采用DNA指纹图谱技术分析中长跑运动员肠道菌群结构特征

目的 :用DNA指纹图谱技术分析中长跑运动员肠道菌群区系结构的特征。方法 :对 7名中长跑运动员进行连续 6天的跟踪观察 ,直接从其粪便样品中提取出总DNA为模板 ,进行ERIC-PCR扩增 ,得到反映肠道微生物菌群结构特征的DNA指纹图。结果 :根据图谱多样性指数变化和相似性系数值的分布特征 ,受试运动员表现出两种类型 :一类菌群区系结构稳定 ,受运动负荷变化影响较小 ;另一类菌群区系结构随运动负荷的增减出现较大波动。结果表明 :运动员DNA指纹图谱特征存在明显个体差异 ;运动负荷的变化可能改变运动员肠道菌群区系结构。提示稳定的菌群结构可能是运动员在剧烈运动条件下保持良好机能状态的重要因素之一。

甜樱桃品种的SSR鉴定

在建立甜樱桃品种SSR分析体系基础上,从24对引物中筛选出5对多态性高、分辨能力强的引物(即PceGA25、PMS3、PMS49、PS08E08、pchpgms3),并且结合S-基因共同对30个甜樱桃品种进行区分鉴别。对生产上应用SSR技术和S-基因检测甜樱桃品种真实性和纯度作了展望。

蕲蛇标准品DNA特异鉴定指纹片段的克隆及评价

目的以工程菌为载体,寻找可以长期保存中药材蕲蛇标准品特异DNA指纹区段的克隆技术.方法采用蕲蛇DNA检测试剂盒提取蕲蛇标准品基因组DNA,按照2010年版《中国药典》收录的方法进行蕲蛇特异DNA片段PCR扩增,将PCR产物与质粒载体重组后导入工程菌细胞内;体外培养细菌,提取重组质粒,应用PCR及测序方法鉴定插入片段是否正确.将鉴定正确、携带正品蕲蛇特异DNA序列的菌落置-80℃冰柜保存,分别以30 d、60 d、3个月和6个月为时间点进行复苏,进行稳定性评价.结果PCR扩增蕲蛇标准品特异DNA片段长度约为300 bp,插入质粒载体后,转入工程菌细胞内的蕲蛇DNA经体外克隆、PCR扩增及测序鉴定,扩增产物与目标大小一致,序列与Genbank中蕲蛇序均一致.将4个时间点复苏后的菌落进行PCR扩增后,条带清晰,没有降解.结论采用分子克隆技术保存蕲蛇特异基因片段的方法可行、有效,方法简单明了,获得的标准品DNA稳定性良好,结果可靠.

植物已知品种数据库构建方法的研究

植物已知品种(以下简称"已知品种")数据库是以品种性状描述、图像和DNA指纹图谱信息为核心,有效整合品种命名、审(鉴)定、保护、推广、转让、培育、栽培、繁殖、保藏等管理和技术信息,模仿人为判定过程,实现自动命名审查和近似品种筛选的高级专家系统。已知品种数据库基于网络环境设计,具有高度的共享性,可以大大提高品种保护、审(鉴)定、种子检测等管理部门的信息交流效率,是农业行政主管部门监控种子质量、维护市场秩序的重要技术支撑。已知品种数据库还可以为种子企业或育种者挑选品种、制定育种目标提供重要参考,节省社会成本。为此,通过对国内外植物品种管理信息系统进行研究,指出植物品种信息管理所应包括的基本内容和功能,得出中国已知品种数据库的构建方法。

酸枣仁与其混淆品及伪品的RAPD分析

目的对酸枣仁及其混淆品和伪品进行DNA指纹图谱的鉴别研究,并对分子生物学在中药材鉴别中存在的一些问题进行探讨。方法应用随机扩增DNA多态性技术对酸枣仁及其易混淆品、伪品进行DNA指纹图谱多态性的比较。结果DNA指纹图谱显示,各样品间具有不同的遗传关系,根据这些差别成功地进行了酸枣仁及其易混淆品、伪品的鉴别。结论RAPD可以有效地鉴别酸枣仁与其混淆品及伪品。同时对RAPD中存在的问题进行了讨论。