利用16S rRNA基因克隆文库技术分析德昌水牛瘤胃产甲烷菌的多样性

选取3头5岁左右的健康雌性德昌水牛作为试验动物,采用机械破壁法提取瘤胃内容物总DNA,用产甲烷菌特异性引物Met86F/Met1340R扩增16S rRNA基因,构建16S rRNA基因克隆文库,分析德昌水牛瘤胃产甲烷菌区系组成。结果表明：试验共获得99个16S rRNA基因序列,RDP分析表明94.2%的序列为甲烷短杆菌属（Methanobrevibacter）16S rRNA序列,按照97%的相似性划分为19个分类操作单元,其中96个序列（17个OTUs）占总序列的97.0%,与已知细菌的16S rRNA序列的相似性≥97%；3个序列（2个OTUs）占总序列的3.0%,与已知细菌16S rRNA序列的相似性为90%～97%；系统发育树分析表明,SGMT簇序列和RO簇序列所占总序列的比例分别为75.8%、1.0%,部分序列与Methanobrevibacter中任何已知相似序列都相隔较远,它们可能代表Methanobrevibacter中新的种。以上结果表明,德昌水牛瘤胃产甲烷菌以Methanobrevibacter产甲烷菌为优势菌群,其中有许多未培养的产甲烷菌需进一步分离培养,并对其功能进行分析。

德昌水牛与杂交水牛乳生化组成的分析

对德昌水牛、广西水牛×尼里拉菲水牛F1代乳生化组成进行了分析。结果表明:德昌水牛及F1代乳中蛋白质、乳脂含量和pH较高;SDS-PAGE分析显示德昌水牛及F1代乳蛋白中乳清蛋白比例高,而酪蛋白相对含量低于普通牛乳;德昌水牛乳中的氨基酸含量显著高于杂交水牛和普通牛。

德昌水牛母牛体重体尺的相关性与回归分析

对德昌水牛95头生长发育母牛的体重与体尺指标进行相关分析,得出其体重与胸围、体长的相关系数达到0.9209和0.5788;经逐步回归分析法建立了最优回归方程:体重(y)=-737.381+432.772×胸围+262.598×体斜长,为早期考察德昌水牛生长发育情况提供了依据。

应用STR基因座及mtDNA D-Loop区遗传标记联合进行中国德昌水牛单亲亲权鉴定

为了研究短串联重复序列(STR)基因座在亲权鉴定中的亲子关系相对概率及mtDNA D-Loop区遗传标记在单亲亲权鉴定中的应用,试验采用PCR技术扩增3头水牛BM2934、BM1862、ETH225、BM1818、INRA035、BM2113、CSRM60、TGLA227共8个STR基因座DNA,STR扩增产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳检测并计算单亲亲权指数(PI)和亲子关系相对概率(RCP),同时扩增3头水牛mtDNA D-Loop区基因片段并进行测序分析。结果表明:2头嫌疑后代中c1与母水牛m亲子关系概率为99.960 6%,两者mtDNA D-Loop区基因序列一致率为100%;微卫星基因座与mtDNA D-Loop区遗传标记检测结果一致,嫌疑后代c1为母水牛m的后代。说明STR基因座与mtDNA D-Loop区遗传标记均可用于单亲亲权鉴定,两种方法相结合提高了亲权鉴定的稳定性、准确性、灵敏度,鉴定范围更广,样品要求更低。

德昌水牛夹竹桃中毒的诊治

夹竹桃为有毒的常绿灌木,其叶、树皮及种子均有毒。德昌水牛误食红花夹竹桃叶中毒很少见,迄今尚无特效解毒方法。我们诊治的病例,采用综合治疗措施,取得了良好的治疗效果。

德昌水牛类群结构分析

为了全面了解和考察德昌水牛的品种现状,笔者对98头德昌水牛育成母牛的体重、体尺性状指标进行了聚类分析。结果表明,德昌水牛性状离散差异性大,且明显分为4种类群,群体中具有一定比例的优良群体,存在可选性。