大鼠发育过程中脊髓组织CAPON与Dexras1 mRNA表达的实验研究

为探讨大鼠发育过程中神经型一氧化氮合酶羧基末端PSD-95/DLG/ZO-1（PDZ）结合配体（carboxy-terminal PDZ ligandof nNOS,CAPON）与Dexras1 mRNA的表达及二者的相关性,本实验采用大鼠发育模型,通过实时荧光定量聚合酶链式反应（Realtime-PCR）及原位杂交组织化学（ISH）与免疫组织化学相结合的技术检测脊髓组织中CAPON及Dexras1 mRNA的表达变化。结果表明：在胚胎14~18d的脊髓组织中,CAPON mRNA呈低水平表达,生后1d表达升高并达到高峰。从形态上看,表达于尚未分化成熟的前角,随后呈逐渐下降趋势。在生后12w,表达于脊髓后角。而Dexras1 mRNA在胚胎14d呈低水平表达,16~18d时表达升高,同样在生后1d出现表达高峰并定位于尚未分化成熟的前角,随后表达逐渐下降。生后12w,在后角有表达。根据Real-time PCR结果作直线相关分析,在生后脊髓发育过程中CAPON与Dexras1 mRNA表达呈高度相关,于生后1d共定位于脊髓前角。形态学结果显示CAPON与神经型一氧化氮合酶（nNOS）表达于相同细胞,但亚细胞定位不同。本研究表明,大鼠发育过程中,脊髓组织中CAPON及Dexras1 mRNA存在共表达,提示CAPON可能通过调节nNOS,进而激活Dexras1,在神经元的分化、突触的可塑性及突触发生过程中发挥一定的作用。

CAPON及其相关分子在大鼠创伤性脑损伤后的表达变化

目的:探讨创伤性脑损伤(TBI)后神经型一氧化氮合酶羧基末端PDZ配体(CAPON)及其相关分子的表达变化及定位。方法:利用实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹技术研究大鼠脑损伤后CAPON及其相关分子Daxras1、nNOS的mRNA及蛋白水平表达变化,利用免疫荧光双标技术检测脑损伤后CAPON分子的细胞定位情况。结果:大鼠TBI后1 d-3 d,CAPON分子mRNA和蛋白表达增加;Dexras1及nNOS的表达变化趋势与CAPON的相一致。在损伤区CAPON主要表达于NeuN阳性的神经元;在损伤周边皮质中,CAPON与星型胶质细胞的标记物GFAP有少量共定位;此外,CAPON在OX-42阳性的小胶质细胞中也有少量的表达。结论:创伤性脑损伤后,CAPON及其相关分子(Daxras1、nNOS)可被诱导表达,损伤神经细胞内的CAPON及其相关分子可能参与了TBI的病理进程。