西瓜霜清咽含片中薄荷酮、薄荷脑、异龙脑、龙脑的含量测定

建立一种西瓜霜清咽含片中薄荷酮、薄荷脑、异龙脑、龙脑的气相色谱分析方法。采用交联键和聚乙二醇作为固定相的毛细管柱,设定柱温程序升温条件:初始温度70℃,保持4 min,然后每分钟升温5~100℃并保持一段时间,随后以2℃/min的速率升温至140℃并保持3 min。进样使用1∶1分流比,进样口温度为40℃。氢气流速为40 mL/min,空气流速为400 mL/min,检测器温度为270℃。根据薄荷脑峰计算,理论板数应不低于1×10^(5)。结果表明西瓜霜清咽含片中薄荷酮、薄荷脑、异龙脑和龙脑的线性范围分别为0.034 05~0.544 7μg(r_(1)=1.000 0);0.118 2~1.892 0μg(r_(2)=1.000 0);0.023 95~0.383 2μg(r_(3)=1.000 0);0.040 45~0.647 4μg(r_(4)=1.000 0)平均回收率分别为:100%;102%;102%;101%。该方法的操作难度较小、方法可靠,结果准确、灵敏度高、重复性好,可作为西瓜霜清咽含片质量控制的方法。

水相酶促酯化法拆分dl－薄荷醇的连续操作

对影响脂肪酶活性、稳定性和对映选择性的因素，如有机溶剂和反应温度等首先进行了优化。其次，使用悬浮于环已烷的粉末状游离脂肪酶（ＣａｎｄｉｄａｃｙｌｉｎｄｒａｃｅａｌｉｐａｓｅＯＦ３６０）作生物催化剂，成功地构建了一个高效的非水相游离酶连续搅拌釜反应器。当使用高度反应性的丙酸酐作为薄荷醇的酰基给体，进行连续的酶促对映选择性酯化反应时，醇的转化率在两周内可保持４０％以上，所生成酯的光学纯度超过９５％ｅ．ｅ。但是，当使用相应的游离丙酸（而不是酸酐）作酰基给体时，薄荷醇的转化率在连续操作开始后迅速下降，表明使用酸酐时的生产力要比使用游离酸时高。最后，对底物溶液的浓度和流速进行了进一步优化；同时对反应器系统的含水量进行了监测，并通过对酸酐料液的浓度或流速进行微调的方法，有效地将有机溶液相的水分浓度控制在一定的范围（２～４ｍｍｏｌ／Ｌ）之内，结果，ｄｌ－薄荷醇对映选择性连续酯化反应非常稳定地运行了两个月之久（转化率４７～３５％，光学纯度９５～９８％ｅ．ｅ．），酶反应器的半衰期超过２００天。

脂肪酶催化拆分外消旋薄荷醇的研究进展

利用脂肪酶拆分外消旋薄荷醇是目前生产光学纯薄荷醇的重要方法之一,主要从脂肪酶拆分机理、脂肪酶的选择、酰化剂的选择及反应体系溶剂的确定等方面,综述了近10年来脂肪酶拆分消旋体薄荷醇的研究进展,同时展望了未来脂肪酶拆分薄荷醇的研究方向。

无溶剂体系脂肪酶Lipozyme TL IM催化拆分DL-薄荷醇

为提高非水相脂肪酶法拆分DL-薄荷醇反应的底物浓度,建立了以乙酸乙烯酯为酰基供体的无溶剂体系。实验考察了底物浓度、酶量、温度和反应时间等因素对脂肪酶Lipozyme TL IM动力学拆分DL-薄荷醇的影响,得到最佳反应条件为DL-薄荷醇浓度2.8 mol/L,酶用量0.5 g,反应温度30℃,反应时间6 h。此条件下,反应转化率为22.7%,e.e.p为99.1%。脂肪酶Lipozyme TL IM重复利用20次,酶立体选择性基本不变,相对酶活为38.7%。

基于PI3K/Akt/Nrf2信号通路研究逍遥散拆方药队挥发油部位对脂多糖致抑郁样模型小鼠的作用及机制

目的采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠抑郁样模型,探究逍遥散拆方药队(柴胡、当归、薄荷,CDB)挥发油部位的抗抑郁作用,及对磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶(protein kinase B,Akt)/核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)信号通路的影响。方法雄性C57BL/6J小鼠按体质量分层随机分为对照组、模型组、盐酸氟西汀(10 mg/kg)组和CDB挥发油高、低剂量(73.6、36.8 mg/kg)组。小鼠连续ig给药16 d,给药第13~15天,ip 1 mg/kg LPS(20 mL/kg)建立模型。通过糖水偏好测试、强迫游泳实验和悬尾实验观察动物抑郁样行为;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;化学法检测小鼠海马组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;尼氏染色法检测小鼠海马尼氏小体数量;免疫荧光法检测小鼠海马CA3区离子钙结合衔接分子-1(ionized calcium-binding adapter molecule-1,Iba-1)表达;Western blotting检测小鼠海马脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2、血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)、SOD1、p-p65/p65、IL-1β、Iba-1蛋白表达。结果CDB挥发油显著提高模型小鼠糖水偏好率(P<0.01),缩短强迫游泳和悬尾实验不动时间(P<0.05、0.01);显著降低海马MDA水平(P<0.05),提高GSH水平及SOD活性(P<0.05),降低血清IL-1β和TNF-α水平(P<0.01);显著增加小鼠海马CA3区尼氏小体平均荧光强度并抑制CA3区Iba-1表达(P<0.05、0.01);显著上调海马组织BDNF、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Nrf2、HO-1和SOD1表达水平(P<0.05、0.01),抑制p-p65/p65、IL-1β、Iba-1蛋白表达(P<0.05、0.01)。结论CDB挥发油能激活PI3K/Akt/Nrf2信号通路,提高抗氧化水平并减轻神经炎症,从而发挥抗抑郁作用。