3种石斛兰以茎段为外植体的离体快繁技术

以肿节石斛(Dendrobium pendulum)、尖刀唇石斛(D.heterocarpum)和报春石斛(D.primulinum)的无菌茎段为外植体,通过正交试验和单因子试验,研究不定芽诱导、生根和炼苗移栽等技术,筛选出各培养阶段的适宜培养基配方和培养条件,建立3种石斛兰离体快繁体系。结果表明:适合肿节石斛和报春石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1+椰乳100 mL.L-1,诱导率分别为93.75%和90.00%;适合尖刀唇石斛不定芽诱导的培养基为1/2MS+6-BA 0.25 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1+椰乳100 mL.L-1,诱导率达到95.00%。适合肿节石斛和尖刀唇石斛生根的培养基为MS+NAA 0.5 mg.L-1+香蕉泥100 g.L-1,适合报春石斛生根的培养基为MS+NAA 0.75 mg.L-1+土豆泥100 g.L-1,生根诱导率高达100%。

尖刀唇石斛化学成分研究

本文对尖刀唇石斛(Dendrobium heterocarpum Lindl.)中的化学成分及其抗炎和抗氧化活性进行研究。实验采用硅胶、Sephadex LH-20凝胶和高效液相色谱等手段进行分离纯化,并用波谱学方法鉴定化合物结构,从尖刀唇石斛的乙酸乙酯萃取部位中分离得到15个化合物,分别鉴定为3,4′-二羟基-5-甲氧基联苄(1)、batatasinⅢ(2)、3-羟基-4′,5-二甲氧基联苄(3)、3-O-methylgigantol(4)、gigantol(5)、3,4-二羟基-4′,5-二甲氧基联苄(6)、moscatilin(7)、dendrocandin A(8)、(S)-3,4,α-三羟基-4′,5-二甲氧基联苄(9)、densiflorol A(10)、dendrocandin I(11)、dendrocandin F(12)、coelonin(13)、红花素(14)、4-羟基-2-甲氧基-3,6-二甲基苯甲酸(15)。化合物1~15均为首次从该种植物中分离得到,其中化合物14为首次从该属植物中分离得到。化合物3、5、11具有抑制小鼠RAW264.7巨噬细胞生成一氧化氮的作用;化合物5具有较好的ABTS自由基清除能力,化合物6具有较好的DPPH自由基清除能力。

尖刀唇石斛和翅梗石斛叶绿体全基因组分析

目的测定尖刀唇石斛Dendrobium heterocarpum和翅梗石斛D.trigonopus叶绿体基因组,分析其序列特征并鉴定石斛属Dendrobium植物物种间亲缘关系。方法利用Illumina Hisep 2500测序平台对尖刀唇石斛和翅梗石斛进行二代测序,经组装、注释后得到2条完整的叶绿体全基因组序列,采用生物信息学方法分析其序列结构及石斛属的系统发育关系。结果尖刀唇石斛的叶绿体全基因组总长为159786 bp,总GC含量为37.2%,共注释得到131个基因,包括88个蛋白编码基因、37个tRNA基因和6个rRNA基因;翅梗石斛的叶绿体全基因组总长为159652 bp,总GC含量为37.1%,共注释得到131个基因,包括88个蛋白编码基因、37个tRNA基因和6个rRNA基因。尖刀唇石斛和翅梗石斛分别检测到112和127个简单重复序列(SSR),二者编码亮氨酸的密码子数量最多,编码色氨酸的密码子数量最少。系统发育树显示,尖刀唇石斛、反瓣石斛D.ellipsophyllum、翅梗石斛、梳唇石斛D.strongylanthum和长距石斛D.longicornu聚为一支,翅梗石斛与梳唇石斛和长距石斛的亲缘关系十分相近,支持率达到100%。结论对石斛属2种植物的叶绿体基因组结构和系统发育关系进行了分析,该研究结果将为石斛属药用植物的准确鉴定、开发利用及其资源保护提供科学依据。