联用色谱及多组分光谱相关色谱用于当归补血汤与单味药成分的比较研究

利用HPLC-DAD提供的二维化学数据信息,通过多组分光谱相关色谱方法及化学计量学分辨技术,对相同试验条件下所得的当归补血汤及其单味药的色谱组分进行了比较和归属分析.结果表明,在当归补血汤色谱响应值较高的21个色谱峰中,8个色谱峰的组分来自当归,6个色谱峰的组分来自黄芪,7个色谱峰的组分同时来源于当归和黄芪.其中一些色谱峰簇中的其它组分发生了消长变化,既有新物质的产生,又有原有化学成分的消失,说明中药复方配伍的药效物质基础不仅是各单味药化学成分的总和,还有单味药在复方配伍过程中各种成分的相互作用.本方法为中药复方与单味药化学组分的比较及归属分析,尤其对重叠色谱峰簇的组分比较分析提供了方便、快捷及可行的研究方法.

加味当归补血汤对血虚小鼠EPO和GM-CSF表达的影响

目的研究加味当归补血汤对环磷酰胺诱发的血虚小鼠促红细胞生成素(EPO)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响。方法采用环磷酰胺诱导小鼠血虚,不同剂量的加味当归补血汤分别对NIH小鼠进行连续灌胃,给药10 d后收集小鼠血液、肾脏以及骨髓。测定各组小鼠血红细胞和血红蛋白数量、肾脏EPO mRNA和骨髓GM-CSF mRNA表达水平及血清EPO和GM-CSF含量。结果与模型组比较,加味当归补血汤组小鼠血红细胞和血红蛋白数量明显增加,肾脏EPO和骨髓GM-CSF的基因表达明显升高,血清EPO和GM-CSF的含量显著提高。结论加味当归补血汤能显著改善小鼠贫血,其机制可能与其明显提高EPO和GM-CSF的表达有关。

当归补血汤有效部位指纹图谱归属分析

目的分析当归补血汤的石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁醇部位的特征峰在复方全方及在单味药中的归属。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Sh im-Pack VP-ODS柱,250 mm×4.6 mm I.D.,流动相为甲醇-水(梯度洗脱),检测波长为280 nm,流速为1 m l/m in。结果复方石油醚部位的9个特征峰5个来自当归,4个来自黄芪;氯仿部位的9个特征峰6个来自黄芪,3个来自当归;醋酸乙酯部位的11个特征峰,7个同时来自当归和黄芪,1个来自当归,3个来自黄芪;正丁醇部位的7个特征峰,6个同时来自于当归和黄芪,1个来自黄芪。结论复方各部位的指纹图谱为阐明各部位的药效物质基础提供科学依据,为下一步的临床应用以及新药的开发提供参考。

当归补血汤立法理论及配伍应用的探析

通过查阅古代文献和现代研究资料,综合全面分析其立法理论及配伍应用。发现尽管对当归补血汤的立法有不同的认识,但均肯定其补气生血的作用,现代医学及药理学研究发现,当归补血汤配伍的合理性及应用的多方面性。当归补血汤药简力专,配伍独特,应用广泛,疗效显著。

当归补血汤粗多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的 :观察当归补血汤多糖对免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法 :用环磷酰胺致免疫抑制小鼠进行实验。结果 :当归补血汤多糖可显著提高免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数 ,促进溶血素及溶血空斑形成 ,促进淋巴细胞转化。结论 :当归补血汤多糖有较好的免疫兴奋作用。

当归补血汤对高尿酸血症肾损害的保护作用研究

目的观察当归补血汤对高尿酸血症大鼠肾损害的影响。方法将50只大鼠随机分成对照组、模型组、治疗低、中、高3个剂量组。模型组给予大量高尿酸饮食,造成肾损害模型,对照组给予普通饮食,治疗组给予高尿酸饮食的同时给予当归补血汤低、中、高3个治疗剂量;14 d后分别测定各组大鼠肾组织所分泌的一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,同时测定肾组织SOD和MDA含量、治疗组与模型组比较,观察各项指标有无统计学意义。结果与对照组相比,高尿酸血症组大鼠肾组织细胞产生的NO含量和NOS、SOD均减少,MDA升高,有统计学意义(P<0.05);治疗组与模型组相比较,给予当归补血汤治疗后血清尿酸(UA)水平降低,同时肾组织含量升高,MDA降低,其中中剂量组与模型组相比有显著的统计学意义(P<0.05),低剂量和高剂量组与模型组相比无统计学意义。结论当归补血汤对高尿酸血症造成的肾损害有保护作用。

当归补血汤对高尿酸血症大鼠肾组织NO、NOS、ET及PAI-1水平的影响

目的观察当归补血汤对高尿酸血症大鼠肾组织中内皮素(ET)、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及组织型纤溶酶原激活抑制物(PAI-1)水平的影响。方法将50只大鼠随机分成对照组、模型组及治疗A、B、C组,模型组给予高尿酸饮食,对照组给予普通饮食,治疗组给予高尿酸饮食的同时分别给予低、中、高剂量参芍胶囊治疗,14 d后分别测定各组大鼠肾组织中ET、NO、NOS和PAI-1的含量。结果与对照组比较,模型组肾组织NO和NOS降低,ET及PAI-1升高(P<0.05)。与模型组比较,治疗组血浆NO和NOS升高,ET、PAI-1降低,其中中剂量组与模型组相比有统计学差异(P<0.05)。结论当归补血汤可以通过升高肾组织中NO、NOS及降低ET及PAI-1水平,从而改善高尿酸血症造成的肾损害。

当归补血汤及其组成单味药极性成分的研究

用HPLC／DAD分析四首当归补血汤及其组成单味药中的极性成分。对产生的二维数据借助于直观推导式演进特征投影法(HELP)来分辨以得到每个组分的纯色谱和光谱,根据纯组分的色谱保留时间和光谱信息,在当归补血汤中确定当归、黄芪的时应成分。结果发现,四首当归补血汤对应于其组成单味药,均有不同程度成分消失的情况。此外通过定量比较四首当归补血汤中的对应组分,找到了每首复方的显著性成份,并发现当归补血汤中部分组分的质量百分含量随当归配比的不同呈规律性变化。

当归补血汤中黄芪对小鼠造血功能的影响

目的:研究补气药黄芪在配伍应用中自身是否具有补血的功效。方法:昆明种小鼠采用6Gy60Coγ射线全身亚致死量照射,于照射当日开始给药,分别在辐射后1d、3d、7d、14d、21d采小鼠尾静脉血,测外周血白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板。结果:当归低剂量组、当归高剂量组、补血汤低剂量、补血汤高剂量组均有升高白细胞的作用。结论:黄芪自身具有一定的补血功效,尤其在升高白细胞方面效果明显。

当归补血汤对高眼压兔视网膜神经节细胞凋亡的抑制作用

目的在眼压得到一定程度控制情况下观察当归补血汤对实验性高眼压兔视网膜神经节细胞凋亡的抑制作用。方法用04%的复方卡波姆前房注射造成兔实验性高眼压模型。39只兔分入正常组、Timolol组(T)、Timolol加中药组(TC)和高眼压未治疗组(EP)。观察4、6、8周后处死,制作病理切片,通过计数凋亡视网膜神经节细胞数和其超微结构变化评估当归补血汤对凋亡的抑制作用。结果MG-P-MY标记的切片凋亡视网膜神经节细胞数TC组为067±082(个/张),明显低于T组4±212(个/张)和EP组529±304(个/张,P<001);TUNEL-N末端标记凋亡的视网膜神经节细胞数数正常组和给药组之间差异无显著性,但明显低于EP组(P<001);视网膜神经节细胞的超微结构TC组细胞变性程度明显轻于T组和EP组,仅见部分细胞器轻度扩张,未见凋亡的典型改变。结论在眼压得到一定程度控制情况下当归补血汤对实验性高眼压所致的视网膜神经节细胞的凋亡具有抑制作用。

当归补血汤对实验性高眼压兔视网膜神经节细胞保护作用的研究

目的 观察当归补血汤对实验性高眼压兔眼压得到一定程度控制情况下视网膜神经节细胞(retinalganglioncells ,RGCs)保护作用。方法 用 0 4 %的复方卡波姆前房注射造成兔实验性高眼压模型。分成 4组 ,正常组、Timolol组、Timolol加中药组、高眼压未治疗组。观察 4、 6、 8周后处死 ,制作视网膜病理切片 ,图像分析仪计数视网膜铺片RGCs数及视网膜神经纤维层 (retinalnervefiberlayer ,RNFL)厚度。结果 联合给药组RGCs数 75 7 89± 134 74 (个 /mm2 ) ,明显高于高眼压未治疗组 4 33 2 9± 119 6 6 (个/mm2 ,P <0 0 1)。联合给药组RNFL厚度 31 2 8± 2 0 1(μm) ,与正常组之间差异无显着性 ,但明显高于高眼压对照组 (P <0 0 1)和噻吗心安组 (P <0 0 5 )。结论 在眼压得到一定程度的控制下 ,当归补血汤可以提高RGCs存活率 ,减轻RNFL损害 。

当归补血汤对小鼠造血功能和生长性能的影响

本文主要研究当归补血汤对免疫抑制小鼠造血功能和免疫功能的影响。用环磷酰胺(Cy)构建小鼠免疫抑制病理模型,然后分别给正常小鼠和环磷酰胺所致免疫抑制小鼠饮服自制中药免疫调节剂——当归补血汤、玉屏风口服液及黄芪多糖,检测参试药物对不同免疫状态下的小鼠血液学指标如白细胞计数(WBC)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)以及体重、脾脏指数、肝脏指数的影响。结果显示:当归补血汤、玉屏风口服液和黄芪多糖对正常小鼠的血液学指标(WBC、RBC、HGB、PLT)及肝、脾指数没有显著影响,但对Cy造模小鼠的血液学指标有一定程度的恢复作用,且当归补血汤效果优于玉屏风口服液和黄芪多糖(P<0.05),但均未能使WBC、RBC、HGB、PLT值恢复到正常水平(P>0.05);各免疫调节剂对Cy造成的小鼠增重减少和脾脏萎缩有明显的抵抗作用,且当归补血汤可将脾脏的损伤恢复到正常水平(P<0.05);各免疫调节剂均不能将体重的增加恢复到正常水平,且对肝脏肿大无明显拮抗作用。

参苓白术散联合当归补血汤治疗慢性肾衰竭脾气虚证临床疗效观察

目的:探讨参苓白术散联合当归补血汤治疗慢性肾衰竭脾气虚证的临床疗效。方法:选取50例慢性肾衰竭脾气虚证患者,随机分为两组。对照组患者给予参苓白术散治疗,实验组患者在对照组治疗基础上加服当归补血汤,比较两组患者治疗前后中医证候积分及治疗效果。结果:两组患者治疗前中医证候积分组间比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后中医证候积分组内比较差异有统计学意义(P<0.01)。实验组患者总有效率为88.0%,优于对照组的80.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:参苓白术散联合当归补血汤治疗慢性肾衰竭脾气虚证可显著改善患者中医证候症状,提高治疗效果,其效果优于单独服用参苓白术散。

当归补血汤抑制慢性青光眼大鼠视网膜神经节细胞凋亡

目的观察当归补血汤对慢性高眼压模型大鼠视网膜神经节细胞(retinalganglioncells,RGCs)凋亡的抑制作用。方法应用烧灼巩膜静脉的方法制作大鼠慢性高眼压模型。50只SD大鼠分入正常组、Timolol组(T)、Timolol加中药组(TC)和高眼压未治疗组(EP)。观察4、6、8周后处死,制作病理切片,计数凋亡视网膜神经节细胞数。结果TC组凋亡RGCs数为1.01±0.55(个/张),明显低于T组5.1±0.74(个/张)和EP组7.28±0.44(个/张,P<0.01);TUNEL-N末端标记凋亡的RGCs数在正常组和给药组之间无显著性差异,但明显低于EP组(P<0.01)。结论当归补血汤对实验性高眼压所致的RGCs的凋亡具有抑制作用。

应力刺激联合当归补血汤治疗下肢骨干粉碎性骨折的临床疗效

目的:分析下肢骨干粉碎性骨折采取应力刺激联合当归补血汤治疗的临床疗效。方法:选取2014年1月—2015年1月行内固定手术治疗的92例下肢骨干粉碎性骨折,按治疗方式的不同,将接受应力刺激治疗的46例患者作为对照组,将接受应力刺激联合当归补血汤治疗的46例患者作为观察组,随访1年,对两组患者的骨折愈合情况及VAS评分进行统计对比。结果:观察组骨折愈合率为91.3%(42/46),高于对照组73.9%(34/46),差异有统计学意义(P<0.05);观察组治疗6个月、12个月VAS评分、踝关节Mazur评分、膝关节Karlstrom评分均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:对下肢骨折粉碎性骨折患者的治疗,采取应力刺激联合当归补血汤治疗可改善患者骨折愈合,缓解患者的疼痛,在临床中具有良好的应用价值。

五苓散合当归补血汤治疗骨折后四肢肿胀随机平行对照研究

[目的]观察五苓散合当归补血汤治疗骨折后四肢肿胀疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将80例门诊患者按随机数字表方法分为两组。均局部制动,抬高患处。对照组40例20%甘露醇250mL,1次/d,静滴。治疗组40例五苓散合当归补血汤(猪苓、茯苓、泽泻各12g,白术15g,桂枝12g,黄芪60g,当归、泽兰、防已各12g);肿胀有瘀瘢,脉涩,舌暗红加桃仁、红花、丹皮各15g;上肢肿胀重用白术至20g,加桔梗、桑白皮各15g;下肢肿胀加厚朴9g,牛膝15g;气滞有纳少便溏,面色萎黄,舌淡胎白脉胖大加木香15g;肢体寒凉,怕冷,舌白脉弱加肉桂12g,附子3g。1剂/d,水煎服,早晚两次温服。连续治疗7 d为1疗程。观测临床症状、肿胀程度、不良反应。连续治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组显效18例,有效20例,无效2例,总有效率95.00%;对照组显效14例,有效18例,无效8例,总有效率80.00%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。[结论]五苓散合当归补血汤治疗骨折后四肢肿胀效果显著,值得推广。

玉屏风散合当归补血汤加味治疗产后面瘫例析

治疗1例产后7天左侧面瘫,治宜大补气血,顾护卫气,祛邪外出,方用玉屏风散合当归补血汤加味。指出:两方均有提高机体免疫力的作用。

当归补血汤调控骨髓造血机理及对造血微环境的影响

目的探讨当归补血汤调控骨髓造血的机理。方法 50只ICR小鼠随机分为5组,每组10只。除正常组外其他组小鼠连续腹腔注射多柔比星4 mg·kg^(-1)·d^(-1),共3 d,正常组给予同等体积的生理盐水。注射多柔比星3 d后,当归补血汤低、中、高剂量组分别连续腹腔注射补血汤5、15、25 g·kg^(-1)·d^(-1),共7 d,正常组和模型组给予同等体积的生理盐水。给药结束制备骨髓单细胞悬液,体外培养观察骨髓基质细胞生长状态,流式细胞仪检测骨髓细胞增殖和黏附情况。结果当归补血汤组骨髓基质细胞生长状态好于正常组和模型组,骨髓细胞之间的聚集明显。模型组聚集细胞数占总细胞比例为(4.00±1.10)%,低于正常组[(3.07±2.35)%],但无显著差异(P>0.05)。当归补血汤低、中、高剂量组聚集细胞数目占总细胞数比例分别为(5.40±2.91)%、(7.36±2.32)%和(9.27±3.35)%,均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。正常组G2期细胞比例高于其他四组(P<0.05),当归补血汤各剂量组G2/M期细胞比例与模型组比较无显著差异(P>0.05)。结论当归补血汤可能通过改善基质细胞的状态、增强骨髓细胞之间的黏附来改善骨髓造血微环境。

当归补血汤半仿生提取工艺研究

目的:优选当归补血汤的半仿生提取工艺。方法:仿制人工胃液和人工肠液作为提取溶剂,固定提取温度(37℃)和提取溶剂(人工胃肠液),采用均匀设计4因素5水平试验方案,以乙酰苯肼致小鼠血虚模型和限食加力竭致小鼠气虚模型为研究对象,筛选基于补血作用和补气作用的当归补血汤半仿生最佳提取工艺。结果:在提取温度(37℃)、提取溶剂(人工胃肠液)相同的情况下,当归补血汤半仿生提取最优工艺为第1次提取人工胃液用量8倍、第1次提取时间3.0h、第2次提取人工肠液用量7倍、第2次提取时间4.0h。结论:以药效学指标结合化学指标综合评价和优选的提取工艺,方法简便易行,较适用于生产实践。

当归补血汤经TGF-β1/Smad2通路对Ang Ⅱ诱导肥大心肌细胞的保护机制研究

目的:研究当归补血汤对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导H9C2肥大心肌细胞的保护作用及机制,探讨其与转化生长因子β1(TGF-β1)及下游分信号Smad2信号通路的关系。方法:体外培养细胞,用α-actin抗体免疫组化法鉴定心肌细胞;采用10-7mol/L AngⅡ诱导H9C2心肌细胞肥大,通过检测心肌细胞蛋白含量及心钠素(ANF)mRNA表达以验证心肌细胞肥大模型;在模型建立成功的基础上利用逆转录聚合酶链反应RT-PCR法测定不同浓度(5%、10%、15%、20%)当归补血汤含药血清对肥大心肌细胞ANF mRNA表达的影响,选取最佳干预浓度;将心肌细胞分组为空白对照组、10-6mol/L AngⅡ模型组、10-7mol/L AngⅡ模型组和10%含药血清组,镜下观察各组细胞形态,并利用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组TGFβ1/Smad2信号通路相关蛋白TGFβ1、Smad2表达与活化情况。结果:鉴定细胞符合心肌细胞特征;与空白对照组相比,10-7mol/L AngⅡ模型组心肌细胞蛋白含量与ANFmRNA表达均显著增加,说明10-7mol/L AngⅡ诱导H9C2心肌细胞肥大模型建立;10%、15%当归补血汤含药血清浓度组较模型组ANF mRNA表达显著减少,10%当归补血汤含药血清组ANF表达降低更为明显;形态学观察,AngⅡ模型组心肌细胞密度和形态增大,漂浮细胞增多;10-6mol/L、10-7mol/L AngⅡ模型组较空白对照组TGF-β1、Smad2蛋白表达均显著增多,10%当归补血汤含药血清组较10-6mol/L、10-7mol/L模型组TGF-β1、Smad2蛋白表达均显著减少。结论:当归补血汤含药血清具有抗心肌细胞肥大的作用,其保护机制可能与调控心肌细胞TGF-β1/Smad2信号通路有关。