通过Dn-5、SlgA研究大柴胡汤恢复重症胰腺炎肠黏膜屏障的作用

目的通过测定模型大鼠肠黏膜Dn-5、SlgA的含量,来研究大柴胡汤恢复重症胰腺炎肠黏膜屏障的作用。方法将健康SD大鼠100只随机分为5组,测定肠黏膜Dn-5、SlgA含量。结果高、中、低剂量组肠黏膜Dn-5m RNA的表达高于模型组;高、中剂量组肠黏膜SlgA含量高于模型组,低剂量组肠黏膜SlgA含量与模型组相仿。结论大柴胡汤可以增强肠道黏膜的防御作用,从而起到恢复肠黏膜屏障的作用。

3,5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量的研究

比较了两种DNS试剂测定还原糖含量的影响因素。探讨了试剂添加量、显色时间、测定波长以及显色后存放时间对测量结果的影响。结果表明,DNS试剂的用量1.5ml,沸水浴显色时间5min,显色定容30min后,分别在540nm和550nm波长条件下测定,数据的准确性和稳定性较好。

3,5-二硝基水杨酸法测定葡萄酒中总糖含量的条件优化

根据3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)与还原糖共热,可被还原成红棕色氨基化合物的原理,采用比色法测定葡萄酒样品经酸水解后总糖的含量。对水解条件、DNS法反应条件和葡萄酒基质影响等方面进行研究。最终确定葡萄酒样品的水解条件为:水解温度70.0℃,水解时间16.0min,HCl(浓盐酸1∶1稀释)添加量6.5mL,DNS比色法测定条件为:吸收波长540 nm,显色剂2mL,显色稳定时间30min内,线性范围0.1～2.0g·L-1,样液pH值7.0～13.0。结果表明DNS法操作简便、干扰少,精密度和重复性好(RSD<2.0%),加标回收率>98%,可以作为葡萄酒中总糖测定的方法。

响应面法对3,5-二硝基水杨酸比色法测定水果中还原糖含量条件的优化

采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法测定水果中还原糖的含量,在单因素试验的基础上,采用三因素三水平的响应面分析法(RSM)优化DNS法测定苹果还原糖的最佳条件,同时建立数学模型并验证其可靠性。回归方程失拟项不显著(P=0.133 7),预测值与实际值吻合(R^2=0.957 4);影响DNS法测定还原糖含量的因素主次顺序为:DNS用量﹥反应温度﹥显色时间;DNS法测定还原糖含量的最佳条件为:DNS用量4.0 m L,显色时间5.0 min,反应温度87.0℃,测得还原糖实际浓度为94.66 mg/L,与理论预测值基本相符。按照优化的最佳条件,以苹果、桃、葡萄、哈密瓜、脐橙、菠萝6种代表性水果为对象验证该方法的精密度、重复性和准确度,其标准偏差为0.1%~0.5%,相对标准偏差为2.0%~4.8%,加标回收率为90.6%~104.2%。该方法简便、快速,准确度高,重现性好,适合于苹果及其他水果中还原糖的测定。

3,5-二硝基水杨酸法测定中国树花中多糖的含量

本实验以乌鲁木齐南山八一林场采集的中国树花(Ramalina sinesis Jatta.)地衣标本为材料,用热水提取法提取地衣多糖,并用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定多糖的含量。结果表明,热水浸提法所得中国树花多糖含量4.06%。

不同DNS试剂测定木糖含量的研究

对几种不同配制方法配制的DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂测定木糖含量的效果进行研究。结果表明,除DNS3不适合测定木糖含量外,其它3种DNS试剂的测定效果均较好,其中DNS1在精密度、准确度和时间稳定性上均优于其它几种DNS试剂,是DNS法测木糖含量时的首选显色试剂。

马铃薯中还原糖不同测定方法的比较

还原糖含量是马铃薯育种、高附加值深加工的重要指标,马铃薯块茎中还原糖含量的高低,不仅影响其营养价值,而且还会影响食品风味,加工工艺和产品品质。本文采用6种不同的方法提取马铃薯块茎中的还原糖,并且对还原糖测定仪法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法两种测定方法进行了比较分析。结果表明,提取时加入乙醇,还原糖提取准确性好,同时延长了提取样品的保存时间。两种方法均能较好的测定马铃薯中还原糖的含量,尤其是还原糖测定仪法使用方便、测定迅速、回收率可达99%以上,是测定马铃薯中还原糖含量的更为简便、理想的方法。

还原糖测定方法的比较研究

采用3-甲基-2-苯并噻唑酮腙(MBTH)法、3,5-二硝基水杨酸(DNS)法和铁氰化钾法分别测定了葡萄糖、木糖、岩藻、阿拉伯糖、N-乙酰氨基葡萄糖、氨基葡萄糖六种还原糖。通过对测定结果的比较分析表明:MBTH法测还原糖的精密度和回收率与DNS法和铁氰化钾法相近;MBTH法测还原糖的灵敏度最高,铁氰化钾法次之,DNS法最低。因此,MBTH法特别适合还原糖的微量测定。

纤维素酶活测定影响因素的研究

研究和分析了3,5-二硝基水杨酸法测定羧甲基纤维素酶糖化力的实验条件,尤其是对测定波长的选择、底物和酶液加量、空白样的选择、酶液稀释倍数对酶活的影响等方面进行了创新性的探究;另外对常规性的影响因素:酶促反应时间、反应pH、底物的浓度等传统因素做了研究。实验表明:在40℃,pH4.6,底物浓度为10g/L,底物和酶液加量各2mL,酶促反应时间5min,空白样选择终止空白,测定波长480nm处测定OD值比较适宜。

电针对实验性家兔视皮层中几种神经递质的影响

目的 通过研究电针对视皮层中几种神经递质的影响,深入探讨针刺影响视觉功能的机理。方法 36只白兔随机分为合谷穴组、太溪穴组及正常对照组,每组12只。电针家兔合谷穴、太溪穴15min后,立即处死,低温下取出视皮层,采用荧光分光光度法进行单胺类递质(5 羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺)测定,采用Ellman改良法进行胆碱脂酶测定。结果 针刺太溪可引起胆碱脂酶活性的增加,与正常组比较差异具有极显著性(P <0 .0 1)。电针合谷穴引起去甲肾上腺素、多巴胺与5 羟色胺含量的增加,与正常组比较,差异有极显著性(P <0 .0 1) ,而太溪穴引起去甲肾上腺素与5 羟色胺变化不明显,但可引起多巴胺的增加,与正常组比较,差异有极显著性(P <0 .0 5 )。结论 针刺可引起视中枢神经递质的变化,如引起胆碱脂酶活性、去甲肾上腺素、多巴胺与5 羟色胺含量增加。

麸曲糖化酶活力测定方法探讨

糖化酶活力是制曲过程中的一个重要指标。建立了3,5-二硝基水杨酸(DNS)结合连续流动化学分析仪(API)检测麸曲糖化酶活力的方法。结果表明:通过t检验,次碘酸盐法、DNS法和DNS优化法测定糖化酶活力均无显著性系统误差,DNS优化法的误差值最低为13.1 U/g,RSD值为1.97%。通过F-检验双样本方差分析,DNS优化法较快速滴定法、DNS法测定麸曲糖化酶活力的精密度均有显著性提高,且具有简便、快捷的特点。

糜子中还原糖含量测定方法的对比研究

为了测定糜子中还原糖含量,通过试验建立了3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法。对DNS法中样品前处理的影响因素,如提取液及温度进行了考察,并进行了精密度与回收率试验,测得标准偏差为0.007 7,变异系数为0.011 7,回收率范围85.0%~100%。结果表明,DNS法具有较好的稳定性与灵敏度,可代替国标GB/T 5513—2008铁氰化钾法,适用于试验室糜子还原糖含量的测定。

番薯还原糖和总糖含量的测定

为了测定比较不同品种番薯的含糖量,以两种番薯品种(紫心番薯、白心番薯)为材料,利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法分别测定其还原糖和总糖的含量。结果表明,紫心番薯的还原糖含量是11.69%,白心番薯的还原糖含量为7.94%,还原糖含量紫心番薯高于白心番薯;而它们的总糖含量分别为:21.30%、16.05%,紫心番薯的总糖含量仍高于白心番薯的总糖含量。为不同品种番薯后期的合理加工利用提供参考。

烤烟叶片还原糖含量测定方法的改进

烤烟叶片还原糖含量是烤烟品质的重要指标之一,现有的测定方法在稳定性、准确度、成本消耗及效率方面尚存在不足之处.该研究在对3,5-二硝基水杨酸(DNS)法与斐林试剂比色法进行比较的基础上,对3,5-二硝基水杨酸(DNS)法提取烤烟叶片还原糖含量进行了优化.结果表明:可将预浸提试剂由酒精改为蒸馏水,浸提时间由10 h缩短为10 min;对于大量样品检测而言,此方法的改进可简化流程,节约成本,提高效率.

2种鸡柔嫩艾美耳球虫DNA疫苗的构建及在鸡体内的表达

利用DNA重组技术,将柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenalla)第2代裂殖子抗原基因MZ5-7的完整 阅读框(ORF,945 bp)克隆到真核表达质粒pcDNA4．0中,构建了DNA疫苗pcDNA4．0-MZ。用同样方法,将鸡成 熟白细胞介素-17(IL-17)基因的完整阅读框(507 bp)与MZ5-7基因串连,使MZ5-7基因位于IL-17基因的上游, 将串连基因克隆到pcDNA4．0中,构建成免疫调节型DNA疫苗pcDNA4．0-MZ-IL-17。2种DNA疫苗纯化后,胸 部肌肉注射免疫1周龄雏鸡(50 μg／鸡),在免疫后3．5,7,15和20 d取注射和非注射部位肌肉组织,分别用RT- PCR和Western blot方法检测抗原基因转录和表达情况。结果表明,在2种疫苗免疫后5,7和15 d,用RT-PCR 方法在注射部位均可检测到MZ5-7基因的转录产物,大小约950 bp,但在免疫第3天和20天的肌肉组织中未检测 到表达产物。相同时间用Western blot方法进行检测,结果在免疫5和7 d的鸡肌肉组织中检测到表达产物,pcD- NA4．0-MZ表达产物大小约36 ku,与理论推测值一致,pcDNA4．0-MZ-IL-17表达产物大小约64 ku,较MZ5-7和 IL-17基因之和的理论推测值58 ku略大。但在非注射部位,两种方法均未检测到转录或表达产物。上述结果表明, 通过肌肉注射后,两种DNA疫苗均可在鸡肌肉组织中得到有效表达。

不同肝脏疾病患者血浆游离氨基酸水平改变的模式

采用DNS -Cl荧光标记氨基酸 ,聚酰胺薄膜层析 ,分析了慢性血吸虫病肝肿大、晚期血吸虫病肝肿大 ,慢活肝 ,慢迁肝以及肝硬化等五种不同肝损伤患者血浆游离氨基酸水平 ,结果发现它们血浆游离氨基酸改变 。

血清分泌型卷曲相关蛋白5与早期糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨糖尿病慢性肾脏疾病(CKD)患者血清分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)与早期糖尿病肾病(EDN)的相关性。方法选择新诊断单纯T2DM患者43例、EDN患者42例,另选择健康体检者(NC)42名。ELISA测定空腹血清SFRP5水平。结果 3组血清SFRP5水平依次为:NC组(5.02±0.69)μg/L,T2DM组(4.37±0.53)μg/L和EDN组(3.76±0.49)μg/L(P<0.05或P<0.01)。血清SFRP5水平与胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、FIns、FPG、HbA1c、BMI、IL-6、TG、TNF-α、UAER、尿白蛋白/肌酐(UAlb/Cr)、病程呈负相关(r=-0.573、-0.522、-0.589、-0.601、-0.467、-0.515、-0.542、-0.647、-0.592、-0.638、-0.553,P<0.05或P<0.01),与SOD呈正相关(r=0.603,P<0.01)。多元逐步回归分析显示,HOMA-IR、TNF-α、UAlb/Cr是SFRP5的独立影响因素。结论EDN患者血清SFRP5水平降低,血清SFRP5与EDN的严重程度相关。

壳寡糖含量的测定方法比较

目的:寻找一种简便有效测定壳寡糖的方法。方法:采用Elson-Morgan法、苯酚-硫酸法和3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定壳寡糖含量并进行比较。结果:Elson-Morgan法不适用于壳寡糖含量的测定;苯酚-硫酸法中盐酸氨基葡萄糖在200～3000μg范围与吸光度也有很好的线性关系,但苯酚-硫酸法对壳寡糖的测定值较实际值偏大;DNS法测定壳寡糖与实际值接近,平均回收率为96.1%,RSD为2.9%(n=6)。结论:DNS法操作简单、快速,重现性好,可直接用于壳寡糖含量的测定。