Determination of Capsaicin and Dihydrocapsaicin in Capsicum( Capsicum annuum) Products by High Performance Liquid Chromatography-Fluorescence Detection( HPLCFLD)

[Objectives] This study was conducted to determine capsaicin and dihydrocapsaicin in capsicum products. [Methods]The sample was ultrasonically extracted with anhydrous ethanol as the extraction solvent for capsaicin and dihydrocapsaicin,followed by centrifugation. The extract was subjected to HPLC separation with methanol-water( 65∶ 35) as the mobile phase,and a fluorescence detector( Ex = 229 nm,Em = 320 nm) was used to detect capsaicinoids in the sample. [Results] Capsaicin and dihydrocapsaicin had a good linear relationship in the range of 1-200 mg/L( R_1~2= 0. 999 8,R22= 0. 999 6). The detection limits were both 0. 007 mg/kg; the quantification limits were both 0. 02 mg/kg; the precision was 0. 235% and 0. 754%,respectively; and the average recoveries were95. 94% and 95. 39%,respectively. [Conclusions]The method is simple,rapid,with good sensitivity and precision,and is suitable for detecting capsaicin substances in capsicum products.

高效液相色谱法测定雀辣中辣椒素及类似物的含量

目的:优化探索适合雀辣中辣椒素和二氢辣椒素的含量测定方法,并对雀辣中的辣椒素及二氢辣椒素进行测定,为雀辣资源的开发利用开展基础研究。方法:通过对不同的提取方法进行优化,得到较优的方法并测定不同地区雀辣中辣椒素及二氢辣椒素的含量。结果:辣椒素在0.019 2~0.191 8 mg·mL^(-1)线性良好,相关系数大于0.999 9,二氢辣椒素在0.015 7~0.157 5 mg·mL^(-1)线性良好,相关系数为0.999 8;方法回收率为91.06%~101.22%,RSD为0.8%~2.1%。雀辣中辣椒素含量为(3.190±0.025)^(5.308±0.022)mg·g^(-1),二氢辣椒素含量为(0.868±0.021)^(1.082±0.018)mg·g^(-1),普洱雀辣中辣椒素及二氢辣椒素含量高于西双版纳雀辣。结论:本文建立的方法快速、稳定、准确、节省溶剂,适合雀辣中辣椒素和二氢辣椒素含量的测定。

高效液相色谱法测定食品中的辣椒素、二氢辣椒素

采用高效液相色谱法测定食品中的辣椒素、二氢辣椒素。超声波辅助甲醇-四氢呋喃(1+1)提取样品中的辣椒素、二氢辣椒素,荧光检测器对其进行检测(Ex=229nm、Em=320nm)。结果表明,辣椒素含量在0.13～160mg/L之间,二氢辣椒素含量在0.04～160mg/L之间;峰面积与待测物浓度呈良好的线性关系,相关系数为1;RSD为1.36%～4.79%,回收率在70.50%～100.07%之间。

HPLC法测定广西指天椒中三种辣椒碱类物质的含量

用HPLC法测定了广西指天椒中的辣椒碱、二氢辣椒碱和降二氢辣椒碱含量。指天椒中辣椒碱类物质用65％乙醇溶液提取经膜过滤，采用GracesC18柱，以甲醇-水-磷酸（65：35：0．1）为流动相，流速0．6mL·min-1，检测波长281nm，柱温为30℃时直接测定。辣椒碱、二氢辣椒碱、降二氢辣椒碱线性范围分别为77．23-407．15μg·mL-1（r=0．9999）、14．03-75．80μg·mL-1（r=0．9999）、1．62～10．00μg·mL-1（r=0．9999），回收率在98％～100．5％之间，RSD（n=4）为0．95--2．2％。实验结果表明，该法快速、简便、准确可靠。

HPLC法测定云南省不同辣椒品种中辣椒碱及二氢辣椒碱的含量

利用超声提取法对云南省不同地区不同品种辣椒样品进行预处理,采用高效液相色谱法(HPLC)测定样品中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量。具体方法为:采用色谱柱HanbonSci&Tech.LichrospherC18(250×4.6mm,5μm)分离,甲醇-3‰磷酸水溶液梯度洗脱(65%～90%,0～30min),检测波长280nm,辣椒碱和二氢辣椒碱的相对标准偏差都小于1%,平均回收率都在99%以上。该方法具有较好的分离效果和较高的稳定性,适用于云南省不同地区不同品种中辣椒碱和二氢辣椒碱含量的测定。测定结果显示云南省不同地区不同品种不同成熟度的辣椒中辣椒碱和二氢辣椒碱含量差异很大。

LC-MS/MS鉴别地沟油新方法

建立了高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)同时测定地沟油中辣椒素、二氢辣椒素及胡椒碱3种难挥发性微量杂质成分的方法。样品采用正己烷饱和的乙腈提取,经Thermo BDS Hypersil C18(100 mm×2.1 mm,2.4μm)色谱柱梯度洗脱分离,在电喷雾正离子模式下以多反应监测(MRM)方式采集数据进行定性定量测定。3种地沟油特征物质在相应的浓度范围内呈良好线性,相关系数(r2)均大于0.99,在3个不同加标水平下,平均回收率为65%～89%,相对标准偏差(RSD)为5.3%～16.1%,检出限(LOD,S/N≥3)和定量下限(LOQ,S/N≥10)分别为0.03、0.1μg/kg。实际样品测试表明,该方法简便快速、灵敏可靠,可作为地沟油鉴别的重要手段之一。

高效液相色谱-荧光法测定辣椒素和二氢辣椒素

建立了一种测定辣椒素和二氢辣椒素的反相高效液相色谱荧光法.样品中的辣椒素和二氢辣椒素用乙腈提取,以水和甲醇为流动相梯度洗脱,HP ODS Hypersil(5μm,250 mm×4 mm i.d)柱分离,用荧光检测器(λex=229 nm,λem=320 nm)测定.研究表明辣椒素和二氢辣椒在0.02～125.00 μg/mL范围内,峰面积与待测物的质量浓度呈良好的线性关系,相关系数均为0.9999,相对标准偏差在0.44%和2.74%之间,回收率为80.8%～99.9%.该方法操作简便、快速,适用范围广,重现性好,灵敏度高.

干旱胁迫对辣椒果实中辣椒素、二氢辣椒素及VC含量的影响

以湘研5号辣椒为试材,采用盆栽控水试验,设置轻度干旱、中度干旱和正常灌水(对照)3个水分梯度,研究干旱胁迫对辣椒果实中辣椒素、二氢辣椒素和VC含量的影响,同时研究了干旱胁迫后植株叶片光合特性的变化。结果表明:在开花后60d,轻度干旱处理能显著提高辣椒果实中辣椒素和二氢辣椒素的含量,分别比对照提高63.36%和63.03%。在开花后40d和50d,不同程度的干旱胁迫均能显著提高辣椒果实中的VC含量。在开花后60d,轻度干旱处理使辣椒果实中的VC含量达到最高,而中度干旱胁迫下辣椒果实中的VC含量显著低于对照。不同程度的干旱胁迫处理后,辣椒植株的净光合速率均呈现先上升后下降的趋势,并且随着干旱程度的增加而逐渐降低。

羊角椒辣味物质成份分析

用紫外光谱法、红外光谱法和高效液相色谱法分析羊角椒中辣味物质纯度与组成,表明辣味物质由辣椒素、二氢辣椒素和降二氢辣椒素组成。

小米辣辣椒素类物质含量测定

【目的】对小米辣Capsicum frutescens的辣椒素类物质合成规律进行研究.【方法】采用高效液相色谱法,对花后13个不同时期小米辣胎座、果肉的辣椒素和二氢辣椒素含量进行检测,结合SAS软件的多因素方差法进行分析.【结果和结论】辣椒素类物质在胎座和果肉中均能合成;其合成随花后果实发育逐渐增加到最高值,而后略微降低;其含量的高低与辣椒果实中组织部位和合成时期显著相关(P=0.00≤0.01),以胎座部位最多(22 d的质量分数达11.418 mg·g-1).

LC-MS/MS法测定食用油中的辣椒素和二氢辣椒素

建立了用氨基固相萃取小柱净化提取液，液相色谱串联质谱（LC-MS／MS）法测定食用油中辣椒素和二氢辣椒素含量的检测方法。结果表明，辣椒素在0--100ng／mL范围内线性关系良好（R2=0．9986），平均回收率在70．6％-90．5％，相对标准偏差（RSD，n=3）在3．1％～8．9％，检出限为0．03ixg／kg,二氢辣椒素在0～20ng／mL范围内线性关系良好（R2=0．9988），平均回收率在71．5％～100．7％，相对标准偏差（RSD，n=3）在6．O％～13．2％，检出限为0．006p,g／kg。该方法简便快速、准确可靠，是鉴别地沟油和测定食用油中辣椒素类物质的有效方法。

制备型高效液相色谱法制备纯化3种辣椒素单体

利用制备型反相高效液相色谱法从辣椒素类物质中制备了3种辣椒素单体。在PRC-ODS色谱柱(250mm×21.5mm,13μm)上,以甲醇-水(体积比为70∶30)为流动相,流速为15mL/min,采用等度洗脱方式,从80%的辣椒素类物质中制备了3种辣椒素单体。经核磁共振氢谱(1H NMR)及电子轰击离子源质谱(EI-MS)分析,确认它们分别为降二氢辣椒素、辣椒素和二氢辣椒素,收率分别为60.1%,58.9%和72.3%。高效液相色谱分析表明所制备的3种化合物的纯度分别达到了98.12%,99.93%及100.7%。

辣椒果实中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量研究

以辣椒中引起辛辣味的主要化学成分辣椒碱和二氢辣椒碱的含量为标准，利用HLPC法测定了不同辣椒品种果实整体及不同部位中辣椒总碱的含量。结果显示，辣椒总碱含量占干重变化范围为0.02%-0.582%；辣椒碱含量由高到低的顺序为朝天椒〉线辣椒〉羊角椒〉青椒〉彩椒，辣椒碱含量占辣椒总碱变化范围为37.0%-66%；二氢辣椒碱含量由高到低的顺序为朝天椒〉线辣椒〉羊角椒〉彩椒〉青椒，二氢辣椒碱含量占辣椒总碱变化范围为23.8%-53.1%。辣椒果实不同部位辣椒碱含量的趋势为胎座〉果皮〉种子。

不同基因型辣椒的辣椒素含量测定和辣度级别分析

以15种不同辣度辣椒基因型为材料,测定辣椒果实发育至成熟期间辣椒素和二氢辣椒素的质量浓度变化,并对这些辣椒进行辣度分级和辣味程度分类.结果表明,随着辣椒果实的发育成熟,辣椒素和二氢辣椒素呈先上升后小幅下降的趋势.印度极辣辣椒的辣椒素和二氢辣椒素的质量浓度最高,SHU达93.2万,是所有参试辣椒基因型中最辣的辣椒;海南黄灯笼椒的辣椒素和二氢辣椒素的质量浓度次之,分别为6.21mg.g-1和2.55 mg.g-1,SHU为15.0万,是国内辣椒参试品种中最辣的辣椒,上述2类型归为极辣辣椒.而小米椒、朝天椒的辣椒素和二氢辣椒素的质量浓度均显著高于印度辣椒和黄灯笼椒以外的其他品种,属高辣辣椒.2个甜椒品种的辣椒素和二氢辣椒素基本检测不到,属不辣辣椒.

辣椒中辣椒素类物质的液相色谱-串联质谱测定方法研究

建立液相色谱-串联质谱联用仪测定辣椒中辣椒素、二氢辣椒素和降二氢辣椒素3种辣椒素类物质的方法。样品用无水乙醇超声提取，经SB—C18色谱柱分离，以O．1％甲酸水溶液一甲醇为流动相进行梯度洗脱，多重反应监测（MRM），外标法定量。结果表明：降二氢辣椒素和辣椒素质量浓度在1．0～10000．0ng／mL范围内与峰面积呈现良好线性关系，二氢辣椒素质量浓度在0．5—10000．0ng／mL范围内与峰面积呈现良好线性关系。方法的加标回收率为96．8％～104．0％，相对标准偏差均小于5％，检出限为0．075—0．15mg／kg，定量限为0．25～0．5mg／kg，具有操作简单、灵敏度高、准确性好、线性范围宽、所用试剂毒性小等优势，可很好地满足辣椒中辣椒素、二氢辣椒素和降二氢辣椒素3种辣椒素类物质的测定。

辣椒素及二氢辣椒素对神经胶质瘤C6细胞和骨肉瘤ROS 17/2.8细胞的抑制作用

目的探讨辣椒素及二氢辣椒素对大鼠神经胶质瘤C6细胞、骨肉瘤ROS 17/2.8细胞的抑制作用,C6细胞凋亡率及细胞内氧自由基(ROS)的影响。方法 CCK-8法检测辣椒素及二氢辣椒素(50、100、150、200μmol/L)对大鼠神经胶质瘤C6细胞的抑制作用;Annexin V-FITC、PI双染检测辣椒素及二氢辣椒素对C6细胞凋亡率的影响;DCFH-DA检测C6细胞内ROS水平。结果辣椒素及二氢辣椒素显著抑制C6细胞、ROS 17/2.8细胞的增殖,且与时间和药物浓度呈正相关。辣椒素处理C6细胞12 h后,早期凋亡率明显增加,ROS水平显著提高。结论辣椒素及二氢辣椒素对大鼠神经胶质瘤C6细胞、骨肉瘤ROS 17/2.8细胞具有显著抑制作用,其抑制C6细胞增殖机制与促进肿瘤细胞凋亡,增加ROS的产生密切相关,辣椒素及二氢辣椒素有望成为新型抗肿瘤药物。

超声提取辣椒素工艺条件的研究

运用超声波法从辣椒中提取辣椒素,以HPLC法测定辣椒素总量为评价指标,通过正交实验及方差分析确定了用甲醇:四氢呋喃=(1:1)提取辣椒素的最佳工艺为:提取功率100w,物料比1:5,提取时间45min,提取3次。

二氢辣椒碱标准样品的研制

建立了二氢辣椒碱标准样品的研制方法。采用催化氢化还原辣椒碱提取物和重结晶的方法制备二氢辣椒碱,UV、IR、MS和NMR等方法对二氢辣椒碱结构鉴定,并进行了均匀性、稳定性检验,经国内8个具有分析资质的实验室进行协同定值,二氢辣椒碱标准样品的标准值为99.30%,置信度95%的不确定度值为0.32%。所制得二氢辣椒碱标准样品达到国家标准样品的技术要求,可用于有关二氢辣椒碱检测方法的校正和相关产品的质量控制。

离子交换纤维吸附二氢辣椒碱的动力学研究

首先采用SEM和IR方法表征了吸附二氢辣椒碱前后的ZB-2强碱性阴离子交换纤维,确定了可以吸附;然后测定了离子交换纤维吸附二氢辣椒碱的速率,确定了吸附在3 min时由液膜扩散控制转入离子交换纤维内扩散控制;最后考察了搅拌速度、溶液浓度、吸附温度和离子交换纤维直径对离子交换速率的影响,得到了离子交换纤维内扩散控制交换过程的表观活化能、反应级数、速率常数和动力学方程式。

固相萃取-超高效液相色谱-串联质谱快速检测食用油和地沟油中辣椒素和二氢辣椒素

采用基于氢键相互作用原理的固相萃取与超高效液相色谱-串联质谱联用技术,建立了食用油和地沟油中天然辣椒素和二氢辣椒素的快速分析方法。该方法中油脂样品经正己烷稀释后直接进行固相萃取。优化了一系列影响萃取效率的参数,包括固相萃取材料用量、解吸液种类、解吸液体积、上样液中油脂基质的含量等。在优化条件下,以上两种目标物在0.01-100ng/mL范围内线性关系良好（R^2〉0.9983）,检出限低至4.5pg/mL,日内、日间相对标准偏差分别小于12.2%和14.1%。该方法已成功应用于多种食用油和地沟油中天然辣椒素和二氢辣椒素的分析检测,具有简便快捷,有机溶剂消耗少等优点,为地沟油的鉴别提供了一种新选择。