多模态影像学方法评估布依药鹿角壮骨煎液的骨折疗效

目的 运用多模态影像学方法评估布依药鹿角壮骨煎液的骨折疗效。方法通过手术方式制作新西兰白兔左下肢胫骨中下段骨折模型30只,随机分成实验组15只给予布依药鹿角壮骨煎液灌胃治疗,对照组15只给予等量0.9%生理盐水灌胃治疗。在造模后当天、第7d、15d、21d、30d、42d随机选择2只模型兔分别行常规DR摄片、常规CT及双能量CT扫描,并对CT扫描数据行冠矢状位及骨髓成像后处理,对比不同影像学方法对实验组及对照组骨折端的对显示情况。结果与对照组比较,实验组在X平片、CT平扫、双能量骨髓成像评估中均有统计学差异(P>0.05),且CT平扫结合双能量骨髓成像对骨折愈合评估更加敏感、准确;对于骨折治愈周期比较,实验组较对照组愈合周期明显缩短,7天时间点骨折的修复评分较对照组提高97.3%。结论布依药鹿角壮骨煎液可促进骨痂生长,缩短骨折病程,且CT平扫结合双能骨髓成像对骨折愈合的评估更加敏感、准确。

鹿茸标准鉴别技术进展研究

鹿茸是一种具有重要药用价值的中药材,具有多种功效和广泛的临床应用。然而,由于市场上出现了大量的假冒伪劣产品,对鹿茸的鉴别技术的研究变得十分重要。本文综述了近年来鹿茸的鉴别技术进展,包括传统的鉴别方法以及现代分子生物学和化学分析技术等。同时,还对当前鹿茸鉴别技术的挑战和未来发展方向进行了讨论。

基于单细胞转录组测序的鹿茸生长中心细胞异质性研究

为了从单细胞水平探究梅花鹿鹿茸生长中心中细胞类型和基因表达的差异,即细胞异质性,试验采用单细胞转录组测序的方法,对生长75 d的梅花鹿鹿茸生长中心进行单细胞转录组分析,鉴定细胞类型,并对不同类型细胞进行基因表达模式、基因功能富集分析。结果表明:鹿茸生长中心包含了内皮细胞、周细胞、间充质细胞、免疫细胞、软骨细胞和成骨细胞等6种细胞类型,其中内皮细胞特异性表达PECAM1和VWF基因;周细胞特异性表达ABCC9和KCNJ8基因;间充质细胞高表达PRRX1和POSTN基因;免疫细胞特异性表达PTPRC和LCP1基因;成骨细胞特异性表达PHEX基因;软骨细胞特异性表达IGF1R基因。说明鹿茸的生长中心有着丰富的细胞类型,鹿茸的生长发育需要这些细胞的协调作用。

不同光照时长对麋鹿茸生长和繁殖季的溢出效应

光周期可影响鹿角脱落和新茸再生,麋(Elaphurus davidianus)冬至解角,冬季持续的光照时长改变对鹿茸生长速度、角形态发育及夏季的繁殖溢出效应尚未见相关报道。依托北京麋鹿苑2018年出生的同父异母雄性麋鹿12头,于2021年11月—2023年3月进行光照时长处理实验,依次分组为:自然光照(对照组)、缩短光照2h、延长光照3h和6h;记录实验麋鹿解角日期,红外测量新茸再生速度,测定脱落的麋角形态参数,并持续追踪记录翌年发情期等级序位、打斗、交配、繁殖绩效等参数。结果显示:持续缩短2h光照(6L∶18D)使麋鹿解角日期、角主干总长度、单角重量分别较对照组(8L∶16D),提前(8.5±0.4)d、缩短2.93cm(P<0.01,n=3)、减轻9.81g(P<0.01,n=3);延长3h光照(10L∶14D)使麋鹿解角日期、角主干总长度、单角重量分别较对照组(8L∶16D),推迟(10.5±0.3)d、增长5.47cm(P<0.01,n=6)、增加18.64g(P<0.01,n=6);延长6h光照(12L∶12D)使麋鹿解角日期、角主干总长度、单角重量较对照组(8L∶16D),分别推迟(13.5±0.6)d、增长10.43cm(P<0.01,n=6)、增加44.31g(P<0.01,n=6)。光照时长对麋角切片重量的影响差异极显著(P<0.01,n=6),缩短2h光照(6L∶18D)使麋角切片重量较对照组(8L∶16D)减轻(0.1230±0.0561)g/片;延长光照3h(10L∶14D)、6h(12L∶12D)使麋角切片重量较对照组(8L∶16D)分别增加(0.1200±0.0318)g/片、(0.3133±0.0618)g/片;冬季延长光照可明显增加夏季雄性麋鹿的交配机会和爬跨时长,增加发情持续天数、累积持续时间,增加查验母鹿发情、维护领地和圈群次数,提高交配成功率。综上所述,麋角脱落与光照时长之间密切相关,冬季持续光照时长变化对麋角脱落日期及繁殖产生了溢出效应,其机理仍需进一步研究,结果可为今后开展不同光照对麋角脱落及新茸再生多样化的分子调控机制研究提供理论支撑,可指导鹿科动物鹿茸产量提高、育种、保护与可持续发展。

基于中红外光谱技术结合化学计量学对假冒和掺假梅花鹿茸粉的快速鉴别

目的基于中红外光谱技术结合化学计量学方法,建立梅花鹿茸粉快速鉴别模型,识别假冒及掺假梅花鹿茸粉。方法采集黑龙江、吉林、辽宁3省梅花鹿茸、马鹿茸、驯鹿茸样品,整只粉碎,得梅花鹿茸粉、马鹿茸粉、驯鹿茸粉样品各60份,并按照质量百分比5%、10%、20%、40%、60%和80%将驯鹿茸粉掺入到梅花鹿茸粉中,获得掺假梅花鹿茸粉样品60份,共计240份样品。样品进行红外光谱扫描,采用K-S法划分样本;利用5种光谱预处理方法结合支持向量机建模,确定最优光谱预处理方法;应用竞争性自适应重加权算法、连续投影算法提取光谱特征信息;建立支持向量机、随机森林、极限学习机识别模型,比较各方法建模效果,确定最优识别模型。结果各样品组红外光谱略有差异,其中纯梅花鹿茸粉组在1029 cm^(-1)附近多糖C-O伸缩振动吸收较强,纯驯鹿茸粉组在3310 cm^(-1)附近氨基酸N-H伸缩振动吸收较强;纯马鹿茸粉组在1659 cm^(-1)附近蛋白质C=O伸缩振动吸收最弱,而各掺假组样品在此波长的红外吸收随着掺假比例增加而增强。多元散射校正-连续投影算法-支持向量机模型对训练集和测试集的识别率均为100%,且仅需11个特征吸收波长点即可完成建模,识别准确率最高,鉴别速度最快,为最佳识别模型。结论中红外光谱结合化学计量学方法可准确、高效、无损的鉴别出假冒、掺假的梅花鹿茸粉。

影响麋鹿茸分枝和角重量的年龄因素分析

角是反刍动物有别于其他动物的明显特征(Wang et al.,2019)。与牛科动物、羊科动物的洞角不同,鹿角为实心骨质、可年度周期性脱落、其分枝和重量受到众多因素的影响,是鹿类保护、养殖、育种领域关注的焦点问题(Bowyer,1991)。幼鹿每增长1岁,角增加1个分枝;角直径和重量也随之增加(夏志强等,2023);同一年龄组同一个体的不同阶段,茸生长速度和重量增加也不相同(Hassanin et al.,2012;李春义,2017;夏志强等,2023);鹿茸软骨与机体其他软骨组织不同,内有血管(鲍加荣等,2008;Chen et al.,2019),可供给茸生长所需的营养(Clements et al.,2010;Lin et al.,2019);血管内皮生长因子(Vascular endotheli‐al growth factor,VEGF)的含量变化对鹿茸的生长速度、茸直径、分枝数、分枝方向及角重和形态发育有重要影响(Clark et al.,2006)。

鹿角脱盘物质基础及药理研究进展

鹿角脱盘作为鹿茸、鹿角的附属产物,一直以来未得到有效的开发利用,浪费较大。历年来其被《中华人民共和国药典》按中药材鹿角收载,但实际二者之间的物质基础、药理毒理等差别较大,不能混为一谈。鹿角脱盘的主要活性成分为多肽类,未来的研究方向为靶向生物小分子多肽方向。此研究认为鹿角脱盘多肽对乳腺癌、乳腺增生、乳腺炎及骨质疏松等疾病的治疗效果较佳。目前市面上尚无鹿角脱盘相关产品,根据乳腺疾病及骨质疏松症治疗药物的发展现状及前景分析,尤其建议研发鹿角脱盘多肽缓释乳房透皮吸收制剂及相关医疗器械等,市场潜力较大。

鹿茸对去卵巢小鼠子宫生长的影响

[目的]观察鹿茸对雌性去势小鼠子宫生长的影响。[方法]雌性小鼠去卵巢10 d后,随意分为对照组和实验组。实验组用鹿茸冻干粉每天以2、6和18 mg剂量连续给去卵巢小鼠灌胃14 d,对照组分为阴性对照组和阳性对照,阴性对照组为去卵巢组;阳性对照以20μg剂量的雌激素连续灌胃14 d,应用子宫/体重比值和子宫外径的测定以及HE染色来观察鹿茸对雌性去势小鼠子宫的形态学改变。[结果]子宫/体重比值,去卵巢组、2、6和18 mg组分别是(0.82±0.05)、(0.95±0.06)、(1.12±0.10)、(1.37±0.04)mg/g,6 mg组和18 mg组与去卵巢组比较有统计学意义(P<0.05)。子宫外径去卵巢组和18 mg组分别是(0.80±0.04)、(0.97±0.06)mm,两组比较有统计学意义(P<0.05)。通过HE染色和实物照片可以观察到雌性去卵巢小鼠的子宫随着鹿茸剂量的增加而逐渐增大,子宫内膜逐渐增生,腺体逐渐增大。[结论]与去卵巢组比较实验组鹿茸有促进雌性去卵巢小鼠子宫生长的作用,并与鹿茸的剂量呈正相关。

饲粮粗蛋白质、能量水平对3岁梅花公鹿鹿茸生长和体增重的影响

为探讨 3岁梅花鹿生茸期饲粮适宜营养水平 ,本研究采用 2 (CP∶2 1%和 19% )× 2 (GE∶16 74MJ/kg和 15 90MJ/kg)二因子交叉设计 ,选用 3岁 (二锯 )梅花公鹿 6 7头 ,分为 4个试验组 ,进行了饲养试验和消化试验。试验结果表明 ,饲粮蛋白质水平对鹿体增重有显著影响 (P <0 0 5 ) ,在本试验所设能量浓度范围内 ,饲粮蛋白质水平为 19%处理组鹿体增重显著高于 2 1%蛋白组 ;鹿茸产量组间差异不显著 (P >0 0 5 ) ;饲粮粗蛋白质水平对蛋白质消化率和能量消化率均有显著影响 (P <0 0 5 ) ;3岁梅花鹿生茸期饲粮中能量、蛋白质适宜水平分别为 15 9～ 16 7MJ/kg (GE)和 19% (CP) ;平均每头鹿每天对消化能和可消化蛋白质的需要量分别为 2 9 9～ 31 3MJ和 388～ 394 g。

鹿茸多肽对心肌干细胞凋亡和线粒体膜稳定性的影响

背景:心肌干细胞在体外经鹿茸多肽诱导后可以分化为心肌细胞这一研究成果为其治疗心肌损伤提供了新思路。目的:观察鹿茸多肽对心肌干细胞凋亡和线粒体膜稳定性的影响,探讨其作用机制。方法:选取出生2 d的雄性Wistar大鼠,提取心肌干细胞,以培养皿作为实验单位,共计分为以下4组(n=12):鹿茸多肽组:使用鹿茸多肽(质量浓度为800 mg/L)进行诱导;联合组:使用5-氮胞苷(浓度为3μmol/L)和鹿茸多肽(质量浓度为800 mg/L)联合诱导;5-氮胞苷组:使用5-氮胞苷(浓度为3μmol/L)进行诱导;空白对照组:加入等量缓冲液进行诱导。诱导48 h后流式细胞仪检测心肌干细胞的凋亡率,免疫荧光检测心肌干细胞的线粒体膜电位,Western blotting方法检测心肌干细胞Nkx 2.5、GATA4、ATF-2、MEF-2C的表达水平。结果与结论:(1)细胞培养2周后,出现大量的小、圆、亮细胞,心肌干细胞集落形成;(2)与空白对照组比较,5-氮胞苷组心肌干细胞凋亡率明显升高(P<0.05),线粒体膜电位明显降低(P<0.05);与5-氮胞苷组比较,鹿茸多肽组、联合组心肌干细胞凋亡率明显降低(P<0.05,P<0.01),线粒体膜电位明显升高(P<0.05,P<0.01);(3)与5-氮胞苷组比较,鹿茸多肽组及联合组Nkx2.5的表达水平明显升高(P<0.05),各组GATA4、ATF-2表达水平不高,且差异无显著性意义(P>0.05),MEF-2C表达在中等水平,各组间差异无显著性意义(P>0.05);(4)结果表明,鹿茸多肽可降低心肌干细胞凋亡率,提高线粒体膜稳定性,其作用机制在一定程度上与提高Nkx 2.5表达有关,是否与GATA4、ATF-2、MEF-2C有关尚待进一步研究。

不同生长时期梅花鹿鹿茸转录组分析

本研究旨在探究不同生长时期梅花鹿鹿茸的转录组差异,丰富梅花鹿鹿茸转录组信息。选取5个生长时期(10、20、28、44、66d)的梅花鹿鹿茸组织作为试验样品,利用Illumina HiSeqTM2500高通量测序,并用测序评估、基因注释等生物信息学方法进行分析。结果,经过测序、转录本拼接获得了375 657条contigs,平均长度为688bp,329 946个unigenes,平均长度为534bp。通过比对Nr、Nt、Pfam、KOG/COG、Swiss-prot、KEGG、GO等7大数据库,90.07%unigenes得到了成功注释。其中39 674个(12.02%)基因成功注释到GO数据库,在level 2水平上共分为41个类别;17 732个(5.37%)基因成功注释到将KOG的26个类别中。对5个生长时期的鹿茸转录本文库进行比较分析,共发现了509个差异基因,其中407个差异表达基因成功注释到GO数据库中,主要为信号转导、氧化还原、转录调节、蛋白酶降解等生物学过程。其中转录调节基因PER1、EGR1的表达随着鹿茸的生长而增加,而GAS1则相反,随着鹿茸的生长而降低,推测PER1、EGR1、GAS1等转录因子在鹿茸生长过程中可能起着重要的调节作用。本研究利用高通量测序技术对不同生长时期的梅花鹿鹿茸组织进行了转录组测序和分析,筛选到了梅花鹿鹿茸在不同生长时期下的差异表达基因,并获得了差异表达基因的功能。

马鹿角蛋白酶解物的抗氧化、抗疲劳和免疫活性

目的:以复合蛋白酶与风味蛋白酶双酶解的马鹿角蛋白酶解物和马鹿角蛋白作为受试样品,研究样品的抗氧化、抗疲劳和免疫调节功能。方法:采用邻苯三酚自氧化法、水杨酸比色法和总还原力测定法,研究酶解物体外抗氧化的功能;通过测定酶解物灌胃小鼠的血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,分析其体内抗氧化功能;通过小鼠负重游泳、血乳酸、肝糖原测定研究酶解物的抗疲劳功能;通过ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验及小鼠碳廓清实验研究酶解物对小鼠免疫功能的影响。结果:马鹿角蛋白酶解物对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-.)均有清除能力,且高于同等质量浓度的马鹿角蛋白,总还原力与马鹿角蛋白相比也有提高;可提高小鼠血清SOD活性,降低其血清MDA含量,并明显延长小鼠负重游泳时间、降低血乳酸值和增加肝糖原含量;可显著增强小鼠的免疫功能。结论:马鹿角蛋白酶解物具有抗氧化、抗疲劳和提高免疫功能的作用,活性明显优于马鹿角蛋白。

饲粮不同能量、蛋白质水平对生茸期梅花鹿的影响

本研究采用 2 (CP:2 4和 2 2 % )× 2 (GE:4.1 5和 1 6.74MJ/kg)二因子交叉设计 ,选用1岁 (毛桃 )梅花公鹿 69头 ,分为四个试验组 ,进行了饲养试验和消化试验。试验结果表明 ,饲粮能量、蛋白质水平对鹿体增重的互作效应显著 (P<0 .0 5) ,饲粮粗蛋白质水平对蛋白质消化率有极显著的影响 (P<0 .0 1 )。 1岁梅花鹿生茸期饲粮中能量、蛋白质适宜水平分别为1 7.37MJ/kg GE、2 2 .44% CP。平均每头鹿每天对能量和蛋白质的需要量分别为 36.84MJGE和 478g

东北马鹿乌兰坝品种鹿茸化学成分分析报告

经对东北马鹿乌兰坝品种三杈带血茸上、中、下３段的３种化学成分分析，结果表明，鹿茸上段氨基酸含量较高为５８００％，牛黄酸含量００６％，钙、磷分别为２３９％和４８０％，钙磷比为０５０∶１；中段氨基酸含量４９８０％，牛黄酸含量００４％。钙、磷分别为１０５９％和５６０％，钙磷比例为１８９∶１；下段氨基酸含量４２６０％，牛黄酸含量００２％，钙、磷分别为１３１２％和６３０％，钙磷比为２０８∶１。上、中、下３段平均值为：氨基酸５０１３％，牛黄酸００４％，钙、磷分别为８０７％和５５７％，钙磷比１５６∶１。东北马鹿乌兰坝品种鹿茸所测的３种生化指标明显优于东北马鹿的，比清原品系马鹿茸的稍好，但次于东·天马鹿茸的。

梅花鹿IGF1全长cDNA克隆及在鹿茸组织的表达

为了检测梅花鹿鹿茸组织IGF1基因的mRNA表达水平,利用TRIzol试剂法分别提取鹿茸真皮、间充质、前软骨和软骨组织总RNA,逆转录合成cDNA。根据GenBank已发表的相关序列设计梅花鹿IGF1基因特异引物并克隆IGF1基因,将IGF1基因DNA序列递交GenBank,并利用相对荧光定量Real-time PCR法检测IGF1在鹿茸顶端不同部位组织的转录表达丰度。研究结果表明:成功获得了梅花鹿鹿茸组织IGF1基因全长编码区cDNA(GenBank登录号为HQ890468),该基因长465 bp,编码154aa长度的多肽;与马鹿、牛、羊、马、猪、人和小鼠IGF1基因进行同源性分析显示,IGF1基因与马鹿、牛和羊同源性最高,核苷酸序列分别为99.78%、98.28%和97.85%;氨基酸序列分别为99.35%、98.05%和97.40%。相对荧光定量PCR差异分析发现,IGF1基因在鹿茸顶端不同部位组织均有表达。其中,在前软骨和软骨组织的表达水平明显高于真皮和间充质组织。

三岁梅花鹿生茸期日粮中适宜钙、磷含量水平的研究

为探讨三岁梅花鹿生茸期日粮中适宜的Ca、P水平，选择45只健康和生茸正常的梅花鹿，采用3个日粮处理水平组（Ⅰ：0．60％Ca、0．32％P；Ⅱ：0．89％Ca、0．52％P；Ⅲ：1．17％Ca、0．71％P）进行对比饲养试验和茸血化验分析。试验结果表明：以鹿茸产量和鹿茸于鲜比为主要依据，三岁梅花鹿生茸期日粮中适宜的Ca、P水平分别为0．89％和0．52％；日粮Ca、P水平对锯茸时鹿茸血清中的Ca含量有影响，而对P的含量影响不大。

梅花鹿鹿茸角生长顶端的组织结构

利用光镜和透射电镜对梅花鹿鹿茸角生长顶端的组织结构进行了观察。结果显示,梅花鹿鹿茸角生长顶端分皮肤层、间充质层、前成软骨层、过渡层和软骨层。间充质层细胞形态均一,细胞体积较小,呈梭形,细胞核呈椭圆形,核仁明显,胞质内细胞器含量极少,呈典型的幼稚性细胞形态。前成软骨层内有前成软骨细胞,前成软骨细胞体积较间充质层细胞大,呈长椭圆形,细胞核呈圆形或椭圆形,有1-2个核仁,胞质内出现较多的粗面内质网及多聚核糖体。过渡层细胞成分多样,包括前成软骨细胞和成软骨细胞;成软骨细胞体积较前成软骨细胞大,胞质内的粗面内质网和高尔基体进一步发育。软骨层内含大量软骨细胞,软骨细胞的形态极不规则,核膜也不规则,胞质内见有粗面内质网、高尔基体、游离核糖体和脂滴,线粒体极少。

鹿茸角发育与再生机理

对鹿茸角发育与再生调节机理的研究进展进行了综述,并对与鹿茸角发育与再生相关的一些生理问题进行了探讨。已确认的与鹿茸角再生关系密切的重要分子有甲状旁腺激素相关肽、视黄酸、胰岛素样生长因子等,这些物质广泛分布于芽基及快速生长的鹿茸角内,可调节软骨细胞、成骨细胞及破骨细胞的分化。由于鹿茸角再生过程与生殖周期密切相关。

梅花鹿鹿花盘对小鼠抗疲劳作用的研究

试验研究了梅花鹿鹿花盘蛋白、鹿花盘胶、鹿花盘霜对小鼠的抗疲劳作用。结果表明:鹿花盘胶和鹿花盘霜组均显著延长了小鼠游泳时间,鹿花盘蛋白组极显著地延长了游泳时间;3组均能显著降低血尿素氮含量并且极显著增加肝糖原含量;鹿花盘霜和鹿花盘蛋白组能显著增强乳酸脱氢酶活力;鹿花盘胶和鹿花盘蛋白对血乳酸含量有显著影响。梅花鹿鹿花盘具有较好的抗疲劳功能,其效果以鹿花盘蛋白为最佳。

一种新型马鹿茸多肽纯化、鉴定及体外降血糖活性

从马鹿茸干品中分离具有降血糖活性的多肽。以新疆塔里木马鹿茸干品为原料,粉碎后经醋酸-醋酸钠(p H 3.5)缓冲液浸提,再经醇沉、超滤、离子交换色谱、凝胶过滤色谱和反相色谱纯化多肽,并对该多肽进行MALDI TOF/MS相对分子质量检测和LC-MS/MS鉴定。MTT法检测促胰岛β细胞增殖和STZ损伤后修复能力以及建立肝细胞胰岛素耐受模型检测该多肽促肝细胞葡萄糖消耗量活性。结果表明,分离纯化得到的多肽CAP经MALDI-TOF/MS检测,其相对分子质量为6 804,LC-MS/MS及相关数据库比对发现,CAP为一种新的肽。CAP能显著促胰岛β细胞的增殖和STZ损伤后的修复,并能显著增加肝细胞的葡萄糖摄入量。