金钗石斛中一个新的木防己毒烷型倍半萜

为了解金钗石斛乙醇提取物正丁醇部位的化学成分,通过硅胶、凝胶、反相硅胶和高效液相等各种色谱技术进行分离纯化得到3个化合物,并根据核磁共振、质谱等波谱手段确定其结构分别为2,11-epoxy-11,13-dihydroxypicrotoxano-3(15)-lactone (1)、2,4,6-三甲氧基苯-1-O-β-D-葡萄糖苷(2)和3-methylbutan-1-ol β-D-glucopyranoside (3)。其中化合物1是一个新的木防己毒烷型倍半萜,该类化合物是金钗石斛中具有代表性的倍半萜类型。所有化合物均没有α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶抑制活性,同时化合物1也没有神经保护活性。

铁皮石斛红枣枸杞复合饮料配方研究

以铁皮石斛、红枣和枸杞为原料,白砂糖、柠檬酸为辅料,通过单因素试验,考察铁皮石斛提取液、红枣汁、枸杞汁、白砂糖、柠檬酸等原料不同添加量对复合饮料感官品质的影响.采用正交试验,对复合饮料配方进行优化,确定铁皮石斛红枣枸杞复合饮料最优的配方.实验结果表明,铁皮石斛提取液25%、红枣汁25%、枸杞汁18%、白砂糖9%、柠檬酸0.04%为铁皮石斛复合饮料的最佳配料比,按此配方制备的复合饮料呈淡黄色,组织均匀质地细腻,无沉淀分层,酸甜可口,风味协调柔和,具有铁皮石斛、红枣、枸杞特有的混合香味,感官评分最高.

铁皮石斛花乌龙茶复合饮料制备工艺研究

随着消费者对健康饮品需求的日益增长,复合饮料因其丰富的营养价值和独特的口感而受到广泛关注。铁皮石斛花和乌龙茶作为传统的中草药和茶叶,具有多种保健功能。现代研究表明乌龙茶具有降血脂、抗氧化、减脂减肥、消炎抑菌、提神、利尿等功效。基于此,本文主要根据铁皮石斛花特有的功效与作用,以铁皮石斛花为原料,通过相应的技术流程加工方法步骤而制成铁皮石斛花乌龙茶复合饮料,旨在探索铁皮石斛花与乌龙茶复合饮料的制备工艺,为开发新型健康饮品提供参考。

基于网络药理学探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病的作用机制及实验验证

目的结合网络药理学方法和实验验证探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病(ALD)的作用靶点及潜在机制。方法借助TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库及文献报道检索复方鲜石斛颗粒的化学成分,利用Swiss ADME数据库筛选优效目标化合物,并通过Swiss Target Prediction数据库对活性成分靶点进行预测。通过GeneCards、OMIM、DrugBank、DisGeNET数据库获取ALD相关疾病靶点,采用String数据库和Cytoscape软件构建靶点相互作用网络图(PPI)及“中药-活性成分-靶点-疾病”网络图,将预测的潜在作用靶点通过DAVID数据库进行GO/KEGG功能富集分析预测作用机制。构建酒精性肝损伤小鼠模型,通过病理染色、ELISA检测、qPCR及Western blot来验证网络药理学富集分析结果。结果通过数据库及文献报道共筛选获得73个关键活性成分,与ALD交集靶点有720个,根据P<0.05,FDR<0.05的GO注释分析得到789个BP信息,93个CC信息,204个MF信息,194个KEGG信号通路,主要涉及代谢过程、PI3K/Akt信号通路、MAPK信号通路、cAMP信号通路、钙信号通路等。体内实验表明,与对照组相比,模型组小鼠肝细胞索排列紊乱,肝小叶界限不清,肝细胞出现明显炎性细胞浸润和脂肪空泡,血清中ALT、AST活力,肝组织TG、TCHO含量及IL-1β、CXCL10、Srebp-1c的基因表达水平显著升高,CPT1基因表达水平显著降低,炎症通路蛋白p-AKT、p-mTOR、p-p65蛋白表达水平升高。复方鲜石斛颗粒治疗后,小鼠肝细胞炎性细胞浸润和脂肪空泡数量减少,肝脏恢复正常细胞结构,血清中ALT、AST活力,肝组织TG、TCHO含量及IL-1β、CXCL10、Srebp-1c的基因表达水平显著降低,CPT1基因表达水平显著升高,同时p-AKT、p-mTOR、p-p65蛋白表达水平也显著降低。结论复方鲜石斛颗粒能有效改善酒精性肝损伤小鼠的肝脏炎症和脂质代谢,并可能通过调节PI3K/Akt信号通路抑制组织炎症。该研究初步揭示了复方鲜石斛颗粒防治ALD的作用机制,为临床用药和后续研究提供参考依据。

铁皮石斛发酵乳游离氨基酸及挥发性风味物质成分分析

通过SPME-GC-MS和氨基酸分析仪对不同添加量的铁皮石斛发酵乳的游离氨基酸含量和挥发性风味物质进行研究,通过相关性分析、主成分分析和TAV呈味特征对游离氨基酸进行分析,采用气味活度值(ROAV)确定了主体风味物质。结果表明,游离氨基酸种类不变,含量有所不同,大多数游离氨基酸指标间有较强的相关性,Glu对铁皮石斛发酵乳呈味有较大贡献,通过主成分分析提取出两个主成分,主成分1为99.90%,主成分2为0.04%,足以反映各组别游离氨基酸的大部分信息。不同组别的挥发性风味物质的种类和含量差异较大,双乙酰和乙偶姻是对照发酵乳和铁皮石斛发酵乳中关键风味物质。

复方石斛总黄酮提取及活性研究

目的:以复方石斛(铁皮石斛-党参-黄芪-黄精=2∶3∶3∶2)为原料进行总黄酮的提取。方法:通过单因素实验和响应面法对提取工艺进行优化,并测定提取物体外抗氧化活性和体内降血糖活性。结果:复方石斛总黄酮的最优提取工艺条件为乙醇浓度60%,超声时间50min,液料比为35,总黄酮提取率为2.59%,测定其对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)、2,2-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(2,2-Binazo-bis-3-ethyl Benzothiazole line-6-sulfonic acid,ABTS+)、羟基自由基的半数抑制率分别为7.189μg/ml、1.288μg/ml、1.468μg/ml。采用线虫实验测定其体内降糖活性,当提取物制备成120 mg/ml的溶液时,有较好的降糖活性。结论:研究制备的复方石斛提取液具有较好的抗氧化和降糖作用。

石斛合剂对衰老糖尿病大鼠胰腺组织凋亡相关基因Bax,Bcl-2mRNA及蛋白表达的调控

目的观察石斛合剂对衰老及衰老糖尿病（DM）大鼠胰腺组织凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA及蛋白表达的影响。方法采用D-半乳糖致衰，继而加高脂高糖及注射低剂量链脲佐菌素（STZ）制备衰老DM模型，测定血清中SOD、MDA浓度，并利用RT-PCR法和Western-Blot法检测大鼠胰腺组织凋亡相关基凼Bax、Bcl-2mRNA及蛋白表达水平。结果与衰老及衰老DM组相比，石斛合剂各治疗组MDA浓度明显降低（P〈0．05），SOD浓度明显升高（P〈0．05～0．01），衰老DM石斛合剂治疗组胰腺组织BaxmRNA及蛋白水平明显降低（P〈0.05～0．01），Bcl-2mRNA及蛋白水平明显升高（P〈0．05）。结论①衰老大鼠呈现Bax／Bcl-2比值显著升高，衰老DM大鼠Bax／Bcl-2比值升高更为显著，即衰老大鼠Bax和Bcl-2mRNA及蛋白表达失衡，且这种失衡在衰老DM大鼠显得更为突出；②石斛合剂降低血糖，显著升高衰老及衰老DM大鼠SOD水平，降低MDA水平，其分子机制之一与其降低衰老DM大鼠胰腺组织Bax、增加Bcl-2 mRNA及蛋白水平，即调整Bax和Bcl-2mRNA及蛋白表达的失衡有关。

复方石斛合剂调节胰岛素受体表达促进HepG2细胞糖代谢

目的探讨复方石斛合剂增加HepG2细胞胰岛素信号促进葡萄糖代谢的机制。方法以高胰岛素培养HepG2细胞24 h,诱导胰岛素抵抗(IR)状态,继以10%复方石斛合剂的含药血清干预48 h,测定细胞6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性,RT-PCR与免疫印迹胰检测岛素受体mRNA与蛋白水平的表达。结果高浓度胰岛素能降低6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性,降低胰岛素受体的表达;复方石斛合剂的治疗能增加6-磷酸果糖激酶、异柠檬酸脱氢酶的活性(P<0.05),促进胰岛素受体的转录与翻译水平表达(P<0.05),逆转高胰岛素的下调影响。结论高浓度胰岛素可诱发IR,复方石斛合剂能增加HepG2细胞胰岛素受体的表达,提高葡萄糖分解代谢关键酶活性,缓解IR。

石斛合剂序贯法治疗糖尿病大鼠的基因和蛋白表达谱之糖代谢研究

目的:采用基因和蛋白表达谱芯片研究,观察石斛合剂序贯疗法对糖尿病大鼠糖代谢的影响。方法:选取健康雌性Wistar大鼠50只,随机分为正常组(10只)和实验组(40只),正常组给予基础饲料喂养,实验组给予高脂高糖饲料喂养16个月后腹腔注射STZ造模。将成模大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、石斛合剂序贯方组(以下简称序贯组)。相应药物连续灌胃16周后,检测大鼠FBG、INS、GLU、GSP,并行肝组织基因及蛋白芯片检测。结果:1与模型组比,序贯组FBG、GSP、GLU水平均显著下降(P<0.01)。2模型组与正常组存在差异的已知功能基因1339个(P<0.05),经石斛合剂序贯方治疗后仅存差异380个(P<0.05)。3蛋白芯片结果显示:序贯组INS、IR、IRS-1、IGF-1、PPAR-γ、Glicentin水平均较模型组升高。结论:石斛合剂序贯疗法有良好的降糖效果和综合疗效,其降糖机制可能与调节多条糖代谢通路组分的表达有关。

石斛合剂对糖尿病模型大鼠胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA表达的影响

目的研究石斛合剂对高糖、高脂+STZ造模糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡及相关基因Bax、Bcl-2mRNA表达的影响。方法大鼠高脂、高糖饲养1个月后腹腔注射STZ(30mg)制备糖尿病模型,经石斛合剂(7.5、15.0、30.0g.kg-1)治疗2周后检测胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因Bax、Bcl-2mRNA的表达。结果石斛合剂可显著地降低糖尿病大鼠空腹血糖(P<0.05或P<0.01);石斛合剂可显著减少糖尿病模型大鼠胰岛细胞凋亡(P<0.05),降低Bax mRNA表达(P<0.05),增加Bcl-2mRNA表达(P<0.05或P<0.01))。结论石斛合剂可降低血糖、减少大鼠胰岛细胞凋亡,可能与其降低糖尿病模型大鼠胰腺组织Bax、增加Bcl-2表达有关。

石斛合剂对衰老糖尿病大鼠胰腺P53表达的影响

目的:观察石斛合剂对衰老及衰老糖尿病大鼠胰腺组织凋亡相关基因P53表达的影响。方法:实验分为正常对照组、衰老模型组、衰老糖尿病模型组、石斛合剂组。除正常组外,大鼠腹腔注射D-半乳糖致衰老,继以高脂高糖加腹腔注射链脲佐菌素造成衰老糖尿病。疗程结束后测禁食血糖,及利用RT-PCR及Western-blot法检测胰腺凋亡相关基因P53 mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常对照组相比,衰老模型组大鼠禁食血糖正常(P>0.05),但衰老糖尿病及治疗组大鼠血糖均升高(P<0.05),衰老糖尿病模型组大鼠胰腺组织P53 mR-NA及蛋白水平明显升高(P<0.01～0.05);与衰老糖尿病模型组相比,石斛合剂组禁食血糖下降(P<0.05),胰腺组织P53 mRNA及蛋白水平明显降低(P<0.01)。结论:衰老糖尿病模型大鼠呈现出血糖升高,胰腺组织细胞凋亡增多;而石斛合剂可能通过抑制胰腺组织细胞的凋亡而达到降血糖的作用。

石斛合剂对db/db小鼠肝胰岛素信号通路蛋白表达的影响

目的：观察石斛合剂序贯治疗对db/db小鼠肝胰岛素信号通路蛋白基因表达的影响,探讨其调节血糖的分子机制。方法：选取12~14周龄雄性db/db小鼠,按空腹血糖及体质量随机分成模型组、二甲双胍组、石斛合剂序贯组（以下简称序贯组）;选db/m为正常对照组。连续灌胃给药共6个循环（54 d）。观察各组治疗后各组空腹血糖（FBG）、口服葡萄糖耐量（OGTT）、糖化血清蛋白（GSP）、血清胰岛素（Ins）、三酰甘油（TG）及胆固醇（Tch）,同时提取肝组织RNA,以逆转录PCR法检测胰岛素受体（InsR）、胰岛素受体底物1/2（IRS1/2）、PI3K mRNA表达水平变化。结果：与模型组比较,序贯组FBG、GSP和Ins显著下降（P〈0.05）,改善葡萄糖耐量（P〈0.05~0.01）;InsR、IRS1/2、PI3K等mRNA表达增加（P〈0.05~0.01）。结论：复方石斛合剂序贯治疗能有效降低db/db小鼠的降低高胰岛素血症,降低空腹血糖及血脂,改善葡萄糖耐量,可能与增加InsR、IRS1/2、PI3K等基因表达有关。

石斛合剂调控老年糖尿病大鼠GLP-1的研究

[目的]观察石斛合剂(DC)对老年糖尿病大鼠胰高血糖素样多肽-1(GLP-1)的影响,探讨石斛合剂治疗衰老糖尿病大鼠的作用机制。[方法]老年Wistar雌性大鼠分为正常对照组、模型组、DC低剂量组、DC高剂量组、二甲双胍对照组,检测0.5、2.5 h血清GLP-1,免疫组化法检测小肠GLP-1。[结果]DC低剂量组0.5、2.5 h GLP-1的差值低于模型组(P<0.05),DC高剂量组差值显著高于模型组(P<0.01),小肠未发现GLP-1。[结论]低剂量DC可能具有减缓GLP-1代谢的作用,高剂量DC可能具有促进0.5 h GLP-1分泌的作用。

石斛合剂对2型糖尿病模型大鼠脂肪组织内脂素基因表达的影响

目的观察石斛合剂对2型糖尿病模型大鼠脂肪组织中内脂素基因表达的影响。方法健康成年SD雌性大鼠40只,随机分为正常对照组(n=10),糖尿病模型组(n=30),模型组采用高脂高糖饮食加注射链脲佐菌素建立2型糖尿病模型,将造模成功的大鼠分为糖尿病模型组(n=12)和石斛合剂干预组(n=12),模型组按1 ml/100 g体重给予生理盐水灌胃;石斛合剂组按1 ml/100 g体重给予石斛合剂灌胃。用荧光实时定量PCR检测大鼠脂肪组织中的内脂素(visfatin)基因mRNA的表达。结果与正常组相比,模型组visfatin表达升高(P<0.01);与模型组相比,石斛合剂组visfatin表达降低(P<0.01)。结论石斛合剂可下调2型糖尿病模型大鼠脂肪组织中visfatin mRNA的表达。

糖尿病石斛合剂序贯法的初步临床观察

目的:探索临床2型糖尿病中医药序贯疗法,为临床推广应用提供中西医结合理论和实践依据。方法:选用临床确诊的2型糖尿病患者经饮食、运动和口服降糖西药控制不良,且中医辨证属阴虚热盛、气阴两虚者为研究对象,加服石斛合剂序贯1、2、3方,每次循环后复查临床中医证候、空腹血糖(FBG)、餐后血糖(2hBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血压(BP),2次循环后加测糖化血红蛋白(HbAlc)。结果:石斛合剂序贯疗法可明显改善2型糖尿病阴虚热盛、气阴两虚证者燥热、烦渴、盗汗等临床症状,且所有患者治疗后HbAlc和FBG或2hBG较治疗前至少下降10%以上,HOMA-IR、TC、TG、Bp均明显改善,与治疗前比较P均<0.01。结论:2型糖尿病属本虚(阴虚气虚)标实(热瘀浊)疾病。石斛合剂序贯疗法(滋阴清热、益气活血,清肝泄浊)不仅可有效改善患者临床症状体征,而且具有显著降低患者血糖,改善血压、调整血脂作用,方法简单易行便于临床推广应用。

石斛合剂对糖尿病模型大鼠胰高血糖素样肽-1的影响

目的:观察石斛合剂对糖尿病模型大鼠高糖负荷后胰高血糖素样肽-1(GLP-1)影响。方法:选取雌性Wistar大鼠随机分为正常对照组(n=10)和观察组(n=30),观察组予高脂高糖饲料喂养4周后腹腔注射小剂量链脲佐菌素(30mg/kg)造模,成模后随机分为模型组(n=10)、石斛合剂组(n=10)、二甲双胍组(n=10)。灌胃8周后,禁食10h行口服葡萄糖耐量(OGTT)试验,尾尖采血,用ELISA法检测血清GLP-1水平。结果:治疗8周后,与模型组比较,石斛合剂组的血糖降低(P<0.01),血清基础(0h)GLP-1水平明显升高(P<0.01),高糖负荷1h后,各组大鼠血清GLP-1水平均升高,石斛合剂组高于模型组与二甲双胍组(P<0.05),且与正常对照组无显著差异;高糖负荷2h后,石斛合剂组、正常对照组大鼠血清GLP-1水平均回落(组内比较,P<0.01),模型组与二甲双胍组则继续上升,各组间比较无差异;高糖负荷3h后,各组大鼠血清GLP-1水平均降低,石斛合剂组血清GLP-1水平较模型组高。结论:石斛合剂能有效的降低糖尿病模型大鼠血糖,增加血清GLP-1水平,其降糖机制可能是通过GLP-1及其降解产物信号途径介导。

铁皮石斛丛生芽增殖研究

为了筛选适宜铁皮石斛丛生芽增殖的不同附加物的浓度,选择适合继代增殖的丛生芽高度和接种丛生芽的株数,在相同培养条件下,将大小相同的丛生芽接种到不同浓度附加物的培养基上,不同高度和不同株数的丛生芽接种到相同的培养基上。结果表明:不同浓度附加物之间,不同高度的丛生芽之间、不同接种株数之间的增殖效果有明显的差异。

石斛合剂对衰老糖尿病模型大鼠胰岛β细胞胰-十二指肠同源盒因子1表达的影响

目的观察石斛合剂对类似人类糖尿病模型大鼠胰岛内胰岛素、胰岛β细胞特异促增殖因子胰-十二指肠同源盒因子1(PDX-1)表达的影响,为石斛合剂促进胰岛细胞功能的恢复、治疗糖尿病提供理论依据。方法采用Wistar雌性大鼠制备衰老DM模型大鼠,随机分为:衰老对照组、衰老DM模型组、衰老DM石斛合剂组(简称"石斛合剂组")、衰老DM优降糖组(简称"优降糖组"),并给予药物治疗4周,分别以免疫组化法和RT-PCR法检测胰腺组织中的胰岛素和PDX-1的表达。结果石斛合剂组和优降糖组胰岛中胰岛素的表达与衰老DM模型组相比,差异均有统计学意义(P<0.01),两治疗组之间比较差异也有统计学意义(P<0.05);与衰老对照组相比,衰老DM模型组PDX-1mRNA几乎不表达(P<0.01)。治疗后,与衰老DM模型组比较,石斛合剂组PDX-1mRNA表达显著提高(P<0.01),但未达到衰老对照组胰岛β细胞中PDX-1mRNA表达水平(P<0.01);优降糖组PDX-1mRNA只是极少量表达,与衰老DM模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论衰老DM大鼠胰岛内胰岛素和PDX-1表达明显减少,与优降糖相比,石斛合剂能够更明显促进衰老DM大鼠胰岛素和胰岛β细胞特异性促增殖基因PDX-1mRNA的表达。表明石斛合剂可能通过促进胰腺原始细胞分化增殖为胰岛β细胞,以保护胰岛β细胞功能,促进胰岛素表达而起到防治老年糖尿病的作用。

复方石斛合剂治疗2型糖尿病90例

目的观察复方石斛合剂治疗2型糖尿病(T2DM)的疗效。方法选取120例T2DM患者按空腹血糖、糖化血红蛋白、胰岛素水平分层后,分为对照组30例,治疗组90例,对照组服西药加四君子汤,治疗组服西药加复方石斛合剂,2组疗程均为90 d,治疗前后检测空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2hBG)、空腹胰岛素(Fins)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果治疗组的FBG、2hBG、HbA1c、HOMA-IR、TC、TG指标较对照组均有显著改善(P<0.05)。结论复方石斛合剂对降低T2DM患者的血糖、血脂、减轻胰岛素抵抗有确切的疗效。

石斛合剂改善模型大鼠胰岛素抵抗的实验研究

观察石斛合剂对高脂高糖加 STZ大鼠胰岛素抵抗的治疗作用 ,结果显示石斛合剂可显著降低模型大鼠血糖、胰高血糖素 ;增加胰岛素、C肽的分泌 ,抑制胰岛素降解 ;提高胰岛素敏感指数 ,抑制游离脂肪酸的分泌 ,并能显著降低肥胖的糖尿病模型大鼠的肿瘤坏死因子 -α(P均 <0 .0 1 )。提示采用高脂高糖加低剂量 STZ注射的方法可制备出较为可靠的伴胰岛素抵抗的糖尿病模型大鼠 ;石斛合剂可通过多途径多环节减轻这种糖尿病模型大鼠的胰岛素抵抗 ;游离脂肪酸 (FFA)可作为评价胰岛素抵抗 (IR)的指标 。