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Dispase诱发兔眼玻璃体后脱离的效果和安全性评价 被引量:10
1
作者 汪枫桦 张皙 +1 位作者 孙晓东 王方 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第2期121-124,共4页
目的 采用Dispase在兔眼中诱导完全性PVD形成 ,评价其效果和安全性。 方法 选择健康成年的青紫蓝兔 3 0只 ,随机分成 5组 ,采用玻璃体内注射 ,分别注射Dispase 0 0 0 5U、0 0 12 5U (2组 )、0 0 2 5U、0 0 5U/0 0 5ml,PBS 0 0 ... 目的 采用Dispase在兔眼中诱导完全性PVD形成 ,评价其效果和安全性。 方法 选择健康成年的青紫蓝兔 3 0只 ,随机分成 5组 ,采用玻璃体内注射 ,分别注射Dispase 0 0 0 5U、0 0 12 5U (2组 )、0 0 2 5U、0 0 5U/0 0 5ml,PBS 0 0 5ml注射到另一只眼内作为对照。术前术后眼底镜、裂隙灯和VOLK + 90D随访观察 ,并进行B超和视网膜电图 (ERG)检查 ,最后取眼球对视网膜进行扫描电镜和透射电镜观察。结果 注射Dispase≥ 0 0 12 5U可见玻璃体后脱离 ,部分伴有不同程度的眼底出血 ;B型超声检查见玻璃体混浊和后脱离 ;术后电生理检查 ,0 0 0 5U和 0 0 12 5U组ERG没有变化 ,≥ 0 0 2 5U ,部分出现ERG振幅下降 ;对照组没有以上改变。结论 Dispase 0 0 12 5U可以在兔眼中成功、安全诱发完全性玻璃体后脱离 (PVD) ,更大剂量同样有效 ,但是有一定毒性作用。 展开更多
关键词 玻璃体后脱离 dispase 视网膜
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Dispase蛋白酶诱导兔眼玻璃体后脱离的实验研究 被引量:5
2
作者 黄玲 王丽丽 +2 位作者 王海燕 郝安平 杨新光 《国际眼科杂志》 CAS 2005年第2期246-249,共4页
目的:研究dispase蛋白酶诱导玻璃体后脱离的效果和安全性。方法:24只健康成年的青紫兰兔随机分为A,B,C,D4组,每组6只兔右眼均为实验眼,左眼为对照眼。A~D组实验眼玻璃体腔内分别注射dispase蛋白酶25,50,125和250U/L,对照眼均为眼用平衡... 目的:研究dispase蛋白酶诱导玻璃体后脱离的效果和安全性。方法:24只健康成年的青紫兰兔随机分为A,B,C,D4组,每组6只兔右眼均为实验眼,左眼为对照眼。A~D组实验眼玻璃体腔内分别注射dispase蛋白酶25,50,125和250U/L,对照眼均为眼用平衡盐BSS液0.0001L。注药前后行检眼镜、裂隙灯和VOLK+90D前置镜以及B超和视网膜电图(electroretinogram,ERG)检查,最后取眼球扫描电镜和透射电镜观察。结果:电镜结果A组实验眼无PVD发生;B,C2组实验眼中各有4眼发生完全性PVD,发生率为67%;D组实验眼有5眼发生完全性PVD,发生率为83%;透射电镜观察对照眼及A,B2组实验眼视网膜组织结构正常。C,D组视网膜细胞和细胞器出现水肿和变性。ERG检测A,B2组术后b波振幅与术前比较无明显降低(P>0.05);而C,D2组实验眼术后b波振幅较术前明显降低(P<0.01)。结论:浓度50U/L的dispase蛋白酶可有效地诱导PVD且对视网膜无明显的毒性作用。更高浓度的dispase蛋白酶虽然可迅速有效的诱导完全性PVD,但对视网膜有毒性作用。 展开更多
关键词 玻璃体后脱离 酶诱导 e蛋白 实验研究 dispase 透射电镜观察 兔眼 b波振幅 毒性作用 视网膜电图 PVD 视网膜细胞 蛋白酶 完全性 扫描电镜 组织结构 眼视网膜 发生率 安全性 青紫兰 对照 体腔内 BSS 检眼镜 前置镜 裂隙灯
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Dispase Ⅱ酶对人角膜缘干细胞培养结果的影响 被引量:3
3
作者 宋秀君 吕伟 +2 位作者 卞小芸 张晓融 阎志鹏 《眼科新进展》 CAS 2005年第2期139-140,共2页
目的 分析Dispase Ⅱ酶对人角膜缘干细胞培养的影响。方法 将110 例人角膜随机分为A、B 2组,在组织块培养过程中分别用和不用Dispase Ⅱ酶处理组织块,观察并分析2种处理方法培养时的细胞生长速度及培养成功率。结果 2 组细胞生长的... 目的 分析Dispase Ⅱ酶对人角膜缘干细胞培养的影响。方法 将110 例人角膜随机分为A、B 2组,在组织块培养过程中分别用和不用Dispase Ⅱ酶处理组织块,观察并分析2种处理方法培养时的细胞生长速度及培养成功率。结果 2 组细胞生长的最早及最晚时间均为(4.00±0.45)d和(11.00±0.27)d,培养成功率分别为93.54%±3.12%和98.51%±1.44%,不使用DispaseⅡ酶处理组比使用DispaseⅡ酶处理组不但培养成功率高,而且从培养至见到细胞生长时间早,统计学上有非常显著的差异(P<0 01,P<0 001)。结论 在人角膜缘干细胞的组织块培养中,不用Dispase Ⅱ酶处理可以得到更快的细胞生长速度,更高的培养成功率。 展开更多
关键词 dispase 角膜缘干细胞 细胞培乔
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Dispase Ⅱ和胰酶消化法分离大鼠皮肤角朊细胞的对比研究 被引量:4
4
作者 崔正军 陈璧 +1 位作者 汤朝武 姜笃银 《第四军医大学学报》 1998年第3期349-350,共2页
引言国内外学者均用酶消化法分离表皮和真皮.消化酶有DispaseⅡ,胰酶和胶原酶,因胶原酶价钱昂贵,故多数单位不使用它.目前尚无学者对比研究DispaseⅡ和胰酶,观察其对收集的角朊细胞数、活力、细胞增殖及成纤维细胞... 引言国内外学者均用酶消化法分离表皮和真皮.消化酶有DispaseⅡ,胰酶和胶原酶,因胶原酶价钱昂贵,故多数单位不使用它.目前尚无学者对比研究DispaseⅡ和胰酶,观察其对收集的角朊细胞数、活力、细胞增殖及成纤维细胞(Fb)污染的影响,故我们希望通过... 展开更多
关键词 皮肤 角朊细胞 分离 酶消化法 dispase
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Dispase Ⅱ分离皮肤表皮-真皮连接及光镜和扫描电镜样本的制作 被引量:2
5
作者 姜笃银 陈璧 +1 位作者 王剑波 史颖辉 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期381-383,I039,共3页
DispaseⅡ分离皮肤表皮-真皮连接及光镜和扫描电镜样本的制作1姜笃银1陈璧2王剑波3史颖辉作者单位:1第四军医大学西京医院烧伤科,西安7100322第四军医大学病理学教研室、3电镜中心,西安710033复合皮(c... DispaseⅡ分离皮肤表皮-真皮连接及光镜和扫描电镜样本的制作1姜笃银1陈璧2王剑波3史颖辉作者单位:1第四军医大学西京医院烧伤科,西安7100322第四军医大学病理学教研室、3电镜中心,西安710033复合皮(compositeskin,CS)移... 展开更多
关键词 皮肤移植 复合皮 dispase 皮肤样本 制作
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DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞及鉴定 被引量:3
6
作者 谢秀雯 周建强 崔红平 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第4期312-316,共5页
目的研究DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察其体外生长特性,并采用免疫组织化学染色鉴定培养的上皮细胞。方法 DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察不同时期细胞的生长情况、细胞形态,做广谱角蛋白、MUC5AC免疫荧光... 目的研究DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察其体外生长特性,并采用免疫组织化学染色鉴定培养的上皮细胞。方法 DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察不同时期细胞的生长情况、细胞形态,做广谱角蛋白、MUC5AC免疫荧光染色及PAS染色鉴定;并比较不同部位结膜上皮细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达阳性情况。结果 DispaseⅡ消化法能够获得大量的较纯净的结膜上皮细胞,细胞生长增殖快,能传代4~5代;绝大多数细胞广谱角蛋白免疫荧光染色阳性,少数细胞MUC5AC表达阳性及PAS染色阳性。睑结膜、穹隆部结膜和球结膜细胞PCNA阳性率分别为:(32.14±1.69)%、(27.67±1.20)%、(22.76±1.73)%,兔睑结膜上皮细胞PCNA阳性率较穹隆部及球结膜上皮细胞的PCNA阳性率高,各部位PCNA阳性率间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DispaseⅡ消化法是进行体外结膜上皮细胞培养的理想方法,兔眼睑结膜处可能存在结膜干细胞。 展开更多
关键词 结膜上皮细胞 结膜上皮干细胞 dispase 原代培养 免疫组织化学鉴定
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Dispase在成年鼠骨骼肌干细胞纯化中的价值 被引量:5
7
作者 姚启盛 叶章群 +3 位作者 陈丛波 王小康 王卫民 陈立新 《郧阳医学院学报》 CAS 2004年第6期336-337,342,F003,共4页
目的寻找一种最佳的骨骼肌干细胞分离及纯化方法。方法采用成年雌性SD大鼠,分别采用二步消化法和Dispase消化法分离肌干细胞,然后用差速贴壁技术纯化肌干细胞,骨骼肌肌动蛋白(α-sarcometricactin)免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。结果... 目的寻找一种最佳的骨骼肌干细胞分离及纯化方法。方法采用成年雌性SD大鼠,分别采用二步消化法和Dispase消化法分离肌干细胞,然后用差速贴壁技术纯化肌干细胞,骨骼肌肌动蛋白(α-sarcometricactin)免疫细胞化学染色对细胞进行鉴定。结果Dipase组肌干细胞的数量明显多于二步消化法组,且细胞的生长速度也明显较后者快,而衰老速度则明显慢于后者。结论Dipase可明显减轻细胞的损伤,提高肌干细胞的数量和质量,是一种最佳的细胞分离酶。 展开更多
关键词 骨骼肌干细胞 dispase 纯化 培养 免疫细胞化学染色
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纤维蛋白溶解酶和Dispase蛋白酶诱导兔眼玻璃体后脱离的实验研究 被引量:2
8
作者 黄玲 王丽丽 +2 位作者 王海燕 王育良 王友法 《临床眼科杂志》 2007年第5期462-466,共5页
目的研究纤维蛋白溶解酶和dispase蛋白酶诱导玻璃体后脱离(PVD)的作用。方法24只健康成年的青紫兰兔随机分为4组,右眼均为实验眼,左眼为对照眼。A组实验眼玻璃体腔内注射纤溶酶1U,B组纤溶酶2 U,C组dispase蛋白酶0.0125U和D组dispase蛋白... 目的研究纤维蛋白溶解酶和dispase蛋白酶诱导玻璃体后脱离(PVD)的作用。方法24只健康成年的青紫兰兔随机分为4组,右眼均为实验眼,左眼为对照眼。A组实验眼玻璃体腔内注射纤溶酶1U,B组纤溶酶2 U,C组dispase蛋白酶0.0125U和D组dispase蛋白酶0.025U,对照眼均为眼用平衡盐BSS液0.1 ml。注药前后行眼底镜、裂隙灯和VOLK+90D前置镜以及B超和视网膜电图(ERG)检查,最后取眼球进行光镜、扫描电镜和透射电镜观察。结果电镜结果A组2只实验眼后极部发生不完全性PVD,发生率为33.3%;B、C两组实验眼中各有4只眼发生完全性PVD。发生率为66.7%;D组实验眼有5只眼发生完全性PVD,发生率为83.3%。纤溶酶各组实验眼注药后ERG振幅与术前及对照眼比较无显著性差异(P>0.05),光镜和透射电镜观察视网膜组织结构正常,均未发现明显异常改变。而Dispase蛋白酶各组透射电镜观察视网膜细胞和细胞器出现水肿和变性。ERG检测Dispase两组实验眼术后b波振幅较术前明显降低(P<0.01)。结论玻璃体腔注射纤溶酶2U较注射1U更能有效的诱导PVD且对视网膜无明显的毒性作用。而Dispase蛋白酶虽然可迅速有效的诱导PVD,但对视网膜有明显的毒性作用。 展开更多
关键词 纤维蛋白溶解酶 dispase蛋白酶 玻璃体后脱离
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Dispase金属蛋白酶诱导的兔增殖性玻璃体视网膜病变模型 被引量:3
9
作者 朱丹 赵明威 黎晓新 《眼视光学杂志》 2006年第1期42-45,共4页
目的建立并评价dispase诱导的增殖性玻璃体视网膜病变(proliferativevitreoretinopathy,PVR)动物模型。方法选择健康成年的青紫蓝兔40只,右眼分别行玻璃体腔注射dispase0.05ml,按注射浓度不同,随机分成4组,A组(0.05U)、B组(0.075U)、C组... 目的建立并评价dispase诱导的增殖性玻璃体视网膜病变(proliferativevitreoretinopathy,PVR)动物模型。方法选择健康成年的青紫蓝兔40只,右眼分别行玻璃体腔注射dispase0.05ml,按注射浓度不同,随机分成4组,A组(0.05U)、B组(0.075U)、C组(0.1U)、D组(0.2U)。左眼分别注射PBS0.05ml作为对照。术后第3小时、第1天、第7天至第70天每周进行眼部检查。检查项目包括裂隙灯、间接眼底镜和眼底照相。在处死动物后,典型的PVR眼进行组织病理学检查及增殖细胞核抗原(proliferatingcellmuclearantigen,PCNA)免疫组织化学染色。结果术后3h所有dispase眼均见视网膜前或玻璃体出血。大约在3周后,dispase眼依次出现视网膜前膜、髓线和血管抬高、固定视网膜皱折以及牵拉性视网膜脱离。组织病理学见视网膜前增殖膜对视网膜的牵拉以及视网膜结构的紊乱。在dispase注药后2周,视网膜节细胞层抗增殖细胞核抗原(PCNA)呈阳性表达,4周时内核层细胞表达阳性,至发生视网膜脱离后视网膜色素上皮开始表达PCNA。对照组未见PVR发生,也未见PCNA的阳性表达。结论Dispase可以在不使用外源性细胞、生长因子和细胞因子的情况下诱导视网膜细胞增殖从而建立PVR模型,操作简单且成功率高。 展开更多
关键词 增殖性玻璃体视网膜病变/化学诱导 动物实验替代试验 dispase/副作用 增殖细胞核抗原
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兔眼玻璃体切割术中应用dispase的毒性研究 被引量:1
10
作者 高永峰 尹娟娟 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2009年第4期293-295,共3页
目的兔眼中央玻璃体切割后注射dispase蛋白酶,观察dispase蛋白酶诱导玻璃体后脱离(PVD)形成的安全浓度。方法新西兰白兔24只,随机分为A、B、C组,每组8只,以右眼为实验眼,左眼为对照眼。兔眼中央玻璃体切割后注射0.5mL dispase,浓度分别... 目的兔眼中央玻璃体切割后注射dispase蛋白酶,观察dispase蛋白酶诱导玻璃体后脱离(PVD)形成的安全浓度。方法新西兰白兔24只,随机分为A、B、C组,每组8只,以右眼为实验眼,左眼为对照眼。兔眼中央玻璃体切割后注射0.5mL dispase,浓度分别为A组0.05μmol/min、B组0.1μmol/min、C组0.2μmol/min;对照组注射0.5mL无菌PBS。用药3个月后光镜和透射电镜观察dispase蛋白酶对视网膜超微结构的影响。结果光镜下可见0.05μmol/min组、0.1μmol/min组、对照组眼视网膜结构完整,排列整齐,未发现异常改变。0.2μmol/min组眼神经节细胞减少。透射电镜下见各实验组动物视网膜内界膜清晰完整,但A组用药3个月后视网膜光感受器内外节结构大致正常,B组、C组实验眼视网膜在用药3个月后有不同程度的光感受器内外节结构紊乱;节细胞水肿,线粒体嵴断裂、空泡变。对照组视网膜超微结构未见明显异常。结论0.05、0.1、0.2μmol/min的dispase均可以诱导兔眼的玻璃体后脱离,随着浓度的增加,毒性增大。 展开更多
关键词 dispase 玻璃体后脱离 超微结构 视网膜
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应用DispaseⅡ与淋巴细胞分层液获取高纯度基底细胞
11
作者 邢忠 陈凤莲 刘庆军 《黑龙江医学》 2001年第1期15-16,共2页
目的 尝试应用DispaseⅡ分离酶获得含有完整基底细胞的表皮 ,再经淋巴细胞分层液收集活性强、生长快的基底细胞。探讨这样的细胞能否加快生长 ,缩短培养周期。方法 取植皮术后所剩中厚皮 ,经Dis paseⅡ处理后 ,用镊子分开表皮与真皮 ... 目的 尝试应用DispaseⅡ分离酶获得含有完整基底细胞的表皮 ,再经淋巴细胞分层液收集活性强、生长快的基底细胞。探讨这样的细胞能否加快生长 ,缩短培养周期。方法 取植皮术后所剩中厚皮 ,经Dis paseⅡ处理后 ,用镊子分开表皮与真皮 ,表皮经胰酶进一步消化后 ,把细胞悬液通过淋巴细胞分层液将收集到的细胞作为实验组。以Tr法分离的表皮细胞作为对照组 ,两组间就细胞数、生长速度 ,克隆形成率与成膜时间进行比较。结果 所得数据经统计学处理显示 :实验组细胞的生长速度、克隆形成率与成膜时间比对照组明显加快。两组间有显著差异 (P <0 0 0 1)。结论 应用DispaseⅡ与淋巴细胞分层液能获得纯度高、活性强、增殖快的基底细胞。可以缩短培养周期 ,具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 dispaseⅡ分离酶 淋巴细胞 分层液 基底细胞 烧伤
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Dispase诱导玻璃体后脱离的实验研究 被引量:3
12
作者 朱冬青 陈辉 邱怀雨 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2004年第4期376-379,共4页
目的 探讨dispase兔眼玻璃体腔内注射诱导玻璃体后脱离 (PVD)的效能及对眼内组织的毒性作用。方法  3 6只兔按观察时间和注入dispase浓度不同分为Ⅰ组 ( 10 μmol/(min·mL)、5 μmol/(min·mL)、1μmol/(min·mL) )和Ⅱ... 目的 探讨dispase兔眼玻璃体腔内注射诱导玻璃体后脱离 (PVD)的效能及对眼内组织的毒性作用。方法  3 6只兔按观察时间和注入dispase浓度不同分为Ⅰ组 ( 10 μmol/(min·mL)、5 μmol/(min·mL)、1μmol/(min·mL) )和Ⅱ组( 0 2 5 μmol/(min·mL)、0 1μmol/(min·mL)、0 0 5 μmol/(min·mL) )。对照眼注入磷酸盐缓冲液 (PBS)。Ⅰ组注药 3 0min、Ⅱ组 1周内进行PVD和眼内毒性的观察。结果  ( 1)有PVD者Ⅰ组各小组均占 4/5 ;Ⅱ组中 0 2 5 μmol/(min·mL)和 0 1μmol/(min·mL)组各占 5 /5 ,0 0 5 μmol/(min·mL)组占 4/5 ;对照眼均无PVD。两组中实验眼的PVD诱导率与对照眼比较 ,差异均有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 2 )两组中较高浓度者可见前房炎性反应、玻璃体混浊或视网膜损害等。在 5 μmol/(min·mL)暴露 3 0min组和 0 2 5 μmol/(min·mL)组电镜下可见视网膜内界膜裸露、感光细胞外段结构紊乱和内段空泡形成。 结论  1μmol/(min·mL) ( 3 0min)或 0 0 5 μmol/(min·mL) ( 1周 )两种应用方式是有效和安全的。 展开更多
关键词 玻璃体后脱离 dispase
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维生素K_3、Dispase联合防治兔增生性玻璃体视网膜病变的实验研究 被引量:1
13
作者 张凯 李志敏 +1 位作者 李明 吴珂 《贵州医药》 CAS 2007年第8期682-685,共4页
目的研究Dispase和维生素K3分别单独和联合用药对实验性兔增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的防治作用与毒性。方法40只兔眼,分为对照组、Dispase组、维生素K3组和联合用药组(每组10只眼)。采用眼球穿通伤... 目的研究Dispase和维生素K3分别单独和联合用药对实验性兔增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的防治作用与毒性。方法40只兔眼,分为对照组、Dispase组、维生素K3组和联合用药组(每组10只眼)。采用眼球穿通伤及玻璃体内注入富含血小板血浆的方法制备外伤性PVR模型后,经睫状体玻璃体腔注入药物,观察比较Dispase、维生素K3及两者联合应用对实验性兔增生性玻璃体视网膜病变的影响。结果用药组平均增生级别均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);联合用药组平均增生级别低于单独用药组,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中,视网膜前的平均增生总细胞数及平均增生成纤维细胞数,维生素K3组和联合用药组少于对照组及Dispase组,比较差异有统计学意义(P<0.05);但前两组比较无差异,后两组亦无差异。视网膜前的平均增生色素上皮细胞数及平均增生神经胶质细胞数,对照组与各用药组两两比较,差异无统计学意义(P>0.05)。电镜结果显示各用药组视网膜超微结构无明显异常。结论维生素K3与Dispase可在一定程度上抑制外伤性PVR的发生、发展,且两者有一定协同作用,对视网膜无毒性损害。 展开更多
关键词 维生素K3 dispase 增生性玻璃体视网膜病变 外伤性 动物实验
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Dispase与RPE细胞联合诱导的小鼠PVR模型的建立 被引量:2
14
作者 田苗 彭绍民 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2011年第6期556-559,共4页
目的用dispase和同种异体视网膜色素上皮(retina pigment epithelium,RPE)细胞联合作用,诱导C57BL/6J小鼠增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的产生,并评价该模型的有效性。方法将32只健康的成年C57BL/6J小... 目的用dispase和同种异体视网膜色素上皮(retina pigment epithelium,RPE)细胞联合作用,诱导C57BL/6J小鼠增生性玻璃体视网膜病变(proliferative vitreoretinopathy,PVR)的产生,并评价该模型的有效性。方法将32只健康的成年C57BL/6J小鼠随机平均分成4组。分别向右眼玻璃体腔内注射5μL dispase+RPE(A组)、dispase(B组)、RPE(C组)、PBS(D组)。A、B两组dispase的浓度为2.4 U/mL。A、C两组RPE细胞的浓度为2×104/5μL。于注射后3天、1、2、4、6周时,利用裂隙灯显微镜检查眼前节情况,用直接检眼镜检查眼底、记录PVR的分级。结果注射后第3天~6周,A组、B组、C组均不同程度地发生了玻璃体积血,玻璃体内可见弥散色素颗粒、小细胞团,条索及膜结构形成,视网膜皱褶,视网膜脱离等PVR典型征象。A组较B、C两组病变发生时相早、程度深而广泛。D组未见明显的PVR征象发生。注射后第6周结束时,A、B、C 3组视网膜脱离率分别为87.5%、62.5%和75%。结论 Dispase和RPE细胞诱发的小鼠PVR模型,建立方法快速,有效,成功率高,可广泛应用于对PVR病理过程,药物筛选,基因治疗等方面的研究。 展开更多
关键词 增生性玻璃体视网膜病变 视网膜脱离 dispase 视网膜色素上皮细胞
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Dispase rapidly and effectively purifies Schwann cells from newborn mice and adult rats 被引量:1
15
作者 Jiaxue Zhu Jinbao Qin +4 位作者 Zunli Shen James D. Kretlow Xiaopan Wang Zhangyin Liu Yuqing Jin 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第4期256-260,共5页
In the present study, Schwann cells were isolated from the sciatic nerve of neonatal mice and purified using dispase and collagenase. Results showed that after the first round of purification with dispase, most of the... In the present study, Schwann cells were isolated from the sciatic nerve of neonatal mice and purified using dispase and collagenase. Results showed that after the first round of purification with dispase, most of the Schwann cells appeared round in shape and floated in culture solution after 15 minutes. In addition, cell yield and cell purity were higher when compared to the collagenase group. After the second round of purification, the final cell yield for the dispase group was higher than that for the collagenase group, but no significant difference was found in cell purity. Moreover, similar results in cell quantity and purity were observed in adult Sprague-Dawley rats. These findings indicate that purification with dispase can result in the rapid isolation of Schwann cells with a high yield and purity. 展开更多
关键词 dispase differential detachment PURIFICATION Schwann cell neural regeneration
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Efficient and ecological leather processing: replacement of lime and sulphide with dispase assisted by 1-allyl-3-methylimidazolium chloride
16
作者 Hui Liu Keyong Tang +3 位作者 Xiumin Li Jie Liu Xuejing Zheng Ying Pei 《Journal of Leather Science and Engineering》 2022年第1期201-213,共13页
Leather is a collagen-based biomass prepared from raw skins or hides by a series of unit operations, in which the unhairing and fiber opening are extremely important operations. However, the conventional Na2S/Ca(OH)2 ... Leather is a collagen-based biomass prepared from raw skins or hides by a series of unit operations, in which the unhairing and fiber opening are extremely important operations. However, the conventional Na2S/Ca(OH)2 system used in unhairing and fiber opening has given rise to the pollution to the environment. It is necessary to develop substitute technology for the Na2S/Ca(OH)2. In the present study, 1-allyl-3-methylimidazolium chloride ([AMIm]Cl) was used to cooperate with dispase for cycle unhairing and one-pot beamhouse to recycle waste bovine hides and com-pared with conventional processing. During those processes, the mechanism of [AMIm]Cl-dispase synergistic unhair-ing and collagen fibers opening were studied. Besides, plant hazard, organic matter and [AMIm]Cl of wastewater from [AMIm]Cl-dispase process were respectively investigated and separated to evaluate the environmental and economic benefits of the [AMIm]Cl-dispase process. As a result, enzyme activity after unhairing by [AMIm]Cl-diapase system for using 5 times is higher than that by KCl-dispase system, and needs lower unhairing time, which is because of rapid penetration of [AMIm]Cl-dispase solution in bovine hides. For this reason, the tensile strength and elastic modulus of tanned leather from [AMIm]Cl-dispase process are higher than those from the KCl-diapase and conventional pro-cesses, and its hydrothermal shrinkage temperature is comparable to that of the conventional one. Because of the 58.13% lower wastewater discharge (WD), 66.60% lower total solids (TS), 97.23% lower ammonia nitrogen (NH3-N), non-toxic wastewater and organic matter recovery in wastewater are reached from [AMIm]Cl-dispase process, which is expected to be an alternative to the conventional process to reduce environmental pollution and realize the sustainable development of technology for leather manufacturing. 展开更多
关键词 1-Allyl-3-methylimidazolium chloride dispase Bovine hides Leather making Recycling Bioresource
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四种气管上皮细胞分离培养方法的比较研究 被引量:5
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作者 邓三明 汪健 +4 位作者 连耀国 倪云峰 卢强 杨晔 李小飞 《医学研究生学报》 CAS 2005年第10期870-871,874,共3页
目的:比较四种不同的方法在培养气管上皮细胞中的异同,改进其培养技术,为组织工程气管提供种子细胞。方法:用两步酶消化法(使用0.1%D ispase 4℃消化18 h后,用0.25%的胰酶37℃消化5m in)、D ispase冷消化法(用0.1%D ispase 4℃消化18 h... 目的:比较四种不同的方法在培养气管上皮细胞中的异同,改进其培养技术,为组织工程气管提供种子细胞。方法:用两步酶消化法(使用0.1%D ispase 4℃消化18 h后,用0.25%的胰酶37℃消化5m in)、D ispase冷消化法(用0.1%D ispase 4℃消化18 h)、胰酶温消化法(0.25%的胰酶37℃消化10m in)和机械刮刷法四种方法分离、培养兔气管上皮细胞,测定分离细胞的数量和纯度。结果:两步酶消化法、D ispase冷消化法较其他两种方法得到的气管上皮细胞纯度高,细胞状态好;D ispase冷消化法得到细胞数量较其他方法少,其余三种方法得到的细胞数统计学上不存在差异。结论:两步酶消化法较其他方法所得细胞数量多、纯度高、细胞成活率高,是一种较好的气管上皮细胞体外分离培养方法。 展开更多
关键词 气管上皮细胞 胰酶 dispase 细胞培养
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兔无细胞真皮基质的研制 被引量:3
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作者 向军 刘英开 +3 位作者 陆树良 青春 廖镇江 史济湘 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第3期223-226,共4页
目的 探讨制备兔无细胞真皮基质(ADM)的最佳方法。 方法 选用三种不同的去表皮处理液,即高渗NaCl溶液、dispase Ⅱ分离酶和嗜热蛋白酶(thermolysin),结合去污剂0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)处理,分别制备兔ADM,并对其进行组织学检测。 结果... 目的 探讨制备兔无细胞真皮基质(ADM)的最佳方法。 方法 选用三种不同的去表皮处理液,即高渗NaCl溶液、dispase Ⅱ分离酶和嗜热蛋白酶(thermolysin),结合去污剂0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)处理,分别制备兔ADM,并对其进行组织学检测。 结果 高渗NaCl-SDS制备的兔ADM尚有少量表皮残留,乳白色中夹杂浅黄色,组织学观察可见真皮中有较多细胞碎屑;而经dispase Ⅱ-SDS和thermolysin-SDS制备的兔ADM表皮完全去除,呈乳白色,组织学观察发现真皮中已不见任何细胞成分,胶原纤维排列规则。电镜观察,上述三种方法制备的兔ADM基底膜结构均完整。 结论 由dispase Ⅱ-SDS法和thermolysin-SDS法制备的兔ADM达到了完全去细胞化,符合制备要求。 展开更多
关键词 无细胞真皮基质 基底膜复合物 组织形态学 dispaseⅡ-SDS法 thermolysin-SDS法 去表皮处理
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一种脱细胞真皮基质制备方法的初探 被引量:3
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作者 左金华 李金荣 李武修 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2003年第4期258-260,共3页
目的 :应用Dispase和TritonX - 1 0 0处理大鼠皮肤 ,探索脱细胞真皮基质的制备条件。方法 :将大鼠皮肤用Dispase 4℃条件下孵育 ,去表皮后 ,再用TritonX - 1 0 0室温孵育 ,并不停地摇荡 ,取标本 ,常规HE染色 ,光镜观察。结果 :单独应用D... 目的 :应用Dispase和TritonX - 1 0 0处理大鼠皮肤 ,探索脱细胞真皮基质的制备条件。方法 :将大鼠皮肤用Dispase 4℃条件下孵育 ,去表皮后 ,再用TritonX - 1 0 0室温孵育 ,并不停地摇荡 ,取标本 ,常规HE染色 ,光镜观察。结果 :单独应用Dispase处理大鼠皮肤即使作用 72h ,仍不能将皮肤中的所有细胞成分去除 ,如再用TritonX - 1 0 0处理 ,可有效地去除皮肤中的细胞成分。结论 :大鼠皮肤经Dispase4℃条件处理 4 8h ,去表皮后 ,再用TritonX - 1 0 0室温处理 4 8h并不停地摇荡 ,可完全去除大鼠皮肤中的所有细胞成分 。 展开更多
关键词 脱细胞真皮基质 ADM 制备方法 真皮替代物 dispase TRITONX-100
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一种获得神经干细胞单细胞的新方法 被引量:5
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作者 刘佳梅 陈东 孟晓婷 《中国康复理论与实践》 CSCD 2004年第1期19-20,共2页
目的寻找一种有效分离神经干细胞球以获得单个神经干细胞的方法。方法应用不同浓度的胰蛋白酶、EDTA及组织培养用酵素 (Dispase)分别对神经干细胞进行消化 ,免疫组织化学技术鉴定其分化。 结果应用Dispase消化神经球 ,可以得到大量单个... 目的寻找一种有效分离神经干细胞球以获得单个神经干细胞的方法。方法应用不同浓度的胰蛋白酶、EDTA及组织培养用酵素 (Dispase)分别对神经干细胞进行消化 ,免疫组织化学技术鉴定其分化。 结果应用Dispase消化神经球 ,可以得到大量单个神经干细胞 ,且浓度以 2 0 0 0U/ml为佳 ;而应用 0 2 5 %胰蛋白酶、0 2 5 %胰蛋白酶 /0 0 2 %EDTA混合液消化神经干细胞球则得不到大量状态较好的单细胞。结论应用Dispase消化神经干细胞球是一种理想的获得神经干细胞单细胞的好方法。 展开更多
关键词 神经干细胞 组织培养用酵素(dispase) 分化
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