DSPP基因相关遗传性牙本质发育异常牙体硬组织研究进展

DSPP基因相关遗传性牙本质发育异常是由DSPP基因突变引起的牙本质发育缺陷,为常染色体显性遗传性疾病。该类疾病主要引起牙本质的异常发育,出现牙本质结构紊乱,异常增殖,导致牙齿颜色改变、釉质早期剥脱和牙本质磨耗,严重影响患者的咀嚼功能和口腔美观。其牙体硬组织病变主要表现为釉牙本质界形态异常,釉质剥脱,牙本质小管数目减少,排列紊乱,牙本质元素含量异常,硬度明显降低。对该类疾病患者牙齿硬组织变化的研究能够深入明确基因-表型之间的关系,可为该类疾病的防治提供依据。本文就DSPP基因相关遗传性牙本质发育异常的硬组织研究进展做一综述。

遗传性牙本质发育不全Ⅱ型DSPP基因新突变

目的分析我国遗传性牙本质发育不全Ⅱ型(dentinogenesisimperfectatypeⅡ,DGI-Ⅱ)患者DSPP基因突变特征,从分子水平探讨DGI-Ⅱ的发病机制。方法抽提2个汉族遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系患者外周静脉血基因组DNA,应用聚合酶链反应及DNA测序技术,结合序列分析方法,对2个家系共13名家庭成员的DSPP基因1～4号外显子及其邻近序列进行突变分析。结果家系A中的患者在DSPP的第4外显子发生Asn164Tyr突变;家系B的患者在DSPP第4外显子发生Cys159Trp突变。结论这两个突变系是国内外尚未报道的新突变。

遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系DSPP基因突变的检测与分析

目的：对2个汉族遗传性牙本质发育不全Ⅱ型家系中的DSPP基因突变进行检测。方法：对2个遗传性牙本质发育不全Ⅱ型（DGI-Ⅱ）家系的成员进行全身基本情况及口腔专科检查,拍摄口内照,全景片,以及牙片,采集外周静脉血并抽提基因组DNA,应用PCR及DNA测序技术,结合序列分析方法,对2个家系共15名家系成员（其中患者10名）的外周静脉血基因组DNA牙本质涎磷蛋白（DSPP）基因1-5号外显子及其邻近序列进行序列分析。结果：家系A中的患者在DSPP的第2外显子发生错义突变c.50C〉T（p.P17L）;家系B的患者在DSPP第4外显子发生错义核苷酸改变c.506A〉G（p.D169G）。结论：DSPP基因突变可能是导致两个DGI-Ⅱ家系发病的分子基础。

DSPP基因启动子多态性位点及其与牙釉质发育异常的相关性分析

目的:分析牙本质涎磷蛋白基因(dentin sialophosphoproprotein,DSPP)启动子多态性位点(SNPs)的致病易感性,探讨DSPP基因与牙釉质发育异常的相关性。方法:从基因组数据库中下载SNPs的数据,采用生物信息学软件预测SNPs所在区域是否作为潜在的转录调控元件;以近两年内来本院就诊的116例牙釉质发育异常患者作为研究对象,抽提外周血DNA,PCR扩增DSPP基因启动子片段;通过DNA测序获得SNP等位基因频率,以"千人基因组计划"所公布的等位基因频率作为对照组,统计学分析SNPs等位基因频率的差异。结果:根据NCBI数据库公布的结果,位于DSPP启动子区1kb范围内存在4个SNPs,分别命名为S1～S4。启动子分析软件预测发现,含S3不同等位基因的同一序列分别存在不同转录因子结合元件;S2不同等位基因的同一序列存在相同的调控元件;S1和S4不同等位基因的同一序列都只能预测到含其中1个等位基因的序列存在转录因子结合元件。与对照组相比较,牙釉质发育异常患者DSPP基因启动子区S3等位基因频率差异存在显著性(P<0.001),而其他SNPs没有统计学差异(P>0.05)。结论:DSPP基因启动子区SNP位点可作为牙齿发育不良相关疾病的筛查对象,其中S3位点很可能与牙釉质发育异常密切相关。

小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因敲除载体的构建

目的 :构建用于小鼠牙本质涎磷蛋白基因敲除的载体 ;方法 :PCR获得上、下游两条同源臂 ,将同源臂和正、负双向筛选标志按一定顺序克隆到载体 pBluescript中 ,序列测定确认正确后 ,NotI酶切使载体线性化 ;结果 :载体中各部分的排列顺序与预期一致 ;结论 :获得了小鼠牙本质涎磷蛋白基因敲除的载体 ,为以后的工作打下了基础。

人和小鼠Dspp基因的克隆及其在成牙本质细胞中的表达检测

目的克隆人和小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因片断,建立一种从分子水平检测成牙本质细胞分化的方法。方法制备特异性的人和小鼠Dspp基因片断的mRNA反义探针,再将其分别与人和小鼠具有成牙本质细胞的牙胚组织进行原位杂交,检测Dspp基因表达情况。结果本实验制备出的人和小鼠Dspp基因的mRNA反义探针在特定条件下能对各自的成牙本质细胞中Dspp基因的表达进行检测。结论本方法可以作为一种从分子水平检测人或小鼠成牙本质细胞分化的工具。

牙髓细胞成牙本质向分化过程中DSPP基因的表观遗传学修饰

目的:通过检测牙髓细胞(DPC)体外成牙本质向分化过程中牙本质涎磷蛋白(DSPP)基因的表观遗传学修饰模式的变化。探讨表观遗传学机制在DPC成牙本质向分化中的作用。方法:在体外诱导DPC成牙本质向分化,采用Real-time PCR检测DSPP基因表达的改变,采用重亚硫酸盐测序法检测DSPP基因的甲基化水平改变,染色质免疫共沉淀检测DSPP启动子区组蛋白修饰(H3K27me3和H3K4me3)修饰的变化。结果:在DPC诱导分化后,DSPP的表达逐渐增高,伴随着基因启动区甲基化水平的降低,同时与转录激活相关的组蛋白修饰H3K4me3升高,而与转录抑制相关的组蛋白修饰H3K27me3降低。结论:DPC在成牙本质分化过程中DSPP表达的上调与DSPP启动子区域出现开放基因表达的表观遗传学修饰模式有关。这提示,表观遗传学调控参与到DPC成牙本质向分化的过程。

DSPP基因启动子不同片段启动活性的对比分析

目的:对比分析牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)基因启动子不同片段的启动活性。方法:选择小鼠成牙本质细胞样细胞MDPC-23为实验细胞,利用含DSPP基因启动子不同片段的真核表达载体,采用报告基因方法观察DSPP基因启动子不同片段的启动活性。结果:在MDPC-23细胞中,DSPP基因启动子不同片段的真核表达载体均不同程度地表现了启动活性,其启动活性有差异(P<0.01)。结论:DSPP基因启动子不同片段的启动活性有差异,其活性变化反映位于-95bp～54bp、-410bp～-195bp、-1243bp～-791bp、-1447bp～-1243bp、-3519bp～-2475bp区存在潜在的增强子;-195bp～-95bp、-670bp～-410bp、-2475bp～-1447bp区存在潜在的抑制子。进一步明确了DSPP基因启动子的结构,为今后研究DSPP基因的特异性表达奠定基础。

小鼠牙本质涎磷蛋白(DSPP)特异性启动子的克隆和序列分析

目的 :获得小鼠牙本质涎磷蛋白 (DSPP)编码序列上游约 1.6kb的特异性启动子。方法 :按Mac Dougall报道设计一对引物 ,提取小鼠胚胎干细胞基因组DNA作为模板 ,PCR获得大小约为 1.6kb的DNA片段 ,将该片段克隆并进行序列分析。结果 :所得到的片段是DSPP的特异性启动子 ,其序列与文献报道有一定差异 ,但转录因子的结合位点均未发生突变。结论 :成功获得小鼠DSPP的特异性启动子 ,为进一步的研究打下基础。

基于空洞空间金字塔池化U-Net的遥感图像多目标检测方法

针对遥感图像(RSI)中的目标相对较小、形变多样,且包含分布不均匀的非目标和背景等问题,提出一种基于空洞空间金字塔池化U-Net的遥感图像多目标检测方法。该方法利用空洞多尺度卷积提取多尺度目标的分类特征,运用空洞空间池化金字塔模块扩大卷积特征图的感受野,提取更充分的目标特征,并采用注意力机制、残差连接和长跳跃连接充分保留卷积层提取的RSI的敏感特征。在公开遥感图像数据库EORSSD上的实验结果表明,所提出的方法能够从复杂多样的RSI中检测多尺度目标,检测精度为96.56%。

北疆地区不同雪粒径光谱特征观测及反演研究

雪粒径反演是冰冻圈遥感的重要研究内容之一。本研究通过设计不同雪粒径观测方案,在我国北疆地区利用SVC HR-1024野外便携式光谱仪观测了不同雪粒径的光谱特征;同时利用可拍照显微镜测量了雪粒径的大小和形状,并通过DSPP方法计算其等效粒径;最后,基于渐进式积雪辐射传输模型(ART)对反演波段和积雪形状因子进行优化,反演并验证雪粒径。研究表明DSPP方法获取积雪等效粒径是可行的,但由于同层积雪中样本选择存在较大差异,在样本选择方面需要进一步改进;近红外波段还是区分雪粒径的有效波段,在研究区积雪是干雪的条件下,基于ART优化反演波段和积雪形状因子优化方法反演雪粒径是可行的,根据试验获取在该地区雪粒径反演最佳波段为1.20μm,最佳积雪形状因子b值为3.62。

Ⅱ型牙本质发育不全的致病基因研究进展

牙本质发育不全症是一种常染色体显性遗传病,其致病基因定位于4q2l.临床上分为三型:型(Dentinogenesis Imperfecta type,DGI-)主要见于成骨发育不全(OsteogenesisImperfecta,OI)患者的口腔,其病因被广泛认为是由型胶原基因突变导致.型(Dentinogenesis Imperfecta type,DGI-)是一种特殊的遗传性牙本质发育不全,在美国马里兰州的3个隔离民族群中独立发生.型(Dentinogenesis Imperfecta type,DGI-)在临床上最为常见,成为研究热点.型牙本质发育不全的致病基因主要为牙本质唾液酸焦磷酸蛋白基因(dentin sialophosphoprotein,DSPP)突变引起,独立发生且具有高度的遗传异质性.主要对牙本质发育不全型的候选基因及DSPP的突变进行了综述.

基于DSP的高性能光学稳定平台控制电路设计

光学稳定平台的发展十分迅速,稳定的伺服控制系统是其主要功能。控制接口电路是其实现传感器与控制实现的桥梁。本论文提出系统对接口电路的设计需求。重点阐述了系统的硬件电路实现,包括电路功能的设计,芯片的选择,具体的电路设计等。最后论述了该控制接口电路的应用范围。

Runx2和Osx在修复性牙本质形成过程中的表达模式

目的:观察Runx2和Osx在牙髓损伤后表达模式的变化。方法:取雄性SD大鼠24只随机抽取4只不作任何处理,用于正常对照;其余20只分别以双侧下颌第一磨牙为对象建立牙髓损伤模型。分别于建模后0、3、12 h和3、7 d各时间点从牙髓损伤组中各随机抽取4只大鼠,并取其双侧下颌第一磨牙标本制作组织切片;然后采用HE染色法观察各组修复性牙本质的形成情况,并采用免疫荧光染色法检测Runx2、Osx、DSPP的表达模式。结果:HE染色显示,损伤后7 d,在损伤下方可见明显的修复性牙本质形成。免疫荧光染色显示,Runx2、Osx和DSPP主要表达于损伤下方,其中Runx2的表达呈"抛物线"趋势,即损伤后3 d时表达最为强烈(P<0.05),此后逐渐下降;Osx和DSPP的表达均呈逐渐上调的趋势,Osx的表达在损伤后7 d时上调最为明显(P<0.05),而DSPP的表达则在损伤后3 d时即显著增强并持续至损伤后7 d(P<0.05)。结论:Runx2、Osx和DSPP在牙髓损伤后的不同时期具有不同的表达模式。

基于YOLO-ST的安全帽佩戴精确检测算法

在建筑业、工地等场景下,由于受到天气、人数、光照强度、拍摄角度和距离等因素的影响,导致在安全帽智能检测时容易出现准确度低、漏检率大、错检率高的问题.为了解决该问题,提出了一种基于YOLO-ST的安全帽佩戴检测算法.该算法具有两个优势:首先,使用更容易捕获图像全局信息的Swin Transformer作为网络的特征提取器,增强网络对安全帽特征的提取能力;其次,设计密集的空间金字塔池化模块并引入到YOLO-ST中,以获取目标中更加丰富的细节信息.实验结果表明,在公开的SHWD数据集上,YOLO-ST的平均识别精度达到了91.3%.与其它方法相比,YOLO-ST取得了更精确的检测结果.

TLR9在成牙本质细胞中的表达

目的:研究成牙本质细胞中TLR9、DSPP基因表达特征及信号转导途径。方法:采用RT-PCR检测TLR9在小鼠牙髓组织中及TLR9、DSPP在成牙本质细胞系中的表达。用CpGODN-A和CpGODN-B刺激细胞,在时间梯度0、3、6、9、12、24h,检测TLR9、DSPP基因的表达特征。结果:TLR9mRNA在小鼠牙髓组织中有表达。TLR9、DSPPmRNA在成牙本质细胞中都有显著的表达,在CpGODN刺激下显著上调,在6h处于峰值。结论:TLR9在成牙本质细胞中有表达;TLR9的特异性表达对DSPP基因表达量有影响。

小鼠牙髓干细胞培养及诱导分化

目的 :分离、培养小鼠牙髓干细胞并诱导分化 .方法 :采用酶消化培养法获得小鼠的单个牙髓细胞悬液 ,细胞密度调整为 1× 10 4/孔细胞 ,用 2 0 0mL·L -1胎牛血清的α MEM培养液培养 14d ,挑出细胞克隆消化传代 ,TGF β、BMP2 、bFGF细胞因子诱导 ,PCR检测DSPP的mRNA的表达 .结果 :小鼠牙髓细胞呈集落状生长 ,克隆形成率为 1.6 -2 .5个 / 10 4细胞 ,所形成的集落细胞结合紧密 ,细胞体积小、胞核大 ,经细胞因子刺激后的细胞表达DSPP的mRNA .结论 :培养的小鼠牙髓集落状生长的细胞具有干细胞增殖快等特性 。

鉴别稀疏保持投影的人脸识别算法

在人脸识别领域中遇到的数据往往是高维的,一般会导致维数灾难问题.近年来稀疏表示(Sparse representation,SR)在处理人脸识别等问题时显示出一定的有效性,而后出现的稀疏保持投影(Sparse preserving projections,SPP)算法又以保持数据的稀疏表示结构为目的成功应用于人脸识别领域,但仍存在一些问题.本文针对SPP算法在人脸识别中存在的问题进行了改进,提出了一种叫做鉴别稀疏保持投影(Discriminant sparsity preserving projection,DSPP)的算法.该算法有以下两方面的改进:(1)针对SPP算法未能有效地利用类标签信息的问题,本文利用最大散度差准则(Maximum scatter difference criterion,MSDC)重建SPP算法的目标函数;(2)针对SPP算法计算复杂度高的问题,本文利用带有相同类标签的训练样本用于稀疏重构.在ORL库、CAS-PEAL库、IMM库上的大量实验结果验证了算法的有效性.

分散第二相Al_2O_3对高分子固体电解质电性能的影响

于固体电解质PEO＿NaSCN络合物中加入Al2O3绝缘体作为第二相,分别研究了Al2O3的粒径,含量对该固体电解质电性能的影响.发现当Al2O3的粒径小于1μm时,离子电导率比纯的固体电解质的电导率高,大于1μm时,则比纯样品的低,即临界粒径约为1μm.当Al2O3的含量达到约25%时,电导率达到极大值.此外,样品的高频极化和低频极化也随Al2O3的粒径的增大而越显著.

过表达Runx2基因对牙髓细胞分化相关基因的影响

目的探讨Runt相关转录因子(Runx)2基因在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用。方法通过矿化诱导培养基(1μmolβ-磷酸甘油钠、10^(-6)μmol地塞米松和5 mg抗坏血酸)建立牙髓细胞向成牙本质细胞分化模型,通过检测碱性磷酸酶(ALP)的活性鉴定模型。将过表达载体pc DNA3.1-Runx2和空载体pc DNA3.1(阴性对照组)转染牙髓细胞,蛋白质免疫印迹法检测转染后细胞中Runx2蛋白的表达量;实时定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中成牙本质细胞分化相关基因牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨涎蛋白(BSP)mRNA的表达。结果在人牙髓细胞向成牙本质细胞分化的过程中,ALP的活性含量逐渐增加,第14天的水平显著大于第7天(P<0.05)。与阴性对照组相比,pc DNA3.1-Runx2组细胞中Runx2蛋白的表达量显著升高(P<0.05);在分化诱导的第7和14天,细胞中DSPP mRNA(P<0.05)、BSP mRNA(P<0.05)均显著高于阴性对照组。结论 Runx2通过增加成牙本质细胞分化相关基因的表达,从而促进牙髓细胞向成牙本质细胞分化。