Effect of Manganese on DNA-Protein Crosslinks of Testicle in Chicken

In order to explore the effect of manganese on DNA-protein crosslinks （DPC） of testicle in chicken. 500, 800, 1 700 mg·kg^-1 MnC12 were added to forage to establish the model of the sub-chronic manganese poisoning. After 30, 60 and 90 d, testicles were taken out to detect hydroxyl radical inhibiting capacity and DPC content. The results showed that compared with control group, hydroxyl radical inhibiting capacity significantly decreased and DPC content notably increased, and there was a time-dose relationship. It demonstrated that manganese could decrease the inhibitng capacity of hydroxyl radical, increase the content of hydroxyl and DPC, and induce DNA damage.

不同浓度甲醛致小鼠肾细胞DNA损伤效应研究

为了探讨甲醛导致生物机体内的DNA损伤效应及其剂量-效应关系,通过不同浓度的液态甲醛对小鼠肾细胞进行染毒,并分别运用了单细胞凝胶电泳实验、荧光检测法实验和KCl-SDS沉淀法实验进行研究.结果显示,甲醛在低浓度(5μmo·lL-1)时,具有致DNA断裂的作用;在中等浓度(25μmo·lL-1)时,对DNA的损伤作用以DNA-DNA交联为主;在高浓度(125、625μmo·lL-1)时,对DNA的损伤作用以DNA-蛋白质交联为主.

甲醛对豚鼠肺巨噬细胞DNA的损伤作用

为探讨甲醛对呼吸道的遗传性损伤和致肺癌机理，本研究以豚鼠的肺巨噬细胞为研究材料，采用碱洗脱膜过滤荧光分析方法，检测了甲醛对ＤＮＡ的损伤作用。结果表明，甲醛的急性细胞毒性较小，但能引起豚鼠肺巨噬细胞ＤＮＡ－蛋白质交链和ＤＮＡ单链断裂，并且交链和断裂的程度与甲醛浓度呈线性关系。说明甲醛对呼吸系统深部的细胞具有遗传性损伤，并进一步证实了甲醛具有遗传毒性。

甲醛致DNA-蛋白质交联作用及其修复的研究

为了探讨甲醛致生物机体DNA蛋白质交联作用及其修复能力,以昆明纯系小鼠和人肝癌细胞系HepG2为实验材料分别进行体内和体外实验,采用KClSDS沉淀法来检测甲醛染毒后小鼠肝细胞和HepG2细胞中DNA蛋白质交联的含量及其修复效果.体内实验结果表明,低浓度的气态甲醛(0.5mg·m-3)不能引起DNA蛋白质的交联,较高浓度的甲醛(1.0mg·m-3,3.0mg·m-3,p<0.01)可以产生明显的DNA蛋白质交联作用;由3.0mg·m-3浓度的气态甲醛产生的DNA蛋白质交联在12h内可以得到明显的修复,并在24h内恢复到空白对照水平.体外实验结果表明,经低浓度液态甲醛(25μmol·L-1和50μmol·L-1)处理后,HepG2细胞内的DPC系数虽然稍有变化,但是与空白对照组相比较无显著差异,而当甲醛浓度上升至75μmol·L-1及以上时,细胞中的DPC系数出现了极显著上升(p<0.01);采用75μmol·L-1甲醛染毒HepG2细胞,在染毒18h和24h后,细胞内的DPC水平较染毒结束时发生了极显著的下降(p<0.01),且与空白对照组相比无显著差异.以上结果显示,低浓度的甲醛不能引起DNA蛋白质的交联,较高浓度的甲醛可以引起明显的DNA蛋白质的交联作用,且甲醛所致的DNA蛋白质交联在体内修复比体外修复所需时间要短.

冷应激致雏鸡肺脏DNA的氧化损伤作用

目的:探讨冷应激对雏鸡肺脏DNA氧化损伤的影响。方法:以健康15日龄雏鸡为试验对象,进行冷应激(12±1℃)处理。检测了肺脏MDA含量以及SOD和GSH-Px活性,并应用KCl-SDS沉淀法和荧光检测法检测肺细胞DNA-蛋白质交联(DPC)系数和DNA-DNA交联(DDC)系数。结果:冷应激时,肺脏MDA含量随应激时间的延长逐渐升高,SOD、GSH-Px活性随应激时间的延长呈现上升趋势,肺细胞DPC和DDC含量也均随应激时间的延长呈升高趋势。结论:揭示冷应激可使肺组织氧化-抗氧化平衡破坏,引起肺组织细胞DNA的氧化损伤。

微囊藻毒素-LR致小鼠肝、肾和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨微囊藻毒素-LR所致小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联(DPC)作用。方法以昆明种雄性小鼠为实验对象,腹腔注射染毒,采用KCl-SDS沉淀法检测小鼠肝、肾、睾丸细胞中交联DNA和游离DNA的量,计算其DPC系数,DPC系数=交联DNA/(交联DNA+游离DNA),判断DNA与蛋白质的交联程度。结果在小鼠肝细胞中,微囊藻毒素-LR各染毒组DPC数量均有显著增加,其DPC系数与对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。在小鼠肾细胞中,微囊藻毒素-LR染毒剂量为3μg/kgbw和6μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05);染毒剂量为12μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。在小鼠睾丸细胞中,染毒剂量为3μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。染毒剂量为6μg/kgbw和12μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论在一定的染毒剂量下,微囊藻毒素-LR可以引起小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联。

甲醛所致DNA-蛋白质交联修复的研究

为了探讨机体对甲醛所致DNA-蛋白质交联的修复能力,采用KCl-SDS沉淀法检测甲醛染毒后不同时间段HepG2细胞和小鼠肝细胞中DNA-蛋白质交联的修复情况.实验结果表明,采用75μmol·L-1甲醛染毒HepG2细胞,在染毒18h和24h后,细胞内的DPC水平较染毒结束时发生了显著下降(p<0.01),且与空白对照组相比无显著差异;由3.0mg·m-3气态甲醛产生的DNA-蛋白质交联在12h内可以得到明显修复(p<0.01),并在24h内恢复到空白对照水平;经20mg·kg-1液态甲醛染毒后,18h时DPC含量与空白组相比有显著性升高(p<0.01),在24h时DPC含量与18h时相比有显著的下降(p<0.05),且与空白组相比无显著差异.以上结果显示:甲醛所致肝细胞DNA-蛋白质交联能够得到修复,且24h内能够修复完全.

气态甲醛致小鼠骨髓细胞DNA-蛋白质交联的研究

为探讨吸入性甲醛能否对小鼠骨髓造血细胞产生遗传毒性,以SPF级昆明雄性小鼠为材料,采用动态吸入方式连续染毒72h,取骨髓细胞,测定DNA-蛋白质交联.结果发现,随着甲醛浓度的升高(0、0.5、1.0、3.0mg·m-3),小鼠骨髓细胞DNA-蛋白质交联系数逐渐升高,0.5mg·m-3组与对照组存在显著差异(p<0.05),1.0、3.0mg·m-3组与对照组存在极显著差异(p<0.01).表明,在实验浓度范围内,甲醛对小鼠骨髓细胞具有一定的遗传毒性.

甲醛致V79细胞DNA交联作用的体外研究

目的研究甲醛对V79细胞DNA的交联作用,探讨甲醛的基因毒作用及可能的形成机制。方法中国仓鼠肺细胞(V79)分别暴露于浓度为75,150,300,600,1200μmol/L的甲醛溶液中1,2,4h,以紫外线照射作为标准断裂剂,用单细胞凝胶电泳技术对不同浓度、不同暴露时间甲醛诱导的V79细胞DNA-交联作用进行体外实验。结果在本研究所用的剂量范围内,除75μmol/L组外,其它4个浓度组3个染毒时间点甲醛均可引起显著的V79细胞DNA的交联作用,彗星尾长和彗星细胞率显著低于紫外线照射的对照组(P<0.01),随着甲醛浓度的增加,交联作用加强,彗星尾长存在明显剂量效应关系(P<0.01)。且细胞暴露在甲醛中4,2h;150,300,600μmol/L浓度组彗星尾长和彗星细胞率显著低于暴露于1h的相应浓度组(P<0.01)。结论甲醛是一种DNA交联剂,具有诱导V79细胞DNA交联的作用,并有明显的剂量、时间效应关系。

SO_2致小鼠肝蛋白质氧化损伤和DNA-蛋白质交联作用

探讨了SO2对小鼠肝组织蛋白质的氧化损伤作用及其分子机制.结果表明,SO2可致雌、雄小鼠肝蛋白质羰基(PCO)含量升高,且呈浓度-效应关系.雌性小鼠肝PCO含量升高较雄性小鼠明显.SO2可致雌、雄小鼠肝细胞DNA-蛋白质交联(DPC)升高,且呈现浓度-效应关系,但这种升高仅在SO2浓度为28,56mg/m3时才具有显著意义.雌性小鼠肝细胞DPC升高较雄性小鼠明显.其分子机制可能是SO2吸入后,导致机体产生·OH和O2-·或直接抑制机体抗氧化系统酶的活性,使机体中过量的自由基堆积,继而对蛋白质和DNA产生损伤.

甲醛和丝裂霉素C的DNA交联作用研究

目的 :探讨用彗星试验检测DNA交联剂作用的时间 效应关系及验证其应用的可行性。方法 :以过氧化氢 (H2 O2 )作标准DNA断裂剂 ,用彗星试验对甲醛诱导TK6细胞DNA交联作用的时间 效应关系进行了探讨 ,并用甲醛和丝裂霉素C进行了验证。结果 :在一定浓度范围内 ,随着甲醛和丝裂霉素C浓度的增加 ,由H2 O2 造成的TK6细胞DNA迁移距离逐渐减小。时间效应的研究表明 ,在H2 O2 浓度一定时 ,随着甲醛染毒时间的延长 ,其DNA交联作用增加。结论 :彗星试验既可检测DNA 蛋白质交联又可检测DNA DNA交联 ,对DNA 蛋白质交联的检测更敏感。

甲醛致小鼠肺DNA蛋白质交联和DNA断裂效应的研究

目的研究甲醛致小鼠肺DNA-蛋白质的交联(DNA-prote in crosslinks,DPC)和致DNA的断裂作用。方法以小鼠肺为材料,经体外染毒后,采用KC l-SDS沉淀法和单细胞凝胶电泳法检测液态甲醛染毒后肺部提取细胞中DNA-蛋白质交联物的含量及DNA的断裂效应。结果KC l-SDS沉淀法,低浓度的液态甲醛(5μM,25μM)不能引起DNA-蛋白质的交联(P>0.05),较高浓度(125μM,625μM)可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用(125μM,P<0.05;625μM,P<0.01)。而单细胞凝胶电泳法显示甲醛在低浓度(5μM,25μM)时可以引起DNA链的断裂(P<0.01),在较高浓度(125μM,625μM)时可以引起交联作用(P<0.01)。结论甲醛在较高浓度时可以导致明显的DNA-蛋白质交联作用,而在<25μM时以DNA断裂为主。

稀土镧离子对大肠杆菌基因组DNA的影响

背景与目的通过研究硝酸镧溶液对大肠杆菌基因组DNA的作用,探讨稀土镧离子对原核生物的遗传毒性效应。材料与方法用含硝酸镧分别为10、40、80、160、320mg/L的LB培养基培养大肠杆菌,以不添加硝酸镧组作为对照,于培养10h,15h和20h后分别采样提取总DNA,琼脂糖凝胶电泳;并用含硝酸镧分别为50、200、400、800、1600mg/L的LB培养基培养大肠杆菌,未添加硝酸镧组作为对照,于培养30h后分别采样提取总DNA,琼脂糖凝胶电泳。结果高剂量镧离子组大肠杆菌基因组DNA出现降解或交联现象,电泳带型荧光减弱,不清晰或滞留于点样孔不能泳出。结论镧离子对大肠杆菌基因组DNA可能具有降解或交联作用。

大鼠肝细胞核膜脂质过氧化对核DNA影响的研究

采用大鼠肝脏细胞核为材料，研究了核膜脂质过氧化对核ＤＮＡ的影响。证实核膜脂质过氧化可以引起ＤＮＡ损伤，表现为ＤＮＡ的增色效应、熔解温度、从ＤＮＡ向ＥＢ的能量转移效率降低，圆二色谱发生显著变化。另外受损ＤＮＡ对ＤＮａｓｅⅠ产生明显抗性和琼脂糖凝胶电泳结果提示核膜脂质过氧化引起的ＤＮＡ损伤可能以交联为主，同时利用原子力显微镜（ＡＦＭ）直接观察到了交联ＤＮＡ的生成。各种自由基清除剂对ＤＮＡ损伤保护的差异说明脂类自由基可能在活性氧自由基引起的ＤＮＡ损伤中具有重要作用。

彗星试验检测甲醛对V79细胞的DNA交联作用

目的 研究甲醛对V79细胞DNA的交联作用 ,探讨甲醛的遗传毒性及机制。方法 以紫外线照射作为标准断裂剂 ,用彗星试验检测不同浓度、不同暴露时间甲醛诱导的V79细胞DNA的交联作用。结果 除 75 μmol/L组外 ,在其它 4个浓度组、3个染毒时间点 ,甲醛均可引起显著的DNA交联作用 ,彗星尾长和彗星细胞率显著低于仅紫外线照射的对照组 (P <0 0 1) ,且彗星尾长具有明显剂量 -反应关系 (P <0 0 1)。细胞暴露在甲醛中 2、4h ,15 0、3 0 0、60 0 μmol/L浓度组彗星尾长和彗星细胞率显著低于暴露在 1h的 (P <0 0 1)。结论 甲醛是一种DNA交联剂 ,具有诱导V79细胞DNA交联的作用 。

邻苯二甲酸二异辛酯致小鼠肝DNA蛋白质交联效应研究

邻苯二甲酸酯是一类广泛应用于人类生产和生活的酸酞酯类人造化学物,许多研究表明其具有广泛的生物学毒性。DNA-蛋白质交联(DNA-proteincrosslinks,DPC)是DNA分子的一种严重损伤。本文以小鼠肝为实验材料,采用Kcl-SDS沉淀法检测邻苯二甲酸二异辛酯(DEHP)腹腔注射染毒两周后,检测其导致的小鼠肝DPC效应。实验结果表明,低浓度的DEHP(62.5mg/kg)不能致DPC效应(P>0.05),随着染毒浓度的倍增(125mg/kg,250mg/kg,375mg/kg),其DPC系数也随之升高,可导致明显的DPC效应(P<0.01),而在500mg/kg染毒组,由于其染毒剂量达到小鼠的致死水平,其DPC效应虽然与空白对照组相比有极显著性差异(P<0.01),但<125mg/kg染毒组。结论DEHP在低浓度(62.5mg/kg)时不引起小鼠肝的DPC效应,但其DPC系数随着染毒浓度(125mg/kg,250mg/kg,375mg/kg)的升高而升高,可以导致明显的DPC效应,在染毒剂量(500mg/kg)达到致死水平的染毒组DPC系数明显降低,但仍明显高于空白对照组。

气态甲醛致小白鼠肝脏DNA-DNA交联的研究

为了探讨气态甲醛致生物体内DNADNA交联效应,进一步评价甲醛的遗传毒性作用,以昆明纯系小鼠为实验材料,进行了72h动态吸入式连续染毒,采用荧光检测法检测甲醛染毒后小鼠肝细胞DNADNA交联形成的效应.实验结果表明,0.5mg·m-3的气态甲醛能引起明显的DNADNA交联(p<0.05),较高浓度的甲醛(1.0mg·m-3、3.0mg·m-3,p<0.01)可以产生极为明显的DNADNA交联作用.以上实验结果显示了0.5mg·m-3的气态甲醛就能致生物体内DNADNA交联效应,且随着浓度的升高DNADNA交联率越高.

DNA-蛋白质交联在砷中毒人群遗传损伤监测中意义及与皮肤癌变的关系

目的 探讨 DNA-蛋白质交联 (DPC)在监测砷中毒遗传损伤及皮肤病变的发生发展中的应用价值。方法 依据皮肤病理组织学检查结果对砷接触者进行分组 ,并采用 1 2 5I-后标记法测定其 DNA-蛋白质交联状况。结果 燃煤砷接触可增加人体 DNA-蛋白质交联的发生率 ,其发生早于皮肤损害 ,与对照、病区非病人及一般病变组比较 ,皮肤角化过度、癌前病变及癌变组明显增高 (P <0 .0 5或 P <0 .0 1) ;该指标的增高与尿砷、发砷值密切相关 ;吸烟及燃煤年限可对其产生影响 ,年龄分层中以 40岁以上者 DPC形成最为突出 ,男性的 DPC形成高于女性。结论 DNA-蛋白质交联是一敏感的分子遗传损伤标记 ,其检测方法 1 2 5I-后标记法简便、快速 ,在砷中毒的现场监测中可以早期发现癌变高危对象及采取针对性处理 。

甲醛致雄性大鼠脑和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨气态甲醛致雄性大鼠脑细胞和睾丸细胞 DNA-蛋白质交联(DNA-protein crosslinks,DPC)作用。方法将24只 SPF 级 Wistar 雄性大鼠随机分为4组,每组6只,分别为0.5、1.0、3.0 mg/m^3气态甲醛染毒组和阴性对照组。连续动态吸入染毒72 h 后,应用 KCl-SDS 沉淀法检测大鼠脑和睾丸组织 DNA-蛋白质交联的含量。结果与阴性对照组比较,0.5mg/m^3气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织的 DPC 系数差异无统计学意义(P>0.05),随着甲醛浓度的增加,DPC 系数逐渐升高。与阴性对照组比较,1.0、3.0mg/m^3气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织 DPC 系数升高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论低浓度(0.5 mg/m^3)的气态甲醛不能引起大鼠脑和睾丸组织产生 DPC 效应,而较高浓度(1.0、3.0mg/m^3)的气态甲醛可明显诱导其产生 DPC 效应,造成严重的 DNA 损伤。

烹调油烟冷凝物对DNA链损伤作用的实验研究

目的 探讨烹调油烟冷凝物对人外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。方法 采用单细胞凝胶电泳检测不同浓度的烹调油烟冷凝物处理 6 0min后的人外周血淋巴细胞的DNA单链断裂、双链断裂及DNA -蛋白交联的情况。结果 各剂量的烹调油烟冷凝物均可引起DNA单、双链断裂 (与对照组比较 :P <0 0 5 ) ,10 0 μg/ml及其以上浓度的烹调油烟冷凝物可诱导DNA -蛋白交联的形成 (与对照组比较P <0 0 5 ) ,交联率分别为 2 1 35 %、2 7 2 0 %、34 30 %,并存在着明显的剂量 -反应关系。结论 烹调油烟冷凝物能引起人外周血淋巴细胞DNA的损伤 ,DNA的损伤可能是烹调油烟致细胞恶性转化的重要机制之一。