IL-35、Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-35、自噬相关蛋白Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义。方法选取2022年5-10月在上海市嘉定区妇幼保健院诊治的原发性乳腺癌女性患者44例(乳腺癌组)、乳腺良性肿瘤女性患者40例(乳腺良性肿瘤组)及体检的健康者40例(健康对照组)作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测并比较各组外周血中IL-35和Beclin-1水平,同时检测乳腺癌患者糖类抗原15-3(CA15-3),比较不同临床病理特征的乳腺癌患者IL-35、Beclin-1、CA15-3水平;分析乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1、CA15-3水平之间的相关性。结果乳腺癌组和乳腺良性肿瘤组外周血IL-35水平均高于健康对照组(P<0.05),Beclin-1水平均低于健康对照组(P<0.05)。乳腺癌组外周血IL-35水平高于乳腺良性肿瘤组(P<0.05),Beclin-1水平低于乳腺良性肿瘤组(P<0.05)。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同雌激素受体(ER)检测结果的乳腺癌患者外周血IL-35水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),而Beclin-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关(r=-0.484,P<0.05);IL-35、Beclin-1水平与CA15-3水平均无相关性(均P>0.05)。结论乳腺癌患者外周血IL-35水平升高、Beclin-1水平降低。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平有明显差异。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关,而IL-35、Beclin-1水平与肿瘤标志物CA15-3水平均无关。

白介素-35在M2型巨噬细胞中的表达及其对前列腺癌细胞的增殖、侵袭和上皮间质转化的影响

目的探讨白介素(IL)-35在巨噬细胞中的表达及其对前列腺癌(PCa)细胞增殖、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响和机制。方法检测巨噬细胞标记分子CD68、M1型标记分子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β和M2型标记分子CD206、IL-10在人单核/巨噬细胞系THP-1细胞诱导分化后的M0、M1与M2型巨噬细胞中的表达。使用不同类型的巨噬细胞-源条件培养液(CM)处理PCa细胞系PC-3,并将其分为:M0-CM组、M1-CM组、M2-CM组和预先使用IL-35中和抗体(IL-35 NA)干预的M2-CM处理组(M2-CM+IL-35 NA组)。检测各组中PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT,以及细胞内JAK/STAT信号通路p-JAK2/JAK2与p-STAT3/STAT3比值的差异。结果与未刺激的THP-1细胞比较,M0、M1和M2型巨噬细胞中CD68 mRNA表达升高(P<0.01);与M0型巨噬细胞比较,TNF-α、IL-1βmRNA在M1型巨噬细胞中升高(P<0.01),而CD206、IL-10 mRNA在M2型巨噬细胞中升高(P<0.01);与M0-CM组比较,M2-CM组PC-3细胞增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值升高(P<0.05),M2-CM+IL-35 NA组PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均显著降低(P<0.05),M1-CM组PC-3细胞的增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值均无显著改变(P>0.05);与M2-CM组比较,M1-CM组和M2-CM+IL-35 NA组增殖活力、侵袭、EMT和细胞内p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3比值降低(P<0.05)。结论M2型巨噬细胞可通过分泌IL-35来促进PC-3细胞的增殖、侵袭和EMT,这可能与IL-35能上调JAK2/STAT3信号通路的活化相关。

血清白细胞介素-35表达水平与前列腺癌全雄激素阻断治疗预后的相关性分析

目的 探究血清白细胞介素-35(IL-35)表达水平与前列腺癌全雄激素阻断(MAB)患者预后的相关性。方法 收集2017年4月至2020年4月在本院接受MAB治疗的60例前列腺癌患者为研究对象。测定患者治疗前血清IL-35水平。依据随访结果,用受试者工作特征(ROC)曲线确定IL-35最佳截断值,并以此将纳入者分为低IL-35组和高IL-35组。比较2组病理特征,Kaplan-Meier生存曲线和Cox回归模型分析血清IL-35与患者预后的相关性。结果 以3年随访是否死亡为结局绘制ROC曲线,所得IL-35最佳截断值147.73 pg/ml[曲线下面积(95%CI)=0.667(0.517,0.818,P<0.001)],并以此为临界点将患者分为低IL-35组(<147.73 pg/ml)和高IL-35组(≥147.73 pg/ml)。高IL-35组中Gleason评分>7分(58%和29%)、肿瘤T分期中T4期(74%和44%)和伴淋巴结转移(68%和39%)者占比均显著高于低IL-35组(P<0.05)。KaplanMeier生存曲线显示,低IL-35组患者无进展生存(PFS)[(32±4)个月和(23±4)个月]和总生存[(32±3)个月和(24±4)个月]情况均优于高IL-35组患者(χ^(2)=11.988、8.617,P<0.05);单因素和多因素Cox回归模型分析显示,血清IL-35水平[HR值(95%CI)=1.044 (1.017,1.073)]、[HR值(95%CI)=1.035(1.006,1.064)];Gleason评分[HR值(95%CI)=2.218 (1.449,6.307)]、[HR值(95%CI)=3.056 (1.649,9.447)];临床T分期[HR值(95%CI)=2.056(1.553,5.984)]、[HR值(95%CI)=1.900(1.237,11.622)]和伴淋巴结转移[HR值(95%CI)=2.415(2.084,7.445)]、[HR值(95%CI)=4.147(1.081,15.910)]均是影响MAB治疗的前列腺癌患者无进展生存期(PFS)和总生存情况的独立危险因素(P<0.05)。结论 治疗前血清IL-35水平异常升高是影响前列腺癌患者MAB治疗预后的独立危险因素。

结直肠癌组织高表达IL-35对Th1和Th17可塑性的作用

目的 探讨结直肠癌组织中高表达的抑制性细胞因子白细胞介素(IL)-35对辅助性T细胞1(Th1)和辅助性T细胞17(Th17)可塑性的作用。方法 选取2019年3月—2020年2月上海交通大学医学院附属新华医院结直肠癌患者90例(结直肠癌组)和健康体检者28名(正常对照组)。采用流式细胞术检测结直肠癌组和正常对照组外周血Th1百分比(Th1%)和Th17百分比(Th17%)。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析γ-干扰素(IFN-γ)和IL-17A高表达对结直肠癌患者总生存期和预后不良的影响。采用免疫组化法检测结直肠癌患者癌组织和癌旁组织(距肿瘤边缘≥2 cm)中IL-35的表达。采用酶联免疫吸附试验检测结直肠癌患者和正常对照者血清IL-35水平。采用体外诱导Th1分化实验观察IL-35对Th1分泌IL-17A和IFN-γ的影响。结果与正常对照组比较,结直肠癌组Th1%显著降低(P=0.019),Th17%显著升高(P<0.001)。结直肠癌组Th1%与Th17%的r2值(0.393 4)与正常对照组(0.041 0)比较差异有统计学意义(P=0.007)。基于KaplanMeierPlotter数据库的分析结果显示,IFN-γmRNA低表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素[风险比(HR)=0.74,95%可信区间(CI)为0.58~0.94,P=0.013],IL-17A mRNA高表达是结直肠癌患者总生存期缩短的危险因素(HR=1.26,95%CI为1.02~1.59,P=0.020)。结直肠癌患者癌组织IL-35表达显著高于癌旁组织(P<0.001)。Ⅰ~Ⅱ期(早期)和Ⅲ~Ⅳ期(晚期)结直肠癌患者血清IL-35水平均显著高于正常对照者(P<0.05)。体外诱导Th1分化实验结果显示,IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。结论 结直肠癌患者外周血Th1和Th17呈异常变化,且IL-35表达增加。高表达的IL-35可降低Th1中IFN-γ表达,提高IL-17A表达。

F-35平尾喷流效应和机动性

本研究主要探讨F-35的平尾喷流效应。根据公开数据,在不高估性能的前提下,建立F-35的动力学模型并进行仿真,将仿真结果与F-35的飞行测试记录进行比较,并且和其他高机动性机型进行比较。仿真结果表明,仿真与飞行测试记录吻合,喷流效应对F-35机动性有较为明显的提升。

维生素D与达英-35联合治疗多囊卵巢综合征的临床效果观察

探究维生素D与炔雌醇环丙孕酮片(达英-35)联合使用对治疗多囊卵巢综合征(PCOS)的临床效果。方法 从2021年至2022年在临汾市人民医院生殖医学中心治疗的PCOS患者中随机选取100例进行本次研究,研究中的患者被随机分配至两组,其中对照组接受达英-35治疗,而观察组则接受维生素D联合达英-35治疗,两组各包含50例患者。在治疗前后检测患者的性激素水平,并对这些数据进行了统计学比较。结果 结果显示,治疗后,观察组性激素水平降低,(P<0.05)。结论 综上所述,联合使用维生素D与达英-35在PCOS患者中表现出显著的临床效果,相较于单独使用达英-35,观察组在改善性激素水平方面显示出更优越的水平,这种联合治疗的方法更有效的缓解了PCOS患者的症状,值得在临床上推广应用。

温肺降浊方通过Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤对PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬的影响

目的:探讨温肺降浊方通过Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤对线粒体自噬的影响。方法:通过重组大鼠β-NGF分化PC12细胞,Aβ_(25-35)干预其成为阿尔茨海默病细胞模型,确定Aβ_(25-35)造模的最佳浓度和时间点,设立温肺降浊方含药血清低(2%)、中(4%)、高(8%)浓度组。MDC染色和JC-1染色法观察自噬小体和线粒体膜电位,免疫荧光化学染色、qPCR和Western Blot检测各组细胞中PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达。结果:β-NGF分化PC12细胞在第6天后成为海马神经元细胞形态结构,AD细胞造模条件以5μmol/L终浓度的Aβ_(25-35)干预48 h最佳。与正常对照组比较,模型组自噬小体显著增多,线粒体膜电位明显降低,PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,温肺降浊方含药血清可使模型细胞自噬小体减少,线粒体膜电位明显升高,PINK1、PARKIN、Ubl、Ub、p-Ub、LC3B mRNA和(或)蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:温肺降浊方可减轻Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤,其机制可能与PINK1/PARKIN介导的线粒体自噬通路有关。

β淀粉样蛋白25-35对BV2细胞TREM2/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨不同浓度β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)对小胶质细胞髓样细胞触发受体2(TREM2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法:将BV2细胞随机分为5组,分别加入0、5、10、20、40μmol/L的Aβ25-35,作用24、48 h,镜下观察细胞形态,CCK-8法测定细胞活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达,实时荧光反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定NF-κBp65、TREM2 mRNA表达。结果:显微镜下观察干预48 h后Aβ25-35≥10μmol/L细胞成片死亡,干预24 h后,CCK-8检测显示,不同浓度Aβ25-35干预BV2细胞的存活率均>70%,ELISA和RT-PCR检测显示,Aβ25-3520μmol/L和40μmol/L组促炎因子TNF-α和TREM2 mRNA的表达均明显升高,Aβ25-3520μmol/L的NF-κB p65 mRNA表达明显升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:Aβ25-35浓度20μmol/L作用24 h,能够激活小胶质细胞发生炎症反应,可能与TREM2/NF-κB信号通路的激活有关。

IL-35下调CD36表达减少巨噬细胞内脂质积累缓解动脉粥样硬化的机制研究

目的分析冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)患者血清白细胞介素-35(IL-35)水平与血脂四项的相关性,探究IL-35抑制人髓系白血病单核细胞(THP-1)泡沫化机制。方法选取2022年6月—2023年6月在泰州人民医院就诊的疑似CHD患者154例,分为对照组和CHD组,空腹采血后用酶联免疫吸附试验检测两组血清IL-35水平,分析与血脂四项的相关性。采用油红染色和胆固醇检测试剂盒对比IL-35刺激THP-1细胞前后细胞内胆固醇含量变化;Western blotting检测CD36、SR-A、Lox-1、p38、p-p38蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链反应检测CD36、SR-A和Lox-1 mRNA的表达。结果CHD组血清IL-35水平低于对照组(P<0.05)。CHD患者血清IL-35水平与TC、LDL-C、TG呈负相关(r_(s)=-0.321、-0.218和-0.215,P=0.003、0.044和0.047),与HDL-C呈正相关(r_(s)=0.322,P=0.003)。对照组与实验组THP-1细胞2、4、6、8和10 h的荧光强度(FI)比较,结果:(1)不同时间点FI比较,差异有统计学意义(F=726.726,P=0.000);(2)实验组与对照组FI比较,差异有统计学意义(F=8.102,P=0.012),实验组FI较低;(3)两组FI变化趋势比较,差异有统计学意义(F=111.061,P=0.000)。oxLDL组和实验组CD36、SR-A、Lox-1蛋白和mRNA相对表达量均高于对照组和IL-35组(P<0.05),实验组CD36蛋白和mRNA相对表达量低于oxLDL组(P<0.05)。oxLDL组和实验组p-p38/p38蛋白相对表达量均高于对照组和IL-35组(P<0.05),实验组p-p38/p38蛋白相对表达量低于oxLDL组(P<0.05)。oxLDL组、实验组、P79350组CD36蛋白相对表达量均高于对照组(P<0.05),oxLDL组和P79350组CD36蛋白相对表达量均高于实验组(P<0.05)。结论CHD患者血清IL-35与血脂四项有相关性,IL-35可能通过抑制p38 MAPK信号通路介导巨噬细胞CD36表达下调,减少细胞内脂质。

奥利司他联合达英-35治疗肥胖型多囊卵巢综合征疗效及对患者血清性激素水平的影响

目的:探讨奥利司他联合达英-35治疗肥胖型多囊卵巢综合征(PCOS)疗效及对患者性激素、血脂、身体状况等影响。方法:选取肥胖型PCOS患者138例为研究对象,随机分为A组和B组各69例,A组以奥利司他联合达英-35治疗,B组以二甲双胍联合达英-35治疗,均连续治疗3个月经周期,观察比较两组患者治疗后临床疗效指标、妊娠及症状表现情况和不良反应发生情况,分析两组患者治疗前后血清性激素水平、血糖代谢水平、血脂代谢水平和肥胖形态学指标。结果:治疗后A组临床总有效率88.41%及不良反应发生率5.80%与B组72.46%、17.39%相比,以A组更优(均P<0.05),但月经改善率、卵巢多囊样变改善率、卵子成熟率和临床妊娠率及流产率相比差异无统计学意义(均P>0.05);治疗后两组患者促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT),空腹血糖(FPG)、餐后2 h血糖(2 hPG)、空腹胰岛素(FINS),甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及体重(BW)、腰围(WC)、臀围(HC)与治疗前相比均显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)显著升高(均P<0.05);治疗后A组与B组相比TG和TC水平及BW更低,HDL-C更高(均P<0.05),而上述其他指标比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:奥利司他和二甲双胍分别联合达英-35治疗肥胖型PCOS患者的临床效果好,在改善患者血清性激素水平、糖脂代谢水平和肥胖形态学指标上均有各自效果,但前者提高临床总有效率更优,且奥利司他改善血脂代谢的效果也优于二甲双胍。

1-磷酸鞘氨醇受体2通过AKT/mTOR通路调节线粒体功能参与Aβ_(25-35)诱导的人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y损伤

阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种与年龄相关的认知功能下降的神经退行性疾病。1-磷酸鞘氨醇受体2(sphingosine-1-phosphate receptor 2,S1PR2)参与多种细胞过程,被证实在神经系统发育中发挥重要作用。本文旨在探究S1PR2对Aβ_(25-35)诱导的AD细胞模型损伤的作用及可能机制。研究通过Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞构建细胞损伤模型,并且构建靶向S1PR2的干扰序列用于干预细胞中S1PR2的表达。Western印迹及RT-PCR检测S1PR2蛋白及基因表达,发现Aβ_(25-35)诱导的细胞模型中S1PR2蛋白及基因表达均显著增加(P<0.01),S1PR2干预后模型组内S1PR2蛋白及基因表达显著降低(P<0.001)。CCK8检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞凋亡,结果显示,S1PR2干预后显著增加Aβ_(25-35)诱导的SH-SY5Y细胞的增殖活性,减少细胞凋亡(P<0.01)。Western印迹检测细胞中APP、Tau、p-Tau和PSD95的表达,结果显示,S1PR2干预后显著降低模型组细胞内APP、Tau和p-Tau的表达,增加突触蛋白PSD95的表达,可显著改善Aβ_(25-35)诱导的细胞损伤(P<0.001)。另外,试剂盒检测细胞中ATP的产生,流式细胞术检测ROS含量及线粒体膜电位以分析细胞的线粒体功能,结果显示,Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞显著降低了细胞中ATP的产生,增加了ROS含量,减少了线粒体膜电位(P<0.001)。S1PR2干预后显著增加Aβ_(25-35)诱导的细胞模型中ATP的产生,降低ROS含量,增加线粒体膜电位(P<0.001)。最后,通过Western印迹检测AKT/mTOR通路蛋白质表达,结果显示,Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞促进了p-AKT/AKT及p-mTOR/mTOR的表达,S1PR2干预后显著抑制AKT/mTOR通路的激活(P<0.001)。总而言之,S1PR2可能通过促进AKT/mTOR通路调节线粒体功能参与Aβ_(25-35)诱导的细胞损伤进程。

血清IL-35 CCL19水平与系统性红斑狼疮患儿免疫学指标的相关性研究

目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患儿血清白介素-35(IL-35)、C-C基序趋化因子配体19(CCL19)变化情况,并分析其与患儿免疫学指标的关联性。方法:纳入2022年1月至2024年3月本院收治的SLE患儿97例,并同期选取97例健康儿童进行对照研究,观察患儿血清IL-35、CCL19水平变化,并分析其与免疫学指标(包括抗ds-DNA抗体、免疫球蛋白(Ig)及补体C3、C4)的相关性。结果:与健康儿童相比,SLE患儿血清IL-35水平明显较低,CCL19水平明显较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与非活动期SLE患儿相比,活动期SLE患儿血清IL-35、C3、C4水平明显较低,CCL19、抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平明显较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:SLE患儿血清IL-35水平与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平成负相关性,与C3、C4水平成正相关,差异均有统计学意义(r=-0.314、-0.203、-0.301、-0.201、0.318、0.383,P<0.05);SLE患儿血清CCL19水平与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平成正相关性,与C3、C4水平成负相关差异均有统计学意义(r=0.272、0.209、0.362、0.202、-0.219、-0.391,P<0.05)。线性回归显示:SLE患儿抗ds-DNA抗体与IL-35水平存在负向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05),C3则与IL-35水平存在正向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05);SLE患儿IgG与CCL19水平存在正向影响关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SLE患儿血清IL-35、CCL19水平异常变化,与抗ds-DNA抗体、IgM、IgG、IgA水平存在一定的相关性,其中抗ds-DNA抗体、C3与IL-35,IgG与CCL19间存在一定的影响关系。

术前NLR、IL-35及MTA2与前列腺癌患者术后复发及转移的相关性

目的探讨术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、白细胞介素-35(IL-35)及转移相关蛋白2(MTA2)对前列腺癌患者术后复发及转移的预测价值。方法选取2019年6月-2022年6月在河北北方学院附属第二医院接受手术治疗的160例老年前列腺癌患者作为研究对象,根据术后有无复发或转移分为发生组(68例)和未发生组(92例)。比较两组一般资料,采用logistic回归分析NLR、IL-35、MTA2与前列腺癌患者术后复发及转移风险的相关性,ROC曲线评估各指标对前列腺癌患者术后复发及转移风险的预测价值。结果两组TNM分级、Gleason评分,NLR、IL-35及MTA2比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,在校正多个混杂因素后,NLR、IL-35水平及MTA2评分均是前列腺癌患者术后复发及转移发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,NLR、IL-35水平及MTA2评分对前列腺癌患者术后复发及转移具有一定的预测价值。结论NLR、IL-35水平及MTA2评分对前列腺癌术后发生复发及转移具有一定的预测价值,对早期前列腺癌术后复发及转移的高危患者的判断和改进患者预后具有重要的临床价值。

经阴道彩色多普勒超声在评估克罗米芬联合达英-35治疗PCOS中的应用

目的采用克罗米芬联合达英-35治疗多囊卵巢综合征(PCOS),并经阴道彩色多普勒超声检测参数对患者的治疗效果进行评估。方法选择2022年6月至2023年6月收治的PCOS患者中随机抽取110例符合要求的患者,根据其治疗方案不同分为对照组和研究组,每组55例。对照组采用二甲双胍、克罗米芬治疗,研究组在对照组的治疗基础上给予达英-35治疗,治疗前后均采用经阴道彩色多普勒超声对患者进行检测,以评估其治疗效果。结果研究组收缩期峰值血流(PSV)、舒张期末期血流速度(EDV)、搏动指数(PI)均大于对照组,阻力指数(RI)则小于对照组(P<0.05);研究组卵巢内卵泡数(FN)少于对照组,卵巢体积(OV)、卵泡间质面积/卵泡总面积(SA/TA)小于对照组,最大卵泡直径大于对照组(P<0.05);研究组的血流信号弱占比高于对照组,血流信号间质电状占比、血流信号间质粗状占比均低于对照组(P<0.05)。结论经阴道彩色多普勒超声检测参数在评估克罗米芬联合达英-35治疗PCOS中,可以对卵巢的动脉血流变化情况、血流信号等,清晰了解到患者的卵巢改善情况,罗米芬联合达英-35治疗PCOS具有确切疗效。

白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖及多肽的含量测定

目的对白果仁止咳有效部位35%乙醇-水洗脱部位中多糖及多肽的含量进行测定,为白果仁的综合开发和质量控制提供科学依据。方法采用苯酚-硫酸法、双缩脲法,建立标准曲线,并进行精密度、稳定性、重复性、加样回收率的考察。结果白果仁35%乙醇-水洗脱部位中多糖和多肽均在浓度范围内有良好的线性关系,方法学验证RSD值均小于2%,加样回收率分别为97.96%、97.94%,多糖含量为13.99%,多肽含量为31.41%。结论本研究建立的白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖和多肽含量测定方法简单可行,稳定性和重现性好。

左炔诺孕酮宫内节育系统联合达英-35在宫腔镜下子宫内膜息肉电切术后的应用效果评估

目的:评估左炔诺孕酮宫内节育系统(LNG-IUS)联合达英-35在宫腔镜下子宫内膜息肉电切术(TCRP)后的应用效果。方法:选取2022年3月—2023年3月枝江市人民医院行TCRP的72例子宫内膜息肉(EP)患者作为研究对象,采用随机分层法分为单一组和联合组,每组各36例。TCRP后两组均给予常规药物治疗,单一组在此基础上使用达英-35治疗,联合组使用LNG-IUS联合达英-35进行治疗。比较用药6个周期后两组性激素水平、子宫内膜厚度、月经量[月经失血图(PBAC)]、EP复发情况及不良反应发生情况。结果:治疗6个周期后两组黄体生成素(LH)水平较治疗前明显升高,乱跑刺激素(FSH)、孕酮(Prog)及雌二醇(E2)水平较治疗前均明显降低,联合组各项水平变化均较单一组更明显;治疗6个周期后两组的子宫内膜厚度及PBAC评分较治疗前均明显降低,联合组降低幅度较单一组更明显,差异有统计学意义(P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05);联合组的不良反应发生率高于单一组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:LNG-IUS联合达英-35在TCRP后应用能获得良好的治疗效果,不仅调节EP患者性激素水平,减少子宫内膜厚度,还可促使月经量恢复正常,降低患者EP复发,其安全性良好。

血清IL-35、HMGB-1水平与慢加急性肝衰竭患者短期预后相关性分析

探讨白细胞介素-35、高迁移率族蛋白对慢加急性肝衰竭患者预后评估的价值。方法 取23年1至10月在安徽医科大学第一附属医院住院的ACLF患者33名为实验组,以同期住院的肝硬化患者20名为肝硬化组,健康体检者20名为健康对照组,测定IL-35、HMGB-1、TBIL、AST、ALT、白蛋白、PT、PTA等指标,分析 ACLF 患者的血清白细胞介素-35、高迁移率族蛋白-1水平与 ACLF 患者28天预后的相关性。观察ACLF患者28天临床转归,比较ACLF生存组和死亡组患者的血清白细胞介素-35、高迁移率族蛋白-1水平及其他临床指标,血清HMGB-1水平、IL-35表达水平进行分析,评价ACLF 患者短期预后的特异性、敏感度、诊断效能,计算截断点。结果:相较于健康对照组、肝硬化组,血清IL-35、HGBM-1水平两项,ACLF组均更高,而相较于健康对照组,肝硬化组两项均更高,三组间存在显著差异(p<0.000)。ACLF组中血清IL-35在生存组及死亡组之间无统计学差异(P=0.150)。HMGB-1在生存组及死亡分别为101.7(44.5,123.3),398.3(170.0,624.5),两者具有显著差异(P=0.003)。HMGB-1与患者短期预后呈负相关,相关系数为R=-0.506P=0.003。血清HMGB-1水平对于ALCF患者的诊断效能较PTA,PT、INR、TBIL更高,预测 ACLF 患者短期预后有较高的灵敏度与特异性,当血清水平HMGB-1高于 165.7pg/ml 时,提示患者预后不佳。结论:①ACLF患者血清IL-35及HMGB-1水较肝硬化及健康人群明显升高;②血清HMGB-1水平与 ACLF 患者的短期预后呈负相关;③血清HMGB-1水平在诊断ALCF患者的效果优于PTA、PT、INR和TBIL,对预测ACLF患者短期预后有高敏感性和特异性。

射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭治疗儿童支气管哮喘冷哮的疗效及血清IL-17、IL-35水平变化

目的探讨儿童支气管哮喘(BA)冷哮采用射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭治疗的疗效及血清白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-35(IL-35)水平变化.方法选取2022年11月—2023年10月聊城市第二人民医院收治的120例BA急性发作患儿为研究对象,按照随机数字表法将其分为研究组与对照组,各60例.对照组采用舒利迭治疗,研究组采用射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭治疗.对比两组患者的临床疗效、肺功能指标及炎症因子水平.结果研究组治疗总有效率为95.00%,高于对照组的81.67%,差异有统计学意义(P<0.05).治疗前,两组第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、肺活量(FVC)、呼气高峰流量变异率(PEFR)比较,组间差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组FEV_(1)、FVC、PEFR均大于对照组,组间差异有统计学意义(P<0.05).治疗前,两组血清IL-17、IL-35水平比较,组间差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,研究组IL-17水平为(162.03±22.68)pg/mL,低于对照组的(182.67±29.76)pg/mL,IL-35水平为(25.03±4.15)pg/mL,高于对照组的(22.67±4.21)pg/mL,组间差异有统计学意义(P<0.05).结论射干麻黄汤辨证加减联合舒利迭应用于儿童BA治疗中,能够提高临床疗效,改善肺功能指标,降低IL-17水平,提高IL-35水平.

KIH结构在人白介素-35体外重组表达中的应用

白细胞介素35(interleukin-35,IL-35)是非常重要的免疫抑制性细胞因子,被证实在多种疾病的免疫应答中发挥作用。本研究通过克隆人IL-35基因编码序列,构建单亚基表达载体pXC17.4-p35和pcDNA3.1(+)-EBI3,共转染CHO-K1细胞体外表达IL-35,经检测未发现p35亚基与EBI3亚基的结合。Knobs-into-Holes(KIH)可解决异源抗体重链错配的问题,因此,在原始序列的基础上融合KIH结构构建表达载体pXC17.4-p35-Fch和pcDNA3.1(+)-EBI3-Fck来表达KIH-IL-35重组融合蛋白质;同时交换2个亚基的表达载体来验证不同表达载体对KIH-IL-35表达量的影响。经过多种蛋白质检测方法的分析,显示KIH-IL-35结构的正确表达率明显提高。大量表达后对KIH-IL-35进行亲和纯化,采用ELISA法检测纯化后的KIH-IL-35与糖蛋白130(gp130)分子的结合活性,结果表明,KIH-IL-35与gp130的结合呈浓度依赖性。采用细胞活性检测方法检测KIH-IL-35与M1细胞的间接活性,结果表明,M1细胞的抑制率与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。此外,本研究成功建立了一种利用激活的人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)对IL-35进行活性检测的方法,结果显示,激活的PBMCs与KIH-IL-35的浓度呈剂量依赖性增长。总之,本研究利用KIH-IL-35模型,提高了重组人IL-35的正确表达率,并验证其在体外的高活性,为IL-35的研究及类似异源二聚体细胞因子的重组表达提供新思路。

半乳糖凝集素-3、白细胞介素35、白细胞介素17在支气管哮喘病儿血清中的水平及与肺功能的相关性

目的探究半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、白细胞介素35(IL-35)及白细胞介素17(IL-17)在支气管哮喘病儿血清中的水平及临床意义。方法选取2021年8月至2022年8月徐州医科大学附属医院诊治的哮喘病儿77例,分为轻中度哮喘急性发作组(40例)及哮喘缓解组(37例),选择同期徐州医科大学附属医院健康体检儿童26例为对照组。采用酶联免疫法测定血清Galectin-3、IL-35、IL-17水平。应用肺功能仪进行肺功能检查,记录第1秒用力呼气容积/1 s用力呼气量预计值百分比(FEV1%)、1 s用力呼气量占用力肺活量比值(FEV1/FVC)、最大呼气50%瞬间流量(FEF50%),最大呼气75%瞬间流量(FEF75%)指标。结果轻中度急性发作组Gal-3、IL-17水平分别为(50.89±7.90)ng/L、(60.95±8.14)ng/L,明显高于缓解组的(33.93±9.49)ng/L、(42.94±6.67)ng/L及对照组的(24.8±5.84)ng/L、(35.45±8.68)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组IL-35水平为(101.28±9.44)ng/L明显低于缓解组(125.91±7.79)ng/L及对照组(148.83±8.09)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。轻中度急性发作组FEV1%、FEV1/FVC水平分别为(67.22±12.11)%、(67.56±12.60)%明显低于缓解组的(95.4±10.63)%、(95.58±10.95)%和对照组的(108.21±10.49)%、(108.9±10.03)%,均差异有统计学意义(P<0.05),FEF50%、FEF75%在轻中度急性发作组分别为(46.22±11.80)%、(38.42±9.94)%,与缓解组的(50.11±11.53)%、(42.76±12.39)%比较,差异无统计学意义(P>0.05),与对照组(91.75±12.43)%、(93.84±12.07)%比较差异有统计学意义(P<0.05)。Gal-3与IL-17呈正相关(P<0.05),IL-35与IL-17呈负相关(P<0.05),Gal-3、IL-17与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈负相关(P<0.05),IL-35与FEV1%、FEV1/FVC、FEF50%、FEF75%呈正相关(P<0.05)。结论哮喘病儿Gal-3表达上调,IL-35表达下调,引起IL-17促表达增强、表达抑制作用减弱,IL-17水平升高从而导致气道炎症加重,可能是轻中度哮喘急性发作的发病机制之一;亦可能是哮喘缓解期部分病儿小气道炎症持续存在的可能机制之一。Gal-3、IL-35、IL-17水平测定有助于预测轻中度哮喘急性发作风险及指导调整吸入糖皮质激素(ICS)用药。