血清Dickkopf-1蛋白、ESR、VEGF-A与强直性脊柱炎患者病情及发生脊柱骨折的关系

目的探讨血清Dickkopf-1蛋白、血沉(ESR)、血管内皮细胞生长因子-A(VEGF-A)与强直性脊柱炎患者病情及发生脊柱骨折的关系。方法选取2020年1月—2022年8月广州中医药大学附属深圳平乐骨伤科医院收治的54例发生脊柱骨折的强直性脊柱炎患者作为骨折组,并选取未发生脊柱骨折的强直性脊柱炎患者70例作为对照组。比较两组的年龄、性别、病程、Dickkopf-1蛋白、ESR、VEGF-A、腰椎骨密度T值、强直性脊柱炎疾病活动指数(BASDAI)、巴氏强直性脊柱炎功能指数(BASFI)、血清C反应蛋白(CRP)、指-地距离。采用Pearson法分析Dickkopf-1蛋白、ESR、VEGF-A与BASDAI、BASFI的相关性。采用多因素一般Logistic回归模型分析强直性脊柱炎患者发生骨折的影响因素。结果骨折组与对照组的腰椎骨密度T值、BASDAI、BASFI、血清CRP、指-地距离比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。骨折组患者的Dickkopf-1蛋白、ESR、VEGF-A均高于对照组(P<0.05)。骨折组患者BASDAI评分与Dickkopf-1蛋白、ESR、VEGF-A均呈正相关(r=0.577、0.596和0.714,均P=0.000);骨折组患者BASFI评分与Dickkopf-1蛋白、ESR、VEGF-A均呈正相关(r=0.502、0.586和0.686,均P=0.000)。腰椎骨密度T值降低[O^R=1.770(95%CI:1.150,2.724)]、BASDAI评分升高[O^R=1.168(95%CI:1.008,1.353)]、BASFI评分升高[O^R=1.202(95%CI:1.302,1.401)]、Dickkopf-1蛋白升高[O^R=1.486(95%CI:1.034,2.135)]、VEGF-A升高[O^R=1.857(95%CI:1.077,3.202)]均是强直性脊柱炎患者并发骨折的独立危险因素(P<0.05)。结论Dickkopf-1蛋白、VEGF-A及ESR水平与强直性脊柱炎患者病情有关,与患者发生脊柱骨折关系密切。

系统性红斑狼疮患者血清骨硬化蛋白及Dickkopf-1水平与病情严重程度的关系

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者血清骨硬化蛋白(Sclerostin)及Dickkopf-1(DKK-1)水平与疾病严重程度的关系。方法选取2020年1月—2022年1月收治的126例SLE患者为SLE组,依据SLE疾病活动度评分(SLEDAI)将SLE组患者又分为轻度活动组(n=46)、中度活动组(n=42)和高度活动组(n=38);选取同期健康体检者70例为对照组。采用酶联免疫吸附实验检测2组血清Sclerostin和DKK-1水平。采用Pearson相关性分析探讨SLE组血清Sclerostin、DKK-1水平与生化指标的相关性。采用多因素Logistic回归模型分析影响SLE患者疾病严重程度的因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价血清Sclerostin、DKK-1评估SLE患者疾病严重程度的价值。结果SLE组血清Sclerostin、DKK-1、红细胞沉降率、抗双链DNA抗体(抗dsDNA抗体)高于对照组,白细胞计数、血红蛋白、淋巴细胞计数、血小板、补体C3及C4水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关性分析结果显示,SLE组患者血清Sclerostin、DKK-1水平与白细胞计数、血红蛋白、淋巴细胞计数、血小板、补体C3及C4呈负相关(P<0.01),与红细胞沉降率、抗dsDNA抗体呈正相关(P<0.01)。高度活动组患者血清Sclerostin、DKK-1水平高于中度活动组和轻度活动组,中度活动组患者血清Sclerostin、DKK-1水平高于轻度活动组,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清Sclerostin、DKK-1升高是影响SLE疾病严重程度的独立危险因素。血清Sclerostin联合DKK-1对SLE疾病高度活动预测的曲线下面积(AUC)为0.919(95%CI:0.862~0.956),高于血清Sclerostin、DKK-1的0.833(Z=4.978,95%CI:0.809~0.851,P<0.001)、0.841(Z=4.213,95%CI:0.810~0.867,P<0.001)。结论SLE患者血清Sclerostin、DKK-1表达水平升高,二者与SLE疾病严重程度有关,是影响SLE疾病严重程度的独立危险因素。血清Sclerostin联合DKK-1对SLE疾病严重程度具有较高的预测价值。

Dickkopf-1调控Wnt通路在缺氧诱导的晶状体上皮细胞转分化中的作用

目的:探讨缺氧条件下Wnt/β-catenin通路在晶状体上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)中的作用,分析Dickkopf-1(DKK-1)的表达对晶状体上皮细胞EMT的影响。方法:将体外培养人晶状体上皮细胞(HLEB3细胞)分为正常氧培养组(加入含10%FBS的DMEM培养液)和缺氧培养组(加入含100μmol/L CoCl 2溶液的培养液进行缺氧处理6、12、24、48h)。利用免疫荧光染色法检测Wnt3a和DKK-1蛋白的表达及β-catenin蛋白的表达和定位;利用qRT-PCR法检测DKK-1 mRNA的表达。结果:免疫荧光染色结果显示,随着缺氧时间的延长,HLEB3细胞中Wnt3a和DKK-1蛋白表达水平明显上调,β-catenin蛋白在细胞核内积聚逐渐增多。qRT-PCR检测结果显示,与正常氧培养组相比较,缺氧培养6h组细胞中DKK-1 mRNA无显著差异(P>0.05),而缺氧培养12、24、48h组细胞中DKK-1 mRNA表达明显增加(P<0.001)。结论:缺氧可以激活晶状体上皮细胞Wnt/β-catenin通路,并诱导Dickkopf-1的表达,参与调控Wnt/β-catenin通路,影响EMT进程。

血清Wnt通路抑制因子Dickkopf-1、血管内皮生长因子A和生长分化因子15对早期肺癌的诊断价值研究

目的:探讨早期肺癌患者血清Wnt通路抑制因子Dickkopf-1(DKK-1)、血管内皮生长因子A(VEGF-A)和生长分化因子15(GDF-15)的水平变化及诊断价值。方法:选取早期肺癌患者70例(肺癌组)、肺部良性疾病患者70例(肺良性病组)以及体检健康者70例(健康对照组),比较三组一般资料,以及血清DKK-1、VEGF-A和GDF-15水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清DKK-1、VEGF-A和GDF-15对早期肺癌的诊断价值,采用Pearson法分析肺癌组血清DKK-1、VEGF-A和GDF-15的相关性。结果:三组性别、年龄及体重指数(BMI)比较差异无统计学意义(均P>0.05);肺癌组和肺良性病组血清DKK-1、VEGF-A和GDF-15水平高于健康对照组,且肺癌组高于肺良性病组(均P<0.05);血清DKK-1、VEGF-A、GDF-15单项和三者联合诊断早期肺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.780、0.880、0.823、0.967,三项联合对早期肺癌的诊断价值更高;肺癌组DKK-1与VEGF-A、GDF-15呈正相关,VEGF-A与GDF-15呈正相关(r=0.666、0.669、0.858,均P<0.05)。结论:血清DKK-1、VEGF-A和GDF-15水平在早期肺癌患者中升高,三者互呈正相关,可作为诊断早期肺癌的有效指标,且三者联合诊断价值更高。

血清Sestrin2、Dickkopf-1与冠心病患者冠状动脉病变程度和不良心血管事件的关系

目的探讨血清Sestrin2、Dickkopf-1(DKK1)在冠心病患者冠状动脉病变程度以及不良心血管事件发生的关系。方法收集2019年1月1日至2022年3月31日鄂东医疗集团黄石市中心医院心血管科收治的153例冠心病患者作为冠心病组,年龄、性别相匹配的109例门诊体检者作为对照组。根据冠状动脉造影Gensini评分将冠心病组分为轻度病变组51例(Gensini评分≤40分)、中度病变组69例(Gensini评分41~79分)和重度病变组33例(Gensini评分≥80分)。检测血清Sestrin2、DKK1水平,出院随访不良心血管事件发生情况。结果冠心病组血清Sestrin2、DKK1水平高于对照组(t=21.075、33.941,P<0.05),重度病变组血清Sestrin2、DKK1水平高于中度病变组和轻度病变组(P<0.05)。Gensini积分、Sestrin2、DKK1是冠心病患者发生不良心血管事件的危险因素[OR(95%CI)=3.762(2.069~6.840)、1.669(1.198~2.324)、1.831(1.245~2.694),P<0.05]。联合Sestrin2、DKK1预测冠心病患者发生不良心血管事件的曲线下面积高于单独指标(Z=5.023、5.963,P<0.05)。结论冠心病患者血清Sestrin2、DKK1水平增高,且与冠状动脉病变严重程度以及不良心血管事件有关,两者联合时对冠心病患者不良心血管事件的发生有预测价值。

Dickkopf-1基因在头颈部鳞状细胞癌中的表达及对细胞系表型变化的影响

目的通过数据库分析Dickkopf-1(DKK1)基因在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的表达和临床意义,DKK1对头颈部鳞癌细胞表型的影响。方法使用GEPIA分析DKK1在HNSCC中的表达及其与患者生存率间的关系,并通过qRT-PCR对DKK1在HNSCC细胞系中的表达进行验证。使用LinkedOmics数据库分析DKK1表达与HNSCC临床病理特征关系。使用siRNA转染下调HNSCC细胞系CAL-27细胞中DKK1表达并通过流式细胞术、细胞划痕实验和细胞侵袭实验评估DKK1对头颈部鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。结果DKK1在HNSCC中显著高表达;qRT-PCR体外验证DKK1在HNSCC细胞系中表达均升高,其中在SCC-4、SCC-9、SCC-25、CAL-27中表达显著升高。DKK1表达水平与HNSCC患者T分期和病理分期呈显著正相关,与HNSCC患者总生存率呈显著负相关。下调DKK1表达后,CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭能力明显减弱。结论DKK1与HNSCC的发生发展及预后密切相关,可能成为HNSCC新的生物学标志物和潜在治疗靶点。

血清高尔基体蛋白联合Dickkopf-1、甲胎蛋白对肝细胞癌的诊断价值

目的探讨血清高尔基体蛋白(GP73)联合Dickkopf-1、甲胎蛋白(AFP)对肝细胞癌的诊断价值。方法收集收治的117例肝细胞癌患者(肝细胞癌组)、80例乙型病毒性肝炎患者(肝炎组)以及随机选取的80例健康体检者(对照组)为研究对象,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组对象的血清GP73、Dickkopf-1、AFP水平,并分析其与患者临床病理特征之间的关系,以及GP73联合Dickkopf-1、AFP对肝细胞癌的诊断价值。结果肝细胞癌组血清GP73、Dickkopf-1、AFP水平高于肝炎组和对照组,且肝炎组血清AFP水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Child Pugh分级中B^C级肝细胞癌患者GP73、Dickkopf-1、AFP水平高于A级,差异有统计学意义(P<0.05),不同分化程度、肿瘤最大径、肿瘤数目患者的GP73、Dickkopf-1、AFP水平差异无统计学意义(P>0.05)。GP73+Dickkopf-1+AFP诊断肝细胞癌的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、准确率均高于GP73、Dickkopf-1、AFP的诊断结果,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清GP73、Dickkopf-1、AFP在肝细胞癌中呈高水平表达,三者联合检测可明显提高对肝细胞癌的诊断价值,有重要的临床参考价值。

股骨颈骨折患者围术期血清骨硬化蛋白及Dickkopf-1蛋白水平变化规律及意义

目的探讨股骨颈骨折患者围术期血清骨硬化蛋白（SOST）和Dickkopf-1（Dkk-1）蛋白的变化规律及临床意义。方法选择2014年8月~2015年8月于南京大学医学院附属鼓楼医院行股骨颈骨折关节置换术患者45例为实验组,采集患者术前1 d及术后1、3、5 d空腹静脉血样;选择同期45例年龄、性别、体重指数配对的健康体检者作为对照组。检测两组患者血清中SOST和Dkk-1水平并进行分析。结果实验组患者术前血清SOST为1.3（1,2.39）ng/m L,Dkk-1为（2.87±1.08）ng/m L,明显低于照组[SOST为1.95（1.64,2.64）ng/m L,Dkk-1为（3.66±1.21）ng/m L]（P〈0.01）。实验组患者围术期血清SOST与Dkk-1均呈先升高后下降的趋势,且两者呈正相关（P〈0.05）。血清SOST在术后1 d迅速升高至1.49（1.07,1.99）ng/m L,术后3 d降至1.3（0.97,2.1）ng/m L,术后5 d迅速降至1.01（0.91,1.55）ng/m L,与术前比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。血清Dkk-1在术后1 d显著升高至（3.04±1.04）ng/m L,术后3 d升至（3.07±1.19）ng/m L,术后5 d降至（2.93±1.08）ng/m L,但术后3、5 d值与术前比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论围术期股骨颈骨折关节置换术患者血清SOST与Dkk-1均呈先升高后下降的趋势。血清SOST术后变化较DKK-1更敏感,趋势更显著,可作为骨折后机体成骨能力的标志物及潜在的药物治疗靶点。

从炎性细胞因子与Dickkopf-1变化研究补肾活血方对绝经后膝骨关节炎的干预作用

目的:研究自拟中药补肾活血方对绝经后膝骨关节炎(Knee Osteoarthritis,KOA)患者血清白细胞介素1(Interleukin1,IL-1)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosis Factorα,TNF-α)、雌二醇(Estradiol,E_2)、Dickkopf-1(Dkk-1)水平的影响。方法:将60例符合标准的KOA患者随机分为治疗组与对照组,每组均30人。治疗组予自拟补肾活血方,1剂/d,分早晚2次服;对照组予双醋瑞因50 mg/d;疗程均为4周,测定患者治疗前后血清IL-1、TNF-α、E_2、Dkk-1含量。结果:治疗组控显率与总有效率分别为60%、96.67%;对照组控显率与总有效率分别为53.33%、93.33%。实验室指标检测显示,2组治疗后血清IL-1、TNF-α水平均较治疗前降低(P<0.01);2组治疗后的组间比较显示,IL-1含量差异无统计学意义(P>0.05),TNF-α含量差异有统计学意义(P<0.05)。血清E_2水平检测结果显示,治疗组治疗后较治疗前增加(P<0.01),对照组治疗后较治疗前有所增加,但差异无统计学(P>0.05),治疗组与对照组治疗后的组间比较差异有统计学意义(P<0.01)。血清Dkk-1水平方面,2组治疗前后比较及2组治疗后组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:绝经后KOA的主要病机为肾虚血瘀,补肾活血中药可改善绝经后KOA的症状;补肾活血方可能通过调节雌激素水平以及炎性细胞因子起到干预绝经后KOA的作用;补肾活血方对于Wnt信号通路中Dkk-1无明显作用,可能Wnt信号通路不参与补肾活血方的干预途径。

Dickkopf-1对结肠癌组织血管生成拟态形成的抑制作用及相关机制研究

目的:探讨结肠癌组织中Dickkopf-1(Dkk1)表达对血管生成拟态(vasculogenic mimicry,VM)的抑制作用及相关机制。方法:收集2002年1月至2004年12月间天津医科大学肿瘤医院收治的217例结肠癌患者资料,利用CD34-PAS对结肠癌组织进行双重染色及免疫组化方法检测并分析VM与Dkk1表达的关系;利用体外三维培养(three dimensional culture,3D culture)观察Dkk1对人结肠癌HCT116细胞管状结构形成能力及血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)表达的影响;建立裸鼠皮下移植瘤模型进一步明确Dkk1对肿瘤组织内VM形成的抑制作用。结果:存在VM的结肠癌组织中Dkk1表达较低(P<0.05);Dkk1过表达的HCT116细胞形成管状结构能力明显减弱,且VE-cadherin表达降低;Dkk1可抑制裸鼠移植瘤组织中HCT116细胞形成VM。结论:Dkk1过表达可抑制结肠癌中VM形成。

Dickkopf-1与抗酒石酸酸性磷酸酶5b在类风湿关节炎骨破坏中的意义

目的:研究类风湿关节炎(RA)患者外周血及关节液Dickkopf-1(DKK-1)水平和血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRAP5b)活性在骨破坏及骨代谢失衡中的意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测230例RA患者、50例骨关节炎(OA)患者及150例健康对照者的血清DKK-1水平、关节液DKK-1浓度及血清TRAP5b的活性浓度,比较各组DKK-1及TRAP5b水平及其与临床相关指标的相关性。结果:(1)RA患者血清DKK-1水平显著高于健康对照组和OA患者组(均P<0.01)。(2)RA关节液DKK-1水平显著高于OA(P<0.01),15例配对血清和关节液DKK-1水平呈显著正相关(r=0.860,P<0.01)。(3)RA骨质疏松组血清TRAP5b活性显著高于非骨质疏松组(P<0.01)。(4)RA患者外周血DKK-1水平及TRAP5b活性均与病程、Sharp评分正相关(P<0.05)。结论:RA患者外周血DKK-1和TRAP5b与局部骨破坏密切相关,可作为骨破坏及骨代谢失衡的评价指标。

子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中Dickkopf-1表达及意义

目的检测Dickkopf-1在子宫内膜癌和正常子宫内膜组织中的表达,探讨Dickkopf-1表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系以及在子宫内膜癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化方法检测并比较Dickkopf-1在30例子宫内膜癌(内膜癌组)及34例正常子宫内膜(正常对照组)组织中的表达,并结合临床资料进行分析。结果两组子宫内膜组织中Dickkopf-1的表达程度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌不同手术病理分期、病理分级患者子宫内膜组织中的高表达率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌不同病理类型、淋巴结是否转移患者子宫内膜组织中Dickkopf-1的高表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Dickkopf-1表达与子宫内膜癌手术病理分期、病理分级有关联;Dickkopf-1表达改变可能与子宫内膜癌发生、发展有关,它有望成为临床上判断子宫内膜癌病程进展和预后的参考指标。

多发性骨髓瘤患者血清Dickkopf-1水平变化及意义

目的探讨血清Dickkopf-1（DKK1）对多发性骨髓瘤骨病（MBD）患者化疗效果及预后的影响。方法研究对象为80例初治多发性骨髓瘤（MM）患者,均伴MBD,其中MBD为0~1级14例,2~3级49例,4级17例。血清DKK1水平≤1.92 ng/m L 40例,〉1.92 ng/m L 40例。80例患者均采用VADT（长春新碱＋蒽环类＋地塞米松＋沙利度胺（VADT））化疗6个周期。分析≤1.92 ng/m L与〉1.92 ng/m L者化疗效果及中位生存期。比较两组化疗有效率及中位生存期。结果血清DKK1水随MBD分级升高而升高（P均〈0.05）。≤1.92 ng/m L与1.92 ng/m L者化疗有效率分别为87.5%、80%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）,中位生存期分别为53.9、46.0个月,两者比较差异无统计学意义。结论血清DKK1水平与MBD严重程度有关;DKK1水平〉1.92 ng/m L者化疗效果差;DKK1水平对MM患者的预后无明显影响。

增殖性糖尿病视网膜病变患者血清Dickkopf-1水平分析

目的通过酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）患者血清中的Dickkopf-1（DKK1）蛋白浓度,探讨Wnt信号通路在PDR发病中的作用。方法纳入2014年6月至12月于北京安贞医院及北京同仁医院眼科接受玻璃体视网膜手术的28例PDR患者及25例年龄、性别相匹配的非糖尿病对照组。通过ELISA法检测PDR组和对照组、活跃期和静止期PDR组血清中的DKK1蛋白浓度,分别比较组间的DKK1水平差异。结果 PDR组血清DKK1蛋白浓度为96.14~1303.65 pg·mL-1,平均为491.79 pg·mL-1;对照组血清DKK1蛋白浓度为250.36~1520.92 pg·mL-1,平均为882.38 pg·mL-1;两组相比,差异有统计学意义（P=0.002）。静止期PDR组血清DKK1蛋白平均浓度为683.35 pg·mL-1,高于活跃期PDR组（275.48 pg·mL-1）,差异有统计学意义（P=0.022）。结论 PDR患者血清中DKK1蛋白水平明显降低,提示Wnt信号通路可能在PDR病理过程中发挥作用。

GATA-6和Dickkopf-1在垂体瘤中的表达及临床意义

目的:探讨GATA-6和Dickkopf-1在垂体瘤中的表达及临床意义。方法:选取本院垂体瘤患者138例,采用实时荧光逆转录法及免疫组化法测定GATA-6和Dickkopf-1在垂体瘤组织及正常垂体组织中的表达水平。分析不同临床特征垂体瘤患者GATA-6和Dickkopf-1表达差异,以及不同GATA-6和Dickkopf-1表达水平垂体瘤患者预后差异。结果:垂体瘤组Dickkopf-1 mRNA表达水平低于正常垂体组,GATA-6 mRNA表达水平高于正常垂体组(P<0.01);垂体瘤组Dickkopf-1蛋白表达评分低于正常垂体组,GATA-6蛋白表达评分高于正常垂体组(P<0.01);垂体瘤组Dickkopf-1蛋白表达阳性率低于正常垂体组、GATA-6蛋白表达阳性率高于正常垂体组(P<0.01)。Dickkopf-1、GATA-6蛋白表达与年龄相关性不明显(P>0.05);与TNM分期、病理学分级、复发、浸润深度、血管间隙浸润、肿瘤最大径、转移相关性明显,且TNM分期越高、病理学分期越高、有复发、浸润深度越深、有血管间隙浸润、肿瘤最大径≥2cm、有转移者Dickkopf-1蛋白阳性表达率越低、GATA-6蛋白阳性表达率越高(P <0.01); Dickkopf-1阳性组3年生存率及生存期均明显高于Dickkopf-1阴性组,GATA-6阴性组3年生存率及生存期均明显高于GATA-6阳性组(P<0.01)。结论:垂体瘤中GATA-6表达升高,Dickkopf-1表达降低; GATA-6在垂体瘤的发生发展过程中起促进作用,Dickkopf-1起抑制作用; Dickkopf-1高表达、GATA-6低表达的垂体瘤患者能获得较好的预后。

Dickkopf-1基因在宫颈鳞癌组织中的甲基化研究

目的检测Dickkopf-1（DKKl）基因在宫颈鳞癌组织中的甲基化状态，分析其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测28例宫颈炎、20例CINI、31例CINⅡ～Ⅲ及36例宫颈鳞癌组织中DKKl基因启动子区甲基化情况，并分析富颈鳞癌组织中DKKl基因甲基化水平与临床病理特征之间的相关性。结果宫颈炎、CINI、CINⅡ～Ⅲ和宫颈鳞癌组中DKKl基因甲基化阳性率分别为10．7％、10％、32．3％和44．4％。宫颈鳞癌组织的甲基化阳性率明显高于宫颈炎和CINI组，DKKl基因启动子甲基化与肿瘤分化程度以及肿瘤的直径相关。结论DKKl基因启动子区甲基化检测可能为宫颈鳞癌的诊断以及鉴别诊断提供一个新的检查方法。

Dickkopf-1在肿瘤中的作用研究进展

目前，在已知的十几种高发性癌中Wnt信号传导途径的失调与肿瘤的发生密切相关， Wnt信号通路通过作用于下游靶基因的表达影响细胞凋亡与细胞迁移及侵袭。 Dickkopf-1是近年来发现的Dickko-pfs家族成员之一，是Wnt 通路的抑制分子。有学者发现，人 Dickkopf-1基因位于10号染色体10q11上，且从不同细胞中提取其分子质量不同，一般为35～45 kU。目前，已知的Dickkopf-1受体有两种：一种是低密度脂蛋白受体（ LRP-5和LRP-6），另一种是含 kringle 结构域的 kremen 蛋白。Dickkopf-1通过 Wnt／β-catenin 经典信号传导途径以及Wnt非经典信号传导途径在多种肿瘤的发生发展过程中起着重要作用。现对Dickkopf-1在肿瘤中的作用作一综述。

外源性p53诱导肝癌细胞Wnt通路抑制因子Dickkopf-1的表达

研究p53对Wnt通路抑制抑制因子Dickkopf-1(DKK-1)表达的调节作用。将携带p53基因的复制缺陷型腺病毒栽体(Adp53)导入到p53缺失的人肝癌细胞株Hep3B中,以RT-PCR技术检测p53对DKK-1表达的调节作用。检测结果表明DKK-1mRNA水平在转染p53 20 h后即有明显升高,其中以32 h达最高水平,随后逐渐降低。量效关系研究表明在转染剂量为0.5、5、50 pfu/cell的Adp53时DKK-1mRNA表达均有显著增高,尤以50 pfu/cell时表达水平最高。提示p53能明显诱导Wnt通路抑制因子DKK-1的mRNA表达。

Wnt阻滞剂Dickkopf-1对肾小管上皮细胞转分化的抑制作用

目的研究Wnt阻滞剂Dickkopf-1(Dkk-1)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞-间充质转分化的影响。方法体外培养人近端肾小管上皮细胞(HKC),收集后分3组:对照组细胞以含10%胎牛血清的培养基常规培养,TGF-β1组在常规培养基中加入TGF-β1(终浓度20ng/ml),TGF-β1+Dkk-1组同时加入TGF-β1(终浓度20ng/ml)和Dkk-1(终浓度100ng/ml)。培养48h后在倒置相差显微镜下进行形态观察,分别采用RT-PCR和Western blotting检测Wnt4、β-catenin、E-cadherin、α-SMA mRNA及蛋白表达情况,细胞免疫荧光染色观察E-cadherin和α-SMA的表达。结果与对照组比较,TGF-β1组和TGF-β1+Dkk-1组Wnt4 mRNA和蛋白表达水平均显著增高(P<0.05),后两组间差异无统计学意义(P>0.05)。β-catenin mRNA表达在各组之间差异无统计学意义(P>0.05)。β-catenin蛋白在对照组呈低表达,TGF-β1组表达明显上调,TGF-β1+Dkk-1组较TGF-β1组表达下调(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。E-cadherin mRNA和蛋白在对照组呈高表达,TGF-β1组表达明显降低,TGF-β1+Dkk-1组较TGF-β1组表达显著增高(P<0.05),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。α-SMA mRNA和蛋白表达在对照组和TGF-β1+Dkk-1组的表达均较TGF-β1组明显降低(P<0.05)。细胞免疫荧光染色显示E-cadherin和α-SMA表达与RT-PCR和Western blotting检测结果一致。结论 Wnt阻滞剂Dickkopf-1能抑制TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化。

膀胱癌患者血清中Dickkopf-1的表达

目的探讨膀胱癌患者手术前后血清中Dickkopf-1(DKK-1)的表达情况,及其与膀胱癌病理特征的联系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定48例膀胱癌患者(膀胱癌组)和24例输尿管结石或尿道肉阜患者(对照组)血清中DKK-1水平,采用Western免疫印迹法检测膀胱癌肿瘤组织、癌旁组织和正常组织中DKK-1、β-链蛋白的表达情况,同时采用免疫组织化学法检测DKK-1蛋白的表达阳性率。结果膀胱癌组术前的血清DKK-1水平为(8.18±2.83)ng/mL,显著高于术后的(6.06±2.27)ng/mL(P=0.021);且显著高于对照组的(4.86±2.56)ng/mL(P=0.007)。膀胱癌组低级别上皮癌与高级别上皮癌患者间,浅表性膀胱癌与肌层浸润性膀胱癌患者间手术前后的血清DKK-1水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。膀胱癌组织和癌旁组织的DKK-1相对表达量分别为2.033±0.372、1.816±0.352,均显著高于正常组织的0.976±0.202(P值分别=0.018、0.047)。在膀胱癌组织中的DKK-1蛋白表达量明显高于对照组,且在血管周围组织有升高现象,但在间质中无明显升高。膀胱癌组织中DKK-1阳性率为48%,显著高于对照组的31%(P=0.020)。结论 DKK-1的表达与膀胱癌的发生关系密切,有可能成为一种新的肿瘤标志物,用于对膀胱癌的检测与诊断。