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鹅DHRS7基因克隆、序列分析及其在鹅肥肝形成过程中的表达特点
被引量:
1
1
作者
何桦
潘志雄
+7 位作者
刘贺贺
李乐
夏露
胡深强
鲁凯
董霞
李亮
王继文
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1385-1391,共7页
为获得鹅DHRS7基因全长cDNA,并探讨该基因是否参与鹅肥肝的形成过程。本研究应用抑制消减杂交文库获得鹅DHRS7基因部分EST序列,采用RACE技术扩增了鹅该基因全长cDNA,并对其序列进行了生物信息分析;用荧光定量PCR技术检测了DHRS7在鹅肝...
为获得鹅DHRS7基因全长cDNA,并探讨该基因是否参与鹅肥肝的形成过程。本研究应用抑制消减杂交文库获得鹅DHRS7基因部分EST序列,采用RACE技术扩增了鹅该基因全长cDNA,并对其序列进行了生物信息分析;用荧光定量PCR技术检测了DHRS7在鹅肝脏、皮脂、腹脂等10个组织中的差异表达,以及填饲对鹅肝脏中DHRS7表达变化的影响。结果发现,鹅DHRS7基因cDNA全长1 279bp,含一个完整的开放阅读框1 011bp(可编码336个氨基酸),25bp的5′UTR和243bp的3′UTR序列;生物信息学分析结果显示,鹅DHRS7含有跨膜结构域以及NADP结合位点,且在这些功能区域变异较少;荧光定量结果显示,DHRS7在鹅肝脏和脂肪组织中都有较高表达,填饲后鹅肝脏中DHRS7的表达水平显著上调(P<0.05)。以上结果表明,DHRS7在鹅肥肝形成过程中具有重要的作用。
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关键词
鹅
短链脱氢酶7(
dhrs7
)
RACE
CDNA全序列
生物信息学分析
下载PDF
职称材料
DHRS7对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及其在乳腺癌组织中的表达
2
作者
张伟红
张西臣
+5 位作者
邢沈阳
李泽中
宫鹏涛
李建华
杨举
倪劲松
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期537-542,F0003,共7页
目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA(shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用。方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3...
目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA(shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用。方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中,构建pcDNA3.1-DHRS7重组真核表达质粒。实验分为pcDNA3.1-DHRS7组、阴性对照组(pcDNA3.1组)、空白对照组和DHRS7-shRNA-pGenesil组,用Fugene HD转染试剂将各种质粒转染MCF-7细胞,采用RT-PCR和Westernblotting法检测各组MCF-7细胞中DHRS7的表达情况,流式细胞术分析细胞周期变化,免疫组织化学SP法检测乳腺原位癌和乳腺浸润癌组织中DHRS7蛋白的表达情况。结果:成功构建pcDNA3.1-DHRS7重组表达质粒。PCR和Western blotting结果显示,pcRNA-DHRS7组蛋白的表达量高于空白对照组(P<0.05),DHRS7-shRNA-pGenesil组蛋白的表达量低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示,DHRS7表达上调使MCF-7细胞S期细胞增多(P<0.05),DHRS7的表达下调使处于G2期的细胞增多(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,DHRS7蛋白在原位癌中高表达,阳性表达率为100%(37/37);在乳腺浸润癌的表达明显降低,阳性率为18.9%(7/37),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:DHRS7基因参与了MCF-7细胞细胞周期的调控过程,可以抑制细胞增殖,DHRS7蛋白的表达丢失可能促进乳腺癌浸润。
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关键词
dhrs7
基因
过表达
干扰
细胞周期
乳腺肿瘤
MCF-7细胞
下载PDF
职称材料
题名
鹅DHRS7基因克隆、序列分析及其在鹅肥肝形成过程中的表达特点
被引量:
1
1
作者
何桦
潘志雄
刘贺贺
李乐
夏露
胡深强
鲁凯
董霞
李亮
王继文
机构
四川农业大学动物遗传育种研究所
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第9期1385-1391,共7页
基金
国家水禽产业技术体系(CARS-43-6)
文摘
为获得鹅DHRS7基因全长cDNA,并探讨该基因是否参与鹅肥肝的形成过程。本研究应用抑制消减杂交文库获得鹅DHRS7基因部分EST序列,采用RACE技术扩增了鹅该基因全长cDNA,并对其序列进行了生物信息分析;用荧光定量PCR技术检测了DHRS7在鹅肝脏、皮脂、腹脂等10个组织中的差异表达,以及填饲对鹅肝脏中DHRS7表达变化的影响。结果发现,鹅DHRS7基因cDNA全长1 279bp,含一个完整的开放阅读框1 011bp(可编码336个氨基酸),25bp的5′UTR和243bp的3′UTR序列;生物信息学分析结果显示,鹅DHRS7含有跨膜结构域以及NADP结合位点,且在这些功能区域变异较少;荧光定量结果显示,DHRS7在鹅肝脏和脂肪组织中都有较高表达,填饲后鹅肝脏中DHRS7的表达水平显著上调(P<0.05)。以上结果表明,DHRS7在鹅肥肝形成过程中具有重要的作用。
关键词
鹅
短链脱氢酶7(
dhrs7
)
RACE
CDNA全序列
生物信息学分析
Keywords
geese
dhrs7
RACE
full-length cDNA sequence
bioinformatics analysis
分类号
S835 [农业科学—畜牧学]
S813.3 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
DHRS7对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及其在乳腺癌组织中的表达
2
作者
张伟红
张西臣
邢沈阳
李泽中
宫鹏涛
李建华
杨举
倪劲松
机构
吉林大学白求恩医学院病理生物学教育部重点实验室
吉林大学畜牧兽医学院寄生虫实验室
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第3期537-542,F0003,共7页
基金
国家"973"项目资助课题(2006CB910505
2010CB530004)
+1 种基金
吉林省科技厅科技发展计划项目资助课题(2003055025
20106044)
文摘
目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA(shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用。方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中,构建pcDNA3.1-DHRS7重组真核表达质粒。实验分为pcDNA3.1-DHRS7组、阴性对照组(pcDNA3.1组)、空白对照组和DHRS7-shRNA-pGenesil组,用Fugene HD转染试剂将各种质粒转染MCF-7细胞,采用RT-PCR和Westernblotting法检测各组MCF-7细胞中DHRS7的表达情况,流式细胞术分析细胞周期变化,免疫组织化学SP法检测乳腺原位癌和乳腺浸润癌组织中DHRS7蛋白的表达情况。结果:成功构建pcDNA3.1-DHRS7重组表达质粒。PCR和Western blotting结果显示,pcRNA-DHRS7组蛋白的表达量高于空白对照组(P<0.05),DHRS7-shRNA-pGenesil组蛋白的表达量低于空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术显示,DHRS7表达上调使MCF-7细胞S期细胞增多(P<0.05),DHRS7的表达下调使处于G2期的细胞增多(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,DHRS7蛋白在原位癌中高表达,阳性表达率为100%(37/37);在乳腺浸润癌的表达明显降低,阳性率为18.9%(7/37),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:DHRS7基因参与了MCF-7细胞细胞周期的调控过程,可以抑制细胞增殖,DHRS7蛋白的表达丢失可能促进乳腺癌浸润。
关键词
dhrs7
基因
过表达
干扰
细胞周期
乳腺肿瘤
MCF-7细胞
Keywords
dhrs7
gene
overexpression
interference
cell cycle
breast tumor
MCF-7 cells
分类号
R737.9 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鹅DHRS7基因克隆、序列分析及其在鹅肥肝形成过程中的表达特点
何桦
潘志雄
刘贺贺
李乐
夏露
胡深强
鲁凯
董霞
李亮
王继文
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
下载PDF
职称材料
2
DHRS7对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及其在乳腺癌组织中的表达
张伟红
张西臣
邢沈阳
李泽中
宫鹏涛
李建华
杨举
倪劲松
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012
0
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