Ion Torrent测序检测非小细胞肺癌外周血DNA的临床价值

目的:探讨Ion Torrent测序检测非小细胞肺癌外周血DNA的临床价值。方法:选择患者80例,分为两组,各40例,观察组利用三代测序技术Ion Torrent检测,对照组使用第1代测序技术Sanger末端终止法进行测序,比较手术前后通过Ion Torrent测序所得EGFR和K-ras结果,并统计两组测序EGFR阳性1年生存情况。结果:未手术者观察组EGFR阳性和K-ras突变阳性检出率均显著高于对照组(P<0.05),术后复发患者观察组EGFR阳性和K-ras突变阳性检出率均显著高于对照组(P<0.05),观察组1年生存率显著高于对照组(P<0.05)。结论:对非小细胞肺癌患者使用Ion Torrent测序技术测定外周血DNA,能更准确的确定患者基因类型,从而为分子靶向治疗提供依据。

荧光光谱法测定外周血DNA对恶性肿瘤的筛选价值

目的评价荧光光谱法测定外周血DNA对恶性肿瘤的筛选价值。方法提取恶性实体瘤、白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)及正常人外周血DNA各50份,应用镧系离子荧光光谱分析法检测其荧光强度。结果恶性实体瘤、白血病、MDS及正常人外周血DNA荧光强度分别为:345.645±28.004、322.988±43.530、308.477±33.834、276.152±29.442,3组恶性疾病患者外周血DNA荧光强度均明显高于正常人(P<0.001),且3组之间荧光强度有显著性差异(P<0.05)。结论外周血DNA荧光检测对于恶性肿瘤具有一定的筛选价值,且可提高早期诊断率。

急性白血病患者DNA甲基转移酶活性测定及其意义

目的探讨DNA甲基转移酶(Dnmt)在急性白血病患者疾病发展中的意义。方法应用同位素标记法测定47例急性白血病患者(初治组19例,完全缓解组20例,难治组8例)和18例健康对照者的Dnmt活性,以同位素液闪计数值的大小表示Dnmt活性大小。结果急性白血病初治组和难治组患者Dnmt活性放射液闪计数值与对照组相比差别有显著性意义(P<0·01),而完全缓解组与对照组相比差别无显著性意义(P>0·05)。结论初治型和难治型急性白血病患者Dnmt活性升高,而完全缓解期Dnmt活性下降,故Dnmt活性可作为判断急性白血病病情发展和预后的指标之一。

高通量基因测序技术检测外周血循环肿瘤DNA基因突变在非小细胞肺癌中的应用

目的:探究高通量基因测序技术检测非小细胞肺癌外周血循环肿瘤DNA基因突变的应用价值。方法:临床纳入2017年1月至2018年9月在我院就诊的40例晚期非小细胞肺癌患者作为研究对象,所有患者入院后均经肺组织活检或气管镜检查确诊为晚期非小细胞肺癌。对患者进行病理组织石蜡切片DNA(tDNA)检测,并采集患者肘静脉血使用高通量基因测序技术检测患者外周血循环肿瘤ctDNA基因情况。对比分析tDNA与ctDNA检测对患者DNA基因突变的准确性,探讨非小细胞肺癌患者进行高通量基因测序技术检测外周血循环肿瘤DNA基因突变的应用价值。结果:40例非小细胞肺癌的外周血循环肿瘤DNA基因突变检测与组织石蜡切片比较,两种方法检测率差异无统计学意义(P>0.05)。在高通量基因测序技术检查外周血循环肿瘤DNA中,21外显子测序结果:61号替代突变2573G→T,62/63/68号替代突变L858R(2573T→G)。19外显子测序结果:50号样品突变为delE746→A750+2235G→A,60号样品突变为delE746→A750,70号样品突变为delL747→T751,80号样品突变为delL747→S752+2257C→T。结论:非小细胞肺癌外周血循环肿瘤DNA基因突变进行高通量基因测序技术对具体的基因突变或缺失具有较高准确性,可实时监测肿瘤DNA基因突变情况,且具有无创性、可重复应用等优点。

基于二代测序技术的etDNA与ctDNA在肺癌合并胸腔积液诊断中的临床价值研究

目的探讨基于二代测序技术的etDNA与ctDNA检测在肺癌合并胸腔积液诊断中的应用价值。方法选取2018年5—12月惠东县人民医院收治的40例晚期非小细胞肺癌合并胸腔积液患者为研究对象,收集患者的胸腔积液、血液以及原发灶肿瘤组织作为检测样本,应用二代基因测序技术检测胸腔积液DNA(et DNA)、外周血DNA(ct DNA)、原发灶肿瘤组织DNA(t DNA)的AF值及其EGFR基因突变情况。结果40例患者的etDNA的AF值较ctDNA明显升高(P<0.05),而与tDNA比较,差异无统计学意义(P>0.05)。以tDNA检测出的EGFR基因突变结果为标准,etDNA检测EGFR基因突变的敏感度和准确性明显高于ctDNA检测(P<0.05)。结论与ctDNA检测相比,应用二代测序技术检测etDNA诊断晚期非小细胞肺癌合并胸腔积液的敏感度更高,对于临床早期诊治具有良好的指导意义。

白血病患者外周血FLT_3基因突变的研究

目的本实验通过对不同类型白血病患者外周血Flt3基因突变的研究,探讨Flt3基因与白血病发生的相关性,以骨髓标本对照,确定外周血Flt3基因检测白血病的新方法。方法从34例白血病患者和10名健康人外周血标本中提取基因组DNA,聚合酶反应(PCR)扩增Flt3基因外显子14-15,PCR产物经电泳纯化后进行DNA测序分析。结果对34例血样标本均扩增出Flt3基因的外显子14-15的靶基因片段经琼脂糖电泳显示3例阳性带。选择11例特征性标本测定外显子14-15的DNA序列,发现5例突变,其中2例为ITD,内串联复制重复序列分别为30bp和33bp,编码10和11个氨基酸;3例均在近膜区(JM)外显子14、L576P发生点突变,其中1例伴有内含子14缺失,长度90bp。10名健康者标本均为阴性。结论Flt3基因突变和白血病发生、发展相关,外周血可以替代骨髓检测FLT3突变;FLT3-ITD阳性患者化疗缓解率低、易复发、预后差;外显子14、L567突变点是否为FLT3一个新的突变热点需进一步研究。

孕妇外周血中游离胎儿DNA检测对唐氏筛查高风险妊娠的诊断价值

目的探讨孕妇外周血中游离胎儿DNA检测对唐氏筛查高风险妊娠的诊断价值。方法选取2020年1月至2021年3月在大同市第一人民医院唐氏筛查中1667例高风险和临界高风险妊娠者作为研究对象,进行前瞻性研究。在其接受外周血中游离胎儿DNA检测后,结果显示高风险的妊娠者可自主决定选择是否接受羊水穿刺-核型分析,后期进行随访追踪相关信息,最后将外周血中游离胎儿DNA检测结果及羊水穿刺-核型诊断结果进行统计,结合随访妊娠结局后进行统计对比并分析结果。结果外周血游离胎儿DNA检测对于21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征以及染色体异常的阳性预测值分别为100.0%、100.0%、0.0%、66.7%,灵敏度为100.0%,总体特异度为99.8%。外周血游离胎儿DNA检测对于13-三体高风险的检测假阳性率0.12%,对于染色体异常的检测假阳性率0.06%。结论外周血中游离胎儿DNA检测在产前筛查的结果中与羊水穿刺-核型分析的结果有相对高的吻合度,可以作为唐氏筛查高风险和临界风险妊娠者的一种产前筛查方法,并且对产前的有创性诊断羊水穿刺-核型分析有一定指导意义。