ABIN蛋白家族结合泛素链与A20参与调控NF-κB的影响与意义

1 ABIN概述ABIN蛋白家族包含ABIN1、ABIN2、ABIN3三种蛋白,这三种蛋白都显示出有限的序列同源性：含有同源区域AHD1和泛素交联区域UBAN（图1）。AHD1可介导ABIN蛋白与A20相结合,UBAN可介导ABIN与泛素相交联,通过ABIN结合泛素、A20编辑泛素的方式来抑制NF-κB的活化,这体现出了ABIN蛋白家族的同一性。

TNIP1基因及其编码蛋白ABIN1在进行期寻常型银屑病中的表达及意义

目的研究TNFα诱导蛋白3相互作用蛋白1(TNFα-induced protein 3-interacting protein 1,TNIP1)mRNA及其编码蛋白在进行期寻常型银屑病患者体内的表达水平,探讨其在银屑病发病机制中的意义。方法研究分为两组,病例组为2011年10月至2012年4月我院皮肤科收治的进行期寻常型银屑病患者25例,男性13例,女性12例,年龄(33.0±8.3)岁;健康对照组为我院体检中心健康人群共25例,男性14例,女性11例,年龄(31.3±9.9)岁。通过荧光定量PCR和Western blot检测TNIP1 mRNA及其编码蛋白ABIN1在病例组和对照组外周血淋巴细胞中的表达,免疫组化染色法检测ABIN1蛋白在患者皮损和健康对照者皮肤中的定位和表达。结果病例组外周血淋巴细胞中TNIP1 mRNA的相对表达量(0.292 1±0.101 6)显著低于健康对照组(1.085 9±0.266 3)(P<0.05),ABIN1蛋白在病例组外周血淋巴细胞中的表达(0.093 2±0.003 9)与健康对照组(0.290 9±0.057 8)相比也有显著差异(P<0.05)。ABIN1蛋白主要表达在健康对照者皮肤的表皮层,且主要表达在细胞核外,病例组皮损中ABIN1蛋白的表达明显减少。结论银屑病患者TNIP1 mRNA及其蛋白的低表达可能与银屑病的发生、发展有密切的联系。

泛素特异性肽酶22诱导胰腺癌细胞对吉西他滨耐药的观察

目的:探讨泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)在胰腺癌吉西他滨耐药中的作用。方法:采用Western blot检测吉西他滨诱导不同胰腺癌细胞株对USP22表达情况的影响。利用胰腺癌SW1990亲本细胞株,构建吉西他滨耐药细胞株SW1990/Gem及USP22siRNA稳定表达细胞株(表示为SW1990-sh USP22、SW1990/Gem-sh USP22);采用CCK-8实验检测抑制USP22表达对胰腺癌细胞吉西他滨敏感性的影响。结果:1μmol/L或10μmol/吉西他滨诱导人胰腺癌PANC-1和SW1990细胞后,USP22表达均增高(P<0.05或P<0.01)。耐药细胞株SW1990/Gem中USP22蛋白表达显著高于SW1990亲本细胞株(P<0.01)。USP22 siRNA稳定表达细胞株SW1990-sh USP22,SW1990/Gem-sh USP22中USP22蛋白表达水平与相应对照组SW1990-NC,SW1990/Gem-NC相比,分别显著下调约65%(P<0.01)和60%(P<0.01)。SW1990-NC组和SW1990-sh USP22组对吉西他滨的IC50分别为(1 850.96±87.37)nmol/L和(534.83±49.68)nmol/L,差异具有统计学意义(P<0.01)。SW1990/Gem-sh USP22组对吉西他滨的IC50为(2 157.08±120.32)nmol/L,与SW1990/Gem-NC组(29 850.96±345.78)nmol/L相比,差异具有统计学意义(P<0.01);与SW1990-NC组(1 387.58±96.56)nmol/L相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:吉西他滨可诱导胰腺癌细胞USP22表达增高。抑制USP22表达可增加胰腺癌细胞对吉西他滨的药物敏感性,并可有效逆转胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药。本研究揭示胰腺癌细胞对吉西他滨耐药的新机制,为改善胰腺癌个体化化疗方案提供新思路。

辅助治疗与新辅助治疗在胰腺癌治疗中的作用

胰腺癌是一种高度恶性的肿瘤.在西方国家中,胰腺癌是恶性肿瘤中的第4位死亡原因,而且胰腺癌的手术切除率低.所以胰腺癌的综合治疗显得尤为重要.胰腺癌的术前的新辅助治疗与术后的辅助治疗是治疗胰腺癌的重要组成部分.通过胰腺癌的辅助治疗,可以提高胰腺癌患者的生存时间与生活质量.而胰腺癌的新辅助治疗则可以降低胰腺癌临床病期缩小原发病灶及转移的淋巴结,为无手术条件的患者提供手术的可能,提高根治性手术的切除率.减少术中出血和术后并发症.提高患者的术后生存率与生活质量.本文简要介绍了胰腺癌辅助治疗与新辅助治疗的方法.

伊马替尼通过上调A20抑制Jurkat T细胞NF-κB通路

目的研究伊马替尼(imatinib)对Jurkat T细胞中A20、A20结合的核因子κB抑制物1(ABIN1)表达的影响。方法用(25、50、100)nmol/L imatinib处理Jurkat T细胞24 h,应用实时定量PCR检测A20、ABIN1、核因子κB(NF-κB)的mRNA水平,Western blot法检测A20、ABIN1、NF-κB蛋白水平。结果佛波酯/离子霉素混合物刺激Jurkat T细胞,可明显上调ABIN1和A20的mRNA和蛋白的表达。Imatinib明显抑制Jurkat T细胞ABIN1、NF-κB mRNA和蛋白的水平,上调A20 mRNA和蛋白水平。结论 Imatinib通过上调A20水平抑制NF-κB通路激活,该作用不需要ABIN1参与。

矿用救生舱舱门设计

主要对矿用救生舱舱门进行研究。针对目前矿用救生舱舱门密封不好、抗冲击强度低、隔热效果差等问题,设计一种抗冲击能力强,气密、水密性能良好并能快速开启的救生舱舱门。

小鼠源性ABIN1蛋白的抗体制备及功能验证

目的制备小鼠源性A20结合核因子κB活化抑制蛋白1(A20 binding inhibitor of NF-κB activation 1,mABIN1)的多克隆抗体并进行功能验证,利用该抗血清对大鼠脑区ABIN1的分布进行验证。方法利用mABIN1片段与钥孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)耦联得到的肽段为免疫原,免疫新西兰大耳白兔3次,共35 d,获得抗血清,分别用ELISA、蛋白免疫(Western)印迹和免疫组织荧光化学法对抗体的特异性进行验证;使用上述验证所得的特异性抗血清,通过Western印迹检测ABIN1在大鼠各脑区的分布;对所得到的特异性抗血清进行纯化。Western印迹证明,纯化后的抗体杂带较纯化前明显降低,但效价也有所下降。结果与结论成功制备了兔抗小鼠ABIN1抗血清并对抗血清进行纯化,经该抗血清首次验证ABIN1在大鼠嗅球、皮质、海马、纹状体、伏隔核、丘脑、下丘脑、小脑、脑干及脊髓等中枢神经系统不同部位均有广泛分布,为在动物体内进行ABIN1生物学功能研究提供了有利工具。

p15^INK4B甲基化与骨髓增生异常综合征患者预后及地西他滨疗效的关系

目的通过检测初诊骨髓增生异常综合征（MDS）患者p15^INK4B甲基化水平，观察地西他滨治疗前、后p15^INK4B甲基化状态变化，探讨p15“啪甲基化水平与预后的关系及其对地西他滨疗效的影响。方法261例初诊MDS患者，其中男143例，女118例，中位年龄52（32—78）岁。低危组172例（低危104例、中危-168例），高危组89例（中危-252例、高危37例）。收集患者骨髓单个核细胞，采用甲基化特异性PCR（MSP）检测p15^INK4B甲基化水平，按p15^INK4B甲基化程度对患者进行生存分析。采用MSP方法分别检测58例MDS患者地西他滨治疗前及治疗2个疗程后骨髓p15^INK4B甲基化水平，分析p15^INK4B甲基化对地西他滨疗效的影响。结果低危组患者p15^INK4B甲基化水平明显低于高危组患者（117．22对157．63，P〈0．05）。p15^INK4B甲基化阳性患者2年预期生存（OS）率低于阴性患者（69．8％对91．8％，P〈0．05）；在低危组，p15^INK4B甲基化阳性患者2年预期OS率低于阴性患者（78．2％对92．0％，P〈0．05）；在高危组，p15^INK4B甲基化阳性患者OS率及中位0S时间与阴性患者比较差异无统计学意义[35．6％对38．5％，（17．0±9．3）个月对（18．0±5．7）个月，P〉0．05]。COX分析结果显示p15^INK4B甲基化水平是OS时间的独立预后因素。治疗前p15^INK4B甲基化阳性组患者地西他滨治疗的总反应率及完全缓解率与阴性组比较差异无统计学意义（65．9％对76．5％，22．0％对29．4％，P〉0．05）。地西他滨治疗有效组p15^INK4B甲基化水平在治疗前、后差异无统计学意义（P〉0．05）。结论初诊时p15^INK4B甲基化水平高的MDS患者生存时间更短，但p15^INK4B甲基化水平对地西他滨疗效无明显影响。

简化调强放疗同步卡培他滨治疗直肠癌术后复发临床观察

目的:观察直肠癌术后复发患者简化调强放疗(sIMRT)同步卡培他滨化疗的近期疗效和不良反应。方法:33例直肠癌术后复发患者均行sIMRT〔先行盆腔淋巴引流区及直肠周围放疗(45～50)Gy/(25f.5w),复发病灶局部加量18～20Gy,(1.8～2.0)Gy/次,5次/周,总剂量达63～70Gy〕,并同步卡培他滨化疗(1 000mg/m2,从放疗第1天开始,连服14d,休息7d为1个周期,放疗期间口服2个周期)。放疗结束后行同方案巩固化疗2个周期。结果:全部患者均完成治疗,33例患者中CR 5例(15.2%),PR 20例(60.6%),NC 6例(18.2%),PD 2例(6.1%),总有效率75.8%。血清CEA下降50%并维持≥1个月者21例(84.0%)。治疗后临床症状改善和明显好转29例(87.9%)。主要不良反应是血液学毒性、消化道反应、急性膀胱炎和手足综合征等,均可耐受。结论:调强放疗联合卡培他滨同步化疗治疗直肠癌术后复发患者,不良反应轻,近期疗效确切,值得在临床上进一步探讨应用。