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东亚三角涡虫DjStag基因干扰载体的构建及干扰效果鉴定
1
作者
袁佐清
赵博生
《云南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期677-681,共5页
构建DjStag基因的RNA干扰表达载体,诱导表达产生dsRNA后喂食涡虫,观察DjStag表达变化及对涡虫再生的影响。本文以含有东亚三角涡虫DjStag基因的pcDNA3-DjStag重组质粒为模板,经PCR扩增目的片段,将其克隆到干扰载体L4440上,构建重组质粒L...
构建DjStag基因的RNA干扰表达载体,诱导表达产生dsRNA后喂食涡虫,观察DjStag表达变化及对涡虫再生的影响。本文以含有东亚三角涡虫DjStag基因的pcDNA3-DjStag重组质粒为模板,经PCR扩增目的片段,将其克隆到干扰载体L4440上,构建重组质粒L4440-DjStag后转化入大肠杆菌HT115感受态细胞中,IPTG诱导表达dsRNA后喂食涡虫。显微观察涡虫再生过程中的表型变化,Real-time PCR检测干扰后涡虫DjStag基因表达的变化。结果表明,成功构建了DjStag基因的RNA干扰表达载体;DjStag基因RNA干扰后,涡虫不能正常再生,再生片段显示出明显的再生缺陷;涡虫体内DjStag基因的表达受到抑制,DjStag mRNA的表达水平显著下降。
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关键词
涡虫
djstag
RNA干扰
再生
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职称材料
题名
东亚三角涡虫DjStag基因干扰载体的构建及干扰效果鉴定
1
作者
袁佐清
赵博生
机构
山东理工大学生命科学学院
出处
《云南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第5期677-681,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(31100377)
山东省自然科学基金资助项目(ZR2011CQ018)
山东省高等学校科技计划项目(J11LC09)
文摘
构建DjStag基因的RNA干扰表达载体,诱导表达产生dsRNA后喂食涡虫,观察DjStag表达变化及对涡虫再生的影响。本文以含有东亚三角涡虫DjStag基因的pcDNA3-DjStag重组质粒为模板,经PCR扩增目的片段,将其克隆到干扰载体L4440上,构建重组质粒L4440-DjStag后转化入大肠杆菌HT115感受态细胞中,IPTG诱导表达dsRNA后喂食涡虫。显微观察涡虫再生过程中的表型变化,Real-time PCR检测干扰后涡虫DjStag基因表达的变化。结果表明,成功构建了DjStag基因的RNA干扰表达载体;DjStag基因RNA干扰后,涡虫不能正常再生,再生片段显示出明显的再生缺陷;涡虫体内DjStag基因的表达受到抑制,DjStag mRNA的表达水平显著下降。
关键词
涡虫
djstag
RNA干扰
再生
Keywords
planarian (Dugesia japonica)
djstag
RNA interference
regeneration
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
东亚三角涡虫DjStag基因干扰载体的构建及干扰效果鉴定
袁佐清
赵博生
《云南农业大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2012
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