探讨云南山茶起源的一线曙光──野生二倍体类型在金沙江流域的发现

新近发现的云南山茶（Ｃａｍｅｌｌｉａｒｅｔｉｃｕｌａｔａ）原始二倍体类型分布于金沙江坷谷流域的云南华坪县及四川盐边县，海拔１８００—２８００ｍ。其植被类型为亚热带常绿阔叶林与云南松的混交林，生境较为湿润。云南山茶原始二倍体类型的形态特征与广布的六倍体类群非常相似，而与怒江山茶及西南山茶的形态特征不同。二倍体的花粉母细胞在减数分裂中期Ｉ形成１５个二价体，间期的细胞核结构为球形前染色体型，分裂前期染色体为中间型，其核型公式为２ｎ＝３０＝２２ｍ＋２ｍ（ＳＡＴ）＋４ｓｍ＋２ｓｔ。根据本文和前人的研究结果，作者对云南山茶的形成和演化进行了讨论，否定了云南腾冲是云南山茶的原产地的观点，并认为二倍体类型的云南山茶与怒江山茶（Ｃ．ｓａｌｕｅｎｅｎｓｉｓ），西南山茶（Ｃ．ｐｉｔａｒｄｉｉｖａｒ．ｐｉｔａｒｄｉｉ）经过多次杂交和连续多倍化形成一个多倍体复合体，云南山茶的二倍体类型与怒江山茶及西南山茶可能是六倍体云南山茶的共有祖先。

卫氏并殖吸虫(二倍体型)在大鼠体内发育的观察

目的 :了解卫氏并殖吸虫 (二倍体型 )在大鼠体内发育的宿主适宜性。方法 :每鼠经口感染囊蚴后定期剖杀 ,从肌肉、体腔或肺虫囊中收集虫体并观测。结果 :感染后第 5 0 ,70 ,15 0 ,30 0 ,5 0 0天 ,平均获虫率依次是 4 1.0 % ,39.5 % ,4 7.5 % ,5 5 .0 %和 6 0 .5 %。检获的虫体数于肌肉、腹腔、胸腔和肺虫囊中的分布依次是 92 .8% (45 2 / 4 87) ,2 .7% (13/ 4 87) ,4 .1%(2 0 / 4 87)和 0 .4 % (2 / 4 87)。在 1鼠肺部的 1虫囊中获成虫 2条 ,2鼠的胸腔分别获成虫 1条及接近成熟虫体 2条 ,其余为童虫 ,其长度均小于 1mm,形态结构与脱囊的后尾蚴无明显差异。结论 :大鼠似不限于仅作该虫的转续宿主 。

两型卫氏并殖吸虫囊蚴、童虫氨基酸含量的比较分析

对黑龙江省二倍体型和辽宁省三倍体型卫氏并殖吸虫进行了17种氨基酸测定。囊蚴中二倍体型检出11种,三倍体型检出15种氨基酸。童虫中二倍体型检出15种,三倍体型检出16种氨基酸。童虫中氨基酸种类均多于囊蚴,三倍体型均多于二倍体型。含量最多的前两种氨基酸均为胱氨酸和谷氨酸。

虫卵微机图象识别应用中的几种Fuzzy数学模型

对卫氏并殖吸虫卵,从形态上通过微机图象识别,计算出虫卵的数字特征:面积和周长。利用Fuzzy数学方法,建立对虫卵的隶属函数,由此鉴别虫卵的类型。

中国鲫与日本鲫几个群体肌浆蛋白的电泳分析

以中国二倍体和三倍体鲫Carassius(黑龙江流域鲫、九江彭泽鲫、宁河彭泽鲫、海河流域鲫、金鱼)以及日本二倍体、三倍体鲫为试验材料,应用水平式淀粉凝胶电泳法对其肌浆蛋白进行了检测分析。结果表明:在中国二倍体鲫中共检测出4种类型(BB、BC、CC和BD),其中BB为主要类型,并且4种类型均不同于日本的二倍体鲫;在中国三倍体鲫中也检测出4种类型(BBB、BBC、BCC、ABB),方正银鲫中的两种类型(BBC、BCC)均不同于九江彭泽鲫、宁河彭泽鲫、于桥水库鲫和日本三倍体鲫,九江彭泽鲫、宁河彭泽鲫以及95.1%的于桥水库鲫为BBB类型,其电泳带组成与谷口顺彦报道的日本银鲫中的Ⅱ-1型相同。

二倍体型卫氏并殖吸虫引发重症病例及其疫源地调查

目的根据一病例调查浙江省永嘉县大岙乡并殖吸虫虫种及其疫源地。材料与方法到达患者发病前生吃溪蟹处采集放逸短沟蜷、溪蟹和野猫粪便检查并殖吸虫尾蚴、囊蚴、虫卵,并检测形态和大小。结果螺、蟹和野猫粪便的并殖吸虫的尾蚴、囊蚴和虫卵的阳性率分别为0%(0/1006)、96.2%(25/26)、和50%(3/6)。其中25只阳性溪蟹中发现囊蚴13122个,平均505个/只,50个/g,大小在246～353μm。而虫卵呈金黄色,大小为73.4μm×42.6μm。成虫经作染色体检测为卫氏并殖吸虫二倍体型。结论浙江省永嘉县大岙乡为超高度卫氏并殖吸虫二倍体型肺吸虫病重疫区,由之引发重症人体并殖吸虫病。

从概念转化的本体论视角分析单倍体迷思概念

单倍体概念是理解生物染色体变异和育种等生物概念的基础概念。由于概念表征的原因,导致学生存在很多类型迷思概念。本文从概念转化的本体论视角分析教科书有关单倍体概念的不同表征方式及与单倍体有关迷思概念,结合教学实践给出单倍体概念表征的理想范式,对改变学生单倍体迷思概念大有裨益。

高场强电磁脉冲辐射对小鼠肝细胞DNA含量和倍体影响的定量学研究

目的 动态观察高场强电磁脉冲辐射 (EMP)对小鼠肝细胞核DNA含量及倍体的影响 ,探讨电磁辐射的生物学效应。方法 应用高场强EMP发射源对二级昆明小鼠进行全身辐射 ,场强分别选用 8× 10 3、2× 10 4 和 6× 10 4 V m ,发射源相关技术参数 :脉冲上升时间 2 0ns,脉宽 30 μs ,2min内发射 5个单脉冲 ;采用Feulgen染色动态观察小鼠肝细胞核内DNA含量的变化 ,观察时间 1年 ,共设 10个时相点 (n =6 ) ,并用德国IBSA显微数字图像分析系统作DNA含量定量分析和倍体分型。结果 小鼠经高场强EMP辐射后 3个月内 ,肝细胞核DNA含量与正常对照组差异无显著性 ,以二倍体细胞 (2C)为主 ,四、六倍体 (4C ,6C)较少 ,八倍体 (8C)偶见 ;辐射后 6个月 ,8× 10 3V m辐射组比对照组DNA含量高 (P <0 0 5 ) ,2C数量减少 ,4C和 6C增加 ;至辐射后 9个月和 12个月 ,各辐射组肝细胞核DNA含量比其他各时相点辐射组及同一时相点对照组显著增高 (P <0 0 1) ,并且以 4C为主 ,6C和 8C增加 ,而 2C明显减少。结论 高场强EMP对小鼠肝DNA含量及倍体有影响 ,且表现为远后效应 ,推测电磁辐射对肝的生物学效应中肝细胞核酸可能是一个重要的靶点 ,这将为进一步研究其损伤效应及其作用机制提供实验性依据。此外 。

肠道病毒71型灭活疫苗的规模化制备和免疫原性研究

目的规模化制备3批肠道病毒71型(EV71)灭活疫苗(人二倍体细胞),研究其免疫原性。方法在人二倍体细胞上适应的EV71毒株经灭活、纯化后,制备成为EV71灭活疫苗成品。采用0、4周2针程序,皮下注射免疫恒河猴,于第2次免疫后2、4～72周取外周静脉血分离血清进行中和抗体测定,同时于第2次免疫后8周时取外周静脉血采用γ干扰素酶联免疫斑点(IFN-γELIspot)方法检测细胞免疫应答。通过EV71毒株颅内注射乳鼠的研究方法,获得乳鼠攻毒的半数致死量(LD50),按5倍LD50对疫苗免疫母鼠所生的乳鼠攻毒,评价疫苗的动物保护效果。结果 EV71灭活疫苗免疫恒河猴后,2针免疫后2周即可诱导中和抗体的产生,其抗体水平可达到1∶32,在2针免疫后72周时中和抗体水平仍能维持在1∶16～1∶32;于2针免疫后第8周取血,疫苗组诱导产生IFN-γ斑点数[250斑点形成细胞(SFC)/1×106外周血单核细胞(PBMCs)]显著高于接种生理盐水的对照组(16SFC/1×106 PBMCs),P<0.01。EV71疫苗对小鼠—乳鼠免疫的保护性研究结果表明,接种EV71疫苗后,在5倍LD50攻毒情况下,对乳鼠的保护率达到100%。结论规模化生产制备以人二倍体细胞作为细胞基质的EV71疫苗,具有较好的免疫原性。

人二倍体细胞对不同病毒感染过程的生物学效应比较分析

目的分析人二倍体细胞对不同病毒感染的生物学反应差异性及相关分子生物学机制。方法用人类肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和人单纯疱疹病毒1型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人二倍体细胞,光镜和电镜下观察感染细胞形态学特征;比较两种病毒在人二倍体细胞上的增殖动力学及两种病毒感染后细胞酶谱的变化;采用基因芯片检测两种病毒感染后人二倍体细胞基因反应的差异。结果感染细胞的光镜或电镜的超微结构观察均表现出许多相同的特点,包括细胞变圆、肿胀、折光性增强,以及细胞细微结构的受损,大多数细胞器的破坏等。两种病毒在人二倍体细胞上具有不同滴度峰值的增殖动力学过程;对细胞超氧化物歧化酶的动力学改变趋势有不同影响,但对乳酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶动力学变化趋势无明显影响;两种病毒感染引起人二倍体细胞出现不同的基因反应,其中与信号转导及与天然免疫反应有关的mRNA转录效率具有一定的差异。结论人二倍体细胞对EV71、HSV-1感染过程表现不同的生物学效应。

Ⅰ型单纯疱疹病毒感染人二倍体成纤维细胞后长链非编码RNA表达谱分析

目的探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB-17)对长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的调控作用。方法用HSV-1感染KMB-17细胞,于感染后48h提取RNA进行高通量测序。测序获得的转录本用Cufflinks、CPC和CNCI软件进行lncRNA的鉴定和注释,并利用cuffdiff软件进行差异表达lncRNA的筛选。对筛选的差异表达lncRNA进行靶基因的预测及其GO和KEGG功能富集分析。结果共筛选到891个差异表达的lncRNA,其中上调515个,下调376个。GO和KEGG功能富集分析表明,HSV-1感染诱导表达差异的lncRNA靶基因主要富集在Toll样受体信号通路,RIG?I样受体信号通路,Jak-STAT信号通路、Hedgehog信号通路、趋化因子信号通路和细胞代谢相关信号通路上。结论 HSV-1感染KMB-17细胞后诱导细胞lncRNA差异表达并通过靶基因来影响细胞抗病毒免疫和细胞代谢等相关信号通路,调控细胞抗病毒的响应机制。