甲基莲心碱调节SDF-1/CXCR4信号通路对糖尿病肾病的影响

目的·探讨甲基莲心碱(neferine,Nef)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织的作用及其相关机制。方法·采用高脂饲料喂食联合腹腔注射链脲佐菌素的方法构建DN模型大鼠,并将造模成功的大鼠随机分为DN组、Nef(低、中、高)剂量组、Nef高剂量+通路拮抗剂(AMD3100)组,每组10只。同时,选10只普通大鼠作为正常组。检测6组大鼠的空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、24 h尿蛋白、血清糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、血清肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平及肾指数。分别采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,H-E)染色、马松(Masson)染色观察6组大鼠的肾组织的病理变化。采用硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测肾组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,分别采用水溶性四氮唑(water soluble tetrazolium,WST-1)法、钼酸铵法检测肾组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性。分别采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)检测肾组织中基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)、CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)的mRNA以及蛋白表达。采用高糖(30 mmol/L葡萄糖)诱导大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E,以建立DN细胞模型。将该细胞分为对照组、高糖(HG)组、HG+Nef(低、中、高)剂量组(即HG+Nef-L、M、H组)、HG+Nef-H+AMD3100组。分别采用WST-1法、钼酸铵法检测模型细胞中SOD、CAT活性,采用TBA法检测MDA含量,分别采用qPCR、Western blotting检测SDF-1、CXCR4的mRNA及蛋白表达,采用CCK-8法、流式细胞术检测细胞活力和凋亡率。结果·与DN组比较,Nef(低、中、高)剂量组和Nef高剂量+AMD3100组大鼠的FBG、24 h尿蛋白、HbA1c、Scr、BUN水平以及肾指数、MDA水平均较低,SDF-1、CXCR4的mRNA和蛋白表达以及SOD、CAT活性均较高(均P<0.05),肾组织病理损伤、纤维化程度有所减轻,且均呈剂量依赖性;AMD3100能减弱高剂量Nef对DN大鼠的肾保护作用。与HG组比较,HG+Nef-L、M、H组NRK-52E细胞的活力,SOD、CAT活性,SDF-1、CXCR4的mRNA和蛋白表达均较高,MDA含量及凋亡率均较低(均P<0.05);AMD3100可逆转Nef-H对NRK-52E细胞损伤的保护作用。结论·Nef可能通过激活SDF-1/CXCR4信号通路来控制DN大鼠的血糖水平并提高其抗氧化能力,从而发挥肾保护作用。

几种因素对多粘类芽孢杆菌DN-1活性的影响

[目的]探讨pH、温度环境因素对多粘类芽孢杆菌DN-1抑菌效果的影响以及井冈霉素A降低芽孢消解作用,为提高其生物活性提供理论依据。[方法]研究不同温度、pH条件下多粘类芽孢杆菌DN-1对水稻纹枯病菌的抑制效果,测定DN-1菌株和井冈霉素A复配对其细胞消解率的影响。[结果]pH在6.0~8.0时DN-1菌株对水稻纹枯病菌均表现出较好的抑制效果,pH为7.0时抑菌率最佳;温度在15~40℃时该菌对水稻纹枯病菌均能表现出较强的抑菌效果,温度在35℃时抑菌效果最强;在DN-1菌株配成的水悬液中添加不同比例的井冈霉素A,都有降低细胞消解速率的作用。[结论]温度和pH对DN-1菌株抑制水稻纹枯病菌的效果均有影响;井冈霉素A可延长含DN-1生物农药的货架期。

DN-1号防治糖尿病肾病鼠进行性肾损伤

目的 观察DN 1号 (黄芪、党参、丹参、大黄复方合剂 )对糖尿病肾病的治疗效果 ,并对其作用机制进行探讨。方法 采用STZ单剂 (6 5mg/kg)腹腔注射方法建立糖尿病大鼠动物模型。动物分为糖尿病肾病对照组、糖尿病肾病DN 1号治疗组和正常对照组。观察DN 1号对各组血糖、血脂、血肌酐、转化生长因子 β1(TGF β1)、白介素 8(IL 8)、2 4h尿微量白蛋白排泄率、肾脏病理的影响。结果 糖尿病肾病组 4～ 8周对尿蛋白排泄率、血脂、TGF β1、IL 8水平 ,肾组织中TGF β1的表达均高于正常对照组。肾组织光镜和电镜检查均出现早期糖尿病肾病典型的病理改变。DN 1号治疗组 8周对尿白蛋白排泄率、血脂、TGF β1、IL 8较未治疗组低 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 )。肾组织中TGF β1的表达也较对照组低。血糖在治疗组和对照组无显著性差异。结论 DN 1号能减少糖尿病肾病的尿蛋白排泄 ,对肾损伤有保护和延缓作用。对糖尿病肾病损伤保护机制与DN 1号降低血TGF β1、IL 8分泌 ,减少肾组织中TGF β1的表达有关。

多粘类芽孢杆菌DN-1固态发酵条件优化

[目的]探讨多粘类芽孢杆菌DN-1固体发酵条件。[方法]以活菌数和芽孢率为指标,采用单因素和多因素试验对DN-1菌株的最适培养基成分及发酵条件进行优化。[结果]菌株DN-1最适培养基配比为:15%稻壳,40%玉米粉,20%马铃薯,10%茶渣饼,15%水,0.1%磷酸氢二钾和0.2%硫酸锰。最适发酵条件为:发酵时间72 h,发酵温度37℃,初始pH 6.5~7.0,接种量10%。优化后菌株DN-1活菌数、芽孢率分别达26.3亿/g、92%。[结论]试验结果为DN-1菌株的进一步研究及应用提供了参考。

产脲节杆菌Dn L1-1拌种对小麦籽粒氨基酸和蛋白质的影响

探明降解阿特拉津的产脲节杆菌Dn L1-1对小麦籽粒氨基酸和蛋白质的影响,为进一步完善降解菌Dn L1-1的功能,更好地应用该菌剂提供理论基础和实践基础。利用产脲节杆菌Dn L1-1拌种小麦种子并播种在夏玉米田中,使小麦籽粒附着不同浓度的活菌数目(1×105CFU/粒、1×106CFU/粒),从而测定其对收获小麦氨基酸和蛋白质的影响。结果表明,在收获期,两种浓度的处理均能够提高小麦的产量,上涨幅度为3. 51%和7. 14%,并且小麦籽粒含有的18种氨基酸总含量分别提高13. 94%和19. 33%,蛋白质含量提高10. 56%和22. 26%。由此可见,降解阿特拉津的产脲节杆菌Dn L1-1拌种小麦种子,有利于小麦籽粒氨基酸和蛋白质含量的提高,从而提高小麦的营养品质。

现代大学制度下高校工会源头参与民主管理的“Dn+1”模式研究——以华中师范大学工会民主管理为例

在现代大学制度与多部门共同决策机制下,工会源头参与学校民主管理、民主监督的"Dn+1"模式,能有效预防、监控、纠正高校改革发展中一些瓶颈问题。该模式由制度保障体系、机构支撑体系、信息沟通体系、评估考核体系四个体系构成,具有不可或缺性、代表性、权威性、全程性四重特性。"Dn+1"模式的实施必须具备明确的责权关系、充分的授权、多方位的参与三个基本前提条件。工会在该模式运行机制中工作重点定位于:积极参与决策、广泛参与评价、深度参与监督。

冬小麦miR172响应抗寒的特征分析

东农冬麦1号(Dn1)是我国首个能在黑龙江省高寒地区安全越冬的强抗寒冬小麦品种。为了解tae-miR172在Dn1抗寒中的调控机制,本研究克隆了Dn1中tae-miR172的前体pre-tae-miR172,根据生物信息学分析预测其靶基因为AP2dn1(TraesCS5D02G486600)。通过农杆菌介导的烟草瞬时表达试验,进一步证明tae-miR172靶向AP2dn1;利用qRT-PCR技术对大田越冬期Dn1分蘖节中pre-tae-miR172和Ap2dn1的相对表达量进行分析。结果表明,pre-tae-miR172的表达量随温度降低呈先升后降的变化趋势,而靶基因Ap2dn1的表达量变化趋势则相反,说明tae-miR172负调控Ap2dn1的表达。

糖肾康对DN模型大鼠血清MCP-1和ICAM-1水平的影响

目的 :观察糖肾康对糖尿病肾病(DN)大鼠血清中单核细胞趋化性蛋白-1(monocytechemotaticprotein-1,MCP-1)、细胞间粘附分子-1(intercellularcelladhesionmolecule-1,ICAM-1)的影响,探讨糖肾康防治DN模型大鼠的作用机制。方法将40只SD大鼠随机分为正常组(n=8)和造模组(n=32)。以三联法(手术+高糖高脂饮食+链脲佐菌素)诱导产生DN大鼠模型,造模过程中死亡5只,余下27只模型大鼠随机分为模型组(n=9)、贝那普利组(n=9)和糖肾康组(n=9)。糖肾康组按0.8g/100g·d灌胃,贝那普利组按0.15mg/100g·d灌胃,正常组及模型组给予等量温水灌胃,连续灌胃给药8周。观察各组大鼠尿白蛋白/尿肌酐(ACR)、肾脏组织病理及血清MCP-1、ICAM-1水平变化。结果糖肾康可消减DN模型大鼠的ACR水平(P<0.01),改善肾脏病理形态损害。模型组、贝那普利组和糖肾康组血清MCP-1、ICAM-1水平均高于正常组(P<0.01);与模型组比较,治疗后贝那普利组与糖肾康组血清MCP-1、ICAM-1水平明显降低(P<0.01),糖肾康组和贝那普利组比较无显著性差异(P>0.05)。结论糖肾康可有效减少DN模型大鼠尿蛋白,减轻肾脏病理形态损害,其机制可能与降低血清MCP-1、ICAM-1水平,抑制肾脏免疫炎症反应有关。

苦瓜皂苷G通过调控Notch/Snail1信号通路改善糖尿病肾病大鼠肾功能减退及肾纤维化

【目的】观察苦瓜皂苷G对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗作用及机制。【方法】从55只大鼠中随机抽取45只采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法诱导DN模型。将造模成功的38只大鼠随机分为模型组9只、苦瓜皂苷G低剂量组9只、苦瓜皂苷G中剂量组10只、苦瓜皂苷G高剂量组10只。剩余10只大鼠设为正常组。对应灌胃给药4周后,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测大鼠24 h尿蛋白水平,血糖仪检测空腹血糖(FBG),全自动生化分析仪检测血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平,苏木素-伊红染色(HE)法观察大鼠肾组织病理学变化,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western Blot法分别检测E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Notch1、锌指蛋白转录因子1(Snail1)、Jagged1 m RNA及蛋白表达情况。【结果】与正常组比较,模型组24 h尿蛋白、FBG、血清SCr和BUN水平及肾组织α-SMA、Notch1、Snail1、Jagged1 mRNA及蛋白水平显著升高,肾组织E-cad m RNA及蛋白水平降低,肾组织可见肾小球萎缩、肾小管扩张及间质纤维化;与模型组比较,苦瓜皂苷G低、中、高剂量组24 h尿蛋白、FBG、血清SCr和BUN水平及肾组织α-SMA、Notch1、Snail1、Jagged1 mRNA及蛋白水平显著降低,肾组织E-cad m RNA及蛋白水平升高,肾组织病理损伤得到改善。【结论】苦瓜皂苷G可有效改善DN大鼠肾功能障碍、减轻肾脏纤维化,其机制可能与通过调控Notch/Snail1信号通路,抑制α-SMA和Jagged1 mRNA及蛋白表达,增强E-cad mRNA及蛋白表达有关。

尿Kim-1与血SOD对DN的早期诊断价值

目的探讨联合检测尿肾损伤分子-1(Kim-1)和血超氧化物歧化酶(SOD)对糖尿病肾病(DN)早期诊断的价值。方法检测30例早期DN患者、30例单纯糖尿病(DM)患者及30例正常成人的尿Kim-1、尿白蛋白排泄率(UAER)和血SOD、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)并进行对比分析。结果早期DN组、单纯DM组的尿Kim-1和血SOD水平均高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05);3组患者的血Scr及BUN水平间差异无统计学意义(p>0.05);早期DN组患者的尿Kim-1与UAER呈正相关(r=0.974,p<0.05),SOD与UAER呈负相关(r=-0.948,p<0.05)。结论 Kim-1可能通过氧化应激途径参与DN的发展,联合检测尿Kim-1和血SOD在DN患者肾损害早期诊断中具有一定的临床价值。

1DN型多功能微耕机及应用效果

介绍了１ＤＮ型多功能微耕机的特点、主要技术参数及试验应用情况。

水蛭对糖尿病肾病大鼠内皮素-1水平的影响

目的:研究中药水蛭对糖尿病肾病(DN)大鼠ET-1水平、肾脏功能及肾脏结构的影响。方法:链脲佐菌素(STZ)诱导DN大鼠模型,随机分成模型组,水蛭(17.5 g/kg、8.75 g/kg)治疗组,卡托普利组,同时另设正常对照组,治疗6 w,测定肾功能及肾脏指数(肾重/体重),放免法检测ET-1水平,免疫组化法检测肾脏ET-1蛋白表达,并对肾组织进行光镜和电镜观察。结果:模型组大鼠ET-1水平、表达及肾脏指数明显增高,水蛭治疗6 w后,肾脏肥大明显改善,ET-1水平、蛋白表达明显降低。结论:水蛭可纠正DN大鼠早期肾脏高滤过、高灌注,并对肾脏病变有一定的保护作用,其部分机制可能是通过下调ET-1水平及表达而实现的。

一种稳固的SiO_(2)/PDMS超疏水涂层的制备与稳定性研究

为了提高超疏水涂层的稳定性,构筑良好的界面是关键。本研究选取并制备了一种硅烷偶联剂改性的SiO_(2)纳米粒子(KH570-SiO_(2)),不仅能在聚二甲基硅氧烷(PDMS)分散液中良好分散,还能与PDMS链之间通过共价键链接;通过一步喷涂并完全固化后在玻璃表面构筑了一个改性SiO_(2)/PDMS超疏水涂层。利用扫描电镜、红外光谱、接触角等多种方式对改性SiO_(2)/PDMS涂层的形貌、结构及表面性质进行分析;并通过划格法、砂纸摩擦及胶带剥离实验对SiO_(2)/PDMS涂层的机械稳定性进行评价,最后探讨了涂层的稳定性机制。结果表明,改性SiO_(2)/PDMS涂层具有优异的超疏水性及机械稳定性。本研究为在材料表面构筑稳定的超疏水涂层提供了一种新方法,有望扩展材料在自清洁、防腐涂层、管道运输、油水分离等领域的应用。

DN一号对糖尿病肾病的治疗作用

①目的 观察DN一号对糖尿病肾病的治疗效果 ,并对其作用机制进行探讨。②方法 采用链脲佐菌素 (STZ)单剂 (6 5mg/kg体质量 )腹腔注射方法建立糖尿病肾病大鼠模型 ,分为糖尿病肾病非治疗组 (Ⅱ组 )、糖尿病肾病治疗组 (Ⅲ组 )和正常对照组 (Ⅰ组 )。实验初始Ⅲ组大鼠每日用DN一号 5mL灌胃 ,Ⅱ组和Ⅰ组只灌入等量饮用水 ,连续 12周。定期观察大鼠体质量、肾质量、血糖、血脂、血肌酐、血内皮素 (ET)、转化生长因子 β1(TGF β1) ,2 4h尿微量清蛋白排泄率。留取大鼠模型肾组织进行光镜、电镜观察 ,并进行免疫组织学TGF β1,血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的半定量分析。③结果 Ⅱ组大鼠第 8,12周时 2 4h尿蛋白排泄率、血脂、血糖、血ET ,TGF β1明显高于Ⅰ组大鼠 (F =4 .89～ 6 .2 5 ,q =2 .98～ 4 .72 ,P <0 .0 5 )。Ⅲ组大鼠DN一号治疗第 8,12周时 ,上述观察指标除血糖外均较Ⅱ组大鼠低 (F =4 .2 4～ 5 .98,q =3.2 0～ 4 .6 7,P <0 .0 5 )。Ⅲ组大鼠肾组织中TGF β1,VEGF表达亦较Ⅱ组低 (H =10 .2 4 ,11.4 8,t=2 .4 6 ,2 .38,P <0 .0 5 )。④结论 DN一号能减少糖尿病肾病的尿蛋白排泄 ,对糖尿病肾病的肾损伤有保护作用。DN一号对糖尿病肾病肾损伤保护作用与DN一号降低血ET ,TGF β1,VEGF的含量 ,降低?

糖尿病高血压和糖尿病肾病患者血清MMP-2及TIMP-1的表达及意义

为了探讨MMP-2、TIMP-1在DMEH和DN发病中的意义,随机收集T2DM患者146例,其中SDM57例,DMEH38例,DN51例,健康对照38例。用ELISA法测定MMP-2、TIMP-1的含量。结果显示,DM患者尤其是DMEH和DN患者血清MMP-2明显低于健康对照组,P均<0.01,且随病情发展呈逐渐降低趋势。而血清TIMP-1随病情的发展则呈现明显的上升趋势,SDM、DMEH组和DN组与健康对照组比较,分别为P<0.05,P<0.01和P<0.01。因此,MMP-2和TIMP-1可能参与了DMEH和DN的发生发展过程,定期检测DM患者血清MMP-2和TIMP-1的含量变化有助于DM并发症的早期诊断和疗效观察。

糖尿病肾病患者体内IL-6、TNF-α及TGF-β_1检测及临床意义的分析

目的 :探讨IL 6、TNF α及TGF β1在糖尿病 (DM)及糖尿病肾病 (DN)中发生、发展的作用。方法 :分别观察正常组、单纯糖尿病组、糖尿病肾病各组中IL 6、TNF α及TGF β1含量的变化。结果 :IL 6、TNF α、TGF β1在DM组及DN组中均明显高于正常对照组 ,在DN组中IL 6、TNF α、TGF β1明显高于DM组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 :IL 6、TNF α及TGF β1对DM及DN的发生、发展均起到重要的作用。

健肾颗粒剂对糖尿病肾病大鼠肾脏组织TGF-β1、ET-1mRNA及肾功能的影响

[目的]观察中药健肾颗粒剂对DN大鼠肾脏组织中TGF-β1、ET-1mRNA及肾功能影响。[方法]采用5/6肾切除加尾静脉注射STZ的方法复制大鼠DN动物模型,并随机分成健肾颗粒剂、苯拉普利、保肾康、病理对照及正常对照组,采用生化法检测肾功能,PCR方法检测肾脏组织中TGF-β1、ET-1mRNA,组织病理学方法观察肾脏组织结构。[结果]健肾颗粒剂组大鼠血中Cr、BUN水平低于苯拉普利、保肾康及病理对照组(P<0.05或P<0.01);健肾颗粒剂组肾脏组织中TGF-β1、ET-1mRNA表达明显低于其他三组(P<0.05或P<0.01),肾脏组织病理结构也较其他三组有明显改善;健肾颗粒剂降低DN大鼠血糖、尿蛋白及血脂的作用明显优于苯拉普利、保肾康及病理对照组(P<0.05或P<0.01)。[结论]健肾颗粒剂可明显改善DN大鼠肾功能,并有降血糖、调整血脂,下调DN大鼠肾脏TGF-β1、ET-1mRNA的作用。

2型糖尿病患者血清网膜素-1水平与肾损伤程度关系的研究

目的探讨血清网膜素-1(serum omentin-1)水平与2型糖尿病(T2DM)肾病发病的关系。方法将100例2型糖尿病肾病患者按糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)诊断标准分为DM组(44例)与DN组(56例)。按照Mogenson分期将DN组分为DN早期(DN1)30例,DN晚期(DN2)26例。另择80例健康体检者作为正常对照组(NC)。同时检测糖化血红蛋白(HbA1c)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、β2微球蛋白(β2-MG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和血清网膜素-1,进行相关的统计学分析。结果 DM,DN和NC组HbA1c,Scr,BUN,β2-MG,HOMA-IR和血清网膜素-1指标差异均有统计学意义(F=6.078~16.231,均P<0.05)。其中DM组和NC组间除了HbA1c和HOMA-IR以外,其它检测指标相比差异均无统计学意义(t=1.421~2.637,均P>0.05),而DN组与NC组上述六项指标相比差异均有统计学意义(t=8.981~26.785,均P<0.05)。DN组和DM组间检测指标差异均有统计学意义(t=6.371~21.673,均P<0.05)。DN1组和DN2组间HbA1c,Scr,BUN和β2-MG差异均无统计学意义(t=0.981~1.389,均P>0.05)。而DN2组HOMA-IR水平明显比DN1组高,而血清网膜素-1水平明显比DN1组低,两组差异均有统计学意义(t=68.451~76.814,均P<0.01)。DN组HOMA-IR水平与血清网膜素-1指标呈显著负相关(r=-0.405,P<0.05)。结论血清网膜素-1与胰岛素抵抗关系密切,血清网膜素-1可能是2型糖尿病患者肾脏损伤程度的靶标。

复方灵芝健肾汤对糖尿病大鼠肾脏及尿AGT和IGF-1表达的影响

目的观察复方灵芝健肾汤对糖尿病大鼠肾脏及尿血管紧张素原(AGT)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达的影响,探讨其肾脏保护作用及机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导制作糖尿病肾病大鼠模型,随机分为模型组、给药组,另设空白组。给药组予以复方灵芝健肾汤灌胃,余大鼠给予等量蒸馏水。8周后,观察大鼠一般情况、生化指标,免疫组化及病理切片观察肾脏组织改变,酶联免疫吸附法(ELISA)检测尿AGT和IGF-1的变化。结果 1与空白组比较,模型组和给药组大鼠体质量均显著下降(P<0.01),肾/体重指数、生化指标及尿AGT和IGF-1水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。镜下可见大鼠肾小球肥大、系膜基质增生、基底膜增厚,肾小管可见蛋白管型及上皮细胞变性,肾脏AGT和IGF-1表达增加。2与模型组比较,给药组大鼠体质量增加(P<0.01),24 h尿蛋白、血肌酐、尿素氮及尿AGT和IGF-1水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);病理改变较模型组明显减轻。结论复方灵芝健肾汤对早期糖尿病肾病大鼠有肾脏保护作用,其机制可能与降低肾脏及尿AGT和IGF-1表达,抑制肾脏RAS系统活性有关。

DN一号对糖尿病肾病大鼠肾脏超微结构的影响

①目的 探讨DN一号 (主要成分为黄芪、党参、丹参、大黄合剂 )对糖尿病肾病大鼠肾脏超微结构的影响。②方法 建立糖尿病肾病大鼠动物模型 ,观察应用DN一号治疗 8周后大鼠肾脏超微结构的变化 ,并与未治疗组 (糖尿病肾病对照组 )、正常对照组进行比较。③结果 正常对照组大鼠肾脏超微结构均正常 ,足细胞、内皮细胞排列整齐 ,基膜厚度正常 ,屏障结构完整。糖尿病肾病对照组出现明显病变 ,系膜区明显增宽 ,足细胞足突融合、基膜增厚 ,屏障结构破坏 ,近曲小管上皮细胞凋亡明显。糖尿病肾病治疗组病变较糖尿病肾病对照组明显减轻。