DMBT1过表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的观察DMBT1过表达对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法利用脂质体Lipofectamine TM 2000转染鼻咽癌5-8F细胞,Real time-PCR、Western-blot验证转染效率。MTT、流式细胞术检测DMBT1过表达对5-8F细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响。Western-blot检测DMBT1过表达对多药耐药基因(P-gp)、肿瘤抑制基因p53蛋白表达的影响。MTT法检测DMBT1过表达对化疗药物敏感性的影响。结果转染pc DNA3.1/DMBT1的5-8F细胞中DMBT1表达显著上调(P<0.05),提示成功构建稳定表达DMBT1基因的鼻咽癌5-8F细胞。DMBT1过表达的鼻咽癌5-8F细胞增殖能力减慢、凋亡率、G0/G1期细胞比例及p53蛋白表达增高,S期、G2/M期细胞比例及P-gp蛋白表达降低,同时细胞对顺铂敏感性增加(P<0.05)。结论 DMBT1过表达能够显著抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖,诱导其凋亡,并提高癌细胞对化疗药物敏感性。

原发性肺癌中DMBT1基因的表达

目的探讨原发性肺癌组织中DMBT1基因表达水平与肺癌临床和病理特征的关系。方法以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测原发性肺癌中DMBT1基因的表达水平。结果37例原发性肺癌中10例DMBT1表达正常(27.03%,10/37),有27例DMBT1表达低下或完全无表达(72.97%,27/37);DMBT1的表达与原发性肺癌的病理类型、TNM分期、吸烟史等均无明显相关(P>0.05),但与肺癌组织分化程度及有无淋巴结和(或)远处转移有相关性(P<0.01)。结论DMBT1基因的表达水平与肺癌的发生和肿瘤细胞分化程度及是否存在转移明显相关。

DMBT1基因纯合性缺失与乳腺癌病理特征的关系

目的：探讨DMBT1基因纯合性缺失与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用聚合酶链反应检测乳腺癌DMBT1基因纯合性缺失，分析其与乳腺癌临床病理特征的关系。结果60例乳腺癌组织标本中27例有DMBT1基因纯合性缺失，缺失率为45％。浸润性乳腺癌患者的DMBT1基因纯合性缺失率高于非浸润性乳腺癌患者，伴有淋巴和（或）远处转移的患者DMBT1基因纯合性缺失率高于不伴转移的患者，Ⅰ期患者低于Ⅱ∽Ⅲ期患者，差异均有统计学意义（P＜0．05）。结论DMBT1基因与乳腺癌的临床病理特征有密切关系，提示DMBT1的纯合性缺失可能与乳腺癌的病例特征、转移及转化有关，同时对于乳腺癌的诊断、治疗和预后具有重要的临床意义。

DMBT1基因在前列腺癌中表达的显著下调及临床意义

目的研究前列腺癌发生过程中可能受甲基化调节的基因,检测其在前列腺癌细胞系和组织中的表达并分析其表达水平与临床病理特征的关系。方法采用人类全基因表达谱芯片筛选出可能因去甲基化导致恢复表达的基因后,以实时荧光定量PCR检测其在前列腺癌细胞系LNCaP、PC-3及39例前列腺癌和16例前列腺正常组织中mRNA的表达情况。Western blot检测以上标本中目的蛋白的表达水平。结果在用甲基化抑制剂处理后,PC-3细胞系中DMBT1(deleted in malignant braintumor)基因表达显著上调,而在LNCaP细胞系中未见到显著改变。在100%的前列腺癌患者组织中DMBT1 mRNA及蛋白表达均显著下调。统计分析表明,DMBT1 mRNA的表达水平与cTNM分期及骨转移有关,而与年龄、PSA水平及肿瘤分化程度无显著关系。结论 DMBT1有可能成为指导前列腺癌分期及判断预后的分子标志物。但DMBT1的调控机制以及DMBT1在细胞生理和肿瘤发生中的作用还需要进一步的研究。

胃癌组织中DMBT1蛋白的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中DMBT1蛋白的表达变化,并探讨其在胃癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测50例人胃癌组织及其相应癌旁正常胃黏膜组织中的DMBT1蛋白。结果胃癌组织中DMBT1蛋白表达明显低于癌旁正常组织（P〈0.01）;低、未分化癌组织中DMBT1蛋白表达明显低于高、中分化癌,Ⅲ~Ⅳ期明显低于Ⅰ~Ⅱ期,伴淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者（P均〈0.05）。结论胃癌组织中DMBT1表达变化与胃癌分化程度、TNM分期及淋巴结转移有关,DMBT1可能参与胃癌的浸润、转移及恶性转化。

食管鳞状细胞癌中DMBT1和CD44v6的表达及意义

目的探讨食管鳞状细胞癌组织中抑癌基因DMBT1以及粘附分子CD44v6的表达及与肿瘤生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学方法检测70例食管鳞状细胞癌组织及23例切缘正常组织中DMBT1、CD44v6的表达情况。结果 DMBT1、CD44v6在癌组织中的表达减弱或呈阴性。DMBT1的表达与食管鳞状细胞癌组织的分化程度、淋巴结的转移有关(P<0.05),与癌组织的浸润深度无关(P>0.05)。CD44v6的表达与食管鳞状细胞癌组织的淋巴结的转移有关(P<0.05),与癌组织的分化程度、浸润深度无关(P>0.05)。结论 DMBT1的表达减弱是食管鳞状细胞癌组织低分化和高度恶性的生物学标志,并与淋巴结的转移密切相关,CD44v6主要与食管鳞状细胞癌的发生与淋巴结的转移密切相关。

原发性非小细胞肺癌组织DMBT1蛋白表达意义的研究

肺癌已占据恶性肿瘤发病率、死亡率的第1位。肺癌的发生是一个多步骤过程,其中,抑制基因的等位基因发生突变或丢失是重要的环节。DMBT1（delet-edinmalig nantbraintumor1）基因是近年来发现的位于染色体10q25.3～26.1区域的候选肿瘤抑制基因。DMBT1蛋白在肺癌、癌旁及良性病变肺组织的表达,国内未见报道。笔者应用免疫组织化学染色,

DMBT1基因在胃癌组织的表达及其临床意义

目的 探讨DMBT1基因表达与胃癌的关系。方法 应用RT PCR方法检测胃癌及癌旁组织DMBT1基因的表达。结果 胃癌组织及癌旁组织DMBT1基因的表达率分别为 2 2 .9% (11/ 4 8)和 89.6 % (43/4 8) ;伴周围淋巴结转移的癌组织的DMBT1表达率 9.7% (3/ 31)均低于不伴周围淋巴结转移的癌组织的表达率76 .5 % (13/ 17) (P <0 .0 1) ,该基因的表达与肿瘤组织学分型、浸润方式及肿瘤大小等无关 (P均 >0 .0 5 )。结论 DMBT1基因表达率降低与胃癌转移有关 。

DMBT1基因在结肠癌组织内的表达及其临床意义

为探讨DMBT1基因表达与结肠癌转移的关系 ,应用RT PCR的方法检测结肠癌组织及其相应癌旁正常组织内DMBT1基因的表达。结果显示 ,结肠癌组织内及其相应癌旁正常组织内DMBT1基因的表达率分别为 36 1% (13/ 36 ) ,91 7% (33/ 36 ) ;伴有淋巴结转移的癌组织DMBT1表达率 (13 0 % )均低于不伴淋巴结转移的组织 (76 9% ) (P <0 0 5 ) ;肿瘤浸润至深肌层以下DMBT1表达率降低 (P <0 0 5 ) ;Dukes分期A +B期表达率为 73 3% (11/ 15 ) ,C +D为 9 5 % (2 / 2 1) ,两者有显著差异 (P <0 0 1)。实验表明 ,DMBT1基因表达率降低与结肠癌转移存在相关性 。

DMBT1在食管鳞癌中的表达及其生物学意义

目的探讨食管鳞癌组织中抑癌基因DMBT1的表达及其与肿瘤生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学和原位杂交技术检测了70例食管鳞癌组织，23例切缘正常组织中DMBT1蛋白和DMBT1 mRNA的表达情况。结果DMBT1蛋白和DMBT1 mRNA在癌组织中的表达减弱或呈阴性，DMBT1蛋白、DMBT1 mRNA的表达与食管鳞癌组织的分化程度、淋巴结构转移有关（P〈0．05），与癌组织的浸润深度无关（P〉0．05）。结论DMBT1蛋白、DMBT1 mRNA的表达减弱是食管鳞癌组织低分化和高度恶性的生物学标志，并与淋巴结的转移密切相关。

DMBT1在鼻咽癌中的表达及临床意义

目的探讨脑恶性肿瘤缺失基因1(DMBT1)在鼻咽癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法检测69例鼻咽癌及36例癌旁正常组织中DMBT1蛋白表达。分析DMBT1表达与鼻咽癌临床病理特征及预后的关系。结果 DMBT1蛋白在鼻咽癌及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为33.3%(23/69)和75.0%(27/36),差异有统计学意义(P<0.05)。DMBT1表达与T分期、分化程度、淋巴结转移及临床分期有关(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析显示,23例DMBT1阳性表达者的中位生存时间(OS)为60.0个月,而46例DMBT1阴性表达者的中位OS为47.0个月,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox多因素回归分析显示,DMBT1表达是影响鼻咽癌预后的独立因素(P<0.05)。结论 DMBT1在鼻咽癌发生发展过程中有重要作用,可作为判断鼻咽癌患者预后的指标。

基于WNT/β-catenin信号通路研究DMBT1调控慢性肾小球肾炎发生发展的作用机制

目的研究DMBT1在人慢性肾小球肾炎(chronic glomerulonephritis,CGN)中相对表达及甲基化水平,分析DMBT1与WNT/β-catenin信号通路在CGN发生发展中的关联。方法收集30例正常人肾组织(肾癌手术中切除的癌旁正常肾组织)、86例CGN患者肾组织作为研究对象,通过实时定量PCR和免疫蛋白印迹实验验证DMBT1在CGN肾组织中的表达,采用甲基化PCR分析DMBT1在CGN患者中甲基化水平。选取人肾小球足细胞分为两组:DMBT1转染组(进行DMBT1基因过表达)和对照组,采用细胞划痕实验研究两组细胞迁移情况;通过免疫蛋白印迹实验验证DMBT1对WNT/β-catenin信号通路的影响。结果与正常肾组织相比,DMBT1在CGN患者肾组织中表达下调(P<0.01);甲基化PCR结果显示CGN患者的DMBT1甲基化程度明显增高;DMBT1基因过表达能抑制细胞迁移和侵袭(P<0.01);过表达DMBT1后,WNT/β-catenin信号通路及其下游细胞因子明显受到抑制。结论DMBT1在CGN中下调,能作为重要的调控因子参与CGN的发生发展。

膀胱癌组织中DMBT1基因的表达及临床意义

目的探讨膀胱癌中脑恶性肿瘤缺失基因1(DMBT1)的表达及其与肿瘤生物学行为的关系。方法采用RT-PCR和免疫组化SP法检测70例膀胱癌组织和12例正常膀胱组织中DMBT1 mRNA及蛋白的表达。结果膀胱癌组织中DMBT1 mR-NA和蛋白的表达水平低于正常膀胱组织(P<0.05),随着病理分级和临床分期的升高,DMBT1 mRNA和蛋白的表达水平明显下调(P<0.05)。DMBT1在有淋巴结转移的癌组织中表达明显低于在无淋巴结转移癌组织中的表达(P<0.05)。结论 DMBT1基因在膀胱癌组织中存在表达缺失和低表达,提示DMBT1基因在膀胱癌的发生、发展中可能具有抑癌基因的作用。

DMBT1、E-cadherin在食管鳞癌中的表达及其生物学意义

目的:探讨食管鳞癌组织中抑癌基因DMBT1以及粘附分子E-cadherin的表达及其与肿瘤生物学行为的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测70例食管鳞癌组织,23例切缘正常组织中DMBT1、E-cad-herin的表达情况。结果:DMBT1、E-cadherin在癌组织中的表达减弱或呈阴性。DMBT1、E-cadherin的表达与食管鳞癌组织的分化程度、淋巴结的转移有关(P<0.05),与癌组织的浸润深度无关(P>0.05)。结论:DMBT1、E-cadherin的表达减弱是食管鳞癌组织低分化和高度恶性的生物学标志,并与淋巴结的转移密切相关。

miR-197-3p调控DMBT1抑制甲状腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭

目的探讨miR-197-3p是否通过靶向调控恶性脑瘤缺失1基因(DMBT1)影响甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。方法RT-qPCR检测健康人甲状腺细胞Nthy-ori 3-1和甲状腺癌细胞SW579、CGTHW-1中miR-197-3p表达;MTT法检测SW579细胞增殖;Transwell小室法检测SW579细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因实验验证miR-197-3p是否靶向DMBT1;Western blot检测细胞DMBT1、cyclinD1、p21、MMP-2和E-cadherin蛋白表达。结果与Nthy-ori 3-1细胞比较,SW579和CGTHW-1细胞中miR-197-3p相对表达量升高(P<0.05);抑制miR-197-3p表达后,SW579细胞的增殖、迁移和侵袭能力明显受到抑制,细胞中cyclinD1蛋白和MMP-2蛋白表达降低而p21蛋白和E-cadherin蛋白表达升高;SW579细胞中miR-197-3p靶向负调控DMBT1的表达;过表达DMBT1明显抑制SW579细胞增殖、迁移和侵袭,而抑制DMBT1则能逆转miR-197-3p对SW579细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结论miR-197-3p通过靶向调控DMBT1的表达,抑制甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

胶质瘤DMBT1基因杂合性缺失和微卫星不稳定性的研究

背景与目的:近年来,发现杂合性缺失(Ioss of heterozygosity,LOH)和微卫星不稳定性(microsatelliteinstability,MSI)参与肿瘤的发生及发展,属于肿瘤发生的一种新机制。本文探讨胶质瘤抑癌基因的改变,可以为今后胶质瘤进行基因诊断和基因治疗提供新的探索方向。探讨 DMBTI 基因(deleted in malignant brain tumors)杂合性缺失和微卫星不稳定性在胶质瘤发生和恶性进展中的作用。方法:应用微卫星多态性分析技术检测10例正常脑组织、10例脑膜瘤、80例胶质瘤10q25.3～26.1区域内5个多态性微卫星标记(D10S187.D10S209,D10S216,D10S575,D10S587),分析 DMBT1基因 LOH 和 MSI。结果:10例良性脑膜瘤和胶质瘤旁正常脑组织均未发现 MSI 和 DMBT1基因 LOH。30例胶质瘤组织至少有1个微卫星标记发生 LOH,Ⅰ级胶质瘤为15.4%(2/13例),Ⅱ级为22.7%(5/2例),Ⅲ级为35.3%(6/17例),Ⅳ级60.7%(17/28例)。其中,Ⅳ级胶质瘤中D10S209和 D10S587发生 LOH 频率>50%,D10S187 LOH 发生率为43.5%。D10S216和 D10S575 LOH 发生率均<30%。80例胶质瘤组织共有19例 MSI,Ⅰ级胶质瘤 MSI 发生率为7.7%(1/13例).Ⅱ级为9.1%(2/22例).Ⅲ级为23.5%(4/17例),Ⅳ级42.9%(12/28例)。DMBT1基因 LOH 和 MSI 与胶质瘤病理分级明显相关(P<0.05),其中,Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤 DMBT1基因 LOH 和 MSI 均明显高于Ⅰ～Ⅱ级(P<0.05)。结论:抑癌基因DMBT1基因 LOH 和胶质瘤 MSI 与胶质瘤发生和分化密切相关。

继发性肺癌中DMBT1的表达及意义

目的探讨DMBT1基因在继发性肺癌组织及癌旁组织中的表达及相互关系。方法采用免疫组化SP法对继发性肺癌组织和癌旁组织进行检测，并分析DMBT1在继发性肺癌组织与癌旁组织中的表达关系和临床病理特征。结果继发性肺癌组织DMBT1阳性表达率为45．5％，癌旁组织阳性表达率为4．5％，两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。DMBT1阳性表达率与性别、年龄及吸烟情况无关。结论继发性肺癌组织存在DMBT1高表达，它可能是发现肿瘤远处转移的有用指标。

瘦素对人乳腺癌MCF-7细胞DMBT1表达的影响

乳腺癌是严重威胁女性生命与健康的恶性肿瘤之一,在中国,乳腺癌发病率已占女性恶性肿瘤首位[1]。肥胖已成为世界范围内的公共健康问题,而肥胖已被证实与乳腺癌的发生、发展及转移密切相关[2]。瘦素是肥胖基因(obese gene,Ob)的产物,具有调节能量平衡、生殖、免疫、炎症、造血及细胞增殖等多种生物学作用[3]。研究显示,瘦素可通过正向调节雌激素的分泌,进而影响乳腺癌的发生发展[4]。DMBT1基因(deleted in malignant brain tumors)是一种候选的肿瘤抑制基因[5],也有研究证实,DMB T1是受雌激素调节的基因[6]。