补肾益精方药对老年大鼠不同组织DNA TOPOⅡ活性的影响

目的 :研究补肾益精方药对老龄大鼠肝、肾、睾丸、脾DNATOPOⅡ活性的影响 ,初步探讨补肾益精方药抗衰老的机理。方法 :用雄性老年大鼠为肾虚模型 ,观察左归饮、益肾宝对TOPOⅡ活性的影响。结果 :老年大鼠TOPOⅡ的活性明显低于青年大鼠 ,经灌喂左归饮、益肾宝后 ,老年大鼠TOPOⅡ的活性显著提高。结论 :补肾益精方药能提高老年大鼠TOPOⅡ的活性 ,起到延缓衰老的作用。

乳腺癌组织DNA TOPOⅡα、p53的表达与化疗耐药的关系

目的 检测DNA拓扑异构酶Ⅱα(TOPOⅡα)、p53在乳腺癌组织的表达 ,并探讨其与化疗耐药的关系。方法 采用免疫组化S P法检测 91例未经抗肿瘤治疗的原发乳腺癌和 1 8例术后经化疗复治的乳腺癌组织中TOPOⅡα、p53蛋白的表达。结果 TOPOⅡα在原发乳腺癌中阳性率为42 % ,阳性率与肿瘤类型、组织学分级、肿瘤大小、临床分期有关 (P <0 0 5 ,其中组织分级P <0 0 1 ) ;术后经化疗复治乳腺癌中阳性率为 1 7% ,与原发癌相比显著降低 (P <0 0 5) ;突变型p53在原发乳腺癌与化疗复治乳腺癌阳性率差异无显著性 (P >0 0 5) ;p53蛋白表达与TOPOⅡα无相关性 (P >0 0 5)。结论 TOPOⅡα表达可作为反映肿瘤增殖和恶性度的指标。TOPOⅡα参与化疗耐药性形成。

骆驼蓬种子提取物及其β咔保啉生物碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用

目的探讨去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱、骆驼蓬总碱及哈尔满碱(止咳药用植物)对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用。方法从体外培养的Q3肝癌细胞中,提取分离DNA拓扑异构酶Ⅱ;以阿霉素为阳性对照,用琼脂糖凝胶电泳法检测药物对DNA拓扑异构酶Ⅱ的作用。结果骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱及哈尔满碱对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性均有一定的抑制作用。结论对DNA拓扑异构酶Ⅱ活性的抑制作用是骆驼蓬总碱、去氢骆驼蓬碱、骆驼蓬碱等生物碱抗癌作用和细胞毒作用的机制之一。

毛叶茶和龙井茶提取物的抗瘤作用以及对DNA拓扑异构酶Ⅱ的抑制作用

作者用噻唑蓝(MTT)法研究了毛叶茶提取物(毛茶C)和龙井茶提取物(龙井A)对人宫颈癌HeLa细胞、鼻咽低分化鳞癌CNE_2细胞和胃低分化粘液腺癌MGC—803细胞的细胞毒作用。毛茶C对上述3种细胞株的半数抑制浓度(IC_(50))分别为495.6μg/ml、243.4μg/ml、268.6μg/ml;而龙茶A分别为421.1μg/ml、311.4和274.6μg/ml。体内抑瘤试验表明,毛茶C在2.5—10mg//kg剂量范围内,对小鼠艾氏腹水癌实体型(ESC)有明显抑制作用,抑瘤率为17.8％—48.3％;对小鼠网织细胞肉瘤(L_2)的抑瘤率为28.3％—54.5％;龙茶A在2.5—10mg/kg剂量范围内对艾氏实体瘤ESC的抑制率为31.5％—49.4％;对L_2的抑瘤率为35.8％—50％。而二种茶叶提取物对小鼠肉瘤S—180仅有边缘的抗瘤活性。用琼脂糖凝胶电泳方法则得毛茶C和龙茶A在1—50μg/ml浓度范围内,对DNA拓扑异构酶Ⅱ的抑制率分别为75—100％,抑酶作用有明显的量效关系。在50μg/ml浓度均可抑制全部酶活性,推测DNA拓扑异构酶Ⅱ可能是这两种茶叶提取物的靶酶。

钌(Ⅱ)多吡啶配合物与DNA相互作用研究

DNA是遗传信息的携带者和基因表达的物质基础,金属配合物与DNA的相互作用研究已受到广泛关注,成为生物无机化学的重要研究内容之一。本文简要评述了钌(Ⅱ)多吡啶配合物在DNA识别、断裂及拓扑异构酶抑制方面的研究情况。

多药耐药基因产物P-gp、TopoⅡ在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨胃癌组织中多药耐药 (MDR)基因产物 P-糖蛋白 (P- gp) ,DNA拓扑异构酶 (Topo )表达与胃癌分型、分期和淋巴结转移间的关系。方法 应用链菌素亲生物素 -过氧化物酶 (SP)法 ,对 10 6例胃癌标本中的 P- gp、 Topo 进行检测。结果 P- gp表达与胃癌临床分期有关 (P<0 .0 5 ) ;Topo 表达与胃癌组织分型有关 (P<0 .0 5 ) ;P- gp高表达和 Topo 低表达与胃癌淋巴结转移相关 (P<0 .0 5 )。结论 检测 P- gp、Topo 不仅可以作为多药耐药的标志物 ,而且对于胃癌治疗方案的选择和预后判断具有重要参考价值。

人膀胱癌耐药细胞中TopoⅡ基因的表达

目的 :研究DNA拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )基因在人膀胱癌多药耐药细胞中的表达状况。方法 :应用MTT法检测人膀胱癌耐药细胞系 (BIU 87 ADM)的耐药性 ;应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)分别对BIU 87 ADM及敏感细胞系 (BIU 87)中TopoⅡ基因进行检测。结果 :BIU 87 ADM细胞对阿霉素的耐药性为BIU 87细胞的 5 6 .4倍 ;TopoⅡ基因表达在BIU 87 ADM细胞中呈弱阳性 ,而在BIU 87细胞中呈强阳性。结论 :TopoⅡ基因在人膀胱癌耐药细胞中表达的降低 。

大肠癌组织中P-gp和GST-π及TopoⅡ的表达及其临床意义的研究

目的:探讨多药耐药P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、谷胱甘肽转移酶(glutathione-S-trannsferaseπ,GST-π)和拓扑异构酶(DNA topoisomeraseⅡ,TopoⅡ)在大肠癌组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化SP法联合检测P-gp、GST-π和TopoⅡ在84例大肠癌组织和20例正常大肠黏膜组织中的表达,并结合临床病理参数进行分析。结果:P-gp、GST-π在大肠癌组织中的表达率分别为71.4%(60/84)和75.0%(63/84),高于正常大肠黏膜组织(8/20和11/20),χ2值分别为6.91和3.14,P均<0.05;P-gp表达强度与临床分期相关,高分期P-gp表达(86.7%、39/45)较低分期(65.5%、19/29)高,χ2=5.28,P<0.05;TopoⅡ在大肠癌组织中的阳性率为45.3%(38/84),低于正常大肠黏膜组织65%(13/20),χ2=0.382,P>0.05;高、中和低分化腺癌P-gp(87.5%、80.7%和54.5%)和GST-π(87.5%、82.5%和54.5%)的表达率由高到低;TopoⅡ的表达率由低到高(37.5%、45.6%和63.6%)。淋巴结转移组P-gp和GST-π的表达显著高于无淋巴结转移组,P<0.05。结论:P-gp、GST-π和TopoⅡ均在大肠癌原发性多药耐药中起重要作用。联合检测P-gp、GST-π和TopoⅡ对于大肠癌化疗方案选择具有一定的指导意义。

p63、P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ在食管鳞癌组织中的表达

目的:观察比较p63、P-糖蛋白(P-gp)、谷甘胱肽-S-转移酶π(GST-π)、DNA拓扑异构酶(Topo-Ⅱ)在食管癌中的表达情况,并探讨其关系和临床意义。方法:采用免疫组化方法对168例食管鳞癌组织中p63、P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ蛋白进行检测,分析其与病理特征的关系及协同表达的意义。结果:p63、P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ蛋白在食管鳞癌中的阳性表达率分别为81.0%、57.1%、71.4%、78.6%。p63的表达与肿瘤的临床分期、浸润深度、淋巴结转移相关(P<0.05),P-gp和TopoⅡ的表达与淋巴转移有关(P<0.05),GST-π的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05)。p63的阳性表达与P-gp、GST-π呈正相关(r=0.193、0.197,P<0.05),P-gp与GST-π表达呈正相关(r=0.224,P<0.05),P-gp与TopoⅡ表达呈负相关(r=-0.218,P<0.05)。结论:p63、P-gp、GST-π及Topo-Ⅱ均与食管癌发生发展有关,对肿瘤化疗方案的选择和预后判断有重要的临床意义。

P-gp、GST-π、Topo-Ⅱ在宫颈癌组织中的表达及意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)和DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测20例正常宫颈、30例宫颈上皮内瘤变(CIN)、60例初治宫颈癌及10例复发宫颈癌组织中P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达,分析P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达与宫颈癌患者临床病理特征及3年生存率之间的关系。结果①P-gp、GST-π、TopoⅡ在正常宫颈、CIN、初治宫颈癌及复发宫颈癌组织中均有表达,表达强弱顺序依次为:复发宫颈癌>初治宫颈癌>CIN>正常宫颈。②宫颈癌组织中存在3种耐药蛋白的共表达,P-gp与GST-π、TopoⅡ的表达呈正相关(P<0.05);GST-π与TopoⅡ的表达无显著性相关(P>0.05)。③P-gp、GST-π与初治宫颈癌临床分期,组织学类型和病理分级无关(P>0.05);TopoⅡ在宫颈腺癌中的表达水平明显低于鳞癌(P<0.05)。④P-gp、GST-π低表达者3年生存率优于高表达者,差别有统计学意义(P<0.05);TopoⅡ低表达者与高表达者3年生存率差别无统计学意义(P>0.05)。结论P-gp、GST-π、TopoⅡ可能与宫颈癌的发生发展相关。P-gp、GST-π表达强度的增加不仅可为宫颈癌化疗用药提供参考,而且可作为宫颈癌判断预后的指标。

以DNA拓扑异构酶Ⅱ为靶点的一种抗癌药筛选的新方法

借鉴文献方法,我们以小鼠L_(1210)白血病细胞为村料,提取DNA拓扑异构酶Ⅱ,鉴别了其生物学特性,并观察了十多种已知及未知的抗癌药物对其活性的影响,初步建立了以DNA拓扑异构酶Ⅱ为靶点的新抗癌药筛选方法。实验表明DNA拓扑异构酶Ⅱ对DNA链切割反应是可逆的,并且高浓度的氯化钠对其活性有抑制作用。许多药物能促进拓扑酶Ⅱ引起的DNA链断裂如ADM、DNR、Vp16及ACM—B等,而另一些药物如萜类化合物BC_1、BC_4等则能抑制链断裂反应。

耐药表型GST-π、P-gp及TopoⅡ在大肠癌中的表达及其临床意义

目的 探讨大肠癌组织中胎盘型谷胱甘肽 S 转移酶 (GST π)、糖蛋白 (P gp)和DNA拓扑酶Ⅱ (TopoⅡ )的表达与临床病理和预后的关系。方法 采用免疫组化方法检测 170例大肠癌组织中GST π、P gp和TopoⅡ的表达 ,对其组织病理改变和 5年生存率进行综合分析。结果 在高、中分化及低分化大肠癌中 ,GST π阳性率分别为 56 .3%、6 5.6 %和 93.8% ;TopoⅡ阳性率为 2 5.0 %、32 8%和 6 8.8% ,P gp阳性率为 37.5%、50 .0 %和 75.0 %。GST π和TopoⅡ表达在高、低分化两组间及中、低分化两组间均有非常显著的差异 (P <0 .0 1) ,P gp表达均有显著差异 (P <0 0 5)。而在不同的年龄、性别、Duke’s分期及有无淋巴结和远处转移中 ,GST π、P gp、TopoⅡ的表达均无显著差异 (P >0 0 5)。5年内生存者GST π、P gp和TopoⅡ表达阳性率低于 5年内死亡者 ,GST π和P gp有显著差异(P <0 0 5) ,TopoⅡ有非常显著差异 (P <0 0 1)。结论 耐药表型GST π、P gp。

P-gp170、GST-π、TOPOⅡ在外周T细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的:探讨多药耐药(MDR)相关的P糖蛋白(P-gp170)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST-π)、拓扑异构酶(TOPOⅡ)在不同亚型外周T细胞淋巴瘤(PTCL)的表达情况以及和化疗反应性、预后的关系。方法:应用免疫组化方法检测64例经病理确诊的PTCL患者病理组织P-gp170、GST-π、TOPOⅡ的表达情况,并分析它们之间的相关性以及与病理亚型、化疗效果、预后的关系。结果:64例患者中PTCLP-gp170、GST-π、TO-POⅡ表达阳性率分别为57.8%(37/64)、51.6%(33/64)和53.1%(34/64)。三者的表达无显著的相关性(P>0.05)。P-gp170在PTCL-U和ALK+ALCL两组中的表达具有显著性差异(P=0.0182)。P-gp170表达强阳性和首程化疗后完全缓解(CR)、部分缓解(RR),均呈显著负相关(P=0.000)。本文综合定义的MDR高危组(≥2分)和RR具有显著负相关(P=0.002)。P-gp170表达强阳性和MDR高危组和预后相关(P=0.000;P=0.0145)。PTCL的病理亚型、对化疗的反应性(包括CR和RR)为外周T细胞淋巴瘤的独立预后因素。P-gp170糖蛋白、GST-π、TOPOⅡ尚不能作为独立预后因素。结论:P-gp170糖蛋白、GST-π、TOPOⅡ的表达在PTCL的不同亚型中有一定的差异,在一定程度上和PTCL的耐药性以及不良预后有关。

乳腺癌MGMT和TopoⅡα表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌中拓朴异构酶Ⅱα(T opoⅡα)和DNA修复酶(MGMT)表达的相关性及临床意义。方法:采用SABC免疫组织化学方法,检测乳腺组织和乳腺纤维腺瘤各30例和76例乳腺癌标本中T opoⅡα和MGMT的表达率。结果:乳腺腺瘤中T opoⅡα无阳性表达;而MGMT阳性率为15%(3/20)。乳腺癌中MGMT阳性率为59.21%(45/76)。T opoⅡα阳性率为68.42%(52/76)。T opoⅡα和MGMT有低度相关性。61岁以上老年组T opoⅡα和MGMT阳性率均低于60岁以下组。有淋巴结转移组阳性率高于无转移组。结论:T opoⅡα和MGMT过表达率与乳癌患者年龄及有否淋巴结癌转移有关。检测乳腺癌中T opoⅡα和MGMT对提示予后和临床选择化学治疗方案有指导意义。

TopoⅡ、P170、GST-pi蛋白在胃癌中表达与临床病理及预后的关系

[目的]探讨胃癌中P-糖蛋白(P170)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)和谷胱苷肽-S转移酶(GST-pi)的表达和胃癌的临床病理特征及其预后的关系及意义。[方法]免疫组化检测160例胃癌组织中的P170、TopoⅡ及GST-pi的表达,收集临床病理资料,随访患者的生存时间。分析各因子表达、临床病理资料和预后的关系。[结果]P170和GST-pi的表达呈正相关(P<0.01),P170表达与肿瘤直径、淋巴结转移、远处转移及TNM分期呈正相关(P<0.05)。GST-pi表达与远处转移及TNM分期呈正相关(P<0.05)。TopoⅡ的表达与侵袭深度、远处转移及TNM分期呈正相关(P<0.05)。单因素分析发现患者年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、病理分级、侵袭深度、淋巴转移、远处转移、TNM分期、TopoⅡ、P170、GST-pi均与预后有关(P<0.05)。Cox风险模型多因素分析发现肿瘤部位、病理分级、侵袭深度、淋巴转移、GST-pi是影响胃癌预后的独立因素(P<0.05)。[结论]TopoⅡ、P170、GST-pi均与胃癌的某些临床病理特征呈一定的相关性,肿瘤部位、病理分级、侵袭深度、淋巴转移、GST-pi是影响胃癌预后的独立因素。

基于DNA拓扑异构酶Ⅱ基因部分序列的侧耳属系统发育分析

对侧耳属(Pleurotus)14个种的14个菌株,亚侧耳属(Hohenbuehelia)1个种和离褶伞属(Lyophyllum)1个种的DNA拓扑异构酶II(EC5.99.1.3)部分序列进行扩增分析。以灰盖鬼伞(Coprinus cinereus)、新型隐球酵母(Cryptococcus neoformans)和玉米黑粉菌(Puccinia polysora)等担子菌为外群,采用最大距离法、最大简约法和最大似然法构建侧耳属的系统发育树。结果表明:作为外群的3个物种独立于所有供试材料;侧耳属菌株作为一大类与供试的离褶伞属和亚侧耳属分开。侧耳属14个种又可细分成6支:可能为侧耳属起源最早的P.flabellatus、P.salmoneostramineus和P.djamor组成一组;P.tuberregium和P.pulmonarius均自成一组;P.abalonus和P.cystidiosus均产生束梗孢,聚为同组;P.eryngiivar.eryngii、P.eryngiivar.ferulae和P.nebrodensis为一组;另一组由P.ostreatus、P.columbinus、P.cornucopiae和P.citrinopileatus组成。按照侧耳属物种菌丝类型的不同,构建的系统发育树将该属14个种进行系群划分,单、二系菌丝分属于各个不同的分支中,说明单、二系菌丝均为多系起源,与用28S rDNA序列进行系统分析的结果一致。

脑胶质瘤和正常脑组织中MGMT、LRP和TopoⅡα的表达及其意义

【目的】探讨脑胶质瘤和正常脑组织中三种耐药酶O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、肺癌耐药相关蛋白(LRP)、拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)的表达及其意义。【方法】利用两步法免疫组织化学技术检测MGMT、LRP、TopoⅡα三种耐药酶在脑胶质瘤和正常脑组织的表达。【结果】三种耐药酶在正常脑组织中几乎不表达;在脑胶质瘤中表达强度与患者的性别、年龄和肿瘤的大小无关(P>0.01),但与肿瘤的WHO分级明显相关(P<0.01)。WHO分级越高,表达越强。【结论】胶质瘤的发生与三种耐药酶的表达改变有关;联合测定多种耐药酶的表达对判定肿瘤的恶性程度与制定化疗方案有参考价值;纠正耐药蛋白的表达有可能成为胶质瘤基因治疗的新策略。

乳腺癌组织中CerbB-2、Ki-67、Pgp、GST-π、TopoⅡ的表达变化及意义

目的观察乳腺癌组织中CerbB-2、Ki-67、Pgp、GST-π、TopoⅡ的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测170例乳腺癌组织中CerbB-2、Ki-67、Pgp、GST-π、TopoⅡ,分析其与乳腺癌临床病理指标的关系。结果乳腺癌组织中CerbB-2、Ki-67、Pgp、GST-π、TopoⅡ的阳性表达率分别为51.76%、78.24%、43.53%、62.35%、62.35%。CerbB-2的表达与乳腺癌直径及淋巴结转移有关(P均<0.05),Ki-67、Pgp的表达与乳腺癌组织学分级、淋巴结转移有关(P均<0.05),TopoⅡ的表达与乳腺癌组织学分级有关(P<0.05)。Ki-67的阳性表达与CerbB-2、TopoⅡ呈明显正相关(r=0.176、0.355,P均<0.05),Pgp阳性表达与TopoⅡ呈正相关(r=0.168,P<0.05)。结论乳腺癌组织中CerbB-2、Ki-67、Pgp、GST-π、TopoⅡ均有较高表达;除GST-π外,均与乳腺癌的发展有关,是判断其预后的重要指标。

肺癌组织P-gp、GST-Ⅱ和TOPO-Ⅱ表达及与Ki-67相关性

目的探讨多药耐药(MDR)基因产物P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶Ⅱ(GST-Ⅱ)、DNA拓扑异构酶(TOPO-Ⅱ)在肺癌组织中的表达及其与细胞核增殖抗原(Ki-67)相关性。方法采用免疫组织化学方法检测63例肺癌组织中P-gp、GST-Ⅱ、TOPO-Ⅱ和Ki-67的表达情况。结果 P-gp、GST-Ⅱ、TOPO-Ⅱ和Ki-67在肺癌组织中的阳性表达率分别为61.9%、63.5%、77.8%和39.7%。P-gp、GST-Ⅱ、Ki-67的表达与肺癌病理组织学分型、分化程度有关(χ2=6.733～22.532,P<0.01)。TOPO-Ⅱ在鳞癌和小细胞癌中的阳性表达率明显高于腺癌(χ2=8.259、4.189,P<0.01、0.05)。两个或两个以上MDR基因产物共表达率合计为90.5%,明显高于单独基因产物P-gp和TOPO-Ⅱ的表达率(χ2=59.660,P<0.01)。P-gp、GST-Ⅱ的表达与Ki-67之间无显著相关性(P>0.05),TOPO-Ⅱ的表达与Ki-67呈明显正相关(r=0.380,P<0.01)。结论 P-gp、GST-Ⅱ、TOPO-Ⅱ在不同肺癌类型中均有不同水平表达,且呈共同表达,它们的表达对肺癌的耐药起重要作用,因此联合检测有助于判断化疗疗效及预后。

海南粗榧新碱衍生物HH07A对肿瘤细胞内DNA拓扑异构酶Ⅱ和蛋白激酶C活性的影响

ＨＨ０７Ａ５．５μｍｏｌＬ－１作用Ｌ１２１０细胞２４ｈ后，可使细胞的ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ活性下降；在无细胞系统，ＨＨ０７Ａ０．５５ｍｍｏｌＬ－１也能直接促进ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ引起的ＤＮＡ链断裂．经ＨＨ０７Ａ（Ｌ１２１０细胞５．５μｍｏｌＬ－１，ＨＬ－６０细胞８．２５μｍｏｌＬ－１）作用２４ｈ后，Ｌ１２１０及ＨＬ－６０细胞的胞浆蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性升高，胞膜ＰＫＣ活性下降，而全细胞ＰＫＣ活性变化不大．在无细胞系统中，ＨＨ０７Ａ１．１ｍｍｏｌＬ－１能明显抑制ＰＫＣ的活性．