Dosper和Lipofectamine转染特点的比较

目的 探讨Dosper和Lipofectamine两种脂质体转染载体的特点 ,为广泛应用打下基础。方法 将新构建载体分别用Dosper和Lipofectamine在有血清和无血清情况下转染包装细胞PA 3 17,通过NIH 3T3细胞检测各组病毒滴度。结果 在无血清组 ,Lipofectamine转染效率略高于Dosper ,但两者无显著性差异 (P >0 .0 5) ;在有血清组 ,Dosper组转染率显著高于Lipofectamine(P <0 .0 1)。两者在有血清组的转染率均低于无血清组。结论 在无血清存在下 ,Dosper和Lipofectamine转染效率都

三种阳离子脂质体介导血管内皮细胞基因转染效率的比较

目的:评价不同阳离子脂质体介导基因转染血管内皮细胞的转染效率。方法:实验于2006-12/2007-02在中山大学生化实验室及广州市创伤外科研究所完成。采用增强型绿色荧光蛋白基因为报告基因,分别采用Lipofectin、Lipofectamine、Dosper3种不同的阳离子脂质体为载体,转染人脐静脉血管内皮细胞。在24孔板中,每孔加入人脐静脉血管内皮细胞悬液(1×106个细胞),各孔分别加入3种不同阳离子脂质体增强型绿色荧光蛋白质粒复合物,分别于培养24,48h后用荧光显微镜及流式细胞仪测定增强型绿色荧光蛋白在细胞内的表达及转染效率。结果:3种不同阳离子介导的增强型绿色荧光蛋白基因转染的人脐静脉血管内皮细胞内均有绿色荧光蛋白表达,24h后明显,48h后达高峰。Dosper介导组绿色荧光细胞百分比明显高于Lipofectin介导组及Lipofectamine介导组,差异有非常显著意义(P<0.01)。结论:Dosper介导的血管内皮细胞基因转染效率较高,较适合作为血管内皮细胞的基因转染载体。

脂质体介导的精原细胞基因转移

背景与目的:研究脂质体介导pDsRed2-N1报告基因转染精原细胞的有效性。材料与方法:在体外、体内用脂质体(DOSPER)为载体,介导红色荧光蛋白(DsRed2)基因转染供体小鼠精原细胞,转染的精原细胞经分离、纯化后移植到经白消安处理耗尽生殖细胞的受体小鼠生精小管内。结果:体外转染精原细胞,DsRed2表达效率为20%,体内转染表达效率为8%,体外转染基因表达效率高于体内转染(P<0.01)。移植后6周,受体睾丸冰冻切片上可见表达红色荧光蛋白的精原细胞。结论:脂质体可介导外源基因转染小鼠精原细胞,结合被转染精原细胞移植有可能为研究精子发生机理和生产转基因动物提供一条简便的途径。