豆蔻明对慢性热应激儋州鸡脏器系数、血清生化指标、抗氧化能力及炎性因子的影响

【目的】研究旨在探讨豆蔻明(CDN)对慢性热应激儋州鸡脏器系数、血清生化指标、抗氧化能力及炎性因子的影响。【方法】试验选取200只1日龄儋州鸡母鸡,随机分为5组,分别为对照组(CON),热应激组(HS),豆蔻明低(L-CDN)、中(M-CDN)和高剂量组(H-CDN),每组4个重复,每个重复10只鸡。CON和HS组饲喂基础饲粮,L-CDN、M-CDN、H-CDN分别在基础饲粮中添加50、100、200 mg/kg豆蔻明。试验期42 d,预试期21 d,正试期21 d。正试期间,HS、L-CDN、M-CDN、H-CDN组每天09:00~16:00饲养温度为(36±2)℃,其余时间饲养温度维持在(25±2)℃,CON组饲养全天温度维持在(25±2)℃。42 d时从每个重复选取2只体重接近的儋州鸡屠宰。采集血液制备血清,检测生化指标、抗氧化指标和血清炎性因子指标;采集肝脏、脾脏、胸腺及法氏囊等器官,计算脏器系数。【结果】(1)M-CDN、H-CDN组儋州鸡血清中谷丙转氨酶(ALT)显著低于HS组(P<0.05),L-CDN、M-CDN、H-CDN组鸡血清中谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量显著低于HS组(P<0.05),且除H-CDN组TG含量显著低于CON组外(P<0.05),其余均与CON组无显著差异(P>0.05)。(2)与HS组相比,M-CDN和H-CDN组儋州鸡法氏囊指数显著上升(P<0.05),H-CDN组儋州鸡脾脏指数显著上升(P<0.05),3个试验组肝脏指数均显著降低(P<0.05),且均与CON组无显著差异(P>0.05)。其中,M-CDN、H-CDN组的法氏囊指数显著高于L-CDN组(P<0.05),H-CDN组的脾脏指数显著高于L-CDN、H-CDN组(P<0.05)。(3)与HS组相比,3个试验组儋州鸡血清丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05),M-CDN组儋州鸡血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和H-CDN组儋州鸡血清SOD、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均显著提高(P<0.05),且均与CON组无显著差异(P>0.05);3个试验组儋州鸡血清总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0.05),但仍显著低于CON组(P<0.05)。M-CDN、H-CDN组的SOD活性显著高于L-CDN组(P<0.05),H-CDN组的CAT、GSH-Px活性显著高于L-CDN、M-CDN组(P<0.05)。(4)与HS组相比,3个试验组儋州鸡血清白细胞介素-1β(IL-1β)含量均显著降低(P<0.05);M-CDN、H-CDN组儋州鸡血清IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均显著降低,IL-10含量显著升高(P<0.05),且均与CON组无显著差异(P>0.05),3个试验组间差异均不显著(P>0.05)。【结论】饲料中添加豆蔻明可以对热应激儋州鸡部分血清生化指标起到调节的作用,促进免疫器官的发育,增强机体免疫能力,缓解热应激带来的肝脏损伤,提高机体抗氧化能力,改善热应激诱导的免疫应激及炎症,儋州鸡慢性热应激豆蔻明推荐添加剂量为200 mg/kg。

基于模糊数学模型研究儋州黄皮鸡的制备工艺

以鸡肉和黄皮叶为主要原料,运用模糊数学感官评价模型,通过单因素试验和正交试验,研究黄皮叶添加量、食盐添加量、腌制时间、蒸煮时间对黄皮鸡感官品质及评价的影响,以确定黄皮鸡制作的最佳工艺参数。结果表明,黄皮叶添加量8%,食盐添加量0.5%,腌制时间20 min,蒸煮时间45 min,可得到色泽淡黄、气味清香、鲜嫩爽滑、滋味鲜美、富有弹性、既有鸡肉香味又有黄皮叶清香的黄皮鸡;最佳工艺黄皮鸡成品营养成分测定用卡路里分析仪检测,检测结果为能量含量820 kJ/100 g,蛋白质21.8 g/100 g,脂肪10.8 g/100 g,碳水化合物2.9 g/100 g,水分63.5 g/100 g。

添加黄秋葵对儋州鸡生长性能、屠宰性能、肉品质及消化酶活性的影响

试验旨在研究儋州鸡日粮中添加黄秋葵对其生长性能、屠宰性能、肉品质及消化酶活性的影响。选用健康、体重相近的90日龄儋州公鸡120只,随机分为5组,每组3个重复,每个重复8只鸡。对照组饲喂基础日粮,Ⅰ~Ⅳ组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%、2.0%黄秋葵粉。试验期28d。结果显示:与对照组相比,Ⅰ~Ⅲ组平均日增重显著提高(P<0.05),料重比显著降低(P<0.05),Ⅳ组与对照组相比差异不显著(P>0.05);与对照组相比,Ⅱ、Ⅲ组屠宰体重、屠宰率、全净膛率、半净膛率、胸肌重均显著提高(P<0.05),Ⅰ组除屠宰体重显著高于对照组外(P<0.05),其余指标与对照组间差异均不显著(P>0.05),Ⅳ组各指标与对照组相比差异均不显著(P>0.05);Ⅰ~Ⅲ组滴水损失率、剪切力显著低于对照组(P<0.05);熟肉率、肌肉pH显著高于对照组(P<0.05);Ⅱ、Ⅲ组胰腺、十二指肠、空肠中胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性均显著高于对照组(P<0.05),Ⅳ组除脂肪酶活性显著高于对照组外(P<0.05),其余与对照组间差异均不显著(P>0.05)。结果提示,在基础日粮中添加黄秋葵粉的适宜比例为1.5%,可有效改善儋州鸡的生长性能、屠宰性能、肉品质及消化酶活性。

儋州鸡和文昌鸡肌肉氨基酸和脂肪酸含量比较研究

为比较海南省两个地方鸡品种(儋州鸡、文昌鸡)胸肌和腿肌氨基酸和脂肪酸含量,试验选取1日龄文昌鸡和儋州鸡雏鸡各50只(公母各半),在相同的营养水平和管理条件下饲养,随机抽取165日龄儋州鸡和文昌鸡各20只(公母各半),分别测定胸肌、腿肌氨基酸和脂肪酸含量。结果表明:儋州鸡与文昌鸡胸肌、腿肌各项氨基酸、必需氨基酸(EAA)、氨基酸总量(TAA)、必需氨基酸/氨基酸总量(EAA/TAA)以及鲜味氨基酸(FAA)差异均不显著(P>0.05)。儋州鸡胸肌十五碳酸(C15∶0)(P<0.01)、腿肌十二碳酸(C12∶0)(P<0.05)、十七碳酸(C17∶0)(P<0.05)显著高于文昌鸡,文昌鸡胸肌、腿肌二十二碳五烯酸(C22∶5)极显著高于儋州鸡(P<0.01),其余各项脂肪酸、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)含量在两个品种间差异均不显著(P>0.05)。结果表明,儋州鸡与文昌鸡肌肉,风味和营养价值基本一致。

儋州鸡和文昌鸡屠宰性能和肉品质比较研究

为比较海南省两个地方品种鸡(儋州鸡、文昌鸡)的屠宰性能和肉品质特点,本试验选取1日龄文昌鸡和儋州鸡雏鸡各50只(公母各半),在相同的营养水平和管理条件下饲养,165日龄时,随机抽取儋州鸡和文昌鸡各20只(公母各半),分别测定其屠宰性能和肉品质。结果表明:儋州鸡活体重、屠体重、全净膛重、胸肌率均显著低于文昌鸡(P<0.05),屠宰率、全净膛率及腹脂率差异不显著(P>0.05)。胸肌与腿肌pH_(45min)、pH_(24h)、滴水损失、剪切力、干物质和粗脂肪差异均不显著(P>0.05),说明儋州鸡与文昌鸡相似,具有较好的肉质特性。

不同羽色儋州鸡鸡蛋品质、营养成分和激素含量的比较分析

该试验对较受消费者欢迎的2种羽色(麻羽、黑羽)儋州鸡鸡蛋的蛋品质、营养成分和激素含量进行比较分析。研究表明:2种羽色儋州鸡鸡蛋在蛋重、蛋形指数、蛋壳强度、蛋壳厚度和哈氏单位等方面指标均无显著差异(P>0.05);黑羽儋州鸡鸡蛋的蛋白高度高于麻羽儋州鸡,差异极显著(P<0.01);麻羽儋州鸡鸡蛋的蛋黄比率高于黑羽儋州鸡,差异显著(P<0.05);2种羽色鸡蛋的常规营养成分(粗灰分、粗蛋白、粗纤维和粗脂肪)、常量元素(钙、磷)和胆固醇、生长激素、瘦素、胰岛素等激素含量均无显著差异(P>0.05);麻羽儋州鸡鸡蛋蛋清中卵磷脂含量高于黑羽品系,差异显著(P<0.05);麻羽儋州鸡鸡蛋蛋清中雌二醇和孕酮含量高于黑羽品系,差异极显著(P<0.01)。结果表明,两种羽色儋州鸡蛋品质和营养价值基本一致。

不同羽色儋州鸡鸡肉营养成分和血清激素含量的测定分析

为了对比不同羽色(麻羽、黑羽)儋州鸡鸡肉营养成分和血清激素含量的差异,试验采用《食品安全国家标准》推荐的方法分别对其胸肌、腿肌的常规营养成分和钙、磷含量进行测定,使用酶联免疫分析试剂盒分别对其1周龄、6月龄血清激素含量进行测定,并比较分析测定结果。结果表明:两种羽色儋州鸡胸肌和腿肌常规营养成分(粗灰分、粗蛋白、粗脂肪和粗纤维)和钙、磷含量接近,均差异不显著(P>0.05);两种羽色儋州鸡血清胆固醇和瘦素含量在1周龄和6月龄时差异不显著(P>0.05)。1周龄时,黑羽儋州鸡血清卵磷脂和生长激素含量极显著高于麻羽儋州鸡(P<0.01),雌二醇含量显著高于麻羽儋州鸡(P<0.05),黑羽公鸡孕酮和胰岛素含量极显著高于麻羽公鸡(P<0.01);6月龄时黑羽儋州鸡母鸡生长激素含量极显著高于麻羽儋州鸡母鸡(P<0.01)。说明两种羽色儋州鸡的营养价值接近,而雏鸡激素含量略有不同。

儋州鸡鸡冠形态差异与BMP2、CHADL蛋白表达关联性分析

为研究儋州鸡鸡冠形态差异和发育与BMP2、CHADL基因的蛋白水平表达关系及变化规律,探索其对儋州鸡鸡冠生长发育的调控作用机制。通过免疫印迹(Western Blot)试验方法,对儋州鸡不同冠型(单冠和玫瑰冠)、不同发育阶段(2、4、5、6月龄)、不同性别(公鸡、母鸡)的鸡冠组织进行BMP2、CHADL基因蛋白水平的表达分析(每组各取5只儋州鸡鸡冠组织重复样本)。结果表明:儋州鸡公鸡的单冠和玫瑰冠组织中BMP2蛋白表达在2、4、6月龄的表达趋势均为由高到低再到高,玫瑰冠组织中差异显著;而CHADL蛋白表达呈上升趋势,但差异不显著;2月龄公鸡单冠组中BMP2蛋白表达水平低于玫瑰冠,4、6月龄则高于玫瑰冠,差异均不显著;2、6月龄公鸡单冠组织中CHADL蛋白表达水平低于玫瑰冠,而4月龄高于玫瑰冠,差异均不显著。性成熟中期(5月龄)儋州鸡公鸡和母鸡单冠组织中BMP2、CHADL蛋白表达水平均高于其在玫瑰冠组中的表达,且BMP2蛋白在公鸡2冠型组织间的表达差异显著,2种蛋白在母鸡2冠型组织间差异均不显著;性成熟中期相同冠型鸡冠组织中公鸡的BMP2蛋白表达水平均低于母鸡,且玫瑰冠中差异显著;CHADL蛋白表达水平在性成熟中期不同性别和不同冠型间表达差异不显著。儋州鸡鸡冠形态的差异和发育阶段的不同与BMP2、CHADL基因的蛋白水平表达有一定的关联性,其中BMP2较为显著。BMP2基因的表达量与儋州鸡鸡冠冠型大小和生长月龄呈负相关,可能在调控鸡冠发育上存在抑制作用,其调控作用在性成熟期间较为显著,并且主要体现在公鸡群体中。

不同羽色儋州鸡生长曲线拟合与分析研究

为研究儋州鸡生长发育规律和各阶段的生长速度,本试验采用Gompertz、Logistic和Bertalanffy 3种非线性模型对黑色羽系和麻花色羽系儋州鸡0～18周龄体重生长数据进行拟合和分析,选取黑色羽系、麻花色羽系儋州鸡各200只(公、母各半),分别于0、2、4、6、8、10、12、14、16和18周龄晨饲前空腹称重并记录,并利用3种非线性模型对儋州鸡生长曲线进行拟合比较分析。结果显示,2种羽色儋州鸡实测生长曲线基本一致,接近于"S"型,符合正常生长发育规律,2种不同羽色儋州鸡母鸡0～18周龄的体重实测值差异不显著(P>0.05),公鸡0～16周龄的体重实测值差异不显著(P>0.05),而16～18周龄麻花色羽系公鸡体重显著高于黑色羽系公鸡(P<0.05)。3种非曲线模型拟合度(R2)均在0.992以上,均能较好地拟合2个羽系儋州鸡的生长曲线,且模型的预测曲线与实际观测曲线基本吻合,但Gompertz模型曲线吻合度高于Logistic和Bertalanffy模型曲线,且母鸡比公鸡拟合效果好。本研究结果初步揭示了儋州鸡的生长发育规律和各阶段的生长特征,可为儋州鸡选育、生产和产业化发展提供科学依据。

基于线粒体DNA D-loop区全序列分析儋州鸡遗传多样性及其起源进化关系

为了研究儋州鸡的遗传多样性及其起源进化关系,本研究对36只儋州鸡样品的线粒体DNA(mtDNA) D-loop区全序列进行PCR扩增和测序,结合GenBank中公布的部分品种鸡的mtDNA D-loop区全序列,利用生物信息学方法进行数据处理,分析儋州鸡的遗传多样性及其起源进化关系。结果显示,儋州鸡mtDNA D-loop区扩增片段长度为1 210 bp,A+T含量为59.9%,C+G含量为40.1%,变异区在167～1 215 bp之间,高变区主要集中在167～367 bp之间,存在6种单倍型,共有20个变异位点,单倍型变异度(Hd)为0.571,平均核苷酸差异(k)为6.449,核苷酸多样度(Pi)为0.00537,中性检验的Tajima’s D值为1.61643,6种单倍型可分为A、B、C 3个世系,以B世系为主。研究结果表明,儋州鸡群体遗传多样性和单倍型多样性相对偏低,结合群体构建的系统进化树发现,儋州鸡的遗传组成来自3个母系祖先,缅甸红原鸡、爪哇红原鸡及红原鸡海南亚种均是其潜在的祖先,受外来鸡种影响较小,是一个较为封闭的原始鸡种。

儋州鸡不同产蛋时期生殖激素分泌规律的研究

为研究儋州鸡不同产蛋时期生殖激素的分泌规律,采用ELISA方法对儋州鸡母鸡开产前期、开产期、产蛋高峰期及产蛋后期4个时期血液中促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)、催乳素(PRL)、孕酮(P)、雌二醇(E_2)的浓度进行测定。结果显示,开产期与产蛋高峰期FSH与LH浓度极显著高于开产前期和产蛋后期(P<0.01);不同产蛋时期血液中PRL浓度呈上升趋势,且开产前期和开产期PRL浓度显著低于产蛋后期(P<0.05);不同产蛋时期血液中E_2浓度呈下降趋势,且产蛋后期E_2浓度显著高于开产前期和开产期(P<0.05),极显著高于产蛋高峰期(P<0.01);开产期与产蛋后期P的浓度较高,均显著高于开产前期(P<0.05),且极显著高于产蛋高峰期(P<0.01)。研究表明,儋州鸡在不同产蛋时期血液中生殖激素含量水平有不同的变化,开产期血液中FSH、LH及P浓度较开产前期明显升高;产蛋高峰期血液中FSH与LH的浓度高于其他时期;产蛋后期血液中PRL、E_2、P的浓度较产蛋高峰期明显上升,且负反馈调节FSH与LH的分泌量。

儋州鸡胸肌肉色性状全基因组关联分析

为挖掘影响地方鸡肉色性状的有效SNP位点及功能基因,给儋州鸡育种工作提供有效的数据基础和理论支撑,利用10×深度全基因组重测序技术对200只儋州鸡个体的肉色性状数据进行全基因组关联分析。结果显示,与肉色性状相关的全基因组和潜在显著水平的SNP位点分别为6个和13个,分别位于儋州鸡1、2、4、5号和Z染色体。通过KEGG通路分析和GO注释,预测ACAA2、ACSS3基因可作为儋州鸡肉色性状的重要候选基因。这些结果将为儋州鸡的育种提供候选分子标记,为地方鸡标记辅助选择提供新的思路。

儋州鸡体尺性状全基因组关联分析

【目的】挖掘影响地方鸡体尺性状的有效SNP位点及功能基因,给儋州鸡育种工作提供有效的数据基础和理论支撑。【方法】共采集200只儋州鸡血样并提取基因组DNA,利用10×全基因组重测序技术获得全基因组SNP标记并对试验个体基因型进行分型。使用EMMAX软件基于混合线性模型对70日龄的儋州鸡体尺性状(胫长、胫围、体斜长、胸宽、髋骨宽、胸深、龙骨长)进行全基因组关联分析。【结果】共发现与胫长性状和胫围性状基因组水平显著相关的SNPs位点有12和8个,与胫长性状相关SNPs分别定位于1、2、4和8号染色体上;与胫围性状相关的SNPs定位于2、4、8和13号染色体上。预测与胫长相关的候选基因为KCNA1、TPK1、EZH2、FSTL5和AMY2A基因,与胫围相关的候选基因为TPK1、FSTL5、AMY2A、TGFBI、LECT2和IL-9。通过KEGG通路分析和GO注释发现,8个基因参与钾离子跨膜转运、硫胺素新陈代谢、细胞增殖、钙离子结合、骨骼肌卫星细胞维持与骨骼肌再生、细胞受体相互作用、生长因子活性等生物学进程。【结论】本研究发现了20个与儋州鸡体尺性状关联的SNPs位点,并筛选到8个目标性状候选基因,为儋州鸡育种提供候选的分子标记,为地方鸡标记辅助选择提供新的思路。

不同来源色素添加剂对儋州鸡生长性能和皮肤着色效果的影响

试验旨在研究饲粮中添加不同来源色素添加剂对儋州鸡生长性能、屠宰性能及皮肤着色效果的影响。选用210只体重相近的150日龄儋州鸡,随机分为7组,每组5个重复,每个重复6只鸡。对照组儋州鸡饲喂基础饲粮,Ⅰ组和Ⅱ组分别在基础饲粮中添加10 mg/kg加丽素红+20 mg/kg加丽素黄、20 mg/kg加丽素红+40 mg/kg加丽素黄,Ⅲ组和Ⅳ组分别在基础饲粮中添加100、200 mg/kg姜黄提取物,Ⅴ组和Ⅵ组分别在基础饲粮中添加500、1 000 mg/kg万寿菊提取物。试验期28 d。结果显示,与对照组相比,各试验组儋州鸡生长性能和屠宰性能差异不显著(P>0.05)。试验第28 d,Ⅱ组和Ⅵ组儋州鸡背部皮肤的黄度(b*)值显著高于对照组(P<0.05),Ⅱ组儋州鸡腹部皮肤的b*值显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,Ⅳ组儋州鸡的腹脂率显著降低(P<0.05)。研究表明,饲粮中添加3种色素添加剂均可不同程度地提高儋州鸡背部和腹部皮肤着色。

利用微卫星标记分析儋州鸡等5个地方种群遗传多样性

为了研究儋州鸡与文昌鸡、黎凤鸡、昌江霸王山鸡和北京油鸡等不同地方鸡种群体的遗传多样性及遗传距离,促进海南地方鸡儋州鸡的遗传资源保护和开发利用,试验利用STR分型技术选取15个微卫星位点,对5个群体共240只个体进行遗传多样性检测。结果表明:儋州鸡的平均有效等位基因数(Ne)为2.76个,期望杂合度(He)为0.644 6,多态信息含量(PIC)为0.584 7,其他4个种群中,文昌鸡的Ne、He和PIC最高(3.00、0.650 5和0.597 5),北京油鸡最低(2.66、0.588 2和0.524 3);遗传距离和系统聚类结果显示,5个鸡群体聚为3类,儋州鸡和昌江霸王山鸡2个群体为一类,文昌鸡和黎凤鸡为一类,北京油鸡为一类。说明儋州鸡与霸王山鸡种间遗传关系较近,与其他品种遗传关系较远。

促卵泡素和促黄体生成素对儋州鸡生殖激素调控规律的研究

为研究促卵泡素(FSH)和促黄体生成素(LH)对儋州鸡体内其他生殖激素的调控规律,本试验通过改变FSH和LH在儋州鸡血液中的浓度,并采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)对处理前后儋州鸡血液中FSH、LH、催乳素(PRL)、孕酮(P)、雌二醇(E2)的浓度进行测定。结果发现,注射外源性FSH和LH分别能提高儋州鸡血液中FSH和LH浓度;当儋州鸡血液中FSH或LH浓度显著升高时则均能引起PRL浓度显著降低(P<0.05),但当FSH和LH浓度同时显著升高时,PRL浓度显著升高(P<0.05);当儋州鸡血液中FSH浓度显著升高时,E2及P浓度显著提升(P<0.05),且在高浓度LH的协同下提升幅度更大;当儋州鸡血液中LH浓度显著升高时E2及P浓度升高但不显著(P>0.05)。本研究结果表明,儋州鸡血液中FSH或LH浓度的提高均能降低PRL的浓度,并能不同程度的提升E2及P的浓度,但FSH与LH浓度同时提高则能通过协同作用刺激E2及P浓度的大幅提升,当E2及P浓度过高时能通过刺激PRL的释放,负反馈调节血液中FSH与LH,并恢复血液中E2及P浓度。

儋州鸡FSHβ基因的单核苷酸多态性研究

为了研究儋州鸡FSHβ基因单核苷酸多态性（SNP）,试验采用PCR产物直接测序法,对60份儋州鸡DNA样本的FSHβ基因进行PCR扩展和双向测序,对测序结果组装后使用DNAMAN软件进行比对,人工核对后筛查SNP位点。结果表明：PCR扩增均能得到与预期相符的清晰条带;测序结果与GenBank中登录的原鸡FSHβ序列比对显示,为儋州鸡FSHβ基因的片段;SNP位点筛查显示,儋州鸡FSHβ基因中含有25个SNP位点,即C-130T、A-332C、T-439C、G-591A、C-956A、G-1 233A、G-1 386C、G-1 466A、T-1 542C、T-1 543A、C-1 703T、C-1 714T、T-1 834C、A-1 867G、A-1 960C、C-2 021T、G-2 285T、G-2 399T、T-2 528C、A-2 536G、T-2 607C、G-2 770A、A-3 229G、-665处插入AA及-2 566处缺失C,这25个SNP位点包含了5个内含子突变和20个外显子突变,其中G-591A和G-1 233A为编码区错义突变。