G+Cmol%含量测定中细菌破壁方法的筛选与应用

以标准株大肠杆菌K1 2 为材料对 3种细菌破壁方法 (SU法、ES法和ESU法 )进行了比较 ,并在此基础上测定了 17株病原菌的G +Cmol%含量。结果表明 :ESU法破壁提取的DNA含量最大 ,纯度最高 ,热变性曲线幅度最大 ,G +Cmol%含量符合文献值 ,17株病原菌鉴定至种 (11/ 17)或属 (6/ 11) ;在 3种破壁方法中 ,ESU法最有效 ,适用于水产动物病原菌的种属鉴定。

热变性温度法测定蚤类DNA中G+C含量的初步研究

本文采用改进的氯仿处理法提取两种蚤类 DNA,简便、快速、经济、得到 OD_(260)/OD_(280)的比值均大于1.9,琼脂糖凝胶电泳后基部呈现单带的纯 DNA;两种蚤 DNA 在1×SSC 溶液中的热变性温度(Tm)和 G+Cmol%分别如下:印鼠客蚤雌虫:82.2℃,31.5%;雄虫:82.3℃,31.7%;方形黄鼠蚤松江亚种雌虫:83.6℃,34.9%;雄虫83.6℃,34.9%。

17株水产动物病原菌的表型及分子遗传学鉴定

1996-1999年从患病鱼、鳖、蟹等水产动物体内分离并保存了17株病原菌,采用ATB expression细菌鉴定系统对这17株病原菌进行表型鉴定,并应用优化的热变性温度法(Tm法)分别测定其染色体DNA G+C mol%含量,进行分子遗传学鉴定,从而确定了17株病原菌的种属。