基于DPPH-HPLC技术的马粪海胆抗氧化活性指纹图谱初步研究

采用基于DPPH-HPLC技术的抗氧化活性指纹图谱对海洋中药马粪海胆来源进行鉴别。对具有较好抗氧化活性的马粪海胆水提物中的抗氧化活性成分进行筛选,基于各抗氧化成分的指纹图谱,结合相似度分析对不同来源马粪海胆进行鉴别研究。结果表明,该方法可以对不同来源的马粪海胆样品进行正确区分,有望成为海洋中药真伪鉴别的新方法。

DPPH-HPLC-QTOF-MS/MS快速筛选和鉴定杜仲黑茶中抗氧化活性成分

建立DPPH-HPLC-QTOF-MS/MS方法快速筛选、鉴定和测定杜仲黑茶中抗氧化活性成分。杜仲黑茶提取物与DPPH自由基反应30 min后,9个抗氧化活性成分的HPLC峰消失或峰面积明显减少,结合QTOF-MS/MS谱图及与标准品对照,确定抗氧化活性成分为:没食子酸,新绿原酸、原儿茶酸、绿原酸、咖啡酸、表没食子儿茶素没食子酸酯、槲皮素-3-O-桑布双糖苷、芦丁和异槲皮苷。并建立HPLC法同时测定9个抗氧化活性成分的含量。所建立的方法无须繁琐的分离纯化过程,可快速、灵敏、准确、高通量筛选复杂体系中的抗氧化活性成分,并为杜仲黑茶的质量控制提供科学依据。

基于DPPH-HPLC的食凉茶抗氧化组分的快速筛选及分析

建立DPPH-HPLC方法快速筛选、鉴别和测定食凉茶中抗氧化活性成分。食凉茶提取物与80μg/mL DPPH自由基室温避光孵育30min后,13000r/min,离心10min,取上清进行高效液相色谱分析,以峰强度减少大于80%的成分,认定为潜在的抗氧化活性物质,结合对照品对照,确定抗氧化活性成分为东莨菪内酯、槲皮素、山奈酚。建立HPLC法同时测定3个抗氧化活性成分的含量,并评价其抗氧化能力。利用DPPH-HPLC方法可快速、灵敏、准确筛选食凉茶中的抗氧化活性成分,并对其进行测定和评价,为开发利用食凉茶中抗氧化活性成分提供科学依据。

DPPH-HPLC-QTOF-MS/MS快速筛选和鉴定臭牡丹中抗氧化活性成分

通过DPPH自由基清除实验对臭牡丹水提物的抗氧化活性进行评估,并建立DPPHHPLC-QTOF-MS/MS方法快速筛选和鉴定臭牡丹中抗氧化活性成分.臭牡丹水提物与DPPH自由基反应30min后,13个主要抗氧化活性成分的HPLC峰消失,根据抗氧化活性成分的保留时间、紫外吸收特征光谱、质谱裂解规律和诊断离子,以及与标准品对照,初步确定了13个抗氧化活性成分的结构:12个苯乙醇苷类化合物和咖啡酸,其中8个苯乙醇苷类物质为首次在大青属植物中发现,咖啡酸为首次报道存在于臭牡丹中.该方法无需繁琐的分离纯化过程,可对复杂组分中的抗氧化活性物质进行快速筛选和鉴定,为天然产物的质量控制和药效物质基础研究提供了简便、快捷、灵敏的方法.

猴耳环双标多测法及抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制活性成分快速筛选法的建立

目的:建立猴耳环中5个成分的双标多测法及其抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制活性成分的快速筛选法。方法:采用HPLC法,以双标线性校正法准确定位猴耳环中5个成分色谱峰,以没食子酸为参照物,计算没食子酸与其余4个成分的相对校正因子,对各成分进行定量,将所得结果与外标法进行比较。采用离线DPPH-HPLC法及亲和超滤液相联用法快速筛选猴耳环中具有抗氧化、α-葡萄糖苷酶抑制活性成分。结果:双标线性校正法相比于相对保留时间更能准确地预测待测组分在未知色谱柱上的保留时间;相对校正因子法和外标法结果的RSD<2.00%。采用离线DPPH-HPLC法及亲和超滤液相联用法可以快速筛选出猴耳环中7-没食子酰基特利色黄烷、杨梅苷等不同程度抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性的化合物。结论:该研究建立的双标多测同时测定猴耳环中5个成分的方法准确可行,采用离线DPPH-HPLC法及亲和超滤液相联用法能快速、灵敏、高通量筛选猴耳环中的抗氧化和α-葡萄糖苷酶抑制活性成分。

HPLC-DPPH法评价雪松松针抗氧化活性成分

目的评价雪松松针抗氧化活性成分。方法以维生素C(VC)和没食子酸为阳性对照,采用高效液相色谱(HPLC)法测定1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)溶液加入雪松松针抗氧化活性成分后DPPH峰面积的衰减情况,并通过计算DPPH自由基的清除率和半数抑制浓度(IC_(50)),来评价雪松松针3种有效部位及8个单体成分的抗氧化活性。采用Agilent Eclipse Plus-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水(62∶38,V/V)为流动相;检测波长为517 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为25℃;进样量为20μL。结果雪松松针各有效部位清除DPPH自由基活性的能力大小依次为总黄酮>总多酚>总木脂素,IC_(50)分别为76.10、100.50、115.40μg/mL。与阳性对照比较,除山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷外,7个单体化合物清除DPPH自由基活性的能力大小依次为二氢杨梅素>金丝桃苷>原儿茶酸>没食子酸>阿魏酸>杨梅素>山柰酚-3-O-(6″-O-E-阿魏酰基)-β-D-吡喃葡萄糖苷>VC>异鼠李素,IC50分别为16.50、19.40、23.73、27.24、32.10、32.20、47.60、93.20、297.20μg/mL。结论建立了HPLC-DPPH法用于评价雪松松针抗氧化活性;雪松松针具有较强的抗氧化活性,其中有效部位总黄酮、总多酚及单体成分二氢杨梅素、金丝桃苷等是具有开发前景的纯天然抗氧化剂。

DPPH-HPLC联合HPLC-ESI-TOF/MS筛选、鉴别马粪海胆中的抗氧化成分

目的建立基于DPPH-HPLC联合HPLC-ESI-TOF/MS技术的抗氧化成分快速筛选方法,并用于马粪海胆中抗氧化成分的快速辨识。方法对DPPH-HPLC筛选条件进行系统优化,采用优化的条件对马粪海胆提取物进行筛选,采用HPLC-ESI-TOF/MS技术对其进行鉴别。结果该方法快速、准确、灵敏度高,在马粪海胆中发现了9种具有抗氧化活性的化学成分。结论本研究为海洋天然产物中抗氧化成分快速辨识提供了方法和技术支持。

HPLC-DPPH法在线分析远志抗氧化活性成分研究

建立了远志抗氧活性成分的在线快速分析方法,为其药效物质筛选研究提供了支持。采用HPLC-DPPH在线分析方法,结合对照品保留值对照与活性测定,确定了活性成分,采用抗氧化阳性样品对照分析了活性成分的抗氧化活性强度。结果表明,远志中,3,6’—二芥子酰基蔗糖、西伯利亚远志糖酯A6为主要抗氧化活性成分。在线快速分析方法简捷、高效,适用于中药远志的抗氧化活性成分的快速筛选。

贮藏条件对苹果多酚成分及抗氧化活性的影响

苹果是以鲜销为主的果品,属于典型的呼吸跃变型果实,贮藏条件对其品质的影响很大。本研究以红富士苹果贮藏地点的温度、湿度和气体成分作为影响贮藏效果的主要因素,检测同一贮藏期苹果的多酚含量、成分及DPPH自由基清除率。结果表明,在0℃、相对湿度95%、O2含量4%、CO2含量2%的贮藏条件下,苹果的DPPH自由基清除率为52.1%,多酚含量为25.7mg/mL,3个月内苹果的多酚成分变化不大。

15种柑橘果实主要酚类物质的体外抗氧化活性比较

为了明确柑橘果实主要酚类物质单体的抗氧化活性差异,利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)法、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(2,2’-azino-bis(3-ethylbenzthiozoline-6)-sulphonic acid,ABTS)法、铁离子还原(ferric reducing/antioxidant power,FRAP)法3种离线法,以及两种在线高效液相色谱-DPPH/ABTS(high performance liquid chromatography-DPPH/ABTS,HPLC-DPPH/ABTS)柱后衍生系统联用技术分别对15种柑橘果实主要酚类物质单体的抗氧化活性进行测定和比较分析。结果表明:抗氧化活性综合(antioxidant potency composite,APC)指数可有效反应各单体的抗氧化活性,柑橘果实15种主要酚类物质抗氧化活性明显不同,4种酚酸的抗氧化活性最强,依次为:没食子酸(92.32%)>咖啡酸(85.29%)>绿原酸(69.75%)>阿魏酸(50.97%)。圣草酚(39.38%)、圣草次苷(39.36%)和芦丁(27.42%)的抗氧化活性中等,橙皮素、柚皮素、地奥司明、橙皮苷、川陈皮素、甜橙黄酮、柚皮苷和橘皮素的抗氧化活性较小(<5%)。酚羟基的糖基化或甲基化会都降低柑橘酚类物质的自由基清除能力,酚羟基数目越多,抗氧化活性越强。

甘草乙醇提取物的体外抑制α-葡萄糖苷酶、抗氧化活性及HPLC-MS分析

目的对甘草乙醇提取物体外降血糖和抗氧化活性进行研究,并对其化学成分进行分析。方法甘草乙醇提取物经大孔树脂精制后进行抑制α-葡萄糖苷酶和清除DPPH自由基实验;采用高效液相色谱-质谱联用技术对甘草乙醇提取物化学成分进行分析。结果甘草乙醇提取物能够较好地抑制α-葡萄糖苷酶活性和清除DPPH自由基,并与提取物浓度存在明显的量效关系,经液质联用分析共鉴定出15个脂溶性黄酮类成分。结论甘草乙醇提取物具有体外抑制α-葡萄糖苷酶、抗氧化活性,其主要有效成分为脂溶性黄酮类化合物。

海参酶解产物的分离及其体外抗氧化作用的研究

从海参酶解产物中分离制备海参肽.并研究其体外抗氧化作用。采用超滤、冷冻干燥方法分离不同分子质量范围的海参肽;采用二苯代苦味酰基自由基(DPPH),研究海参肽的抗氧化活性;经Sephadex G-25和反相高效液相色谱对抗氧化海参肽进行进一步分离。结果表明,分子质量在1000～3000u的海参肽表现出很强的抗氧化作用,对DPPH自由基的清除能力强于V_E,其再经Sephadex G-25分离得到海参肽Ⅰ的抗氧化活性最强,对DPPH自由基的清除率达56.3%(1mg/mL),海参肽Ⅰ经反相高效液相色谱将分离得到2个海参多肽组分.

酶辅助提取莲房原花青素工艺及其抗氧化活性研究

主要用纤维素酶和果胶酶对莲房组织进行酶解,以提高莲房原花青素提取率。采用四因素三水平正交实验对酶解时间、加酶量和酶解温度等提取工艺参数进行优化,获得了最佳工艺参数为纤维素酶添加量为0.7%,果胶酶添加量0.1%,酶解温度55℃,酶解时间2.5h,优化后的提取工艺与直接醇提法相比,能将莲房原花青素的提取率提高约48%。在此基础上采用DPPH法进行了抗氧化性的对比,结果表明酶辅助提取和醇提法提取的原花青素有着相同的抗氧化性。

黄山贡菊抗氧化活性成分提取工艺优化与HPLC MS分析

探讨黄山贡菊的抗氧化活性化学成分。以FRAP及DPPH法分析抗氧化活性,采用响应面法优化黄山贡菊抗氧化活性成分的提取条件。在乙醇浓度60%,液料比35∶1(mL/g),超声时间25 min的条件下,黄山贡菊提取物的总抗氧化能力为(2.134±0.011)mmol/L(RSD=1.97%,n=3),与预测值(2.010 mmol/L)吻合很好。总黄酮当量为7.88 mg芦丁/L的黄山贡菊提取物的抗氧化能力相当于2.87 mmol/L亚铁离子的还原力;总黄酮当量为25.85 mg芦丁/L的提取物的DPPH自由基清除率为94.81%。采用HPLC-MS分析黄山贡菊提取物的抗氧化活性成分,共鉴定出了113个化合物,含黄酮类化合物72个,绿原酸及衍生物7个、香豆素类8个。这些化合物可能是黄山贡菊具备抗氧化活性的物质基础。

HPLC-DPPH在线联用技术评价茶的抗氧化活性

基于"谱效整合指纹图谱"的研究思路,构建了HPLC-DPPH在线联用技术,并将该技术应用于茶的抗氧化活性分析。将获得的11批不同品牌茶样品的化学指纹峰(谱)和活性指纹峰(效)的数据进行统计分析处理,换算出11批茶样品的总抗氧化活性。结果显示,不同品牌茶的总抗氧化活性差异较大。该方法可以对茶等保健品中的相关活性物质进行鉴别和定量检测,可以作为对保健品及中药进行质量控制的参考方法。

HPLC-DPPH快速测定枳壳抗氧化活性成分

目的:为高效利用枳壳(Aurantii Fructus)中活性成分,建立测定枳壳中活性成分柚皮苷、橙皮苷和新橙皮苷的方法,并同时评价其抗氧化能力。方法:采用高效液相色谱联用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(HPLC-DPPH)技术,Agilent-ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.04%磷酸水(A)-乙腈(B),采用梯度洗脱程序,检测波长:283 nm,柱温:25℃,流速:0.8 m L·min-1。结果:柚皮苷、橙皮苷及新橙皮苷质量分数分别为52.64、2.41、34.27 mg·g-1;抗氧化能力贡献率(AA*):柚皮苷(58.9%)>新橙皮苷(38.3%)>橙皮苷(2.8%),DPPH自由基清除率(AA**):柚皮苷(47.8%)>橙皮苷(38.1%)>新橙皮苷(36.2%)。结论:本文通过建立HPLC-DPPH法对枳壳抗氧化活性成分进行测定和评价,为开发利用枳壳中抗氧化活性成分提供一种新思路。

贮藏后期苹果的多酚组成及抗氧化性研究

对贮藏后期苹果不同部位的多酚组成及抗氧化性进行了初步研究。首先,利用HPLC和Folin-Ciocalteu法对苹果皮、肉及籽中多酚组成及含量进行了分析。之后,利用DPPH法对其抗氧化性也进行了检测。结果表明,贮藏后期苹果籽和肉中多酚类以绿原酸、花色素、栎精糖苷、儿茶素类为主,皮中多酚以绿原酸、根皮苷为主,而且苹果肉、籽中总酚含量远大于皮中总酚。总酚清除DPPH·自由基的能力也与其含量成正比。

用清除有机自由基DPPH法评价连翘不同部位抗氧化作用

目的研究连翘不同部位及其中连翘酯苷和连翘苷2种化学成分的抗氧化作用。方法用清除有机自由基DPPH法评价抗氧化作用,并通过HPLC-PDA法测定了连翘酯苷和连翘苷在不同部位的含量。结果连翘不同部位及其中2种化学成分对DPPH自由基均有一定的清除作用,具有抗氧化能力。结论连翘酯苷的抗氧化能力大大优于连翘苷,是一种优秀的天然抗氧化剂。

红花提取物抗氧化活性研究(英文)

本研究从红花提取物中分离并用质谱鉴定了四种黄色素。建立了一个快速测定红花提取物中黄色素的反相液相色谱方法,并对不同温度和时间加热对红花提取物中黄色素含量的影响及其动力学变化进行了研究。进一步采用清除DPPH自由基能力的方法测定红花提取物的抗氧化能力。结果显示随着温度的升高,红花提取物中黄色素的含量逐步减少,同时发现红花黄色素含量与其抗氧化能力有相关性。

补骨脂抗氧化活性指纹图谱研究

[目的]建立补骨脂抗氧化活性指纹图谱,评价不同产地补骨脂药材的抗氧化活性和明确抗氧化活性成分的贡献率。[方法]采用高效液相色谱-二极管阵列检测器-1,1-二苯基-2-苦基肼(HPLC-DAD-DPPH)方法。[结果]建立了补骨脂抗氧化活性指纹图谱,确定了补骨脂酚为最主要的抗氧化活性成分。[结论]抗氧化活性指纹图谱可用于补骨脂质量评价,为全面提高中药质量控制水平提供了新方法。