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抗果蝇Dnop5蛋白抗体的制备及其特性鉴定
被引量:
1
1
作者
袁榴娣
张燕
+1 位作者
万永奇
丁洁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期654-656,共3页
目的:制备兔抗果蝇Dnop5蛋白的抗体,并进行特性鉴定。方法:以RTPCR扩增Dnop5的全长cDNA并克隆入pET28a(+)表达载体中,表达并纯化Dnop5His融合蛋白。用纯化的Dnop5His融合蛋白免疫家兔,制备抗Dnop5的抗体,并用His亲和层析法进行纯化。采...
目的:制备兔抗果蝇Dnop5蛋白的抗体,并进行特性鉴定。方法:以RTPCR扩增Dnop5的全长cDNA并克隆入pET28a(+)表达载体中,表达并纯化Dnop5His融合蛋白。用纯化的Dnop5His融合蛋白免疫家兔,制备抗Dnop5的抗体,并用His亲和层析法进行纯化。采用Westernblot法和免疫组化染色法鉴定该抗体的特异性及生物学活性。结果:表达的Dnop5His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Dnop5His融合蛋白,以纯化的Dnop5His免疫家兔制备的兔抗Dnop5的抗体,经Westernblot分析显示:该抗体可与果蝇的胚胎、幼虫、蛹及成虫组织中表达的Dnop5特异性结合。结论:获得具有良好特异性的兔抗dnop5抗体,为进一步研究Dnop5的功能奠定了基础。
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关键词
果蝇
Nop/Sik家族
dnop5
基因
原核表达
抗体制备
下载PDF
职称材料
题名
抗果蝇Dnop5蛋白抗体的制备及其特性鉴定
被引量:
1
1
作者
袁榴娣
张燕
万永奇
丁洁
机构
东南大学基础医学院教育部发育与疾病相关基因重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第5期654-656,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30270309)
文摘
目的:制备兔抗果蝇Dnop5蛋白的抗体,并进行特性鉴定。方法:以RTPCR扩增Dnop5的全长cDNA并克隆入pET28a(+)表达载体中,表达并纯化Dnop5His融合蛋白。用纯化的Dnop5His融合蛋白免疫家兔,制备抗Dnop5的抗体,并用His亲和层析法进行纯化。采用Westernblot法和免疫组化染色法鉴定该抗体的特异性及生物学活性。结果:表达的Dnop5His蛋白以包涵体的形式存在,用His亲和层析法分离纯化后得到较纯的Dnop5His融合蛋白,以纯化的Dnop5His免疫家兔制备的兔抗Dnop5的抗体,经Westernblot分析显示:该抗体可与果蝇的胚胎、幼虫、蛹及成虫组织中表达的Dnop5特异性结合。结论:获得具有良好特异性的兔抗dnop5抗体,为进一步研究Dnop5的功能奠定了基础。
关键词
果蝇
Nop/Sik家族
dnop5
基因
原核表达
抗体制备
Keywords
Drosophila
Nop/Sik family
dnop5 gene
prokaryotic expression
antibody preparation
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗果蝇Dnop5蛋白抗体的制备及其特性鉴定
袁榴娣
张燕
万永奇
丁洁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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