HPLC法检测黑豆乙醇提取物中活性成分的含量

采用高效液相色谱技术(HPLC),建立快速、有效、能同时分析检测黑豆乙醇提取物中大豆苷、苷元、木苷、木素含量的检测方法。结果:在一定条件下流动相及其比例对各组分的分离测定有较大的影响,我们所确定的色谱条件为:固定相:C18柱,流动相:甲醇∶水∶乙酸为42∶57∶1,检测波长为260nm;标准对照品的浓度与吸收峰面积均有较好的线性关系,r>0.99,各组分间分离度大于1.5;测得的黑豆乙醇提取物中大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素的平均含量(%)分别为:0.341、0.386、0.0929、0.0265。RSD(%)分别为3.49、5.12、10.0、4.94。HPLC法可同时检测黑豆提取物异黄酮中大豆苷、染料木苷、大豆苷元、染料木素的含量,而且方法简单、快速、精密度高、重现性好。

大豆异黄酮酶解物中活性成分的薄层鉴别及含量测定

采用GF254薄层色谱鉴别方法对大豆异黄酮酶解产物中的大豆苷元和染料木素进行快速鉴别,同时用HPLC法对其活性成分进行了含量测定。结果表明:在同一薄层板上与标准大豆苷元、染料木素荧光斑点对应的位置上,大豆异黄酮酶解物有色泽相同的荧光斑点,Rf分别为0.3、0.6,该方法斑点明显、重现性好、专属性强,能对转化结果进行准确的定性判断。采用HPLC法测定活性成分的含量,在一定的浓度范围内,标准样品的浓度和吸收峰面积呈良好的线性关系(r值均大于0.99),HPLC图谱清晰、峰形稳定,保留时间较为理想,各个组分间的分离度均大于1.5,且精密度高,加标回收率在99%以上,能同时测定大豆异黄酮4组分的含量。大豆异黄酮酶解物中大豆苷、大豆苷元、染料木苷、染料木素的含量分别为:0.129%、4.101%、0.028%、1.442%。