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Application of PCR-SSCP in detecting rpoB drug resistant gene polymorphism of M. tuberculosis L-form from pneumoconiosis patients with tuberculosis
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作者 陆军 江姗 郑昭 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2006年第5期330-332,共3页
Objective: To study the relationship between the polymorphism of drug resistant gene rpoB and drug resistance against rifampicin(RFP) of M. tuberculosis L-forms, and to evaluate its clinical application. Methods: A to... Objective: To study the relationship between the polymorphism of drug resistant gene rpoB and drug resistance against rifampicin(RFP) of M. tuberculosis L-forms, and to evaluate its clinical application. Methods: A total of 52 clinical isolated strains of M. tuberculosis L-forms were collected. rpoB gene polymorphism was analyzed by polymerase chain reaction and single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) and conventional antimicrobial susceptibility test (AST). Their results were compared. Results: AST results showed that 38 of 52 clinical isolated strains were drug resistance (73.08%),while PCR-SSCP indicated 65.38% (32/52) rpoB gene polymorphism. There was no statistic significance(χ2= 2.4914) between the 2 methods. Conclusion:Combined the application of PCR-SSCP with AST in detecting rpoB drug resistant gene polymorphism of M. tuberculosis L-form from pneumoconiosis patients with tuberculosis may have advantages at earlier diagnosis and guidance of clinical medications. 展开更多
关键词 PNEUMOCONIOSIS TUBERCULOSIS M. TUBERCULOSIS L-FORM drug-resistance RPOB polymerase chain reaction and single-strand conformation polymorphism antimicrobial susceptibility test
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Microbial community structure in different wastewater treatment processes characterized by single-strand conformation polymorphism (SSCP) technique 被引量:2
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作者 Yangguo ZHAO Aijie WANG +1 位作者 Nanqi REN Yan ZHAO 《Frontiers of Environmental Science & Engineering》 SCIE EI CSCD 2008年第1期116-121,共6页
In order to investigate microbial community structures in different wastewater treatment processes and understand the relationship between the structures and the status of processes,the microbial community diversity,v... In order to investigate microbial community structures in different wastewater treatment processes and understand the relationship between the structures and the status of processes,the microbial community diversity,variety and distribution in five wastewater treatment pro cesses were studied by a culture-independent genetic fingerprinting technique single-strand conformation poly-morphism(SSCP).The five processes included denitrifying and phosphate-removal system(diminished N),Chinese traditional medicine wastewater treatment system(P),beer wastewater treatment system(W),fermentative biohydrogen-producing system(H),and sulfate-reduction system(S).The results indicated that the microbial community profiles in the wastewater bioreactors with the uniform status were very similar.The diversity of microbial populations was correlated with the complexity of organic contaminants in wastewater.Chinese traditional medicine wastewater contained more complex organic components;hence,the population diversity was higher than that of simple nutrient bioreactors fed with molasses wastewater.Compared with the strain bands in a simulated community,the relative proportion of some functional microbial populations in bioreactors was not dom-inant.Fermentative biohydrogen producer Ethanoligenens harbinense in the better condition bioreactor had only a 5% band density,and the Desulfovibrio sp.in the sulfate-reducing bioreactor had less than 1.5%band density.The SSCP profiles could identify the difference in microbial community structures in wastewater treatment processes,monitor some of the functional microbes in these processes,and consequently provide useful guidance for improving their efficiency. 展开更多
关键词 wastewater treatment process microbial community structure community diversity single-strand conformation polymorphism(SSCP)
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DNA芯片鉴定分枝杆菌的研究 被引量:9
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作者 黄明翔 王琳 +2 位作者 张丽水 戴腊梅 张俊仙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期555-557,共3页
目的评价DNA芯片技术鉴定分枝杆菌菌种的应用价值,为临床实际应用提供科学依据。方法收集以BACTECMGIT960从结核病患者分离到的分枝杆菌阳性培养物,以传统分枝杆菌菌种鉴定方法为对照,应用DNA芯片技术进行菌种鉴定。结果两种方法鉴定结... 目的评价DNA芯片技术鉴定分枝杆菌菌种的应用价值,为临床实际应用提供科学依据。方法收集以BACTECMGIT960从结核病患者分离到的分枝杆菌阳性培养物,以传统分枝杆菌菌种鉴定方法为对照,应用DNA芯片技术进行菌种鉴定。结果两种方法鉴定结果一致和基本一致共112株,吻合率为83.6%(112/134),包括胞内分枝杆菌50株,龟分枝杆菌14株,结核分枝杆菌14株,戈登分枝杆菌9株,鸟分枝杆菌7株,偶然分枝杆菌7株,堪、瘰、胃和猿分枝杆菌6株,土分枝杆菌和海分枝杆菌各1株;未分类NTM3株。应用DNA芯片未能分类的17株分枝杆菌中,传统方法分别鉴定为戈登分枝杆菌5株、胞内分枝杆菌3株、龟分枝杆菌2株、蟾分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和浅黄分枝杆菌各1株,未分类NTM4株。结论用DNA芯片检测技术,可以简便、快速、灵敏、特异地将大多数分枝杆菌鉴定到种,但有待进一步完善。 展开更多
关键词 分枝杆菌 聚合酶链反应 菌种鉴定 dna芯片
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应用DNA微阵列技术快速鉴定分枝杆菌菌种 被引量:5
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作者 张俊仙 吴雪琼 +4 位作者 邢婉丽 张琼 梁建琴 张洪恩 陆阳 《中国防痨杂志》 CAS 2007年第1期1-7,共7页
目的利用DNA微阵列的高通量、高效性,建立一种快速、简便的分枝杆菌分子菌种鉴定方法,为临床医师正确诊断提供依据。方法以DNA直接测序法为对照,通过PCR-SSCP和DNA微阵列技术分析28种分枝杆菌标准菌株、9种非分枝杆菌和465株分枝杆菌临... 目的利用DNA微阵列的高通量、高效性,建立一种快速、简便的分枝杆菌分子菌种鉴定方法,为临床医师正确诊断提供依据。方法以DNA直接测序法为对照,通过PCR-SSCP和DNA微阵列技术分析28种分枝杆菌标准菌株、9种非分枝杆菌和465株分枝杆菌临床分离株的菌种。结果应用DNA微阵列技术分析28种分枝杆菌标准菌株和9种非分枝杆菌菌株,特异性100%。465株分枝杆菌临床分离株中,经16S rRNA PCR-SSCP初步菌种鉴定,256株为结核分枝杆菌复合群,应用DNA微阵列分析,显示与分枝杆菌属探针M和结核分枝杆菌复合群探针a杂交阳性,两种鉴定方法结果一致;209株PCR-SSCP初步鉴定为非结核分枝杆菌的分离株,经芯片分析,68株为龟分枝杆菌龟亚种和脓肿亚种,46株为胞内分枝杆菌,34株为堪萨斯、瘰疬、胃和猿猴分枝杆菌复合群,31株为偶然分枝杆菌,16株为戈登分枝杆菌,3株为鸟分枝杆菌,2株为海和溃疡分枝杆菌复合群,1株为土分枝杆菌, 1株为迪氏分枝杆菌,1株为草分枝杆菌;另6株只与探针M杂交,经测序显示5株为胞内分枝杆菌,但其基因序列与标准菌株不完全相同,1株为新金色分枝杆菌,芯片上无鉴定该菌种的探针。结论用DNA微阵列可简便、快速、灵敏、特异地将大多数分枝杆菌鉴定到种,提高分枝杆菌病的正确诊断率,指导临床合理治疗。 展开更多
关键词 分枝杆菌 聚合酶链反应 单链构象多态性 菌种鉴定 dna微阵列
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Leber遗传性视神经病变家系线粒体DNA突变检测 被引量:2
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作者 金学民 王珮 +3 位作者 胡宏阁 刘斌 李晓文 姜枫 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2005年第4期680-683,共4页
目的:探讨Leber遗传性视神经病变(LHON)患者的线粒体DNA(mtDNA)突变。方法:运用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和DNA序列测定方法,设计4对引物,扩增出含11778、14484、3460三个已知原发突变位点和3394、4136、4160、4216、1... 目的:探讨Leber遗传性视神经病变(LHON)患者的线粒体DNA(mtDNA)突变。方法:运用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和DNA序列测定方法,设计4对引物,扩增出含11778、14484、3460三个已知原发突变位点和3394、4136、4160、4216、11696、14459、14482、14498八个已知继发突变位点的4对mtDNA片段,对3个LHON家系30位母系成员的血样进行检测。32份无视力障碍的正常人血样作对照。参照mtDNA序列为剑桥标准mtDNA序列。结果:30位母系成员均含11778位点突变,其中1人合并4164位点突变(A→G)。与剑桥标准mtDNA序列对比,30位LHON母系成员和32位正常对照均含有11719位点突变。结论:11778是LHON患者常见的突变位点,4164位点突变可能是新的继发突变或正常人单核苷酸位点多态性。11719位点突变可能是中国人存在的单核苷酸位点多态性。 展开更多
关键词 LEBER遗传性视神经病变 线粒体dna 单链构象多态性 dna序列测定
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内毒素致兔线粒体DNA基因突变的SSCP检测 被引量:2
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作者 高洪 彭辂 +1 位作者 王德成 高斌 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期373-375,共3页
将20只健康实验用白兔随机分为4组(5只/组):正常对照组(A组)、阳离子A处理组(B组)、内毒素处理组(C组)、阳离子A+内毒素处理组(D组),运用改进的碱变性法提取肝细胞的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA),设计4对引物扩增mtDNA的tRNALeu(... 将20只健康实验用白兔随机分为4组(5只/组):正常对照组(A组)、阳离子A处理组(B组)、内毒素处理组(C组)、阳离子A+内毒素处理组(D组),运用改进的碱变性法提取肝细胞的线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA),设计4对引物扩增mtDNA的tRNALeu(UUR)、tRNALys、ATPase8、ATPase6基因,同时运用分光光度计法对扩增产物进行质量鉴定,并运用聚合酶链式反应-单链构象多态性分析技术对PCR产物进行突变分析。结果发现:C组tRNALeu(UUR)基因在凝胶中的带型出现泳动异常,表明该基因发生了碱基突变,序列测定表明该突变为2716位的A→G点突变,同时其他各组的tRNALeu(UUR)基因无突变发生。该结果提示内毒素可以导致mtDNA的tRNALeu(UUR)基因发生突变,而阳离子A对这一突变具有保护效应。 展开更多
关键词 内毒素 聚合酶链式反应-单链构象多态性 MTdna 基因突变
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乙型肝炎患者父子间HBV DNA U5样序列的研究 被引量:1
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作者 王培林 丛书英 +2 位作者 王修海 汤秀明 苏爱 《中国优生与遗传杂志》 1998年第1期26-28,共3页
为了探讨乙型肝炎(HB)的遗传传递,我们对乙型肝炎患者(HBP)38个家系82个个体检测了血清游离型和外周血单核细胞内整合型 HBV DNA U5样序列片段和单链 DNA 构象多态性等实验指标。发现男患者及其发病后出生子女 U5样序列检出率均显著高... 为了探讨乙型肝炎(HB)的遗传传递,我们对乙型肝炎患者(HBP)38个家系82个个体检测了血清游离型和外周血单核细胞内整合型 HBV DNA U5样序列片段和单链 DNA 构象多态性等实验指标。发现男患者及其发病后出生子女 U5样序列检出率均显著高于其发病前出生子女(P<0.05);U5样序列检出率在 HBP 和其发病后出生子女呈一致性增高;HBP 与其发病后出生子女可具有完全一致的单链泳动变位结果。在正常人群基因组内无 HBV DNA U5样序列的同源序列。本研究结果为 HB的遗传传递学说提供了分子遗传学证据。 展开更多
关键词 乙型肝炎 聚合酶链反应 遗传 U5样序列 HBV dna
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DNA单链二级结构预测与单链构象多态性分析的一致性研究
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作者 何云刚 谭德勇 +2 位作者 钱伟 赖建华 谢咏芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期848-852,共5页
单链构象多态性 (SSCP)分析是一种简便 ,快速检测DNA突变的方法 ,它在基因突变检测、遗传分析、进化研究等领域有着广泛的应用价值 .但是这种方法的突变检出率随DNA序列不同而变化 ,一般只能达到 70 %~ 80 % .这主要是有的碱基突变对单... 单链构象多态性 (SSCP)分析是一种简便 ,快速检测DNA突变的方法 ,它在基因突变检测、遗传分析、进化研究等领域有着广泛的应用价值 .但是这种方法的突变检出率随DNA序列不同而变化 ,一般只能达到 70 %~ 80 % .这主要是有的碱基突变对单链DNA的构象影响较小 ,不能通过SSCP检测出来 .将计算机对DNA二级结构的预测结果和实验结果作了对比 ,发现二者有很高的一致性 .这一结果表明计算机的DNA单链二级结构预测分析可用于PCR SSCP分析的辅助设计 。 展开更多
关键词 突变检测 dna单链二级结构预测 单链构象多态性分析
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Leber遗传性视神经病变线粒体DNA突变的研究
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作者 郑梅玲 贺江梅 +2 位作者 张桂林 化爱玲 张月莲 《中国优生与遗传杂志》 2007年第8期23-24,共2页
目的探讨Leber遗传性视神经病变患者的线粒体DNA突变类型及特点。方法分别应用等位基因特异性PCR(MSP-PCR)、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)联合DNA测序的方法,对12个家系中21位... 目的探讨Leber遗传性视神经病变患者的线粒体DNA突变类型及特点。方法分别应用等位基因特异性PCR(MSP-PCR)、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)联合DNA测序的方法,对12个家系中21位临床症状疑诊为LHON的患者及其19位无明显眼疾的母系亲属进行线粒体DNA检测。结果40例受检者中35例发生11778位点突变,2位成员有3460位点突变,有1例发现有4258位点突变(A→G)。结论11778是LHON患者常见的突变位点,3460突变少见,新发现的突变位点4258可能是新的继发突变或基因多态性。 展开更多
关键词 LEBER遗传性视神经病变 线粒体dna突变 等位基因特异性PCR、限制性片段长度多态性 单链构象多态性 dna序列分析
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DNA构象多态性对肿瘤生物学行为影响的研究进展
10
作者 苏晓丽(综述) 张声(审校) 《临床与病理杂志》 CAS 2021年第2期415-422,共8页
获得性DNA损伤可导致体细胞基因突变或失活,与肿瘤的发生发展有关。传统的研究主要针对B-DNA双链结构中Watson-Crick碱基互补对的改变对DNA生物学的影响。而对DNA构象多态性(特殊DNA序列分子间或分子内氢键、不成对碱基配对等形成的多种... 获得性DNA损伤可导致体细胞基因突变或失活,与肿瘤的发生发展有关。传统的研究主要针对B-DNA双链结构中Watson-Crick碱基互补对的改变对DNA生物学的影响。而对DNA构象多态性(特殊DNA序列分子间或分子内氢键、不成对碱基配对等形成的多种非B-DNA三维立体空间结构)的研究尚少。对非B-DNA结构的生物学功能、转录、翻译、基因损伤及其与疾病发生发展关系的深入了解,可以提高人们对DNA三维立体空间结构对肿瘤生物学行为影响方面的认识。 展开更多
关键词 dna构象多态性 非B-dna结构 肿瘤生物学行为
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Study on mitochondrial DNA diversity among 7 inbred strains of mice
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作者 戴纪刚 肖颖彬 +2 位作者 张国强 闵家新 魏泓 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 2006年第3期164-168,共5页
Objective:To study the genetic variation of mitochondrial DNA (mtDNA) among common laboratory strains of inbred mice. Methods: The genetic polymorphism of mtDNA among 4 classical laboratory strains of inbred mice ... Objective:To study the genetic variation of mitochondrial DNA (mtDNA) among common laboratory strains of inbred mice. Methods: The genetic polymorphism of mtDNA among 4 classical laboratory strains of inbred mice and 3 inbred strains of mice established in China was analyzed by polymerase chain reaction coupled with restriction fragment length polymorphism(PCR-RFLP) and PCR coupled with single-stranded conformation polymorphism(PCR-SSCP). Results: With regard to the D-loop (Displacement loop, D-loop), tRNA^ Met+Glu+Ile, and ND3 (NADH dehydrogenase subunit 3, ND3) gene fragments of mtDNA from these mice,no variation was revealed by PCR-RFLP at 46 restriction enzyme sites. Further analyzed by PCR-SSCP,the D-loop 5'fragment and 3'end fragment of mtDNA from these mice also showed no genetic variation. Conclusion: Owing to maternal mode of inheritance of mtDNA,the results indicate that these common inbred strains of mice share the same maternal lineage. 展开更多
关键词 inbred strains mtdna polymerase chain reaction coupled with restriction fragment length polymorphism PCR coupled with single-stranded conformation polymorphism polymorphism
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结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制的研究 被引量:16
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作者 吴雪琼 梁建琴 +5 位作者 李洪敏 张俊仙 由昆 金关甫 刘佳文 闫国蕊 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期49-54,共6页
目的 了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制 ,建立快速分子药敏试验方法。方法 通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性 (RFL P)和 PCR-直接测序 (DS)技术分析 10 7株结核分枝杆菌临床分离株 emb B... 目的 了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇分子机制 ,建立快速分子药敏试验方法。方法 通过聚合酶链反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)、PCR-限制性片段长度多态性 (RFL P)和 PCR-直接测序 (DS)技术分析 10 7株结核分枝杆菌临床分离株 emb B基因。结果 以 H3 7Rv标准株为对照 ,10 7株结核分枝杆菌临床分离株的 16 S r DNA SSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准相同。 38株药物敏感株的 emb B基因、SSCP均泳动正常 ,RFL P和 DS分析与对照株相同。 6 9株耐乙胺丁醇 (EMB)分离株中 ,2 5株 (36 .2 % ) emb B基因 SSCP泳动异常 ;8株 RFL P分析异常 ;DS分析 2 5株均为 30 6位密码子突变 ,其中 1株合并有 2 74位 CGC→ CCC突变 ,其 EMB MICs均≥ 2 0 μg/ml;8株为 30 6位 ATG→ATA或 ATT突变 ,17株为 ATG→GTG或 CTG突变 ,后者 EMB MICs均≥ 30μg/ml。结论 部分结核分枝杆菌耐乙胺丁醇是由于其 emb B基因 (尤其是 30 6位密码子 )突变所致 ,PCR- SSCP技术可能成为测定部分结核分枝杆菌乙胺丁醇耐药基因型的简便。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 药物耐受性 聚合酶链反应 单链构象多态性 dna序列分析 乙胺丁醇
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p53蛋白表达和基因突变在所谓肺硬化性血管瘤组织中的意义 被引量:9
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作者 齐凤杰 张秀伟 +1 位作者 张永兴 王恩华 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第2期147-151,共5页
背景与目的所谓肺硬化性血管瘤(socalledpulmonarysclerosinghemangioma,PSH)是一种至今不能肯定其来源及性质的少见肺肿瘤。虽然目前普遍认为PSH是一种良性肿瘤,但却发现有少数PSH可发生浸润和转移。p53蛋白表达和基因突变是反映肿瘤... 背景与目的所谓肺硬化性血管瘤(socalledpulmonarysclerosinghemangioma,PSH)是一种至今不能肯定其来源及性质的少见肺肿瘤。虽然目前普遍认为PSH是一种良性肿瘤,但却发现有少数PSH可发生浸润和转移。p53蛋白表达和基因突变是反映肿瘤生物学行为的有用指标。本研究的目的是检测PSH组织中p53基因突变及p53蛋白的表达情况及其意义。方法应用免疫组化SP法、激光捕获显微切割(lasercapturemicrodissection,LCM)技术、单链构象多态性(singlestrandedconformationpolymorphism,SSCP)及DNA测序分析方法(5~8外显子)检测19例PSH中多角形细胞和表面立方细胞的p53蛋白表达和基因突变情况。结果19例PSH组织中p53蛋白阳性表达率为21.1%(4/19),SSCP及测序分析检测p53基因突变率分别为26.3%(5/19)和42.1%(8/19)。p53蛋白阳性表达的4例PSH组织,测序分析显示3例标本有突变发生,2例为错义突变,1例同时发生错义突变和移码突变;而p53蛋白阴性表达的15例PSH组织中,5例标本经测序证实亦发生了突变,4例为移码突变,1例为错义突变。在有突变的8例PSH组织中,单一多角形细胞突变5例,单一立方细胞突变2例,多角形细胞和立方细胞同时突变1例。结论PSH组织p53蛋白阳性表达并不能完全反映p53基因突变的真实情况;p53基因突变或蛋白表达异常均可发生在PSH组织中的两种不同的细胞内;p53基因的高突变率提示PSH可能具有潜在的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 所谓肺硬化性血管瘤 p53 基因突变 免疫组化 激光捕获显微切割(LCM) 单链构象多态性(SSCP) 基因测序
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结核分支杆菌耐喹诺酮分子机制的研究 被引量:3
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作者 安慧茹 王巍 +3 位作者 李洪敏 何珂 刘真 李素梅 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期103-106,共4页
目的了解结核分支杆菌耐喹诺酮药物的分子机制,建立快速的药敏的方法。方法通过16SrRNA聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析77株分支杆菌临床分离株;通过PCR-SSCP和直接测序技术(PCR-DS)分析结核分支杆菌的gyrA基因突变的情... 目的了解结核分支杆菌耐喹诺酮药物的分子机制,建立快速的药敏的方法。方法通过16SrRNA聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析77株分支杆菌临床分离株;通过PCR-SSCP和直接测序技术(PCR-DS)分析结核分支杆菌的gyrA基因突变的情况。结果75株为结核分支杆菌复合群。以结核分支杆菌标准菌株H37Rv和卡介苗为对照,30株喹诺酮敏感株的gyrA基因的SSCP图谱均泳动正常,测序分析与对照株相同。45株耐喹诺酮的菌株中,34株(75.6%)gyrA基因SSCP图谱泳动异常;测序证实10株为90位密码子的突变,24株为94位密码子突变,所有gyrA突变株的氧氟沙星4μg/ml≤MICs≤32μg/ml,左氧氟沙星2μg/ml≤MICs≤16μg/ml。结论gyrA基因突变,尤其90位和94位密码子突变是结核分支杆菌耐喹诺酮的主要分子机制,PCR-SSCP可能成为测定部分结核分支杆菌喹诺酮耐药基因型的简便、快速的方法,并有望直接用于临床标本喹诺酮敏感性试验。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 喹诺酮 GYRA基因 药物耐受性 聚合酶链反应 单链构象多态性 dna直接测序
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分子生物学技术在临床兽医学上的应用 被引量:4
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作者 宋文学 谢光洪 王哲 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第6期93-95,共3页
近几年,生物技术不断向深度和广度迅猛发展。它的发展与动物疫病的诊断、预防和治疗技术之间已并无明显的界限,并且起了不可替代的作用;如转基因动物既能用于抗病育种,也能用于生产疫苗和药品;核酸疫苗具有预防和治疗的双重作用;单克隆... 近几年,生物技术不断向深度和广度迅猛发展。它的发展与动物疫病的诊断、预防和治疗技术之间已并无明显的界限,并且起了不可替代的作用;如转基因动物既能用于抗病育种,也能用于生产疫苗和药品;核酸疫苗具有预防和治疗的双重作用;单克隆抗体不但用于免疫诊断,也可用于被动免疫和导向药物治疗等。生物技术已经不是一项单一的技术,而是一个综合的技术体系,尤其是在兽医临床上的应用、发展中,需要多种不同技术、学科和领域的相互渗透、相互配合。 展开更多
关键词 PCR技术 酶切图谱 单链构象多态性 dna微阵列
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喉鳞状细胞癌蛋白酪氨酸磷酸酶基因第5和第8外显子的突变分析 被引量:4
16
作者 白伟良 高红 +1 位作者 任重 潘子民 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期13-16,共4页
目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶 (phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosome 10 /mutatedinmultipleadvancedcancer1/TGF βregulatedandepithelialcell enrichedphosphatase ,PTEN/MMAC1/TEP1,以下简称PTEN)基因突变与喉鳞状细胞... 目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶 (phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosome 10 /mutatedinmultipleadvancedcancer1/TGF βregulatedandepithelialcell enrichedphosphatase ,PTEN/MMAC1/TEP1,以下简称PTEN)基因突变与喉鳞状细胞癌 (简称鳞癌 )的关系。方法 应用聚合酶链反应 单链构象多态性 (polymerasechainreaction single strandconformationpolymorphism ,PCR SSCP)分析银染系统和PCR产物直接测序技术 ,检测喉鳞癌新鲜或冰冻组织中PTEN基因第 5、第 8外显子的突变情况 ,对有电泳迁移率改变的进行PCR产物测序。结果 第 5、第 8外显子的突变均发生在声门上型喉癌 ,声门型喉癌未发现突变。其中 ,第 5外显子有 6例发生突变 ,突变率 15 % (6 / 4 0 )。直接测序发现 2例在 85密码子第 2、3碱基子之间发生了插入A突变 ,即TT→TAT ,2例 86密码子第 3碱基缺失一个A ,从而导致移码突变 ;1例同时存在以上两种突变 ,导致错义突变 ;1例 85密码子第 2、3碱基之间插入A ,同时 86密码子第 2碱基缺失 ,即GCA→GA导致无义突变。这 6例中有低分化 3例 ,中分化 3例 ,无高分化 ;淋巴结转移 5例占 83 3% (5 / 6 ) ,无淋巴结转移 1例 ,占 16 7% (1/ 6 )。第 8外显子仅有 1例发生突变 ,突变率为 2 5 % (1/ 4 0 ) 展开更多
关键词 鳞状细胞癌 蛋白酪氨酸磷酸酶 基因外显子 基因突变 喉肿瘤 淋巴结转移
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急性白血病患者MGMT基因突变的研究 被引量:1
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作者 齐华 李晓雯 +4 位作者 游文凤 连建华 郑红 庞长河 陈玉清 《新乡医学院学报》 CAS 1999年第2期124-126,共3页
目的研究甲基鸟嘌呤-脱氧核糖核酸-甲基转移酶(MGMT)基因突变与急性白血病发病的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对62例急性白血病中MGMT基因进行了突变分析。结果MGMT基因突变... 目的研究甲基鸟嘌呤-脱氧核糖核酸-甲基转移酶(MGMT)基因突变与急性白血病发病的关系。方法应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对62例急性白血病中MGMT基因进行了突变分析。结果MGMT基因突变在急性白血病中为14.5%。结论急性白血病中存在MGMT基因突变,其在急性白血病的发生与发展中起到一定作用。 展开更多
关键词 急性 白血病 MGMT基因 PCR-SSCP
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喉鳞癌p53基因第7外显子的测序分析 被引量:1
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作者 张晓晴 傅艳军 +1 位作者 刘四喜 梁传余 《中华耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2001年第2期142-145,T010,共5页
目的 探讨p5 3基因与喉鳞状细胞癌的关系。方法 应用聚合酶链反应 单链构像多态性分析 (polymerasechainreaction single strandconformationpolymorphism ,PCR SSCP)银染系统和PCR产物直接测序技术 ,检测喉鳞状细胞癌新鲜或冰冻组... 目的 探讨p5 3基因与喉鳞状细胞癌的关系。方法 应用聚合酶链反应 单链构像多态性分析 (polymerasechainreaction single strandconformationpolymorphism ,PCR SSCP)银染系统和PCR产物直接测序技术 ,检测喉鳞状细胞癌新鲜或冰冻组织中抑癌基因p5 3第 7外显子的突变情况。结果  6 0例喉鳞状细胞癌组织中使用SSCP检测发现 2 5例显示电泳迁移率的改变。对 2 5例SSCP阳性样本随机抽出 8例进行PCR产物直接测序 ,8例第 7外显子均在 2 5 0密码子上第 1、3位碱基缺失一个C。同时 ,2例在 2 48密码子上第 1位碱基缺失一个C ,从而导致移码突变 ;3例在 2 6 1密码子上第 1、3位碱基发生A→G的转换和T→G的颠换 ,导致错义突变。 1例在 2 49密码子上缺失一个G ,1例存在2 5 4密码子上第 1位碱基A→T的颠换 ,1例 2 6 2密码子上GGT→TCA。结论 提示p5 3基因第 7外显子的 2 48、2 5 0和 2 6 1位密码子可能在中国人喉鳞状细胞癌中突变率较高。 展开更多
关键词 鳞状细胞癌 P53基因 dna突变分析 基因缺失 单链构象多态 聚合酶链反应
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非小细胞肺癌p73基因突变与表达的研究 被引量:2
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作者 纪红 何侠 +1 位作者 陈真如 林勇 《肿瘤学杂志》 CAS 2005年第6期428-430,共3页
[目的]研究p73基因在非小细胞肺癌中的突变及表达情况,分析其与非小细胞肺癌的临床分期、组织学分型的相关性,探讨p73与肺癌发生、发展的关系。[方法]应用催化信号放大(CSA)法检测40例非小细胞肺癌患者癌组织及癌旁组织p73蛋白表达;酚-... [目的]研究p73基因在非小细胞肺癌中的突变及表达情况,分析其与非小细胞肺癌的临床分期、组织学分型的相关性,探讨p73与肺癌发生、发展的关系。[方法]应用催化信号放大(CSA)法检测40例非小细胞肺癌患者癌组织及癌旁组织p73蛋白表达;酚-氯仿-异戊醇法提取基因组DNA,应用PCR-SSCP法(单链构象多态性分析)检测p73基因突变,并对出现异常条带样本进行DNA测序分析。[结果]40例非小细胞肺癌组织中p73阳性表达率52.5%(21/40)明显高于癌旁肺组织(0)(P<0.005)。p73阳性表达率与肿瘤临床分期、组织学分型有相关性(P<0.01)。有3例p73基因第2位外显子序列存在遗传多态性,碱基T→C置换。[结论]p73在非小细胞肺癌组织中存在过度表达及遗传多态性,p73可能参与调控非小细胞肺癌的发生、发展过程。 展开更多
关键词 非小细胞肺 基因 p53 蛋白质P53 dna突变分析 聚合酶链反应 多态现象 单链构象
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早发性乳腺癌/卵巢癌BRCA1基因突变分析 被引量:3
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作者 许奕 贾婵维 王树玉 《中国优生与遗传杂志》 2005年第3期21-22,26,共3页
目的 探讨中国北方地区汉族人群早发性乳腺癌和卵巢癌与BRCA1基因的关系。方法 应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析和DNA直接测序法检测BRCA1基因外显子 2和外显子 1 1部分序列。结果 对 1 2例早发性乳腺癌 /卵巢癌患者PCR -SSCP... 目的 探讨中国北方地区汉族人群早发性乳腺癌和卵巢癌与BRCA1基因的关系。方法 应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析和DNA直接测序法检测BRCA1基因外显子 2和外显子 1 1部分序列。结果 对 1 2例早发性乳腺癌 /卵巢癌患者PCR -SSCP的检测中 ,在外显子 2发现 1例突变 ,经DNA测序证实突变为第 1 6 6碱基插入碱基“C”。结论 BRCA1基因突变可能与北方地区汉族人群早发性乳腺癌有关。 展开更多
关键词 BRCA1基因 乳腺癌 早发 卵巢癌 突变分析 dna直接测序 汉族人群 碱基 dna测序 构象
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