基于网络药理学和实验验证研究丹参饮治疗心衰的作用机制

目的用网络药理学方法及体外实验验证,研究丹参饮(Danshenyin,DSY)治疗心衰的药理作用并探讨治疗机制。方法使用中药系统药理学分析平台(TCMSP),UniProt等数据库筛选丹参饮的有效成分及作用靶点,以“heart failure”为关键词检索Gene Cards等数据库得到疾病靶点,二者交集得到核心靶点。用STRING数据库构建核心靶点蛋白质-蛋白质相互作用网络,利用DAVID数据库进行生物功能和信号通路富集分析。构建“药材-成分-靶点-疾病”网络,将活性成分与靶点分子对接验证。手术结扎小鼠心脏冠状动脉左前降支建立心衰模型,丹参饮干预,超声检测、蛋白免疫印记对预测结果进行实验验证。结果网络药理学分析显示,丹参饮通过丹参醛、丹参酮ⅡA、miltiononeⅡ等成分发挥对心衰的治疗作用,其作用机制可能与参与MAPK信号级联的生物调控过程以及调控MAPK等信号通路相关;动物实验对这一发现进行了初步验证:实验发现丹参饮治疗后小鼠左心室心功能、流出道血流等超声指标得到改善;心肌组织中MAPK信号通路蛋白ERK、JNK、p38磷酸化水平降低(P<0.05)。结论丹参饮能够保护心肌,影响MAPK通路从而发挥对慢性心衰的治疗作用。

加味丹参饮不同组方对心肌缺血再灌注损伤COX-2、ICAM-2、P38 MAPK蛋白表达的影响

目的:探讨加味丹参饮不同组方对心肌缺血再灌注损伤大鼠环氧酶(COX-2)、细胞间黏附分子-2(ICAM-2)、P38 MAPK表达的影响。方法:根据L_(12)(2^(11))正交设计表格分为12组,加上一个假手术组,将78只白鼠随机分为13组,每组6只,雌雄各3只。采用结扎冠状动脉左前降支的方法制备心肌缺血再灌注模型,观察加味丹参饮不同组方对心肌缺血再冠注损伤大鼠血清中COX-2、ICAM-2、P38 MAPK蛋白的表达。结果:与空白组相比较,加味丹参饮能够显著降低血清中COX-2、ICAM-2、P38 MAPK蛋白的表达(P<0.05),不同组方之间比较,可以得出加味丹参饮中丹参、檀香、川芎、红花四位药物发挥主要作用。结论:加味丹参饮能够显著降低血清中COX-2、ICAM-2、P38 MAPK蛋白的表达而到达治疗作用,在方剂组成中丹参、檀香、川芎、红花发挥主要治疗作用。

丹参饮促进胃溃疡愈合作用及其机理研究

目的:观察丹参饮对大鼠乙酸性胃溃疡的影响并探讨其作用机制。方法:应用大鼠乙酸性胃溃疡模型,给予丹参饮治疗14 d后,观察胃粘膜损伤程度(UI),检测血清NO含量和血浆PGE2水平,测定胃壁结合粘液的含量、溃疡边缘粘膜细胞凋亡(AI)、凋亡相关基因Bcl-2以及表皮生长因子受体(EGFR)的表达。结果:与模型组相比,丹参饮可明显促进大鼠溃疡愈合(P<0.01),提高血清NO、血浆PGE2和胃壁结合粘液含量(P<0.05),并显著抑制胃溃疡边缘粘膜细胞凋亡(P<0.01),同时促进EGFR和凋亡抑制基因Bcl-2的表达,其中7、3.5g.kg-1剂量组作用更为显著(P<0.01)。结论:通过胃粘膜防御因子及抑制凋亡途径来促进溃疡愈合可能是丹参饮治疗胃溃疡的作用机制之一。

丹参饮胶囊治疗消化性溃疡的临床研究

目的:探讨丹参饮(DSY)对消化性溃疡的临床疗效。方法:消化性溃疡患者105例,随机进入DSY组(60例)和雷尼替丁组(45例),分别服药4周后,观察溃疡的愈合情况,采用放射免疫法分别检测治疗前后患者血浆中EGF和胃黏膜中PGE2的含量,并随访一年后的复发率。结果:给药4周后,DSY的临床疗效与雷尼替丁相当(P>0.05),但一年随访复发率明显低于对照组(P<0.05),且DSY可明显提高患者血浆EGF和胃黏膜PGE2的含量(与对照组相比,分别P<0.05,P<0.01)。结论:DSY具有较好的促进溃疡愈合作用,增加血浆EGF和胃黏膜PGE2的含量、提高溃疡愈合质量是其抗溃疡复发的机理之一。

枳实消痞丸(汤)合丹参饮加减治疗慢性萎缩性胃炎32例

目的:观察枳实消痞丸(汤)合丹参饮加减治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效。方法:将62例患者随机分为治疗组及对照组,对照组给予维酶素片、吗丁啉常规口服治疗,治疗组给予枳实消痞丸(汤)合丹参饮加减治疗,疗程均为3个月。结果:治疗组总有效率87.5%,对照组总有效率66.7%,2组疗效比较差异有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗前、后除纳差、胃痛,其余各指标积分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗组治疗前、后除异型增生外,其他各指标积分比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2组除异型增生积分外其他各项指标积分组间比较差异有统计学意义(P<0.05),治疗组疗效优于对照组。结论:枳实消痞丸(汤)合丹参饮加减治疗慢性萎缩性胃炎疗效满意。

丹参饮治疗冠心病心绞痛60例

[目的]观察丹参饮对冠心病心绞痛的疗效和血脂水平改善情况。[方法]118例随机分为治疗组和对照组,治疗组单纯使用丹参饮汤剂口服,对照组单纯使用复方丹参片口服,疗程均为42天,分别观察其症状及血脂改善情况。[结果]两组治疗比较,治疗组症状疗效和血脂等均明显优于对照组(P<0.05或P<0.01)。[结论]丹参饮治疗冠心病心绞痛疗效确切。

辨证分型联合西药治疗慢性萎缩性胃炎随机平行对照研究

[目的]观察辨证分型联合西药治疗慢性萎缩性胃炎疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将120例患者按就诊顺序编号方法简单随机分为两组。对照组60例兰索拉唑,30mg/次,2次/d,口服;甲硝唑400mg/次,2次/d,口服;左氧氟沙星200mg/次,2次/d,口服。治疗组60例辨证分型,中药水煎200m L,100m L/次,早晚温服;脾胃虚弱-香砂六君子汤:人参、白术、茯苓各15g,甘草、陈皮各10g,半夏法9g,砂仁、木香各10g,海螵蛸15g;胃络瘀阻-丹参饮合失笑散:丹参、木香各15g,砂仁10g,蒲黄15g,五灵脂、香附、延胡索各10g,三七粉15g;西药治疗同对照组。连续治疗3个月为1疗程。观测临床症状、胃镜积分、病理积分、不良反应。治疗1疗程(3个月),判定疗效。[结果]治疗组临床痊愈5例,显效28例,有效18例,无效9例,总有效率85.00%;对照组临床痊愈0例,显效17例,有效23例,无效20例,总有效率66.67%;治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。胃镜积分、病理积分两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.01)。[结论]辨证分型联合西药治疗慢性萎缩性胃炎,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

基于蛋白质组学探讨丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制

目的:通过长期高脂饲料喂养复制高脂血症动物模型,采用蛋白质组学、分子生物学等方法阐释丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板活化的影响机制。方法:Wistar大鼠,按血脂水平随机分正常组、模型组、丹参饮组,每组10只。正常组动物喂食基础饲料,模型组和丹参饮组动物喂食高脂饲料造模,3组动物均自由饮水、自由进食。于第9周开始治疗干预,丹参饮组实验动物给予丹参饮灌胃给药,剂量为3.6 g·kg^(-1)生药;模型组和正常组实验动物根据体质量给予等体积生理盐水。第12周后取材并进行相关指标检测,利用生化分析仪来检测血清中血脂4项水平,利用血液流变仪来检测全血黏度和血浆黏度,利用液质联用色谱仪来检测血小板蛋白质组,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血小板膜糖蛋白4(CD36)、黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇4-磷酸5-激酶(PIP5K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、蛋白激酶(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达。结果:与模型组比较,丹参饮组高脂血症模型大鼠血浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平能够明显降低(P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,丹参饮组大鼠血小板聚集率明显降低(P<0.05);模型组与正常组比较上调蛋白数目44个,下调蛋白数目12个,差异蛋白总数为56个;丹参饮组与模型组比较上调蛋白数目21个,下调蛋白数目22个,差异蛋白总数为43个;丹参饮组和正常组比较上调蛋白数目31个,下调蛋白数目49个差异蛋白总数共计80个,通过基因本体(GO)功能富集分析主要涉及胆固醇转运和外排,以及细胞因子的产生比较显著且与血脂异常和血小板活化有关,京都基因与基因组百科全书(KEGG)功能富集分析涉及ECM-receptor interaction信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)信号通路、黏着斑信号通路、PI3K/Akt信号通路比较显著;丹参饮能够显著下调CD36、FAK、PIP5K、PI3K、p-Akt(Ser473)、p-Akt1/2/3(Thr308)蛋白表达。结论:丹参饮可以改善高脂血症模型大鼠血脂水平;并可以显著抑制异常血脂水平引起的血小板活化,相关机制可能与下调CD36/PI3K/Akt信号级联有关。

丹参饮对化疗后气阴两虚型膀胱癌患者胃肠道抑制及免疫功能的影响

目的:探讨丹参饮对膀胱癌患者化疗后胃肠道抑制及免疫功能的影响,并探讨其作用机制。方法:将重庆市中医院收治的膀胱癌患者140例均行化疗治疗,随机抽取70例于化疗期间服用丹参饮(观察组),其余70例为对照组。比较两组胃肠道抑制比例,化疗前后细胞免疫和体液免疫指标水平、自然杀伤(natural killer,NK)细胞水平及血清相关因子水平。结果:化疗后24 h内,对照组Ⅲ~Ⅳ比例高于观察组(P<0.05),对照组0级比例低于观察组(P<0.05)。在72 h内,观察组0级比例高于对照组(P<0.05),Ⅰ~Ⅱ和Ⅲ~Ⅳ比例均低于对照组(P<0.05)。化疗后,两组患者CD3^+,CD4^+和CD4^+/CD8^+均较化疗前降低(P<0.05),CD8^+水平均较化疗前升高(P<0.05);观察组CD3^+,CD4^+和CD4^+/CD8^+的变化程度均小于对照组(P<0.05)。化疗后,两组患者免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)和免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)水平均较化疗前降低(P<0.05)。化疗后,两组患者NK细胞水平均低于化疗前(P<0.05),观察组下降幅度小于对照组(P<0.05)。化疗后,观察组的白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α水平低于对照组(P<0.05)。结论:在化疗时,加服丹参饮可有效降低患者的胃肠道抑制,并更好的调节患者免疫功能。

理气化痰祛瘀法对慢性心力衰竭气虚血瘀型患者心脏康复的观察

目的:观察理气化痰祛瘀法对慢性心力衰竭(CHF)气虚血瘀证患者心衰程度、心室重构和疾病进展的影响。方法:将134例符合CHF患者随机分为对照组和观察组各62例。对照组口服螺内酯片,20 mg/次,1次/d;贝那普利片,20 mg/次,1次/d;比索洛尔片,10 mg/次,1次/d,口服;并根据情况加服地高辛片。观察组在对照组治疗的基础上,加服丹参饮合血府逐瘀汤加减,1剂/d。两组疗程均为连续治疗3个月。进行治疗前后Lee氏心衰评分,纽约心脏协会(NYHA)心功能分级,6 min步行试验(6 MWT),气虚血瘀证评分和明尼苏达心衰生活质量调查表(MLHFQ)评价;行超声心动图检查,记录左室射血分数(LVEF),室间隔厚度(IVSd),左室心肌质量指数(LVMI),左室收缩末期内径(LVEDs),左室舒张末期内径(LVEDd);检测治疗前后基质金属蛋白酶-9(MMP-9),基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1),转化生长因子(TGF)-β1,N末端B型利钠肽原(NT-proBNP),半乳糖凝集素3及和肽素水平。结果:经Ridit分析,治疗后观察组心功能疗效优于对照组(P<0. 05),纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级轻于对照组(P<0. 05);观察组LVEDd,LVEDs和LVMI均低于对照组,LVEF高于对照组(P<0. 05),治疗后两组患者IVSd组间比较,无统计学差异;观察组患者Lee氏心衰评分,气虚血瘀证评分和MLHFQ评分均低于对照组,6 min步行距离多于对照组(P<0. 01);观察组血清MMP-9,TGF-β1,NT-proBNP,半乳糖凝集素3及和肽素水平均低于对照组,TIMP-1水平高于对照组(P<0. 01)。结论:在常规西医治疗的基础上,加服丹参饮合血府逐瘀汤加减治疗气虚血瘀型CHF患者,提高了患者的运动耐量,减轻了心衰症状和心衰程度,提高了患者的生活质量,并能抑制心室重构,促进了心脏康复,延缓病情进展。

丹参饮合温胆汤加减对稳定型心绞痛患者心肌缺血的保护机制

目的:观察丹参饮合温胆汤加减治疗痰瘀阻滞型稳定型心绞痛(SAP)的疗效及对心肌缺血的保护机制研究。方法:将132例患者随机按数字表法分为对照组和观察组各66例。除去脱落、失访和剔除病例,两组最后分别完成63例。所有患者进行抗心绞痛药物和控制风险因素药物治疗。对照组口服丹蒌片,5片/次,3次/d;观察组给予丹参饮合温胆汤加减,1剂/d;两组疗程均为治疗3个月。每周进行心绞痛发作情况评分;冠心病心肌缺血情况采用心电图平板运动试验评价,中医症状和生活质量分别进行痰瘀阻滞证、西雅图心绞痛量表(SAQ)评分,血液流变学指标、白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),细胞间黏附分子-1(ICAM-1),胱抑素C(CysC),同型半胱氨酸(Hcy),缺血修饰白蛋白(IMA)和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)水平,均治疗前后各评价1次;并进行安全性评价。结果:观察组心绞痛发作次数、持续时间、疼痛程度和硝酸甘油用量评分均低于对照组(P<0.01);观察组Duke评分、总运动时间、出现ST段压低1.0 mm的时间、心绞痛出现时间和代谢当量均多于对照组(P<0.01);观察组SAQ评分高于对照组(P<0.01),痰瘀阻滞证积分低于对照组(P<0.01);观察组心绞痛疗效优于对照组(Z=2.091,P<0.05);观察组ICAM-1,CysC,IL-6,TNF-α水平均低于对照组(P<0.01);观察组全血黏度(低切、高切)、全血还原黏度、血浆黏度、血小板聚集率、纤维蛋白原(FIB)均低于对照组(P<0.01);观察组IMA,Hcy和MIF水平均低于对照组(P<0.01)。没有发现服用丹参饮合温胆汤相关不良反应。结论:在西医常规治疗的基础上,丹参饮合温胆汤加减治疗SAP,可控制心绞痛发作,减轻痰瘀阻滞证症状,提高生活质量,有着较好临床疗效,且安全,并能改善患者血液流变性,抑制炎症反应,减轻管腔狭窄或阻塞,从而改善心肌缺血程度。

基于络病理论观察丹参饮加味治疗慢性萎缩性胃炎胃络瘀阻证的临床疗效及机制

目的:观察丹参饮加味治疗慢性萎缩性胃炎的临床效果,探讨其部分作用机制。方法:选择西宁市第一人民医院收治的慢性萎缩性胃炎患者152例,随机分为对照组和观察组,每组各76例。对照组患者给予常规西药治疗,观察组给予丹参饮加味方口服,连续治疗8周。比较两组的临床效果、中医证候总积分、胃黏膜病理评分,测定胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、免疫炎性状态[可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、胃黏膜保护相关因子[前列腺素E(PGE_(2))、降钙素基因相关肽(CGRP)]含量,记录不良反应、复发率。结果:与对照组的有效率77.61%(52/67)比较,观察组的有效率91.18%(62/68)明显升高(χ^(2)=4.727,P<0.05);与对照组比较,观察组患者的中医证候总积分明显降低(P<0.05);与对照组比较,观察组腺体萎缩、肠上皮化生、异型增生的病理评分明显降低(P<0.05);与对照组比较,观察组患者的血清中PGⅠ分泌量、PGⅠ/PGⅡ值明显升高,PGⅡ分泌量明显降低(P<0.05);观察组患者的炎症相关指标sIL-2R、TNF-α含量均明显降低(P<0.05);观察组患者的胃黏膜保护相关因子PGE_(2)、CGRP含量均明显升高(P<0.05);与对照组的不良反应发生率14.93%(10/67)比较,观察组的不良反应发生率7.35%(5/68)明显降低,但差异无统计学意义;与对照组比较,观察组6、12个月的复发率均降低,但经Fisher精确检验,差异无统计学意义。结论:丹参饮加味治疗慢性萎缩性胃炎在缓解中医证候、调节PG分泌量、改善胃黏膜病变程度等方面有更好的效果,其机制可能与调节sIL-2R、TNF-α、PGE_(2)、CGRP以减轻胃黏膜的炎性损伤、保护胃黏膜有关,用药相对安全,不易于复发。

丹参饮合二陈汤加减对颈动脉粥样硬化血管内膜损伤的保护作用

目的:探讨丹参饮合二陈汤加减治疗颈动脉粥样硬化(CAS)痰瘀互结证的临床疗效及对血管内膜损伤的影响效果。方法:将151例患者随机按数字表法分为对照组75例(脱失4例,剔除2例,完成69例)和观察组76例(脱失3例,剔除4例,完成69例)。两组患者均口服阿托伐他汀钙片,10 mg/次,1次/d,阿司匹林肠溶片,100 mg/次,1次/d。对照组口服荷丹片,2片/次,3次/d;观察组口服丹参饮合二陈汤加减,1剂/d。两组均为连续治疗4个月。进行治疗前后颈动脉彩色超声检测,记录颈动脉内-中膜厚度(IMT),斑块数量、斑块面积、斑块厚度和血流动力学;检测治疗前后一氧化氮(NO),内皮素-1(ET-1),血管性血友病因子(vWF),可溶性细胞间黏附分子-1(s ICAMs-1),血管内皮生长因子(VEGF),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平;检测治疗前后甘油三酯(TG),总胆固醇(TC),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),全血低切黏度(LBV),全血高切黏度(HBV),血浆黏度(PV),血小板聚集率(PAR),纤维蛋白原(FIB),同型半胱氨酸(Hcy),白细胞介素-6(IL-6),IL-10,肿瘤坏死因子-α(TNF-α),血清超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)和循环谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;进行安全性评价。结果:治疗后观察组IMT,斑块数量、斑块面积和斑块厚度均低于对照组(P<0.01);观察组收缩期峰值血流速度和舒张期末血流速度均高于对照组(P<0.01),搏动指数和阻力指数均低于对照组(P<0.01);观察组ET-1,vWF,sICAM-1,VEGF,MMP-9均低于对照组(P<0.01),NO水平高于对照组(P<0.01);观察组TG,TC,和LDL-C水平均低于对照组,HDL-C水平高于对照组(P<0.01);观察组LBV,HBV,PV,PAR和FIB均低于对照组(P<0.01);观察组Hcy,IL-6和TNF-α水平均低于对照组(P<0.01);观察组IL-10,SOD和GSH-Px均高于对照组(P<0.01),MDA和ox-LDL均低于对照组(P<0.01)。未观察到与服用中药相关不良反应。结论:丹参饮合二陈汤加减治疗CAS痰瘀互结患者能缩小斑块,改善血流动力学和血液流变学,调节血脂代谢和血管内皮因子,并具有抗炎和抗氧化损伤,保护血管内膜,抑制CAS发生、发展的效果,且临床使用安全。

丹参饮颗粒抑制NLRP3炎症小体抗大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的:观察丹参饮颗粒对心肌缺血再灌注损伤的作用及其通过氧化应激和NLRP3炎症小体活化途径的作用机制。方法:采用冠状动脉左前降支结扎制备大鼠心肌缺血再灌注模型,随机分为模型对照组、丹参饮颗粒1 g/kg组、3 g/kg组和9 g/kg组,缺血1 h后进行再灌注,另设假手术对照组。于再灌注前0.5 h和再灌注20 h时分别灌胃给予丹参饮颗粒溶液或纯水。再灌注24 h后检测大鼠心功能,测定心肌梗死范围、血清心肌酶谱、心肌炎症因子、超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC),心肌冰冻切片染色观察活性氧(ROS)含量,免疫印迹分析NLRP3炎症小体活化水平。结果:与假手术对照组比较,模型对照组LVESD明显升高,而EF和FS亦急剧降低,梗死区面积明显增加,血清中AST、LDH、CK-MB、MDA含量明显升高(P<0.05或P<0.01),SOD活性和T-AOC活力显著降低,心肌组织TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著升高,ROS水平明显升高,NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、成熟型半胱天冬酶-1(cleaved Caspase-1)和白介素-1β(cleaved IL-1β)蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组比较,丹参饮颗粒3 g/kg、9 g/kg组大鼠心功能明显提高,心肌梗死范围减小,血清心肌酶水平、心肌组织炎症因子和ROS水平显著降低,MDA含量降低,而SOD和T-AOC活力升高(P<0.05或P<0.01),还明显下调NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1和cleaved IL-1β蛋白水平。结论:丹参饮颗粒具有显著的抗心肌缺血再灌注损伤作用,可能与其抑制氧化应激、抑制NLRP3炎症小体活化和缓解炎症有关。