前列腺癌PC-3多西紫杉醇耐药细胞株的蛋白组学分析

目的:比较前列腺癌PC-3细胞株对多西紫杉醇(docetaxel)耐药前后的蛋白质差异性表达,了解前列腺癌PC-3细胞株耐药性产生机制。方法:利用逐渐加量的方式培养前列腺癌PC-3多西紫杉醇耐药细胞株,利用双向荧光差异凝胶电泳(DIGE)定量筛选PC-3细胞敏感株与耐药株的差异蛋白,并用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF/TOF-MS)对差异位点蛋白进行成分鉴定。结果:利用DIGE结合MALDI-TOF/TOF-MS质谱技术分析,PC-3细胞耐药株较敏感株成功分离出49种差异表达蛋白质,29种表达上调,20种表达下调。其中ATP synthase、Galectin-1等参与肿瘤血管的生成,Calreticulin、CathepsinD、Coflin-1蛋白参与肿瘤的转移;78 kDa glucose-regulated protein(GRP78)、Microtubule-associated protein-6等参与肿瘤的耐药性调节。结论:人前列腺癌PC-3细胞株多西紫杉醇耐药前后存在蛋白质的差异性表达,为进一步发现前列腺癌转移及耐药性的分子机制以及晚期激素非依赖性前列腺癌的靶向药物治疗提供实验依据。

多西紫杉醇诱导前列腺癌PC3细胞凋亡的蛋白质组学研究

目的比较多西紫杉醇诱导激素非依赖性前列腺癌PC3细胞凋亡前后的差异表达蛋白。方法采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测不同浓度多西紫杉醇对前列腺癌PC3细胞增殖的抑制作用;应用胶内差异凝胶电泳对PC3细胞凋亡前后蛋白质进行双向凝胶电泳图谱分析,分离并筛选鉴定相关差异蛋白。结果半数抑制浓度IC50为20 nmol/L。双向凝胶电泳图谱发现表达差异较为明显的18个蛋白质位点,其中8个蛋白表达上调,10个蛋白表达下调。结论本研究发现的部分差异蛋白可能参与激素非依赖性前列腺癌对紫杉醇类药物的耐药作用。