催化动力学荧光光谱法测定芹菜中铁的含量

本文将荧光光度法与催化动力学相结合,在酸性介质中,铁(Ⅲ)对溴酸钾氧化二氯荧光素的反应具有很强的催化作用,以溴酸钾———二氯荧光素为反应体系,建立了一种测定痕量铁的催化动力学荧光新方法.对催化体系的最优反应条件进行了考察研究,在最优条件下,Fe(Ⅲ)浓度在1×10^(-7)~7×10^(-6)mg/mL范围内与荧光强度呈良好的线性关系,方法的检出限为6×10^(-8)mg/mL.对浓度为5×10^(-7)mg/mL的Fe(Ⅲ)标准溶液进行11次平行测定,相对标准偏差(RSD)为1.2%.该法简单、快速、灵敏,已用于蔬菜中铁含量的测定,回收率为90%~107.1%,结果令人满意.

催化荧光法测定痕量铁的研究

本文利用Fe(Ⅲ)与四乙撑五胺协同催化过氧化氢氧化还原型二氯荧光素的反应,提出了测定痕量Fe(Ⅲ)的新催化荧光方法。方法的线性范围为0.01～0.30μg/25ml,检出限为1.3×10^(-10)g/ml,常见离子不干扰测定。用于人发、指甲、血清和面粉中痕量铁的测定,回收率为97％～104％。

荧光猝灭法测定痕量六价铬

基于六价铬与碘化钾反应生成了单质碘 ,碘可以使 2′ ,7′ 二氯荧光素 (DCF)发生荧光猝灭 ,从而间接测定六价铬。六价铬浓度在 0 .2 0～ 2 .5 0 μg/2 5ml范围内 ,荧光强度差值与六价铬浓度呈线性关系 ,线性回归方程ΔF =12 .12C + 0 .19,相关系数r =0 .9993,检出限为 0 .10 μg/2 5ml。方法简便、灵敏度较高 ,已用于合成样中六价铬的测定 ,回收率在 10 0 %～ 10 3% 。

二氯荧光素-氯化十六烷基吡啶荧光猝灭法测定微量碘

本文研究了用二氯荧光素(DCF)-氯化十六烷基毗啶(CPC)体系荧光猝灭法测定微量碘。在pH为2.8～3.1的H_2SO_4介质中,检出限为0.30μg/25ml,线性范围为0.30～2.00μg/25ml。本法灵敏度高,选择性好,适用于微量碘的测定。

Fe^(3+)-H_2O_2-二氯荧光素化学发光体系测定药物中的扑热息痛

酸性介质中,Fe3+催化H2O2分解生成羟基自由基,进而氧化扑热息痛产生微弱的化学发光,二氯荧光素对该发光强度有较强的增敏作用。研究了影响化学发光强度的各种因素,并探讨了其可能的发光机理。在最佳化学发光条件下,其化学发光强度与扑热息痛的浓度在8.0×10-8～5.0×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为5.0×10-9mol/L,对3.5×10-6mol/L的扑热息痛平行测定9次,其相对标准偏差为2.2%。该法用于片剂中扑热息痛含量的测定,结果满意。

过氧化氢氧化二氯荧光素动力学荧光法测定痕量铜

研究了在氨性介质中,铜(Ⅱ)催化过氧化氢氧化二氯荧光素的褪色反应,建立了动力学荧光法测定痕量铜的新方法。方法的检出限为0.06μg L,测定铜的线性范围为0.2～4.0μg L。已用于人发、茶叶和自来水中痕量铜的测定。

2′,7′-二氯荧光素荧光法测定环境水样中的酚

报道了以２′，７′－二氯荧光素（ＤＣＦ）为指示剂，荧光法间接测定痕量酚的新方法。在０．５ｍｏｌ／ＬＨ２ＳＯ４介质中，Ｂｒ－和ＢｒＯ－３反应生成Ｂｒ２，Ｂｒ２与２′，７′－二氯荧光素反应，使２′７′－二氯荧光素荧光猝灭，当加入酚时，酚的溴代反应使体系荧光增强。ｐＨ４．０～６．０范围内，该体系激发波长，发射波长分别为λｅｘ５０５ｎｍ，λｅｍ５２０ｎｍ。酚浓度在１．６～５２ｎｇ／Ｌ范围内呈线性关系，检出限为１．６ｎｇ／Ｌ。本法选择性好，用于环境水样中酚的测定，结果满意。

卤代荧光素荧光猝灭法测定肾上腺色腙

在pH=6.6的缓冲介质中,肾上腺色腙(CBZC)与二氯荧光素(DCF)、二溴荧光素(DBF)和二碘荧光素(DIF)通过静电引力、芳基堆积作用和范德华力形成摩尔比为2∶1的复合物,引起上述二卤代荧光素的荧光发生猝灭,最大猝灭波长分别位于533,536和560 nm.其荧光猝灭值(ΔF)在一定范围内与肾上腺色腙浓度成正比,荧光猝灭反应具有较高的灵敏度,对CBZC的检出限分别为3.3 ng/mL(CBZC-DCF体系),5.7ng/mL(CBZC-DBF体系)和129.6 ng/mL(CBZC-DIF体系).考察了共存物质的影响、荧光猝灭反应的适宜条件和影响因素,结果表明,该方法具有良好的选择性,可用于CBZC的血药和尿药浓度的快速检测.从温度的影响、荧光寿命以及Stern-Volmer图判断该反应为静态猝灭反应.

N-溴代琥珀酰亚胺-二氯荧光素化学发光体系测定废水中5-磺基水杨酸

建立了测定5-磺基水杨酸的流动注射化学发光新方法。研究了影响化学发光强度的因素,并初步探讨了可能的发光机理。在最佳化学发光条件下,化学发光强度与5-磺基水杨酸浓度在5.0×10-8～2.0×10-5mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为1.0×10-8mol/L,对5.0×10-6mol/L的5-磺基水杨酸平行测定9次,其相对标准偏差为2.7%。该法可用于强力霉素废水中5-磺基水杨酸的测定。

维生素C与宫颈癌HeLa细胞凋亡关系的研究

目的:探讨维生素C是否能诱导实体肿瘤宫颈癌HeLa细胞凋亡,及其作用机制。方法:采用不同浓度的维生素C处理HeLa细胞不同时段,显微镜下观察细胞的形态学变化;噻唑蓝(MTT)法和流式细胞分析法测定细胞生长抑制情况;检测不同浓度的维生素C[(0.25-4)mmol/L]处理细胞15min、30min、1h、2h、5h、8h、12h、24h不同时段后细胞内过氧化氢(H2O2)水平变化情况。结果:0.25mmol/L维生素C对HeLa细胞生长无明显影响,而0.5mmol/L维生素C处理HeLa细胞24h后细胞的生长受到抑制,表现出细胞凋亡的特征,MTT检测此时细胞的存活率只有59.94%,随着维生素C浓度的增加和作用时间的延长效果更加明显,与流式细胞分析的结果一致。用DCFH-DA标记细胞,检测细胞内H2O2水平,发现不同浓度维生素C处理HeLa细胞15min后,除0.25mmol/L组外,其他组的细胞内H2O2水平比对照组升高(4mmol/L组为对照组的162.46%),且呈现明显的剂量依赖性,持续到30min达到高峰(4mmol/L组为为对照组的174.55%),1h后检测细胞内H2O2水平已下降,以后各时间段检测到的细胞内H2O2水平均比对照组低。结论:低浓度维生素C(≤0.25mmol/L)单独处理实体肿瘤宫颈癌HeLa细胞不能抑制其生长,而较高浓度(0.5mmol/L)维生素C能诱导HeLa细胞凋亡,且与细胞内H2O2水平改变有密切关系。H2O2积累是维生素C诱导肿瘤细胞凋亡途径中的早期事件。

流式细胞术在检测细胞内活性氧中的应用

目的流式细胞术检测细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的水平。方法将新生1天20只乳鼠随机分为3组（试验组15只，阴性和阳性对照组各5只），取乳鼠海马组织制备成单细胞悬液，经蓝莓花色苷、双氧水处理后，加入二氯荧光素一双乙酸盐（DCF-DA）孵育，13（2F-DA进入细胞后可被ROS氧化生成发荧光的2’，7’-二氯荧光素（DCF）52，通过流式细胞仪检测DCF荧光水平的变化，同时设立阴性及阳性对照。结果蓝莓花色苷物质可以降低H2O2刺激诱导的胞内ROS的产生，以1umol／L效果最为明显。结论利用流式细胞仪检测过氧化物刺激后胞内产生的活性氧是一种简单、准确、稳定的方法。

荧光猝灭法测定痕量亚硝酸根

研究了用荧光猝灭法测定了亚硝酸根。本方法是基于亚硝酸根与碘化钾反应生成了单质碘，碘可以使2＇，7＇-二氯荧光素（DCF）发生荧光猝灭，从而间接测定亚硝酸根。亚硝酸根浓度在10－120μg／L范围内，荧光强度差值与亚硝酸根浓度呈线性关系，检测限为5．6μg／L。本法简便、灵敏度较高，已用于合成样和分析纯试剂中亚硝酸根的测定。

荧光法测定环境水中的痕量砷

建立了测定环境水中痕量砷的荧光新方法 ,在 p H 6.5～ 7.5的缓冲介质中 ,利用 2′,7′-二氯荧光素 (DCF)作为荧光试剂 ,激发波长 λex=51 0 nm,发射波长 λem=52 8nm下 ,测定痕量砷 ,亚砷酸根浓度在 0 .2 5～ 3.50 μg/2 5m L范围内 ,相对荧光强度差值与亚砷酸根浓度呈线性关系 ,检测限为 0 .1 6μg/2 5m L,用于检测自来水和池塘水中的痕量砷 ,回收率为 95%～ 1 0 5%。

阻抑动力学荧光法测定痕量钴

在氢氧化钠碱性介质中,痕量钴(Ⅱ)对过氧化氢氧化二氯荧光素的反应具有强烈的抑制作用。过氧化氢在氧化二氯荧光素时,使反应体系的荧光强度减弱;当加入痕量钴(Ⅱ)时,体系的荧光强度增强,钴(Ⅱ)对氧化反应具有抑制作用。反应体系的激发波长和发射波长分别为492和5 15nm ,测定钴(Ⅱ)的线性范围为0 .2 4～3 .2 μg·L- 1 ,检出限为0 .12 μg·L- 1 。该法用于茶叶和人发样品中痕量钴(Ⅱ)的测定,结果满意。

催化荧光法测定环境水样中痕量对苯二酚

在H2SO4介质中,痕量对苯二酚对溴酸钾氧化二氯荧光素（DCF）的反应具有显著的催化作用,据此建立了催化荧光法测定水样中痕量对苯二酚的新方法。在最佳测试条件下,荧光强度降低值（△F）与对苯二酚浓度在0-1.0μg/mL范围内呈良好的线性关系,方法的检出限为0.037μg/mL。该方法可用于环境水样中痕量对苯二酚的测定,结果满意。

2,7-二氯荧光素与蛋白质相互作用的分光光度法研究

首次采用分光光度法研究了模拟生理条件(pH7.4Tris-HCl缓冲溶液,离子强度I=0.1)下2,7-二氯荧光素与牛血清白蛋白(BSA)相互作用的情况。研究结果表明两者相互作用形成稳定的复合物,最大吸收波长为509nm,与2,7-二氯荧光素的最大吸收波长502nm比较,红移了7nm;两者之间主要通过静电引力结合,但并不排除疏水作用力和氢键;两者之间的结合数为32。

NBS-二氯荧光素化学发光体系测定西索米星

在碱性奈件下，西索米星被NBS（N-溴代琥珀酰亚胺）氧化，其能量可激发共存的二氯荧光素（DCF）而产生化学发光，发光强度与西索米星的质量浓度在一定范围内呈良好的线性关系，基于此，结合流动注射技术，建立了一种直接测定西索米星的化学发光新方法。该方法具有较高的灵敏度，检出限为73μg／L（IUPAC），线性范围为0．1～10mg／L，对5．0mg／L西索米星平行测定11次，其相对标准偏差为2．3％。已用于针剂中西索米星的测定。

谷氨酰胺化学发光生物传感器的研制及应用

基于NBS-二氯荧光素-氨化学发光体系,结合流动注射技术,在白萝卜中存在的谷氨酰胺酶作用下,谷氨酰胺被水解释放出氨,产生化学发光信号.据此制成了化学发光生物传感器.谷氨酰胺浓度在1×10-6-1×10-5g/mL范围内与化学发光信号强度成线性关系.对5×10-6g/mL的谷氨酰胺进行了11次平行测定,得相对标准偏差为4.2%.根据IUPAC规定,算出谷氨酰胺的检测限(3σ)为3×10-7g/mL.将本法用于谷氨酰胺制剂(麦滋林-S颗粒)中谷氨酰胺含量的测定,结果令人满意.

二氯荧光素二丙烯酸酯的合成与抗肿瘤活性研究

合成了化合物二氯荧光素二丙烯酸酯(Ⅰ),用元素分析、IR、1HNMR、UV、荧光光谱对它进行了表征。测试了Ⅰ对小鼠白血病L1210细胞生长曲线的影响和对人体胃腺癌SGC-7901的抗肿瘤活性。结果表明,Ⅰ对体外培养肿瘤细胞L1210有很强的瞬时杀伤作用〔在ρ(Ⅰ)=0 1μg mL时,24h对其杀死率几乎为100%〕;对人体胃腺癌SGC-7901有很强的细胞增殖的抑制作用〔在ρ(Ⅰ)=0 1μg mL时,克隆数约为(3±1.1)%,集落形成率=0 15%,存活率=0 4%〕。是有希望的脂溶性、带荧光的抗肿瘤药学化合物。

二卤代荧光素阿曲库铵体系的吸收光谱及其分析应用

在弱酸性Britton-Robinson缓冲溶液中,阿曲库铵（AB）与二氯荧光素（DCF）、二溴荧光素（DBF）、二碘荧光素（DIF）形成离子缔合物,引起这3种染料的最大吸收峰明显降低,并在532 nm（DCF体系）、540 nm（DBF体系）和551 nm（DIF体系）处出现新的吸收峰.在一定范围内,AB浓度与吸光度的改变值（ΔA）成良好的线性关系,不同体系的摩尔吸光系数（ε）在9.95×10^3-1.22×10^5L/（mol.cm）之间.据此,提出了测定AB的新分光光度法,并考察了体系的光谱特征、适宜的反应条件和共存物质的影响.将该方法用于尿样中AB的测定,回收率在97.6%-104.4%之间.