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ANALYSIS OF N-METHYL-N-NITROSOUREA-INDUCED MUTATIONS IN A SHUTTLE VECTOR PLASMID PROPAGATED IN MOUSE O^6-METHYLGUANINE-DNA METHYLTRANSFERASE-DEFICIENT CELLS IN COMPARISON WITH PROFICIENT CELLS. 被引量:1
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作者 Shin-ichiMoriwaki TakashiYagi +1 位作者 ChikakoNishigori HirakuTakebe 《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1991年第S1期132-132,共1页
To investigate a contribution of O-methylguanineto mutagenesis in mouse cells,we constructed ashuttle vector plasmid,pYZ289,from a part ofpZ189 plasmid and polyoma virus DNA.The plasmidcontains a supF gene as a marker... To investigate a contribution of O-methylguanineto mutagenesis in mouse cells,we constructed ashuttle vector plasmid,pYZ289,from a part ofpZ189 plasmid and polyoma virus DNA.The plasmidcontains a supF gene as a marker of mutation andcan replicate in both E.coli and mouse cells.ThepYZ289 treated with N-methyl-N-nitrosourea (MNU) 展开更多
关键词 PLASMID mutagenesis dna PURINE marker mutation mutated GUANINE methy shuttle
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Poly(ADP-ribosyl)ation of Apoptosis Antagonizing Transcription Factor Involved in Hydroquinone-Induced DNA Damage Response 被引量:6
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作者 ling xiao xuan liu jia xian +5 位作者 yun lin du yu jun chen shao qian chen jia long tang huan wen liu lin hua 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2016年第1期80-84,共5页
The molecular mechanism of DNA damage induced by hydroquinone (HQ) remains unclear. Poly(ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) usually works as a DNA damage sensor, and hence, it is possible that PARP-1 is involved ... The molecular mechanism of DNA damage induced by hydroquinone (HQ) remains unclear. Poly(ADP-ribose) polymerase-1 (PARP-1) usually works as a DNA damage sensor, and hence, it is possible that PARP-1 is involved in the DNA damage response induced by HQ. In TK6 cells treated with HQ, PARP activity as well as the expression of apoptosis antagonizing transcription factor (AATF), PARP-1, and phosphorylated H2AX (v-H2AX) were maximum at 0.5 h, 6 h, 3 h, and 3 h, respectively. To explore the detailed mechanisms underlying the prompt DNA repair reaction, the above indicators were investigated in PARP-l-silenced cells. PARP activity and expression of AATF and PARP-1 decreased to 36%, 32%, and 33%, respectively, in the cells; however, y-H2AX expression increased to 265%. Co-immunoprecipitation (co-IP) assays were employed to determine whether PARP-1 and AATF formed protein complexes. The interaction between these proteins together with the results from IP assays and confocal microscopy indicated that poly(ADP-ribosyl)ation {PARylation) regulated AATF expression, in conclusion, PARP-1 was involved in the DNA damage repair induced by HQ via increasing the accumulation of AATF through PARylation. 展开更多
关键词 PARP dna DDR Figure ADP-ribosyl)ation of Apoptosis Antagonizing Transcription Factor Involved in Hydroquinone-Induced dna Damage Response
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肺癌线粒体DNA突变的研究 被引量:6
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作者 金雄杰 张建军 +2 位作者 宋燕 高燕宁 程书钧 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第7期715-718,共4页
背景与目的:近年来已经在多种肿瘤中发现了线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)突变,但其意义尚不明确。本研究通过检测肺癌组织中的mtDNA突变,探讨mtDNA突变在人肺癌发生中的作用。方法:提取58例肺癌组织及其相应病灶的远端非癌肺组织... 背景与目的:近年来已经在多种肿瘤中发现了线粒体DNA(mitochondrialDNA,mtDNA)突变,但其意义尚不明确。本研究通过检测肺癌组织中的mtDNA突变,探讨mtDNA突变在人肺癌发生中的作用。方法:提取58例肺癌组织及其相应病灶的远端非癌肺组织和外周血淋巴细胞的总DNA(包括核DNA和mtDNA),用巢式PCR(nestedPCR)方法扩增相互重叠且涵盖mtDNA全长的58个DNA片段。经PCR产物直接测序法测定mtDNA序列,通过与外周血淋巴细胞比较,确定肺癌组织mtDNA突变。结果:在36例(62.1%)肺癌组织中发现66个突变,其中点突变58个,插入突变4个,缺失突变4个。这些突变分散地分布于mtDNA,以D-loop区突变最多,为18个,在多肽编码区没有明显的热点突变区。在多肽编码区检出的43个点突变中,20个突变不改变氨基酸编码序列。在8例病灶远端非癌肺组织中发现了与相应肿瘤相同的突变。结论:肺癌组织中mtDNA突变可能是随机发生的,且大部分突变对肿瘤的发生可能没有影响,但其有望成为一种肿瘤诊断的分子标记。 展开更多
关键词 线粒体dna 肺肿瘤 突变 MTdna
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STUDIES ON ORGANOTROPISE OF DNA DAMAGE IN DIFFERENT ORGAN CELLS OF RAT INDUCED BY AOH AND AME
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《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1991年第S1期220-220,共1页
With the Unscheduied DNA Synthesls (UDS),We studiedorganotropism of DNA damage in different organ cells ofrat induced by Alternariol (AOH) and Alternariol mono-methyl ether (AME) produced by Alternaria alternata thatw... With the Unscheduied DNA Synthesls (UDS),We studiedorganotropism of DNA damage in different organ cells ofrat induced by Alternariol (AOH) and Alternariol mono-methyl ether (AME) produced by Alternaria alternata thatwas preponderate strain isolated from the grain in thehigh incidence area of esophageal cancer.The 展开更多
关键词 dna esophageal incidence ESOPHAGUS ALTERNARIA methy ACTIVATING powerful keeping infer
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RELATIONSHIP BETWEEN STRUCTURE AND MUTAGENICITY OF ORGANOPH OSPHORUS PESTICIDES
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《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1991年第S1期94-94,共1页
24 0rganophosphates(0PPs) were tested by Salmonella test(SAL),B.subtilis DNA repair test(SUB),mouse micronucleustest(MNT-M),CHL cell micronucleus test(MNT-C) and SOSinduction test(S0S).The results of 33 0PPs in SCE te... 24 0rganophosphates(0PPs) were tested by Salmonella test(SAL),B.subtilis DNA repair test(SUB),mouse micronucleustest(MNT-M),CHL cell micronucleus test(MNT-C) and SOSinduction test(S0S).The results of 33 0PPs in SCE test invitro from literatures were also analysed.The results werecontradicted to those reported by Fahrig and Klopman,thatis not only the methyl-0PPs shown genetic activity or highprobability of positive reaction,but the ethyl-0PPs in pre-sent studies,also demostrated high positive reaction rate. 展开更多
关键词 invitro REPAIR SALMONELLA analysed dna estab tried methy SUBGROUP PERMUTation
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亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与脑梗死的关系 被引量:2
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作者 赵永波 王乔树 +1 位作者 王枫 郭春妮 《中国临床康复》 CSCD 2003年第7期1059-1060,共2页
目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolatereductase,MTHFR)基因C677T多态性与脑梗死的关系。方法采用PCR-RFLP技术,检测了62例脑梗死患者和79例对照者的C677T突变的基因型。结果MTHFR基因C677T突变型等位基因(V)频率在... 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolatereductase,MTHFR)基因C677T多态性与脑梗死的关系。方法采用PCR-RFLP技术,检测了62例脑梗死患者和79例对照者的C677T突变的基因型。结果MTHFR基因C677T突变型等位基因(V)频率在患者组和对照组,差异有显著性意义(χ2=4.41,P<0.05);3种基因型频率在两组人群中差异均无显著性意义。基因型频率的相对危险分析,AV基因型比AA基因型患脑梗死危险高1.76倍;VV基因型比AA基因型患脑梗死危险高3.25倍。结论MTHFR基因C677T突变型等位基因与脑梗死有一定的关联,突变基因型增加了脑梗死的发病危险。 展开更多
关键词 亚甲基四氢叶酸还原酶 基因多态性 脑梗死 突变型等位基因
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胶质瘤组织中多药耐药性相关蛋白的表达变化及意义 被引量:1
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作者 方川 檀艳丽 +3 位作者 王佳良 李炜 郑克彬 史彦芳 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第30期1-2,共2页
目的观察胶质瘤组织中耐药蛋白谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)、O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)在胶质瘤组织中的表达变化,为临床制订个体化化疗方案提供依据。方法选取69例胶质瘤病理切片,采用免疫组化SP法检测GST-π、MGMT,分析其与胶... 目的观察胶质瘤组织中耐药蛋白谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)、O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)在胶质瘤组织中的表达变化,为临床制订个体化化疗方案提供依据。方法选取69例胶质瘤病理切片,采用免疫组化SP法检测GST-π、MGMT,分析其与胶质瘤病理级别的关系及两者表达的相关性。结果 69例胶质瘤组织中GST-π阳性表达率为72.46%(50/69),其表达强度与病理分级呈正相关(r=0.374,P<0.05);MGMT阳性率为63.77%(44/69),其表达强度与胶质瘤病理分级无关(P>0.05)。GST-π与MGMT的表达无相关性(P>0.05)。结论 GST-π的表达与胶质瘤恶性程度有关,MGMT与恶性程度无关。检测胶质瘤组织中GST-π、MGMT有利于指导临床进行个体化化疗。 展开更多
关键词 胶质瘤 多药耐药 谷胱甘肽S转移酶Π O6-甲基鸟嘌呤dna甲基转移酶
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宫颈癌变进展中人乳头瘤病毒甲基化的研究 被引量:1
8
作者 胡元晶 曲芃芃 《国际妇产科学杂志》 CAS 2013年第5期443-445,共3页
高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌发生的直接原因,然而HPV感染后多数可被宿主免疫机制清除,只在部分病例中HPV感染持续存在并与宿主细胞DNA整合,导致宿主细胞癌变。HPV表观遗传学的改变在病毒整合及致宿主细胞癌变中起一定作用... 高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌发生的直接原因,然而HPV感染后多数可被宿主免疫机制清除,只在部分病例中HPV感染持续存在并与宿主细胞DNA整合,导致宿主细胞癌变。HPV表观遗传学的改变在病毒整合及致宿主细胞癌变中起一定作用。对目前有关HPV表观遗传学特点在影响HPV自身表达和宫颈病变进展中作用的文献加以综述,了解HPV DNA甲基化状态在宫颈癌发生、发展中的作用。HPV基因表观遗传学状态有可能成为临床诊断和判断预后的分子标记物。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 人乳头瘤病毒16 dna甲基化 基因沉默
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LGR5启动子甲基化在胃癌中的表达
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作者 陈晓雨 朱耀东 +2 位作者 喻鑫 刘弋 于东风 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第12期1952-1954,1959,共4页
目的探究富含亮氨酸的重复序列G蛋白偶联受体5(LGR5)甲基化与胃癌发生及相关临床病理参数的关系。方法利用多重PCR和Methyl Taryot技术,计算26组胃癌标本LGR5启动子甲基化水平,并与临床病理参数进行统计分析&结果LGR5甲基化水平在... 目的探究富含亮氨酸的重复序列G蛋白偶联受体5(LGR5)甲基化与胃癌发生及相关临床病理参数的关系。方法利用多重PCR和Methyl Taryot技术,计算26组胃癌标本LGR5启动子甲基化水平,并与临床病理参数进行统计分析&结果LGR5甲基化水平在胃癌组织中显著降低,并且与胃癌病理分期、浸润深度、肿瘤大小、淋巴转移、1年内复发相关&结论胃癌组织中的LGR5甲基化水平有助于胃癌的诊断及对病理参数的初步判断,为预测短期复发提供参考,并可能为治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 胃癌 LGR5 启动子 甲基化
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PARP2突变恢复parg1突变体对基因毒剂敏感表型的机理研究
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作者 潘维扬 顾宗英 葛晓春 《复旦学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期704-712,724,共10页
蛋白质多聚ADP核糖化是一种翻译后修饰方式,拟南芥中有3个编码多聚ADP核糖化聚合酶的基因(PARP1,PARP2和PARP3)和两个编码多聚ADP核糖水解酶的基因(PARG1和PARG2),其中PARG1突变体parg1-4对基因毒剂极其敏感,为了了解PARP家族成员PARP2... 蛋白质多聚ADP核糖化是一种翻译后修饰方式,拟南芥中有3个编码多聚ADP核糖化聚合酶的基因(PARP1,PARP2和PARP3)和两个编码多聚ADP核糖水解酶的基因(PARG1和PARG2),其中PARG1突变体parg1-4对基因毒剂极其敏感,为了了解PARP家族成员PARP2基因与parg1突变体表型的关系,本研究将PARP2突变体parp2-3与parg1-4杂交获得了parp2-3 parg1-4双突变体,发现PARP2突变部分恢复了parg1-4对双链断裂基因毒剂zeocin和单链断裂基因毒剂MMS敏感的表型.Western blot结果显示:在zeocin和MMS处理下,parp2-3 parg1-4中的PAR信号强度与parg1-4中的相比大大降低.实时荧光定量PCR结果显示:在zeocin和MMS处理下,parg1-4中响应DNA损伤的基因在胁迫初期被显著诱导,胁迫后期与细胞死亡相关的基因表达量明显高于其他基因型植物,但PARP2突变后,parp2-3 parg1-4中PAR水平和损伤及死亡基因的表达量均降低,从而部分恢复了parg1-4的敏感表型. 展开更多
关键词 多聚ADP核糖化 多聚ADP核糖聚合酶2 多聚ADP核糖水解酶1 dna损伤响应
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STUDY ON SUSCEPTIBILITY OF VARIOUS TISSUES TO CHEMICAL CARCINOGENS USING AUTORADIOGRAPHIC DETECTION OF UDS
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《癌变.畸变.突变》 CAS CSCD 1991年第S1期269-269,共1页
The methods of in vitro and in vivo-in vitro combinationassay for autoradiographic detection of unscheduled DNAsynthesis(UDS)induced by chemical carcinogens wasestablished.To estimate the reliability of these assays,U... The methods of in vitro and in vivo-in vitro combinationassay for autoradiographic detection of unscheduled DNAsynthesis(UDS)induced by chemical carcinogens wasestablished.To estimate the reliability of these assays,UDS in tissues slices was measured with the establishedmethods after exposure to MNNG and dimethylnitrosamine(DMN)in vitro or in vivo respectively.To study thesusceptibility of various tissues to chemicals,UDS 展开更多
关键词 CHEMICALS EXPOSURE morethan insensitive meant methy noticed PANCREAS dna
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血栓调节蛋白基因甲基化修饰与脑梗死发病关系的研究 被引量:1
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作者 龙其泰 杨秋玲 窦汝香 《精准医学杂志》 2018年第6期512-515,519,共5页
目的探讨血栓调节蛋白(TM)基因启动子区域甲基化修饰与脑梗死发病的相关性。方法 2017年1—12月在我院神经内科住院的脑梗死病人96例,根据颅脑MRI-弥散加权成像结果将脑梗死病人分为腔隙性脑梗死组(B组)41例,中等面积梗死组(C组)34例,... 目的探讨血栓调节蛋白(TM)基因启动子区域甲基化修饰与脑梗死发病的相关性。方法 2017年1—12月在我院神经内科住院的脑梗死病人96例,根据颅脑MRI-弥散加权成像结果将脑梗死病人分为腔隙性脑梗死组(B组)41例,中等面积梗死组(C组)34例,大面积梗死组(D组)21例。同期在我院体检中心进行健康体检的志愿者38例(A组)作为对照。采用巢式甲基化特异性聚合酶链式反应(nMSP)检测所有受试者TM基因启动子区域甲基化状态;同时检测各组血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、空腹血糖(FPG)水平。采用ELISA法检测各组血清同型半胱氨酸(hcy)水平。结果脑梗死组病人血清TG、FPG、hcy水平均明显高于A组(F=3.33~249.98,P<0.05)。脑梗死病人TM甲基化率明显高于A组(χ~2=13.071,P<0.05);D组病人TM甲基化率明显高于B组病人(χ~2=4.397,P<0.05)。Spearman相关分析显示,脑梗死病人TM基因启动子区甲基化水平与病人入院24h内NIHSS评分呈正相关(r=0.537,P<0.05)。Logistic多元回归分析结果显示,病人年龄(OR=1.299,95%CI=1.075~6.678,P<0.05)、饮酒史(OR=6.654,95%CI=3.456~8.987,P<0.05)以及hcy水平升高(OR=5.098,95%CI=2.876~7.845,P<0.05)是影响病人发生TM基因甲基化的独立危险因素。结论脑梗死病人TM基因甲基化程度明显高于健康受试人群,且与脑梗死灶面积和疾病严重程度呈正相关。 展开更多
关键词 血栓调节蛋白 脑梗死 dna甲基化 高半胱氨酸 巢式甲基化特异性聚合酶链式反应
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DNA条形码在生态学研究中的应用与展望 被引量:15
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作者 罗亚皇 刘杰 +1 位作者 高连明 李德铢 《植物分类与资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期761-768,共8页
DNA条形码是利用标准的DNA片段对物种进行快速鉴定的技术,已在生物学各相关领域得到广泛应用。随着DNA条形码技术的不断发展和完善,已成功应用于生态学领域的相关研究中。本文综述了DNA条形码在物种快速鉴定和隐存种发现、群落系统发育... DNA条形码是利用标准的DNA片段对物种进行快速鉴定的技术,已在生物学各相关领域得到广泛应用。随着DNA条形码技术的不断发展和完善,已成功应用于生态学领域的相关研究中。本文综述了DNA条形码在物种快速鉴定和隐存种发现、群落系统发育重建和生态取证、群落内物种间相互关系研究等方面的应用,并介绍了DNA metabarcoding技术和环境DNA条形码在生物多样性和生态学研究领域中的应用。最后,结合新的测序技术和未来大科学装置的发展,在相关数据库逐渐完善,新分析方法和计算模型不断开发使用的情景下,对DNA条形码在生态学相关领域的应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 生物多样性 群落系统发育 dna metabarcoding 环境dna条形码 第二代测序技术
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饮茶抑制大鼠体内杂环胺-DNA加合物形成的机理 被引量:5
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作者 林东昕 陈君石 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期265-269,共5页
目的我们已报告饮茶可有效抑制2氨基1甲基6苯基咪唑并[4,5b]吡啶(PhIP)在大鼠体内形成致癌物DNA加合物,本研究旨在探讨这一作用机理。方法PhIP在体内经代谢活化形成终致癌物N乙酰氧基PhI... 目的我们已报告饮茶可有效抑制2氨基1甲基6苯基咪唑并[4,5b]吡啶(PhIP)在大鼠体内形成致癌物DNA加合物,本研究旨在探讨这一作用机理。方法PhIP在体内经代谢活化形成终致癌物N乙酰氧基PhIP,后者与DNA结合形成PhIPDNA加合物。本研究模拟体内条件,观察茶水或茶多酚对化学合成的[3H]N乙酰氧基PhIP与DNA反应的抑制作用,并以高效液相色谱分析反应产物。结果茶水和茶多酚均可显著抑制PhIP与DNA结合,抑制效果与加入的茶水或茶多酚呈浓度效应关系。在所测试的茶水和茶多酚中,在同等浓度下,绿茶抑制效果优于红茶,绿茶多酚优于红茶多酚。高效液相色谱分析未发现[3H]N乙酰氧基PhIP与茶多酚的结合物,而反应体系中的主要产物是母体杂环胺PhIP。结论茶多酚抑制N乙酰氧基PhIP与DNA结合的作用机理,是直接将N乙酰氧基PhIP还原成PhIP,使之失去亲电子的能力从而抑制PhIPDNA加合物形成。鉴于茶多酚和N乙酰氧基PhIP均可在血循环和组织中存在。 展开更多
关键词 杂环胺 dna加合物 肿瘤抑制
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SLE患者外周血CD4^+T淋巴细胞DNA中p16基因启动子区甲基化研究 被引量:1
15
作者 李政亮 李遇梅 +5 位作者 马红 顾文涛 许辉 刘丽萍 吴蔚 张雪静 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期22-24,共3页
目的检测SLE患者外周血CD4^+T淋巴细胞DNA中p16基因的甲基化状态及其在SLE发病机制中的作用。方法以Taqman探针为基础的实时定量PCR(Methylight)方法检测28例SLE患者和20例正常人CD4^+T淋巴细胞中p16基因启动子区甲基化状态。结果SL... 目的检测SLE患者外周血CD4^+T淋巴细胞DNA中p16基因的甲基化状态及其在SLE发病机制中的作用。方法以Taqman探针为基础的实时定量PCR(Methylight)方法检测28例SLE患者和20例正常人CD4^+T淋巴细胞中p16基因启动子区甲基化状态。结果SLE患者CD4^+T淋巴细胞的p16基因启动子区甲基化率(35.7%,10/28)高于对照组(10.0%,2/20)。两者比较差异有统计学意义(r=4.11,P〈0.05)。SLE患者疾病严重程度评分与对应的标准甲基化指数无统计学相关性(rs=-0.29,P〉0.05)。结论SLE患者CD4^+T淋巴细胞p16基因甲基化异常,提示p16基因的高甲基化在SLE的发病中起一定作用。 展开更多
关键词 红斑狼疮 系统性 CD4阳性T淋巴细胞 基因 p16 dna甲基化
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一例Prader-Willi综合征的基因诊断和减重手术治疗 被引量:5
16
作者 吴佳君 乔洁 +11 位作者 韩兵 朱惠 刘炳丽 顾岩 王兵 赵双霞 杨建军 陈斌 陆颖理 宋怀东 陈名道 吴万龄 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期498-501,共4页
分析一例Prader-Willi综合征的临床表现、基因诊断及相关治疗。对一例临床高度怀疑PWS患者的15q11-q13印迹中心SNRPN基因,外显子α区段中CpG位点进行甲基化特异性聚合酶链反应(MSPCR)扩增,用重亚硫酸盐测序聚合酶链反应(BSPCR)证... 分析一例Prader-Willi综合征的临床表现、基因诊断及相关治疗。对一例临床高度怀疑PWS患者的15q11-q13印迹中心SNRPN基因,外显子α区段中CpG位点进行甲基化特异性聚合酶链反应(MSPCR)扩增,用重亚硫酸盐测序聚合酶链反应(BSPCR)证实;并比较患者在胃袖状切除手术前后的代鲥状况。MSPCR提示与正常人比较,患者15q11-q13区域尢父源等位基因的扩增产物;BSPCR证实患者SNRPN基因CpG位点完全甲基化;胃袖状切除手术后4个月整体代谢情况和心功能均有改善。MSPCR和BSPCR相瓦印证可以作为基因诊断PWS的方法,减重手术有望成为此病的主要治疗手段之一。 展开更多
关键词 PRADER-WILLI综合征 基因组印迹 甲基化特异性聚合酶链反应 胃袖状切除术
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上调微小RNA-148a对胰腺癌AsPC-1细胞抑癌基因前脑啡肽原、p16和Ras相关区域家族1A基因表达的影响 被引量:2
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作者 肖卫东 敖建 +4 位作者 黄祯 彭龙 肖建 刘战赢 李勇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期96-99,共4页
目的观察上调微小RNA-148a(miR-148a)表达对胰腺癌AsPC-1细胞抑癌基因前脑啡肽原(ppENK)、p16和Ras相关区域家族1A基因(RASSF1A)甲基化、蛋白表达及细胞增殖的影响。方法利用Lipofectamine?2000转染miR-148a模拟物(miR-148a mim... 目的观察上调微小RNA-148a(miR-148a)表达对胰腺癌AsPC-1细胞抑癌基因前脑啡肽原(ppENK)、p16和Ras相关区域家族1A基因(RASSF1A)甲基化、蛋白表达及细胞增殖的影响。方法利用Lipofectamine?2000转染miR-148a模拟物(miR-148a mimics)至胰腺癌AsPC-1细胞。实验细胞分为3组:空白对照组(转染脂质体)、阴性对照组(转染阴性对照序列)、实验组(转染miR-148a mimics)。转染后72 h,采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测细胞中miR-148a表达水平;甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测ppENK、p16和RASSF1A基因启动子甲基化;Western blot法检测DNA甲基转移酶1(DNMT1)及ppENK、p16和RASSF1A蛋白表达水平;噻唑蓝(MTT)法检测细胞体外增殖活力。结果实验组miR-148a的表达量显著高于空白对照组及阴性对照组(4.63±1.32比1.00±0.30比0.93±0.37,P=0.002),而DNMT1蛋白表达量则显著降低(1.00±0.00比1.04±0.19比0.27±0.15,P=0.001)。空白对照组和阴性对照组ppENK、p16和RASSF1A基因甲基化阳性,而实验组ppENK和p16基因甲基化阴性,RASSF1A基因部分甲基化。实验组ppENK、p16和RASSF1A蛋白表达量均显著高于两个对照组(ppENK:2.06±0.32比1.00±0.00比1.01±0.21,P=0.002;p16:2.02±0.12比1.00±0.00比0.96±0.12,P=0.000;RASSF1A:1.95±0.37比1.00±0.00比1.09±0.12,P=0.002)。实验组细胞体外增殖活力显著减慢(P=0.026)。结论上调胰腺癌AsPC-1细胞miR-148a的表达后,抑癌基因ppENK、p16和RASSF1A发生去甲基化,蛋白质重新表达,并抑制癌细胞增殖,其作用机制与miR-148a靶向抑制DNMT1表达有关。 展开更多
关键词 胰腺癌 微小RNA-148a dna甲基转移酶1 抑癌基因 甲基化 细胞增殖
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维吾尔族妇女子宫颈癌CCNA1基因甲基化检测
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作者 刘引引 张金莉 +5 位作者 李玉华 李星 康华丽 龙海晨 左强强 潘泽民 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第11期1791-1792,共2页
目的:探讨CCNA1基因启动子区域甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌的相关性。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法,对40例子宫颈癌患者手术切除肿瘤组织及其40例正常子宫颈组织CCNA1基因启动子区域甲基化进行检测。结果:CCNA1基因在40例子宫... 目的:探讨CCNA1基因启动子区域甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌的相关性。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法,对40例子宫颈癌患者手术切除肿瘤组织及其40例正常子宫颈组织CCNA1基因启动子区域甲基化进行检测。结果:CCNA1基因在40例子宫颈癌中甲基化率为87.5%,正常子宫颈组织中甲基化率为2.5%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:CCNA1基因启动子甲基化与维吾尔族妇女子宫颈癌发生相关。 展开更多
关键词 子宫颈癌 CCNA1基因 甲基化
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