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Changes of CD8+CD28-T regulatory cells in rat model of colitis induced by 2,4-dinitrofluorobenzene 被引量:3
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作者 Wen-Bin Xiao, Department of Gastroenterology, Peking University People’s Hospital, Beijing 100044, China Yu-Lan Liu, Department of Gastroenterology, Peking University People’s Hospital, Beijing 100044, China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2003年第11期2528-2532,共5页
AIM:To determine the changes of CD8+ T subsets especially CD8+CD28-T regulatory cells in rat model of experimental colitis induced by 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB). METHODS:The rat model of experimental colitis was ... AIM:To determine the changes of CD8+ T subsets especially CD8+CD28-T regulatory cells in rat model of experimental colitis induced by 2,4-dinitrofluorobenzene (DNFB). METHODS:The rat model of experimental colitis was induced by enema with DNFB.Ten days later,colonic intraepithelial and splenic lymphooltes were isolated from colitis animals (n=16) and controls (n=8).The proportion of CD8+ T cells,CD8+CD28+ T cells and CD8+CD28-T regulatory cells were determined by flow cytometry. RESULTS:The model of experimental colitis was successfully established by DNFB that was demonstrated by bloody diarrhea,weight loss and colonic histopathology.The proportion of CD8+ T cells in either splenic or colonic intraepithelial lymphocytes was not significantly different between colitis animals and controls (spleen:34.6±7.24 % vs 33.5±9.41%, colon:14.0±8.93 % vs 18.0±4.06 %,P>0.05).But CD8+CD28- T regulatory cells from colitis animals were significantly more than those from controls (spleen:11.3±2.26 % vs 5.64±1.01%, colon:6.50±5.37 % vs 1.07±0.65 %,P<0.05).In contrast, CD8+CD28+ T cells from colitis animals were less than those from controls (spleen:23.3±6.14 % vs 27.8±9.70 %,P=0.06; colon:7.52±4.18 % vs 16.9±4.07 %,P<0.05).The proportion of CD8+CD28-T regulatory cells in splenic and colon intraepithelial CD8+ T cells from colitis animals was higher than that from controls (spleen:33.3±5.49 % vs 18.4±7.26 %, colon:46.0±14.3 % vs6.10±3.72 %,P<0.005). CONCLUSION:Experimental colitis of rats can be induced by DNFB with simplicity and good reproducibility.The proportion of CD8+CD28-T regulatory cells in rats with experimental colitis is increased,which may be associated with the pathogenesis of colitis. 展开更多
关键词 Animals Antigens CD28 CD8-Positive T-Lymphocytes COLITIS Colon dinitrofluorobenzene Disease Models Animal Flow Cytometry Male RATS Rats Sprague-Dawley Research Support Non-U.S. Gov't Specific Pathogen-Free Organisms Spleen
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大黄中氨基酸的DNFB柱前衍生化高效液相色谱测定 被引量:5
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作者 兰韬 王风云 +3 位作者 唐涛 魏远隆 李彤 张维冰 《生命科学仪器》 2007年第11期41-43,共3页
通过升高色谱柱温度,结合线性梯度洗脱的分离模式调整分离选择性,发展了一种氨基酸的2,4-二硝基氟苯柱前衍生化高效液相色谱分析方法,也将该方法用于大黄中氨基酸含量的测定。所发展的方法采用Kromasil C18,(250mm×4.6mm I.D.5μm... 通过升高色谱柱温度,结合线性梯度洗脱的分离模式调整分离选择性,发展了一种氨基酸的2,4-二硝基氟苯柱前衍生化高效液相色谱分析方法,也将该方法用于大黄中氨基酸含量的测定。所发展的方法采用Kromasil C18,(250mm×4.6mm I.D.5μm)色谱柱,44℃柱温,以3段线性梯度可以在30分钟内基线分离17种基本氨基酸,方法具有普适性好、稳定性高等特点。 展开更多
关键词 氨基酸 衍生化 2 4-二硝基氟苯(dnfb) 高效液相色谱
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DNFB柱前衍生化RP-HPLC测定大黄种子氨基酸的含量 被引量:6
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作者 刘何春 徐文华 +3 位作者 沈建伟 宋文珠 臧黎黎 周国英 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1056-1061,共6页
采用柱前衍生RP-HPLC法测定大黄种子中氨基酸的含量。6mol/L盐酸水解得到氨基酸,以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生化试剂,梯度洗脱。色谱柱为Gemlmi—NX C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相A相为0.1M乙酸钠水溶液,B相为乙... 采用柱前衍生RP-HPLC法测定大黄种子中氨基酸的含量。6mol/L盐酸水解得到氨基酸,以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生化试剂,梯度洗脱。色谱柱为Gemlmi—NX C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相A相为0.1M乙酸钠水溶液,B相为乙腈-水(1:1),柱温37℃,检测波长360nm。结果表明,三种正品大黄种子中均含有17种氨基酸,总量在11.30%-19.26%。该方法灵敏、准确,有良好的重复性和稳定性。 展开更多
关键词 大黄种子 RP-HPLC 2 4-二硝基氟苯 氨基酸
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Anti-DNP IgE联合DNFB诱导免疫性接触性荨麻疹小鼠模型的建立 被引量:5
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作者 李润祥 冯承恩 +2 位作者 梁碧华 田歆 朱慧兰 《皮肤性病诊疗学杂志》 2015年第1期25-28,32,共5页
目的:利用抗-二硝基苯酚(anti-DNP)Ig E单克隆抗体和2,4-二硝基氟苯(DNFB)建立免疫性接触性荨麻疹小鼠模型。方法:将36只BALB/c小鼠随机分成3组,每组12只:造模组小鼠尾静脉注射anti-DNP Ig E单克隆抗体,24 h后在小鼠双耳涂DNFB进行激发... 目的:利用抗-二硝基苯酚(anti-DNP)Ig E单克隆抗体和2,4-二硝基氟苯(DNFB)建立免疫性接触性荨麻疹小鼠模型。方法:将36只BALB/c小鼠随机分成3组,每组12只:造模组小鼠尾静脉注射anti-DNP Ig E单克隆抗体,24 h后在小鼠双耳涂DNFB进行激发;单纯Ig E组仅注射anti-DNP Ig E单克隆抗体,空白对照组小鼠注射生理盐水,均在24 h后在小鼠双耳涂生理盐水。观察小鼠在14 d内的风团、瘙痒、耳朵肿胀度情况,并检测血清中Ig E、IL-4、IFN-γ、组胺水平和皮肤病理。结果:造模组全部小鼠产生风团;与其它两组相比,造模组小鼠搔抓次数、耳朵肿胀度及组胺血清水平均明显升高(P值均<0.01),但三组间Ig E、IL-4、IFN-γ水平无明显差异(P>0.05)。结论:静脉注射anti-DNP Ig E单克隆抗体联合外用DNFB可快速、可靠地建立免疫性接触性小鼠荨麻疹模型。 展开更多
关键词 免疫性接触性荨麻疹模型 小鼠 抗-二硝基苯酚Ig E单克隆抗体 二硝基氟苯
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氧化苦参碱对DNFB诱导的ICR小鼠慢性湿疹的治疗作用 被引量:1
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作者 宋洪彬 王媛 +1 位作者 施惠娟 薄开平 《宁夏医科大学学报》 2017年第9期1022-1025,1033,共5页
目的探究氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对二硝基氟苯(Dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导的ICR小鼠慢性湿疹模型的治疗作用。方法将25只ICR小鼠随机分为五组,分别为30mg·kg^(-1)氧化苦参碱组(OMT Ⅰ组)、60mg·kg^(-1)氧化苦参碱组(... 目的探究氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对二硝基氟苯(Dinitrofluorobenzene,DNFB)诱导的ICR小鼠慢性湿疹模型的治疗作用。方法将25只ICR小鼠随机分为五组,分别为30mg·kg^(-1)氧化苦参碱组(OMT Ⅰ组)、60mg·kg^(-1)氧化苦参碱组(OMT Ⅱ组)、1mg·kg^(-1)地塞米松组、模型组及正常对照组,其中前四组利用DNFB致敏和激发建立ICR小鼠慢性湿疹模型,致敏当天分别腹腔注射30mg·kg^(-1)氧化苦参碱、60mg·kg^(-1)氧化苦参碱、1mg·kg^(-1)地塞米松及PBS溶液,正常对照组腹腔注射等量PBS溶液,每日1次,共6周。治疗前后对小鼠耳皮损进行评分,测量耳厚度变化;实验结束行耳部组织病理检查,利用HE染色对比观察各组小鼠耳皮损组织病理学变化,计算各组小鼠皮损中炎症细胞数量。结果从第2、3、4次激发后24h,OMT Ⅰ组、OMT Ⅱ组、地塞米松组小鼠皮损评分均低于模型组(P<0.05),OMT Ⅱ组与地塞米松组间差异无统计学意义(P>0.05),第4次激发后24h,评分OMT Ⅱ组低于OMT Ⅰ组(P<0.05)。从第2、3、4次激发后24h,小鼠耳厚度OMT Ⅰ组、OMT Ⅱ组、地塞米松组均小于模型组(P<0.05),OMT Ⅰ组与地塞米松组间差异无统计学意义(P>0.05),OMT Ⅱ组小于地塞米松组(P<0.05),第4次激发后24h,OMT Ⅱ组小于OMT Ⅰ组(P<0.05)。OMT Ⅰ组、OMT Ⅱ组、地塞米松组及正常对照组小鼠炎细胞数均小于模型组(P均<0.05),OMT Ⅱ组与地塞米松组间差异无统计学意义(P>0.05),OMT Ⅱ组小于OMT Ⅰ组(P<0.05)。结论氧化苦参碱可改善DNFB诱导的ICR小鼠慢性湿疹皮损,显著减轻炎症反应,疗效显著。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 慢性湿疹 二硝基氟苯 小鼠
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DNFB皮肤延迟过敏反应对膀胱肿瘤患者细胞免疫状态的检测
6
作者 杜广辉 章咏裳 +1 位作者 胡仁昭 周惜才 《临床泌尿外科杂志》 北大核心 1989年第4期199-200,202,共3页
对27例膀胱肿瘤患者进行DNFB延迟型变态反应皮肤试验,检测机体细胞免疫功能状态,结果表明DNF啵肤试验反应与膀胱肿瘤的分级分期的高低有密切关系,阴性率高多表示肿瘤恶性程度高或浸润较深。对致敏剂量的DNFB不产生自发性红斑反应者,其... 对27例膀胱肿瘤患者进行DNFB延迟型变态反应皮肤试验,检测机体细胞免疫功能状态,结果表明DNF啵肤试验反应与膀胱肿瘤的分级分期的高低有密切关系,阴性率高多表示肿瘤恶性程度高或浸润较深。对致敏剂量的DNFB不产生自发性红斑反应者,其免疫功能是异常的。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 细胞免疫功能 dnfb检测
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DNFB柱前衍生化RP-HPLC测定大鼠肝组织18种氨基酸 被引量:2
7
作者 王小琴 邹玉安 +1 位作者 郭春燕 薛茜 《河北北方学院学报(自然科学版)》 2015年第5期4-8,共5页
目的采用柱前衍生RP-HPLC法测定大鼠肝脏组织中18种氨基酸的含量。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,采用Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇作为流动相A,0.015mol·L-1醋酸钠缓冲液(pH=6.0)作为流动相B... 目的采用柱前衍生RP-HPLC法测定大鼠肝脏组织中18种氨基酸的含量。方法以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,采用Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,以甲醇作为流动相A,0.015mol·L-1醋酸钠缓冲液(pH=6.0)作为流动相B,梯度洗脱,柱温30℃,流速为1ml·min-1,检测波长360nm。结果在30min内大鼠肝脏组织中的18种氨基酸可以得到完全分离,且各氨基酸浓度与峰面积之间具有良好的线性关系,回收率在88.3%~110%之间。结论该方法简便、快捷、灵敏、准确,有高度的稳定性和很好的重复性。可以为其他生物样品氨基酸测定提供参考。 展开更多
关键词 肝组织 氨基酸 2 4-二硝基氟苯 RP-HPLC
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不同品种大枣对DNFB诱导小鼠超敏反应的抑制作用
8
作者 王淑萍 张静泽 +2 位作者 张志丹 高文远 陈虹 《天津药学》 2016年第6期1-3,共3页
目的:研究不同品种大枣对二硝基苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响;评价不同品种大枣在免疫抑制作用上的差异。方法:将昆明小鼠随机分为对照组、DTH组与不同品种大枣给药组,通过致敏剂DNFB诱发DTH模型,检测不同品种大枣给药... 目的:研究不同品种大枣对二硝基苯(DNFB)诱导的小鼠迟发型超敏反应(DTH)的影响;评价不同品种大枣在免疫抑制作用上的差异。方法:将昆明小鼠随机分为对照组、DTH组与不同品种大枣给药组,通过致敏剂DNFB诱发DTH模型,检测不同品种大枣给药后模型小鼠耳廓重量的变化,同时测定肝指数、脾指数、胸腺指数进行综合评价。结果:实验表明行唐大枣、山东长枣、诺羌大枣、宁夏滩枣能够明显抑制DNFB引起的超敏反应,同时,还可对免疫器官胸腺起到保护作用。结论:不同产地大枣的免疫活性存在差异。 展开更多
关键词 大枣 dnfb诱导小鼠 超敏反应
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敷和汤对特应性皮炎小鼠Toll样受体4/核因子-κB通路调控辅助性T细胞1/辅助性T细胞2的作用及机制研究
9
作者 青千裕 赵乐 +3 位作者 赵子苇 姜楚洋 王兆南 李艳彦 《安徽医药》 CAS 2024年第8期1507-1511,I0001,共6页
目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路探讨敷和汤对特应性皮炎(AD)小鼠模型的作用及辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)免疫平衡的机制。方法将40只BALB/c小鼠采用随机数字表法分为四组:对照组、模型组、地氯雷他定... 目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路探讨敷和汤对特应性皮炎(AD)小鼠模型的作用及辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)免疫平衡的机制。方法将40只BALB/c小鼠采用随机数字表法分为四组:对照组、模型组、地氯雷他定组、敷和汤组,每组10只,除正常组外,其余各组均用2,4-二硝基氟苯(DNFB)刺激。在DNFB刺激后的第14天各组给予相应药物治疗14 d。治疗后观察各组小鼠皮损变化;记录10 min内小鼠搔抓次数;测量胸腺、脾脏指数;苏木精-伊红(HE)染色观察皮肤组织病理形态学改变;免疫组化检测TLR4阳性蛋白;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)和瘤坏死因子-α(TNF-α)水平变化;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测小鼠皮肤组织中核因子-κB P65(NF-κB P65)、TLR4、白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素1β(IL-1β)、干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA水平变化。结果与正常组相比,模型组小鼠皮损严重、表皮明显增生、角化过度、大量炎性细胞浸润;小鼠搔抓次数(12.80±1.32)次/10分钟和皮损评分(4.00±0.67)分、脾脏和胸腺指数分别为42.53±2.04和35.76±2.01,免疫组化检测TLR4阳性蛋白为97.20±12.19;血清IgE、IL-4、IL-6和TNF-α水平分别为(302.39±46.60)μg/L、(239.54±29.23)ng/L、(249.94±33.62)ng/L、(310.01±50.09)ng/L,皮损NF-κB P65、TLR4、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达分别为(6.70±0.38、7.45±0.30、4.03±0.57、3.35±0.35、5.31±0.12、41.21±1.17)显著升高(均P<0.05);敷和汤组给药14 d后小鼠搔抓次数(4.30±0.67)次/10分钟和皮损评分(1.40±0.52)分、脾脏和胸腺指数分别为29.11±1.61和22.02±1.15,免疫组化检测TLR4阳性蛋白为70.85±7.76;血清IgE、IL-4、IL-6和TNF-α水平分别含量为(183.89±11.74)μg/L、(112.67±9.233)ng/L、(121.88±10.84)ng/L、(153.24±12.78)ng/L,皮损NF-κB P65、TLR4、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达分别为(2.87±0.15、2.23±0.31、2.57±0.46、2.39±0.19、2.35±0.21、23.27±2.44)低于模型组(均P<0.05);地氯雷他定组给药14 d后小鼠搔抓次数(5.30±0.67)次/10分钟和皮损评分(1.80±0.63)分、脾脏和胸腺指数分别为27.23±1.19和20.10±1.20,免疫组化检测TLR4阳性蛋白为77.28±5.77;血清IgE、IL-4、IL-6和TNF-α水平含量分别为(175.97±13.12)μg/L、(116.07±9.48)ng/L、(112.11±8.89)ng/L、(143.90±10.83)ng/L,皮损NF-κB P65、TLR4、IL-2、IL-10、IFN-γ、IL-1β的mRNA表达分别为(2.53±0.08、3.46±0.28、2.03±0.11、1.52±0.22、2.15±0.19、23.52±1.24)低于敷和汤组(均P<0.05)。结论敷和汤通过NF-κB通路的激活抑制相关炎症因子反应以及调节Th1/Th2发挥免疫稳定的作用,促进皮损修复,从而达到治疗的作用。 展开更多
关键词 皮炎 特应性 敷和汤 2 4-二硝基氟苯 TOLL样受体4 炎症因子
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三七素合成及其结构分析
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作者 冯淼 毛羽 张天 《中国高新科技》 2024年第6期94-96,共3页
以L(+)-天门冬酰胺为原料,经(Boc)2O保护、霍夫曼降解、取代和水解反应,得到三七素,总纯度可达99.8%。反应过程,可通过TLC显色技术进行监控。三七素的化学结构为β-ODAP,其异构体α-ODAP同时存在。采用2,4-二硝基氟苯进行柱前衍生,分析H... 以L(+)-天门冬酰胺为原料,经(Boc)2O保护、霍夫曼降解、取代和水解反应,得到三七素,总纯度可达99.8%。反应过程,可通过TLC显色技术进行监控。三七素的化学结构为β-ODAP,其异构体α-ODAP同时存在。采用2,4-二硝基氟苯进行柱前衍生,分析HPLC图谱后发现,β-ODAP和α-ODAP在水存在条件下加热时,两者会相互转化,并最终达到β-ODAP和α-ODAP的比例为60∶40的平衡状态。自然界三七素中β-ODAP和α-ODAP也同时存在,与化学合成的三七素具有相同的化学本质。 展开更多
关键词 三七素 TLC 2 4-二硝基氟苯(FDNB) 结构分析
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超高效液相色谱法检测特殊医学用途配方食品中22种游离氨基酸 被引量:1
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作者 尹丽丽 郑红 +5 位作者 程志 卢兰香 薛霞 王骏 胡梅 刘艳明 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第14期264-271,共8页
本文建立了特殊医学用途配方食品中22种游离氨基酸的超高效液相色谱检测方法。样品中氨基酸用磺基水杨酸提取,以2,4二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生试剂,以乙腈水-甲酸铵为流动相梯度洗脱,HSS T3色谱柱高效分离,超高效液相-二极管阵列检测... 本文建立了特殊医学用途配方食品中22种游离氨基酸的超高效液相色谱检测方法。样品中氨基酸用磺基水杨酸提取,以2,4二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生试剂,以乙腈水-甲酸铵为流动相梯度洗脱,HSS T3色谱柱高效分离,超高效液相-二极管阵列检测器检测,外标法定量。结果显示,22种氨基酸在2~100μg/mL范围内线性关系良好(R2>0.99)。方法检出限(S/N≥3)为10 mg/100 g,定量限(S/N≥10)为25 mg/100 g,低、中、高三个加标水平的回收率在90.1%~109.1%,相对标准偏差为0.8%~6.9%。方法简单高效、准确度高、重复性好,适用于特殊医学用途配方食品中22种游离氨基酸的定性、定量分析,为保障特殊医学用途配方食品的质量安全提供技术支持。 展开更多
关键词 特殊医学用途配方食品 游离氨基酸 柱前衍生 2 4二硝基氟苯 超高效液相色谱法
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经皮诱导特应性皮炎小鼠模型的研究进展 被引量:1
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作者 冯树晶 宋志强 《皮肤科学通报》 2023年第1期76-80,共5页
特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种慢性复发性的炎症性疾病,其发病机制比较复杂,涉及遗传和环境因素、皮肤屏障功能障碍、皮肤微生物菌群失调及异常的免疫反应等。为了更便捷、更深入地研究其发病机制,人们一直努力构建AD的小鼠模... 特应性皮炎(atopic dermatitis,AD)是一种慢性复发性的炎症性疾病,其发病机制比较复杂,涉及遗传和环境因素、皮肤屏障功能障碍、皮肤微生物菌群失调及异常的免疫反应等。为了更便捷、更深入地研究其发病机制,人们一直努力构建AD的小鼠模型,由于AD发病机制的复杂性和临床表现的多样性,涌现出种类繁多的AD小鼠模型,我们对常见外源物质经皮诱导的AD小鼠模型进行了整理归纳,阐述其相关机制和临床表现,并对其优缺点进行初步的分析,为研究者选择合适的AD小鼠模型提供参考。 展开更多
关键词 特应性皮炎 小鼠模型 尘螨 氟苯 卵清蛋白
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柱前衍生化HPLC法测定植物水解蛋白中的17种氨基酸
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作者 陈建芳 江学文 +1 位作者 梁科 王莹莹 《食品安全导刊》 2023年第11期99-104,共6页
本文建立了一种2,4-二硝基氟苯柱前衍生测定植物水解蛋白(Hydrolyzed Vegetable Protein,HVP)中17种氨基酸的高效液相色谱方法。色谱柱为Diamonsil AAA,柱温为45℃,检测波长为360nm,进样体积为10μL,流速为1.0 m L·min^(-1);流动相... 本文建立了一种2,4-二硝基氟苯柱前衍生测定植物水解蛋白(Hydrolyzed Vegetable Protein,HVP)中17种氨基酸的高效液相色谱方法。色谱柱为Diamonsil AAA,柱温为45℃,检测波长为360nm,进样体积为10μL,流速为1.0 m L·min^(-1);流动相A为0.02 mol·L^(-1)Na(2)HPO_(4)+0.02mol·L^(-1)NaH_(2)PO_(4)水溶液,流动相B为甲醇∶乙腈=10∶90(V∶V),梯度洗脱,17种氨基酸得到了很好的分离,衍生方法操作简单,方法精密度高、稳定性和重复性均良好,适用于植物水解蛋白中氨基酸的定量测定。HVP与酿造酱油中的氨基酸组成差异较大,主要体现在谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸、甘氨酸以及脯氨酸,可为酿造酱油与配制酱油的鉴别提供一定依据。 展开更多
关键词 植物水解蛋白(HVP) 氨基酸 2 4-二硝基氟苯 高效液相色谱法 酿造酱油
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盐酸奥芬米洛对二硝基氟苯诱导小鼠迟发型变态反应的影响 被引量:13
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作者 徐孝平 王辉 +3 位作者 陈民利 林琳 寿旗扬 周卫民 《浙江中医药大学学报》 CAS 2006年第6期617-618,共2页
[目的]观察盐酸奥芬米洛对小鼠迟发型变态反应的影响。[方法]取体重为18~22g的ICR小鼠120只,雌雄各半,按体重随机分6组,即空白对照组、模型对照组、盐酸奥芬米洛高(10.0mg/kg)、中(5.0mg/kg)、低(2.5mg/kg)剂量组和阳... [目的]观察盐酸奥芬米洛对小鼠迟发型变态反应的影响。[方法]取体重为18~22g的ICR小鼠120只,雌雄各半,按体重随机分6组,即空白对照组、模型对照组、盐酸奥芬米洛高(10.0mg/kg)、中(5.0mg/kg)、低(2.5mg/kg)剂量组和阳性对照(CsA 15mg/kg)组,每组20只,各给药组分别给予相应浓度的相应药物,空白与模型对照组给予蒸馏水10ml/kg,每日1次,连续给药1周后,除空白对照组外,每鼠腹部用1%DNFB溶液均匀涂抹进行致敏,致敏后第5天,将1%DNFB溶液均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击,空白对照组同样涂耳但未致敏,攻击后24h,测定右耳的肿胀度和小鼠的脾指数和胸腺指数。[结果]不同剂量的盐酸奥芬米洛能不同程度地降低DNFB致敏ICR小鼠耳廓肿胀度、降低脾脏系数和胸腺指数,[结论]盐酸奥芬米洛可抑制DNFB诱导小鼠迟发型变态反应(DTH),具有抑制小鼠的特异性细胞免疫功能的作用。 展开更多
关键词 盐酸奥芬米洛 二硝基氟苯 迟发型变态反应 小鼠
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氧化苦参碱对 CD_4^+CD_(25)^+调节性T细胞(Tr)和淋巴细胞增殖的影响(英文) 被引量:20
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作者 李建国 伍斌 +3 位作者 谢红付 张江林 易梅 李吉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期993-999,1004,共8页
目的通过分析氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)各剂量组对小鼠外周血调节性T细胞(regulatory Tcells,Tr细胞)数量的影响,同时检测OMT对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠淋巴结T细胞增殖的影响,探讨OMT治疗ACD的免疫学作用机制,以期为临床用OMT治... 目的通过分析氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)各剂量组对小鼠外周血调节性T细胞(regulatory Tcells,Tr细胞)数量的影响,同时检测OMT对刀豆蛋白A(Con A)刺激的小鼠淋巴结T细胞增殖的影响,探讨OMT治疗ACD的免疫学作用机制,以期为临床用OMT治疗变态反应性疾病提供更深入的理论和实验依据。方法建立DNFB诱发的小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射(ip),在实验进程的第1、7、14、21和28天小鼠尾静脉采血,抗-CD3、抗-CD4、抗-CD25单抗进行三色免疫荧光标记,流式细胞术检测各组CD4+CD25+T细胞数量。利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖的影响。实验数据以SPSS10.0以及CELLQuest软件进行处理。结果体外实验证明,在500、125和31μg/mL组的OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖呈剂量依赖性抑制,而在16、8、4和2μg/mL组的OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖起促进作用,但其剂量依赖关系不明显。腹腔注射OMT能明显提高小鼠外周血中CD4+CD25+T细胞的数量,与HCT组比较(P<0.01),与PBS组比较(P<0.01)。结论OMT对小鼠淋巴结T细胞的增殖呈双向作用;腹腔注射OMT能明显提高小鼠外周血中CD4+CD25+T细胞的数量;即OMT对免疫系统的影响呈双向作用,OMT是一种双向免疫调节剂。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 T淋巴细胞 CD4^+CD25^+T细胞
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脑蛋白水解物中氨基酸的柱前衍生高效液相色谱测定 被引量:3
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作者 兰韬 王风云 +3 位作者 唐涛 魏远隆 李彤 张维冰 《分析科学学报》 CAS CSCD 2007年第5期535-538,共4页
通过升高色谱柱温度,结合线性梯度洗脱的分离模式调整色谱分离的选择性,提出了一种测定脑蛋白水解物注射液中氨基酸含量的2,4-二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生高效液相色谱方法。本法采用Kromasil C18(250×4.6mmi.d.,5μm)色... 通过升高色谱柱温度,结合线性梯度洗脱的分离模式调整色谱分离的选择性,提出了一种测定脑蛋白水解物注射液中氨基酸含量的2,4-二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生高效液相色谱方法。本法采用Kromasil C18(250×4.6mmi.d.,5μm)色谱柱,柱温44℃,在30min内以3个线性梯度能完全分离17种氨基酸,定量线性范围为0.2~1.0mg/L;加标回收率为89%~108%。该法具有适用性好、稳定性高等特点,也可以应用于其它种类样品中氨基酸的测定。 展开更多
关键词 氨基酸 衍生化 2 4-二硝基氟苯(dnfb) 高效液相色谱法
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氧化苦参碱抑制二硝基氟苯所致小鼠接触性皮炎及淋巴细胞增殖 被引量:13
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作者 伍斌 蔡小嫦 +4 位作者 曾耀英 施军 王通 肇静娴 黄秀艳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期931-935,共5页
目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法①建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化。②利用... 目的探讨氧化苦参碱(OMT)对二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用及小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法①建立DNFB所致小鼠ACD模型,以不同剂量的OMT、PBS、氢化可的松(HCT)进行腹腔注射,检测小鼠耳廓肿胀度变化。②利用羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,流式细胞术检测OMT对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果①OMT对DNFB所致小鼠ACD呈剂量依赖性抑制作用,且与同等剂量HCT作用效果相似,但副作用明显减小。②体外实验证明,在500、125和31mg/L组,OMT对小鼠淋巴细胞增殖呈剂量依赖性抑制。结论OMT对DNFB所致小鼠ACD有显著的抑制作用,而且抑制小鼠淋巴细胞增殖;OMT是一种免疫抑制剂。 展开更多
关键词 二硝基氟苯 皮炎 变应性接触性 苦参 淋巴细胞
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HPLC法测定丙酸菌发酵液中游离氨基酸的含量 被引量:1
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作者 耿涛华 李巧玲 +1 位作者 邢健 王丽丽 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2013年第2期233-238,共6页
建立了一种利用反相高效液相色谱法检测18种氨基酸的方法。以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生剂,使用TIANHE Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)反相色谱柱,采用二元梯度洗脱,流动相A相为0.05mM醋酸钠缓冲液(pH5.3),B相为乙腈-水(v/v=... 建立了一种利用反相高效液相色谱法检测18种氨基酸的方法。以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为柱前衍生剂,使用TIANHE Kromasil C18(4.6mm×250mm,5μm)反相色谱柱,采用二元梯度洗脱,流动相A相为0.05mM醋酸钠缓冲液(pH5.3),B相为乙腈-水(v/v=1∶1)。在该条件下,各氨基酸线性回归方程相关系数均大于0.9991,18种氨基酸的加样回收率均在95%103%范围内,该法快速、可靠,并将其应用于丙酸菌发酵液中的氨基酸检测。 展开更多
关键词 氨基酸 dnfb HPLC 发酵液
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UPLC快速测定可溶性肽或蛋白中谷氨酰胺含量 被引量:6
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作者 张海华 陶冠军 周惠明 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期338-339,365,共3页
建立了UPLC测定谷氨酰胺的方法。采用BTI([bis(trifluoroacetoxy)iodo]benzene,BTI)衍生化肽或蛋白中非氮端的谷氨酰胺(Glutamine,Gln),衍生产物L-2,4-二氨基丁酸(L-2,4-Diaminobutyric acid,DABA)经2,4-二硝基氟苯(2,4-Dinitrofluorobe... 建立了UPLC测定谷氨酰胺的方法。采用BTI([bis(trifluoroacetoxy)iodo]benzene,BTI)衍生化肽或蛋白中非氮端的谷氨酰胺(Glutamine,Gln),衍生产物L-2,4-二氨基丁酸(L-2,4-Diaminobutyric acid,DABA)经2,4-二硝基氟苯(2,4-Dinitrofluorobenzene,DNFB)紫外显色后,用超高效液相色谱仪(UPLC)在355nm下进行检测测定。结果表明,DABA的最低检出限为0.2ng/mL,线性范围为1~10μg/mL。经Ala-Gln、β-乳球蛋白、α-乳清蛋白和溶菌酶四种蛋白标品检验,测得标样中Gln的回收率为93%±2%~98%±3%。所用方法具有检出限低、样品用量少、高效快速等特点。 展开更多
关键词 谷氨酰胺 超高效液相色谱 L-2 4-二氨基丁酸 2 4-二硝基氟苯
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山羊角提取物中氨基酸含量测定研究 被引量:12
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作者 杨清林 傅亚 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1023-1026,共4页
目的:对山羊角提取物中氨基酸进行含量测定研究。方法:采用高效液相柱前衍生2,4-二硝基氟苯法(DNFB-HPLC)检测山羊角提取物中常规氨基酸含量。色谱柱为Elite AAK(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A:乙腈-水(1∶1),流动相B:0.05 mol/L的... 目的:对山羊角提取物中氨基酸进行含量测定研究。方法:采用高效液相柱前衍生2,4-二硝基氟苯法(DNFB-HPLC)检测山羊角提取物中常规氨基酸含量。色谱柱为Elite AAK(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A:乙腈-水(1∶1),流动相B:0.05 mol/L的醋酸钠缓冲液(pH=6.4),流速为1.2 mL/min,检测波长360 nm,柱温27℃。结果:氨基酸浓度在2.50~125.0μg/mL范围内,线性相关系数均大于0.99;氨基酸的平均回收率在97%~106%之间。但山羊角提取物各批次之间氨基酸含量差异较大。结论:柱前衍生DNFB法适合用于山羊角提取物中氨基酸的检测。 展开更多
关键词 山羊角提取物 dnfb 氨基酸
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