大鼠脑皮质发育中Dlx1表达特点研究

目的明确Distal-less homeobox 1(Dlx1)在发育大鼠脑皮质中的表达特点,了解Dlx1与大脑发生发展的关系。方法应用实时荧光定量PCR技术分析Dlx1 mRNA在E11-P1 SD大鼠脑皮质中的表达趋势,应用免疫组织化学技术观察Dlx1蛋白在E11—P1 SD大鼠脑皮质中的表达变化。结果实时荧光定量PCR显示,在E11—P1 SD大鼠脑皮质中,Dlx1 mRNA的表达呈逐渐上升趋势,其中E11—E13上升不显著,E17—E19上升幅度较小;免疫组织化学法显示Dlx1蛋白在E11时,出现较高水平的表达,随后其表达于E13降至较低水平,在E13—P1 SD大鼠脑皮质中表现为持续上升趋势且随皮质的分层而呈现出区域性分布,但蛋白水平的表达与对应时间点mRNA的表达不一致。结论 Dlx1在SD大鼠脑皮质发育过程中可能起着重要的生理调控作用,且其表达与脑皮质的分层联系紧密。

远端同源异型盒2和叉头盒O3a在大鼠脑皮质发育过程中的分布与表达

目的探讨远端同源异型盒2(Dlx2)和叉头盒O3a(FoxO3a)在SD大鼠脑皮质发育过程中的表达特点。方法应用Real-time PCR法检测Dlx2 mRNA和FoxO3a mRNA分别在受孕11d(E11)、E13、E15、E17、E19及生后1d(P1)的表达情况;应用免疫组织化学技术显示Dlx2和FoxO3a在E11、E13、E15、E17、E19及P1蛋白的表达情况。结果 FoxO3a与Dlx2 mRNA在E11~P1均有表达,而FoxO3a mRNA表达高峰明显早于Dlx2 mRNA;Dlx2mRNA表达在E15~E17时大幅度上升,而在此之后始终保持这一高水平的表达;Dlx2 mRNA与FoxO3a mRNA的表达在E15~P1呈现出一致的变化趋势;Dlx2基因在E19时出现mRNA水平的高表达而未见蛋白表达。结论Dlx2和FoxO3a基因在胚胎后期鼠脑皮质中均有表达,且其表达趋势具有一定的一致性;两基因的分布随皮质分层而改变。

Dlx_(1/2)在经Kcl刺激脑皮质神经细胞中的表达研究

目的:观察Dlx1/2在经Kcl刺激大鼠E 17脑皮质神经细胞中的表达,揭示该对基因在核酸与蛋白水平的表达特点及其在大脑接受刺激后反应早期功能活动中的初步作用。方法:原代细胞培养获取SD大鼠E17脑皮质神经细胞;qRT-PCR分析2个基因的核酸在Kcl刺激0～24 h中的表达变化情况;Western blot分析2个基因的蛋白在Kcl刺激0～24 h中的表达变化情况。结果:原代细胞培养显示细胞状态良好。qRT-PCR显示Dlx1/2在经Kcl刺激细胞的24 h内mRNA表达趋势均为先上升后下降,其中6 h是高峰,24 h出现下降。Western blot显示经Kcl刺激后,Dlx1的表达增高只出现在12 h内,24 h出现明显下降;而Dlx2表达随时间延长而明显增高,24 h稍有下降。结论:Dlx1/2的表达与Kcl刺激时间的长短有关,Dlx2表达整体高于Dlx1。Dlx1/2表达升高对胚胎期脑皮质神经细胞早期反应中的活动功能具有重要作用,其中Dlx2的作用可能相对更大。

外固定针结构与远侧皮质骨折的关系

目的分析外固定针结构与其拧入骨干时引起远侧皮质骨折间的关系。方法成人新鲜尸体胫骨11根,取包埋后胫骨中段为针拧入测试区,确定进针点和方向。按针尖、针杆直径及螺纹的不同,将固定针分为4组(A、B、C、D)。通过MTS机动力轴,在扳手上施以持续纵向压力100N,操作者以≤3Nm的扭矩顺时针以25～30圈/min拧入固定针。观察胫骨近、远侧皮质的骨折情况。结果①A组(直径6mm)与B组(直径5mm)非自攻型固定针间所致骨折发生率没有显著性差异(P>0.05);②在螺距和直径相同前提下(C组与B组),自攻型较非自攻型针更易造成骨折(P<0.05);③对于自攻型固定针,D组(螺距1mm)固定针较C组(螺距2mm)骨折几率显著性降低(P<0.05);④远侧骨皮质较近侧骨皮质更易发生骨折(P<0.05)。结论自攻型外固定针拧入时易导致远侧骨皮质骨折,减少螺距和牙深可降低骨折发生率。