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铜绿假单胞菌DHA-1型AmpC酶的检测及耐药性分析 被引量:9
1
作者 金保富 林平 陈佳玉 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期510-513,共4页
目的调查临床分离铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC酶的产生、AmpC酶的基因型及对常用抗菌药物的耐药特征。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;ESBLs检测及药敏试验按CLSI推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法;AmpC酶检测采用头孢西丁... 目的调查临床分离铜绿假单胞菌ESBLs、AmpC酶的产生、AmpC酶的基因型及对常用抗菌药物的耐药特征。方法采用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌;ESBLs检测及药敏试验按CLSI推荐的双纸片确证法和K-B纸片扩散法;AmpC酶检测采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产阳性菌株,再经三维试验确诊;PCR扩增DHA结构基因。结果铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶总检出率分别为40.8%和38.2%,其中,单产AmpC酶、单产ESBLs和同产AmpC酶+ESBLs检出率分别为19.7%、26.3%和14.5%;26株三维试验阳性菌株PCR扩增出23株DHA-1型酶基因;药敏试验显示:产酶株的耐药性明显高于非产酶株,耐药现象在同产AmpC酶和ESBLs菌株中更为严重,产酶株和非产酶株对亚胺培南均有较高的敏感性。结论临床分离的铜绿假单胞菌产ESBLs和AmpC酶菌株检出率较高;AmpC酶基因型以DHA-1型为主要流行株;产AmpC酶和ESBLs的菌株呈高度耐药。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 AMPC酶 dha-1 ESBLS 耐药性
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两株阴沟肠杆菌的DHA-1型耐药基因的转移方式探讨 被引量:3
2
作者 蒋燕群 韩立中 +3 位作者 奚伟 汤瑾 王坚强 倪语星 《检验医学》 CAS 北大核心 2004年第6期490-492,共3页
目的 通过确定编码AmpC酶DHA 1型基因是存在于整合子还是质粒上 ,来探讨此类AmpC酶的播散方式。方法 分别提取细菌的染色体DNA和质粒DNA通过斑点杂交的方式 ,并将整合子聚合酶链反应(PCR)产物测序 ,来确定编码AmpC酶DHA 1型基因存在... 目的 通过确定编码AmpC酶DHA 1型基因是存在于整合子还是质粒上 ,来探讨此类AmpC酶的播散方式。方法 分别提取细菌的染色体DNA和质粒DNA通过斑点杂交的方式 ,并将整合子聚合酶链反应(PCR)产物测序 ,来确定编码AmpC酶DHA 1型基因存在的位置。 结果  2株阴沟肠杆菌的斑点杂交试验均在质粒DNA中发现AmpC酶DHA 1型基因 ,而染色体DNA和整合子片断中未找到相关基因。 结论 这 2株阴沟肠杆菌的AmpC酶DHA 1型的基因均存在于质粒上 ,说明他们的AmpC酶是通过质粒的转移而散播的。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 dha-1 耐药基因 转移 斑点杂交 整合子 质粒
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DHA-1型质粒AmpC酶临床回顾研究 被引量:2
3
作者 李卿 蒋燕群 +3 位作者 李轶 汤瑾 王坚镪 庄亦辉 《检验医学》 CAS 北大核心 2008年第3期212-215,共4页
目的调查我院分离DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)菌株感染患者的临床资料,分析其耐药性和分子流行病学。方法收集2003年至2005年间34株产DHA型质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染者的临床资料,采用多重聚合酶链反应(PCR)... 目的调查我院分离DHA群质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)菌株感染患者的临床资料,分析其耐药性和分子流行病学。方法收集2003年至2005年间34株产DHA型质粒AmpC酶的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌感染者的临床资料,采用多重聚合酶链反应(PCR)扩增DHA结构基因,用随机扩增DNA多态性(RAPD)分析同源性,测定其对药物的敏感性。结果高龄、使用免疫抑制剂、外伤手术史等均为风险因素;三代头孢治疗失败率为86.9%(头孢他啶88.9%,头孢噻肟60%和头孢哌酮100%);复方制剂(β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂)为71.4%;碳氢酶烯类为10%;喹诺酮类为70%。DHA群测序确定为DHA-1型;RAPD显示科室内及科室间存在克隆传播。结论我院DHA-1型质粒AmpC酶菌株感染患者抗生素治疗失败率较高;不同科室分离的菌株存在一定的同源性。 展开更多
关键词 质粒头孢菌素 Β-内酰胺酶 dha-1 临床回顾研究
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一株产DHA-1型质粒AmpC酶肺炎克雷伯菌的耐药基因鉴定及药物敏感性测定
4
作者 李轶 周绪华 冯羡菊 《山东医药》 CAS 北大核心 2009年第11期66-67,共2页
目的对一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌进行耐药基因鉴定及药物敏感性测定。方法对临床分离的一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌,采用PCR扩增及测序,检测细菌的耐药基因特性,接合实验验证质粒的传递性,等电聚焦电泳(IEF)测定细菌β-内酰胺酶... 目的对一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌进行耐药基因鉴定及药物敏感性测定。方法对临床分离的一株头孢西丁耐药肺炎克雷伯菌,采用PCR扩增及测序,检测细菌的耐药基因特性,接合实验验证质粒的传递性,等电聚焦电泳(IEF)测定细菌β-内酰胺酶的等电点。结果该株肺炎克雷伯菌产生TEM-1、DHA-1和SHV-12三种β-内酰胺酶,其耐药基因blaDHA-1可通过质粒传递。结论我院已发现同时携带DHA-1型质粒AmpC酶及SHV-12型ESBL的肺炎克雷伯菌;临床应及时准确进行鉴定及药敏实验,为合理使用抗菌药物提供依据。 展开更多
关键词 头孢西丁 肺炎克雷伯菌 内酰胺酶 质粒 dha-1
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肺炎克雷伯菌中DHA-1型质粒AmpC酶的流行分布 被引量:1
5
作者 杨天平 《检验医学》 CAS 北大核心 2008年第2期128-130,共3页
目的了解我院肺炎克雷伯菌中质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)的流行分布及其基因型和耐药特征。方法用纸片扩散法对2003至2005年连续不重复的487株肺炎克雷伯菌进行产11pCp AmpC酶的筛选,对筛选阳性的细菌分别进行三维试验、多重聚合... 目的了解我院肺炎克雷伯菌中质粒头孢菌素β-内酰胺酶(AmpC酶)的流行分布及其基因型和耐药特征。方法用纸片扩散法对2003至2005年连续不重复的487株肺炎克雷伯菌进行产11pCp AmpC酶的筛选,对筛选阳性的细菌分别进行三维试验、多重聚合酶链反应(PCR)、型特异引物PCR及测序,以确定质粒AmpC酶的基因型,并对产质粒AmpC酶细菌进行药物敏感性实验和美国临床实验室标准化研究所(CLSI)推荐的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)确认检测。结果487株肺炎克雷伯菌中,70株(14.4%)AmpC酶纸片筛选试验阳性(头孢西丁抑菌圈直径≤18 mm);22株(4.5%)三维试验阳性;21株(4.3%)细菌多重PCR阳性,经测序均为DHA-1型质粒AmpC酶,其中12株确认产ESBLs。2003年的质粒AmpC酶阳性率仅为1.3%,而2005年为6.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论我院肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶为DHA-1型,发生率为4.3%,且有逐年上升趋势。 展开更多
关键词 质粒 头孢菌素β-内酰胺酶 dha-1 肺炎克雷伯菌
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Escherichia coli Producing CTX-M and DHA-1 Beta-lactamases in Farm Animals in Chongqing City of China
6
作者 WU Jun-wei ZHANG Zhen-zhen WANG Kai-yu 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第S1期97-101,共5页
Aim of this study was to investigate the genotypic distribution of extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) and AmpC enzymes among Escherichia coli isolated from farm animals in Chongqing City. 326 E.coli isolates were... Aim of this study was to investigate the genotypic distribution of extended-spectrum β-lactamases (ESBLs) and AmpC enzymes among Escherichia coli isolated from farm animals in Chongqing City. 326 E.coli isolates were obtained from piglets,cattle and chickens.In these isolates,19 ESBLs and 6 AmpC-producing E.coli isolates were detected by preliminary screening and phenotypic identification, and polymerase chain reaction and sequence analysis methods were used to detect ESBLs and AmpCβ-lactamases genes.The results showed that the frequencies of TEM,CTX-M,DHA-1 and CMY-2 genes were 2.15%,5.21%,0.61%and 0.61%,respectively,in E.coli of animal origin in the Chongqing area,and 5 E.coli isolates were found to carry two kinds of genotype.The DHA-1 gene was detected for the first time in a veterinary clinic in China;its GenBank accession number is FJ386455.This study indicated that TEM and CTX-M genes were the predominant genotypes in Chongqing,and the majority of ESBLs and AmpC-producing E.coli isolates were multi-resistant to antibiotics,so they deserve particular attention in veterinary clinics. 展开更多
关键词 Escherichia coli farm animals CTX-M dha-1 China
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北京发现同时产DHA-1质粒AmpC型及CTX-M型超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌 被引量:38
7
作者 王辉 刘颖梅 +2 位作者 王清涛 孙宏莉 陈民钧 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期419-422,共4页
目的 研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β- 内酰胺酶(ESBL)及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型。方法 收集北京两家教学医院2 0 0 1—2 0 0 2年产ESBL且对头孢西叮耐药的5 9株大肠埃希菌和2 1株肺炎克雷伯菌,采用等电聚焦... 目的 研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时产超广谱β- 内酰胺酶(ESBL)及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型。方法 收集北京两家教学医院2 0 0 1—2 0 0 2年产ESBL且对头孢西叮耐药的5 9株大肠埃希菌和2 1株肺炎克雷伯菌,采用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性,并用碱裂解法提取质粒;采用多重聚合酶链式反应(multiplexpolymerasechainreaction ,MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。脉冲场凝胶电泳(pulsedfieldgelelectro phoresis,PFGE)确定耐药菌株的亲缘关系。结果 北京两家医院ESBL中质粒型AmpC酶的发生率,大肠埃希菌分别为0和2 % ,肺炎克雷伯菌则分别为9.7%和17.1%。1株大肠埃希菌及9株肺炎克雷伯菌产生DHA -1型质粒AmpC酶,同时也产CTX -3型(6株)或CTX- M- 14 (1株)或SHV -12 (3株)型ESBL。10株中,3株肺炎克雷伯菌可将头孢西叮耐药性传给受体菌。这10株菌均至少携带1个约33~36kb的大质粒,未发现质粒的传播。PFGE发现这10株菌来自不同的克隆株。结论 北京地区发现同时产DHA -1质粒AmpC型及CTX- M型ESBL的肺炎克雷伯菌,它们来自不同的克隆。 展开更多
关键词 北京 dha-1 质粒AmpC型 CTX—M型 超广谱Β-内酰胺酶 肺炎克雷伯菌
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肺炎克雷伯菌DHA-1型质粒AmpC酶全编码基因克隆、表达及序列分析 被引量:4
8
作者 多丽波 刘晶 +2 位作者 杨东晓 王孟滨 周虹 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期683-686,共4页
目的以我院临床分离的肺炎克雷伯菌KP1为研究对象,对其所产生的质粒AmpC酶编码基因的序列进行研究。方法采用聚合酶链反应(PCR),用DHA1型AmpC酶引物扩增KP1接合子中AmpC酶全编码基因,并克隆到pUC118载体中进行表达,对PCR产物进行测序,... 目的以我院临床分离的肺炎克雷伯菌KP1为研究对象,对其所产生的质粒AmpC酶编码基因的序列进行研究。方法采用聚合酶链反应(PCR),用DHA1型AmpC酶引物扩增KP1接合子中AmpC酶全编码基因,并克隆到pUC118载体中进行表达,对PCR产物进行测序,分析其基因型别。结果肺炎克雷伯菌KP1菌株的转移接合子所含有的质粒AmpC酶为DHA型,编码基因序列与GenBank中DHA1编码基因序列的同源性为100%。结论哈尔滨地区临床分离肺炎克雷伯菌有可转移性DHA1型AmpC酶的存在。 展开更多
关键词 质粒 dha-1 AMPC酶 序列分析 肺炎克雷伯菌 质粒AMPC酶 编码基因 基因克隆 1 聚合酶链反应(PCR)
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全国10所教学医院产ESBLs和质粒AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的研究 被引量:31
9
作者 孙宏莉 宁永忠 +2 位作者 廖康 王辉 朱任媛 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2007年第5期323-329,共7页
目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61... 目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61株,用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性;采用多重聚合酶链反应(MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。结果武汉、南京、济南等地产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌所占比率相近,均在50%左右;北京产ESBLs大肠埃希菌所占比率低于肺炎克雷伯菌;其他各城市产ESBLs大肠埃希菌所占比率均略高于肺炎克雷伯菌。在产ESBLs菌株中24.4%大肠埃希菌和19.4%肺炎克雷伯菌对头孢西丁耐药。除沈阳无对头孢西丁耐药菌株外,其他医院均存在对头孢西丁耐药株。产ESBLs菌株基因型主要为CTX—M型,其中以CTX-M-9组最为常见,其次为CTX-M-1组。在同时产ESBLs和AmpC的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,且均为CTX-M/ DHA-1型(多为CTX-M-9/DHA-1型)。3株同时产ESBLs和AmpC肺炎克雷伯菌的接合子PCR结果与其供体菌完全相同。结论参与本研究的各所教学医院产ESBLs菌株基因型主要为CTX-M-9组,在同时产ESBLs和AmpC酶的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,多为CTX-M-9/DHA-1型,该酶可通过质粒传播。 展开更多
关键词 超广谱Β内酰胺酶 质粒型AMPC酶 CTX-M-9组酶 dha-1型酶
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苯丙氨酸解氨酶(PAL,EC4.3.1.5)反应机理研究新进展 被引量:15
10
作者 杨顺楷 杨亚力 杨维力 《生物加工过程》 CAS CSCD 2004年第4期1-5,共5页
根据有关文献阐述了苯丙氨酸解氨酶 (PAL ,EC4 3 1 5 )反应机理研究新进展 ,主要内容包括两种反应机理的提出 :其一 ,米切尔加成反应 (MichaelAdditionReaction) ;其二 ,傅氏反应 (Friedel CraftsReaction)。通常认为该两种反应机理较... 根据有关文献阐述了苯丙氨酸解氨酶 (PAL ,EC4 3 1 5 )反应机理研究新进展 ,主要内容包括两种反应机理的提出 :其一 ,米切尔加成反应 (MichaelAdditionReaction) ;其二 ,傅氏反应 (Friedel CraftsReaction)。通常认为该两种反应机理较好地解释了L Phe的氨消除模式 ,PAL含有的去氢丙氨酸 (DHA)单位是反应活性的关键。随着化学和分子生物学实验证据的提出 ,主要基于PAL和HAL(组氨酸解氨酶 ,EC4 3 1 3)具有高度同源性 (19%~ 2 9%序列分析 ) ,及其对“姐妹”酶HAL的X 射线结构分析 ,发现催化性的亲电试剂并非DHA ,而是 3,5 二氢 5 次甲基 4H 咪唑 4 酮 (MIO)。由此 ,提出一对非芳香L Phe异构体作探针 ,以支持这一机理的实验研究。此外 ,还列出红酵母PAL逆向催化合成非天然芳族氨基酸的相关实验结果。 展开更多
关键词 酶反应机理 苯丙氨酸解氨酶 组氨酸解氨酶 去氢丙氨酸 3 5-二氢-5-次甲基-4H-咪唑-4-酮(MIO)
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Fat-1基因及其功能的研究进展 被引量:5
11
作者 华晓敏 陈俏俏 潘庆杰 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2012年第1期41-47,共7页
fat-1基因来源于秀丽隐杆线虫C.elegans,翻译产物是ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢酶,此酶的功能是以18-20碳的ω-6 PUFAs为底物进行脱氢反应,生成相应的ω-3 PUFAs,平衡体内ω-6/ω-3 PUFAs的比例,对于预防和治疗心脑血管、肿瘤、精神分裂... fat-1基因来源于秀丽隐杆线虫C.elegans,翻译产物是ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢酶,此酶的功能是以18-20碳的ω-6 PUFAs为底物进行脱氢反应,生成相应的ω-3 PUFAs,平衡体内ω-6/ω-3 PUFAs的比例,对于预防和治疗心脑血管、肿瘤、精神分裂症等疾病有重要的作用。本文根据国内外对fat-1基因及编码产物的研究现状,分别从它们的结构、作用机制、检测、功能等方面进行了相关的阐述。 展开更多
关键词 fat-1基因 ω-3多聚不饱和脂肪酸 DHA EPA
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固定化酶催化合成EPA/DHA型磷脂的研究
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作者 刘文静 晁燕 +4 位作者 郭红英 李昌珠 李培旺 李力 肖志红 《生物质化学工程》 CAS 2024年第6期23-30,共8页
以大豆卵磷脂和富含二十碳五烯酸(EPA)/二十二碳六烯酸(DHA)的鱼油为底物,在固定化磷脂酶A_(1)(PLA_(1))的催化作用下,制备EPA/DHA型磷脂(EPA/DHA-PLs)。考察了PLA_(1)的固定化酶用量、水用量、反应温度、底物鱼油与磷脂质量比对EPA/DHA... 以大豆卵磷脂和富含二十碳五烯酸(EPA)/二十二碳六烯酸(DHA)的鱼油为底物,在固定化磷脂酶A_(1)(PLA_(1))的催化作用下,制备EPA/DHA型磷脂(EPA/DHA-PLs)。考察了PLA_(1)的固定化酶用量、水用量、反应温度、底物鱼油与磷脂质量比对EPA/DHA-PLs制备的影响,并通过响应面法分析了影响EPA/DHA-PLs合成的关键因素。研究结果表明:EPA甲酯保留时间约为54.594 min,DHA甲酯保留时间约为69.317 min,原料鱼油中EPA和DHA的总量为83.27%。EPA/DHA-PLs合成的最佳反应条件为:固定化PLA_(1)的添加量为21.81%(以底物鱼油/磷脂的总质量为基准),鱼油与磷脂质量比为5.45∶1,反应温度为54.3℃,水用量为1.08%(以底物的总质量为基准)。在此条件下,EPA/DHA的最大结合率可达65.5%。固定化PLA_(1)经5次重复使用后,剩余的酶活性仍不低于52.3%。 展开更多
关键词 磷脂酶A1 EPA/DHA型磷脂 响应面优化
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大肠埃希菌中质粒AmpC酶的流行分布 被引量:4
13
作者 李轶 周绪华 冯羡菊 《检验医学》 CAS 北大核心 2009年第8期595-597,共3页
目的了解河南地区大肠埃希菌中质粒AmpC酶的流行分布及其基因特征。方法对380株大肠埃希菌进行AmpC酶表型筛选,对筛选阳性株进行多重聚合酶链反应(PCR)及型特异PCR、克隆、测序;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点;接合实验验证质... 目的了解河南地区大肠埃希菌中质粒AmpC酶的流行分布及其基因特征。方法对380株大肠埃希菌进行AmpC酶表型筛选,对筛选阳性株进行多重聚合酶链反应(PCR)及型特异PCR、克隆、测序;等电聚焦电泳检测细菌β-内酰胺酶等电点;接合实验验证质粒传递性;肠杆菌科基因组内重复一致序列(ERIC-2)PCR检测同源性。结果380株大肠埃希菌中2.1%(8株)的细菌产AmpC酶,经测序证实均为DHA-1型质粒AmpC酶基因,ERIC-2 PCR结果显示质粒AmpC酶主要以非克隆传播为主。结论河南地区发现DHA-1型质粒AmpC酶以非克隆传播为主。 展开更多
关键词 dha-1 质粒 AMPC酶 大肠埃希菌
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EPA/DHA对体外发酵及瘤胃液脂肪酸组成的影响 被引量:5
14
作者 刘亮 王加启 +4 位作者 卜登攀 刘仕军 魏宏阳 周凌云 刘开朗 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第7期5-10,共6页
试验旨在研究日粮中添加不同水平的DHA/EPA对体外发酵和瘤胃液脂肪酸变化的影响。试验通过采用持续动态人工瘤胃装置,向发酵罐中添加EPA/DHA,连续培养7 d,分析脂肪酸组成的变化及发酵模式的改变。试验结果表明,日粮添加EPA/DHA使瘤胃液p... 试验旨在研究日粮中添加不同水平的DHA/EPA对体外发酵和瘤胃液脂肪酸变化的影响。试验通过采用持续动态人工瘤胃装置,向发酵罐中添加EPA/DHA,连续培养7 d,分析脂肪酸组成的变化及发酵模式的改变。试验结果表明,日粮添加EPA/DHA使瘤胃液pH升高(与CK相比,Trt1和Trt2分别升高了0.11和0.35),Trt2与CK相比差异极显著(P<0.01);与CK相比处理组3种主要挥发酸中乙酸浓度下降(P<0.01),丙酸浓度升高(P<0.01),丁酸浓度下降(P<0.01),总挥发性脂肪酸浓度与对照组相比略有下降但差异不显著(P>0.05);日粮添加EPA/DHA使瘤胃液脂肪酸成分发生改变。与CK相比处理组C18∶0含量显著下降(P<0.01);t-11 C18∶1含量显著升高(P<0.01);c-9,t-11 CLA含量显著升高(P<0.01),但是两组之间差异均不显著。因此,日粮中添加不同水平的EPA/DHA可以改变瘤胃发酵模式,影响不饱和脂肪酸瘤胃氢化过程,使脂肪酸组成发生改变,为采用新的营养措施调控反刍动物产品中CLA的含量提供理论依据。 展开更多
关键词 EPA/DHA 人工瘤胃 瘤胃发酵 t-11C18∶1 cis-9 t-11CLA
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双氢青蒿素治疗狼疮肾炎与SIGIRR诱导免疫负调控的相关性 被引量:9
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作者 黄明 金小康 +3 位作者 蔡庆超 李敏 林志彬 李卫东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1637-1641,1647,共6页
目的:探究双氢青蒿素(DHA)对狼疮肾炎的治疗作用与SIGIRR诱导的TLR4/NF-κB信号通路的相关性,并观察DHA对HK-2细胞炎性损伤的影响。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠分为模型组、DHA(25、50、100 m/kg)治疗组、阳性对照组(强的松,5 mg/kg),另取C5... 目的:探究双氢青蒿素(DHA)对狼疮肾炎的治疗作用与SIGIRR诱导的TLR4/NF-κB信号通路的相关性,并观察DHA对HK-2细胞炎性损伤的影响。方法:将MRL/lpr狼疮小鼠分为模型组、DHA(25、50、100 m/kg)治疗组、阳性对照组(强的松,5 mg/kg),另取C57BL/6小鼠为正常对照组,共给药12周。HE染色观察肾脏病理学改变,Western blot法检测肾脏SIGIRR,IRAK1和TRAF6蛋白表达变化。在体外,以10μg/ml LPS刺激人肾小管上皮细胞HK-2细胞,分别加入0.67、2.00、6.00μg/ml DHA,以Western Blotting法检测药物分别作用6、12和24 h后SIGIRR蛋白表达情况,ELISA方法检测上清IL-6、CCL2的分泌水平。结果:体内实验中,肾脏病理结果显示模型组小鼠肾脏受损,DHA 100 mg/kg治疗组肾脏损伤有所减轻。DHA 100 mg/kg组相比模型组,SIGIRR蛋白表达有一定的升高,且随DHA剂量增加该蛋白表达有升高趋势。体外实验中,不同浓度DHA能抑制CCL2的分泌,0.67μg/ml DHA作用24 h能显著增加SIGIRR的表达,且SIGIRR表达量随着时间延长有逐渐升高趋势。结论:DHA对狼疮肾炎有一定的治疗作用,且与肾脏SIGIRR表达升高抑制TLR4/NF-κB信号通路的过度活化有关;DHA对LPS诱导的HK-2炎症损伤的抑制与抑制CCL2分泌及增加SIGIRR表达有关。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 狼疮肾炎 MRL/LPR 单免疫球蛋白IL-1相关受体
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二十二碳六烯酸预处理增强大鼠脑胶质细胞对氧糖剥夺条件下脑血管内皮细胞的保护作用 被引量:2
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作者 陈小波 占乐云 +3 位作者 王强 舒爱华 张明瑜 邓彩英 《中风与神经疾病杂志》 CAS 北大核心 2015年第8期684-687,共4页
目的评价二十二碳六烯酸(DHA)预处理是否增强脑胶质细胞对氧糖剥夺(OGD)条件下脑血管内皮细胞的保护作用。方法原代培养的胶质细胞,分别在正常氧含量或低氧条件培养24 h,收集各组培养上清液。再将原代培养的血管内皮细胞按实验设计分别... 目的评价二十二碳六烯酸(DHA)预处理是否增强脑胶质细胞对氧糖剥夺(OGD)条件下脑血管内皮细胞的保护作用。方法原代培养的胶质细胞,分别在正常氧含量或低氧条件培养24 h,收集各组培养上清液。再将原代培养的血管内皮细胞按实验设计分别与胶质细胞培养上清液共培养。利用流式技术检测凋亡率,Western检测Bax、bcl-2、caspase-3、p Tie-2、p Akt、ZO-1。结果经DHA预处理后的胶质细胞培养上清液能够降低低氧条件下血管内皮细胞的凋亡(P<0.01),降低Bax、caspase-3的表达(P<0.01),而增加bcl-2、bcl-2/Bax、p Tie-2、p Akt、ZO-1表达(P<0.01)。结论 DHA预处理能够增强脑胶质细胞对氧糖剥夺条件下血管内皮细胞的保护作用。其机制可能与增加Ang1分泌、激活Tie-2受体、从而促进抗凋亡作用相关。 展开更多
关键词 二十二碳六烯酸 氧糖剥夺 细胞凋亡 促血管生成素-1 血管内皮细胞
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双氢青蒿素诱导人前列腺癌细胞系PC-3凋亡
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作者 邹文琴 唐溧 +1 位作者 杜施娟 罗子国 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第9期1232-1236,共5页
目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人前列腺癌细胞系PC-3的凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法人前列腺癌PC-3细胞经不同浓度(0、25、50和100μmol/L)DHA处理48 h,用FCM法检测各组细胞凋亡率。用荧光定量PCR检测细胞中HSP... 目的探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人前列腺癌细胞系PC-3的凋亡诱导作用,并探讨其可能机制。方法人前列腺癌PC-3细胞经不同浓度(0、25、50和100μmol/L)DHA处理48 h,用FCM法检测各组细胞凋亡率。用荧光定量PCR检测细胞中HSP70 mRNA的表达。用蛋白质印迹法检测细胞中HSP70蛋白、凋亡酶激活因子(Apaf-1)及caspase-3的表达;荧光定量PCR及蛋白质印迹法增加两组,即100μmol/L HSP70抑制剂槲皮素(quercetin)作为阳性药物对照组,以DMSO作为溶剂对照组。结果 DHA能明显诱导PC-3细胞凋亡(P<0.05)。不同浓度DHA能明显下调HSP70 mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),上调Apaf-1及caspase-3蛋白表达水平(P<0.05)。结论双氢青蒿素能诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡,其作用机制可能是DHA干扰HSP70的表达,促进caspase信号通路中Apaf-1及caspase-3表达。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 人前列腺癌 热休克蛋白70 凋亡酶激活因子 半胱天冬酶-3
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转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规血生化及免疫指标的影响 被引量:1
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作者 宋鹏坤 张坚 +4 位作者 王春荣 李丽祥 满青青 汤茂学 崔文涛 《中国食品卫生杂志》 北大核心 2013年第2期140-144,共5页
目的评价转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规、血生化及免疫指标的影响。方法以转sFat-1基因猪肉、普通猪肉为受试物,配成配合饲料后分别设立低、高2个剂量组和基础饲料对照组,经口喂饲小鼠30天后,比较各组小鼠血常规、血生化、免疫球蛋白和... 目的评价转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规、血生化及免疫指标的影响。方法以转sFat-1基因猪肉、普通猪肉为受试物,配成配合饲料后分别设立低、高2个剂量组和基础饲料对照组,经口喂饲小鼠30天后,比较各组小鼠血常规、血生化、免疫球蛋白和外周血T淋巴细胞比例。结果同性别的各组血常规和免疫球蛋白指标差异均无统计学意义;转sFat-1基因猪肉高剂量组血清BUN浓度与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);雌性小鼠中,转sFat-1基因猪肉低剂量组的CD3+CD4+细胞比例、转sFat-1基因猪肉高剂量组的CD3+CD8+细胞比例与普通猪肉低剂量组相应指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在本研究的剂量下,未发现转sFat-1基因猪肉对小鼠血常规、血生化和免疫指标有影响。 展开更多
关键词 免疫球蛋白 转sFat-1基因猪肉 淋巴细胞 血常规 血生化 EPA DHA
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三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3
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作者 赵丽凤 李晓强 +2 位作者 任汝静 刘丽 谭余庆 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期42-48,共7页
目的:研究三氧化二砷联合双氢青蒿素对人急性单核细胞白血病(AML)细胞株THP-1细胞增殖、周期及凋亡的影响并探究其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞增殖的影响,... 目的:研究三氧化二砷联合双氢青蒿素对人急性单核细胞白血病(AML)细胞株THP-1细胞增殖、周期及凋亡的影响并探究其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法检测三氧化二砷、双氢青蒿素、三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞增殖的影响,流式细胞术AnnexinV/碘化丙啶(PI)双染实验检测细胞周期和凋亡的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3),裂解半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达,在高内涵显微镜下观察药物作用后细胞形态的变化。结果:与空白组比较,不同浓度的三氧化二砷、双氢青蒿素对THP-1细胞的增殖均具有显著抑制作用(P<0.01),且成剂量和时间依懒性;作用48 h,与同等剂量的三氧化二砷或双氢青蒿素单独应用比较,1μmol·L^-1三氧化二砷与2μmol·L^-1双氢青蒿素联合应用对THP-1细胞增殖的抑制作用显著增强(P<0.01),且细胞阻滞在G1期(P<0.01),并显著下调Bcl-2和Caspase-3的表达(P<0.01),同时明显上调cleaved Caspase-3的表达水平(P<0.05)。结论:三氧化二砷联合双氢青蒿素对THP-1细胞具有明显抑制增殖和诱导凋亡的作用,其作用机制可能与阻滞细胞G1期,下调Bcl-2和Caspase-3蛋白表达,上调cleaved Caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 急性单核细胞白血病 三氧化二砷 双氢青蒿素 THP-1细胞 增殖 凋亡
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高含量DHA/EPA甘油三酯对脂质代谢相关酶活力的影响 被引量:3
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作者 朱昱哲 王静凤 +3 位作者 张维刚 孙兆敏 王玉明 薛长湖 《中国海洋药物》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期33-38,共6页
目的研究高含量DHA/EPA甘油三酯对脂肪肝模型大鼠肝脏脂质代谢相关酶活力的影响。方法采用1%乳清酸饲喂法建立脂肪肝大鼠模型。灌胃高含量DHA/EPA甘油三酯20d后,检测大鼠血清和肝脏总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceri... 目的研究高含量DHA/EPA甘油三酯对脂肪肝模型大鼠肝脏脂质代谢相关酶活力的影响。方法采用1%乳清酸饲喂法建立脂肪肝大鼠模型。灌胃高含量DHA/EPA甘油三酯20d后,检测大鼠血清和肝脏总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)含量以及肝脏脂肪合成和分解相关酶活力。结果高含量DHA/EPA甘油三酯可预防大鼠血清和肝脏脂质含量升高(P<0.05,P<0.01),有效降低脂肪酸合成酶(fatty acid synthesase,FAS)、苹果酸酶(malic enzyme,ME)等脂肪合成酶活力(P<0.01),显著提高肉碱棕榈酰转移酶(carnitine palmitoyl transterase-1,CPT-1)和过氧化物酶体β-氧化酶系(peroxisomalβ-oxidation enzymes,POE)等脂肪分解酶活力(P<0.01),其效果明显优于乙酯型和低含量DHA/EPA甘油三酯型鱼油。结论高含量DHA/EPA甘油三酯通过抑制脂肪合成,促进脂肪氧化分解,有效调节脂肪肝大鼠的脂质代谢。 展开更多
关键词 乳清酸 脂质代谢 DHA EPA甘油三酯 FAS ME CPT-1 POE
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