蛇毒中的直接溶解因子对人肿瘤细胞株的毒性作用

用台盼蓝拒染法研究来源于眼镜蛇毒的纯化直接溶解因子（ＤＬＦ）对培养人肿瘤细胞株的毒性作用。结果表明ＤＬＦ对ＭＧＣ－８０３、ＣＮＥ－２、ＢＥＬ－７４０２、Ｒａｉｉ、ＨｅＬａ和Ｋ５６２等６种细胞株的ＩＣ５０分别为１．５４、１．７２、３．６８、６．７６、７．２０和大于８０μｇ／ｍｌ。鉴于ＤＬＦ的ＩＣ５０和以前报道的对肌肉神经组织有效浓度的范围大致相同，提示肿瘤细胞和可兴奋细胞有相似ＤＬＦ的作用点。不同来源的肿瘤细胞株对ＤＬＦ敏感度不一致可能是这些结合部位量的差异引起的。

眼镜蛇毒直接溶解因子对人肝癌细胞株H_(7402)产生NO和LPO的影响

目的：研究眼镜蛇毒直接溶解因子（ＤＬＦ）对人肝癌细胞株Ｈ７４０２产生一氧化氮（ＮＯ）和脂质过氧化物（ＬＰＯ）的影响。结果：ＤＬＦ对体外培养的Ｈ７４０２细胞有杀伤作用，ＩＣ５０为２４７ｍｇ·Ｌ－１，ＤＬＦ与Ｈ７４０２细胞的生长抑制率呈量效关系。ＤＬＦ可介导Ｈ７４０２细胞产生大量ＮＯ２，ＮＯ２量与ＤＬＦ的剂量呈量效关系。在一定剂量范围内ＮＯ２量与Ｈ７４０２的生长抑制率呈显著正相关。用５７０型粘附式细胞仪测定单个细胞内ＬＰＯ，发现ＤＬＦ可使Ｈ７４０２细胞内ＬＰＯ产生增加。结论：ＤＬＦ可杀伤Ｈ７４０２细胞，其部分机制可能是通过诱导肿瘤细胞产生ＮＯ和ＬＰＯ。

徐长卿对舟山眼镜蛇毒心脏毒素和神经毒素毒性的影响

目的 探讨徐长卿提取液对眼镜蛇毒心脏毒素 (cardiotoxin,CTX)和神经毒素 (neurotoxin,NT)毒性作用的影响。 方法 用心电监测方法观察徐长卿提取液腹腔注射对 CTX致小鼠心脏毒性的影响 ;以小鼠死亡率和存活时间为指标 ,观察徐长卿提取液对 NT所致小鼠急性毒性的影响。 结果 徐长卿提取液 10 g/ kg腹腔注射对 CTX致小鼠心脏的毒性有明显的减毒作用 ,它抑制 CTX致小鼠 ECG(胸导联 ) ST段偏移 (抬高 ) (P<0 .0 5 ) ,降低 CTX致小鼠心脏停搏 (CA )的发生率 ,延长房室传导阻滞发生的潜伏期 (P<0 .0 5 ) ;徐长卿提取液对 NT所致小鼠的急性毒性无明显影响 ,既不能降低死亡率 ,也不能明显延长小鼠存活时间。 结论 徐长卿提取液腹腔注射有对抗眼镜蛇毒 CTX的毒性的作用 ,而对眼镜蛇毒

眼镜蛇毒溶解因子对人鼻咽癌细胞株的毒性及其与抗癌药的协同作用

目的 :探讨纯化的眼镜蛇毒因子 (CVF) ,CVF和单抗交联物 (BAC5 -CVF)和直接溶解因子 (DLF)对人鼻咽癌细胞株的毒性及DLF和抗癌药的相互作用。方法 :用MTT法或台盼蓝拒染法了解合并用药的细胞毒作用。结果 :CVF本身对CNE2细胞并无细胞毒性 ;BAC5 -CVF对CNE2细胞有剂量依赖性杀伤作用 ,其IC5 0为 3 0 7× 10 -7mol/L ;引起 2 2 0 3 %抑制效应的DLE与长春碱 (VLB)、甲氨蝶呤 (MTX)、阿霉素 (ADM)、氟尿嘧啶 ( 5 -FU)和平阳霉素 (BLM)有协同作用 ,但能拮抗氮芥 (HN2 )作用。结论 :CVF不引起CNE2细胞毒性 ,但BAC5 -CVF和DLE对CNE2细胞有毒性作用 ;除能拮抗氮芥外 。

眼镜蛇毒直接溶解因子对人肝癌细胞株细胞内游离钙动态变化的影响

用荧光染料FIuo-3标记人肝癌细胞株H_(7402)细胞内游离钙,在粘附式细胞仪观察检测单个细胞内游离钙水平的动态变化,细胞在无钙环境中,直接溶解因子(DLF)刺激下细胞内游离钙迅速升高,达到峰值后下降;在细胞培养皿中加入1mmol/L CaCl_2,DLF使胞浆游离钙持续升高;加入10mmol/L CaCl_2,DLF刺激后胞浆游离钙水平无明显变化,表明DLF能引起胞内Ca^(2+)释放和胞外Ca^(2+)内流,细胞外高浓度Ca^(2+)能阻断DLF升高细胞内Ca^(2+)浓度的 作用。

眼镜蛇毒因子引起的大白鼠胸膜渗出性炎症

目的 建立旁路激活补体引起渗出性胸膜炎的模型。方法 纯化的眼镜蛇毒因子 (CVF)胸膜腔内注射 ,一定时间后检测渗出液容积、总白细胞数、蛋白浓度和组胺浓度。预先给予各种抗炎药或同时给予眼镜蛇毒另一种毒性成分直接溶血因子 (DLF) ,观察对上述指标的影响。结果 CVF0 0 8～ 2mg·kg-1注入大白鼠胸膜腔能引起有明显量效关系和时效关系的渗出性炎症 ,表现和角叉菜胶 1mg·kg-1作用类似。苯海拉明和异丙肾上腺素都能显著减少上述模型的渗出液容积、总白细胞数、蛋白含量和组胺浓度 ;吲哚美辛、地塞米松和环磷酰胺虽不影响组胺释放 ,但也可减少渗出液容积、总白细胞数和蛋白含量 ;但细胞膜补体调节蛋白CD5 9对上述的渗出性炎症无明显影响 ;而DLF能增强CVF引起的渗出性炎症。结论 CVF胸膜腔内注射能引起对常用的抗炎药敏感的渗出性胸膜炎。

眼镜蛇毒因子消耗补体对大鼠移植心急性排斥反应的抑制作用

目的研究中华眼镜蛇毒因子(CVF)消耗补体对大鼠心脏移植急性排斥反应的影响。方法以近交系BN大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,建立腹腔异位心脏移植模型。实验分为2组,每组8只。CVF组:心脏移植术前3 d、2 d时,经受者尾静脉注射CVF 50μg／kg;术前12 h至移植心停跳时,经尾静脉注射CVF 20μg／kg,每2 d注射1次。对照组:术前、术后不给予受者任何特殊处理。术后观察移植心的存活时间,测定术后第1、3、5和6d及移植心停跳时的血清总补体活性(CH50法)、移植心C3沉积及CD3+T细胞浸润情况,并观察移植心的病理变化。结果CVF组和对照组的移植心存活时间分别为(11．69±0．72)d和(6．65±0．35)d,两组比较,差异有统计学意义(P<0．01)。CVF组移植心组织内C3沉积和CD3+T细胞浸润程度均较对照组同期明显减轻,病理损害程度也较对照组同期明显减轻。结论CVF消耗补体对大鼠心脏移植急性排斥反应起到了明显的抑制作用,从而延长移植心存活时间。