Duffy血型抗体分布及输血策略研究

目的分析Duffy血型系统意外抗体分布特点并探讨患者输血策略。方法收集2012年1月至2022年12月西部战区总医院患者意外抗体筛查和鉴定资料,检测Duffy血型患者系统意外抗体标本的红细胞Duffy表型,通过疾病史、妊娠史、输血史等分析抗体产生原因,并探讨输血策略。结果351957例患者标本中检出2128例(0.6%)意外抗体,Duffy血型意外抗体34例(0.0097%),其中抗-Fy^(b)26例(76.5%),抗-Fy^(a)3例(8.8%),抗-Fy^(b)+抗-E 3例(8.8%),抗-Fy^(b)+抗-Le a 1例(2.9%),抗-Fy^(b)+抗-E+抗-c 1例(2.9%),免疫球蛋白G(IgG)抗体33例(97.1%),IgG+IgM抗体1例(2.9%),主要为妊娠或输血免疫刺激产生。34例Duffy血型意外抗体患者中2例输注自体血液(4 U),6例输注异体血液,共输注ABO、Rh血型相同,Duffy抗体相应抗原阴性悬浮红细胞36.5 U,均无输血不良反应,33例患者好转出院,1例患者因多器官功能衰竭放弃治疗。结论Duffy血型系统意外抗体较罕见,可导致溶血性输血反应和新生儿溶血病,主要因妊娠或输血免疫刺激产生,抗-Fy^(a)检出率远低于抗-Fy^(b),应采用多种方法保障患者临床输血安全。

Duffy血型不同表型对红细胞储存及清除趋化因子的影响

目的 探讨Duffy血型不同表型对红细胞储存及清除趋化因子的影响。方法 收集24份红细胞标本,用抗人球蛋白试验法检测Duffy血型表型,使用ELISA法检测红细胞CCL2、CCL5、CXCL8以及CCL11含量及其趋化因子清除功能。使用流式分析仪检测红细胞上Duffy抗原的表达。结果 Duffy血型Fy(a+b-)与Fy(a+b+)表型的红细胞裂解液CCL2含量(41.1±14.7) pg/mL vs(63.1±20.8)pg/mL有差异(P<0.05),而CCL5(794.5±320.1)pg/mL vs(846.9±359.4)pg/mL、CXCL8(59.5±34.2)pg/mL vs(49.1±11.9)pg/mL及CCL11的含量(109.1±25.1)pg/mL vs(158.6±56.0)pg/mL均无差异(P>0.05)。Duffy血型Fy(a+b-)与Fy(a+b+)表型对于CCL2(1 471±202.1)pg/mL vs(1 860±267.5)pg/mL及CCL5清除功能(848.5±461.7)pg/mL vs(1 797±546.1)pg/mL均有差异(P<0.05),而对于CXCL8(1 851±180.7)pg/mL vs(1862±248.3)pg/mL及CCL11(691.0±125.7)pg/mL vs(781.7±293.8)pg/mL的清除功能无差异(P>0.05)。Duffy血型Fy(a+b-)与Fy(a+b+)表型的红细胞上的Duffy抗原表达平均荧光强度:(105.3±20.45)vs(111.9±18.30)无差异(P>0.05)。结论 Duffy血型Fy(a+b+)和Fy(a+b-)表型对红细胞储存及清除趋化因子的影响存在差异,Fy(a+b+)表型要比Fy(a+b-)表型红细胞能够储存更多的趋化因子以及具有更强的趋化因子清除功能。

上海地区稀有血型Duffy系统Fy^a阴性献血者筛查和临床应用

目的了解上海地区献血者中Fya阴性的红细胞表型情况,以解决临床Fya抗原阴性患者急救用血的问题。方法利用间接抗球蛋白试验从上海地区献血者中筛查稀有血型Duffy系统Fya抗原阴性献血者;用盐水和抗球蛋白法对1名白种人疑难输血患者的血清做抗体筛选和鉴定,并使用乙醚放散结合抗球蛋白方法检测放散液中抗体,同时对其Duffy血型进行检测。配血用盐水、polybrene和抗球蛋白介质3种方法。结果从9479名献血者中筛查到Fy(a-)14例;从该名白种人患者血清中未检出不规则抗体,直接抗球蛋白试验阳性,红细胞放散液中检出抗-Fya,输注配合型的红细胞后,其血红蛋白明显升高。结论上海地区献血者中Fya阴性的红细胞表型极低。对于大量输血后临床症状未有改善患者,如果血清中未能检出红细胞抗体,应考虑检测患者红细胞上可能存在血型同种抗体。

河北汉族人群Duffy血型系统抗原频率调查

目的了解河北汉族人群Duffy血型系统抗原分布状况,建立河北汉族人群稀有血型抗原初步资料,解决抗-Fya等稀有血型抗体患者的用血问题。方法随机抽取无血缘关系的河北汉族健康人群血样5mL(EDTA抗凝),采用抗球蛋白检测卡法,按照说明书进行献血者Fya、Fyb抗原检测,对于检测出的Fya阴性标本,采用SSP法进一步确认抗原基因状况。结果在1 901份献血者标本中Fya+b+233例(12.26%),Fya+b-1 663例(87.48%),Fya-b+5例(0.26%),未检测出Fya-b-标本。Fya基因频率为0.936 1,Fyb基因频率为0.063 9。经Hardy-Weinberg平衡检验,观察值与预期值之间差异无统计学意义(χ2=1.123 2,P>0.05),河北汉族人群中Duffy血型系统抗原分布符合Hardy-Weinberg平衡。结论在河北汉族人群中Fya阴性表型分布很低,一旦患者产生抗-Fya,通过随机筛查试验找到相合的供者非常困难,严重时会危及到患者的生命,因此,实验室有必要建立Fya阴性献血者资料库,以便及时为患者提供合适的血液成分。

深圳献血人群Duffy血型基因多态性的研究

目的建立Duffy血型的分子生物学检测方法,研究深圳献血人群Duffy血型基因多态性。方法在2011年8～11月本中心900名无血源关系献血者标本中,用卡式微柱凝胶抗球蛋白方法鉴定Duffy血型表现型,建立Duffy血型的基因分型方法 PCR-SSP法及PCR产物直接测序法,对900例标本DNA进行PCR-SSP法检测,其中50例做Duffy血型基因编码区域序列测定。结果血清学结果为Fy(a+b-)855例,Fy(a+b+)43例,Fy(a-b+)2例,Fy(a-b-)0例。900例Duffy血型PCR-SSP法基因分型结果与血清学表现型完全一致。50例FY基因编码序列部分测序结果与血清学、PCR-SSP法吻合,表现型FY(a+b-)标本测序结果可见FY基因第2外显子第125位核苷酸碱基为纯合子G;表现型FY(a-b+)标本测序结果为第125位核苷酸碱基为纯合子A。结论 Duffy血型PCR-SSP基因分型方法及PCR产物直接测序法可以正确地鉴定Duffy基因型,适用于Duffy血型基因多态性的研究。深圳地区Fya的基因频率为0.973 9,Fyb的基因频率为0.026 1。

云南傣族人群红细胞Rh、Duffy血型抗原多态性调查

目的调查云南傣族人群的Rh、Duffy血型系统抗原表现型的分布及抗原频率,为云南傣族血型分布的多态性及防治Rh、Duffy血型系统引起的溶血症提供科学依据。方法采集云南省境内3代内无血缘的傣族人群200例(男女各100例)、汉族对照组100例(男女各50例)为无关人群,采集血样3 ml(EDTA抗凝),采用微柱凝胶法检测Rh、Duffy及抗体筛选,Duffy血型系统基因分型检测采用PCR-SSP法,对比分析两人群间的差异。结果 200例傣族人群中RhD阳性率为98.5%,RhD阴性率为1.5%,100例汉族人群100例(男女各50例)中RhD阳性率99.0%,RhD阴性率1.0%。Duffy基因分型检测结果:傣族200份样本中,Duffy血型各种表型分布为:Fy^((a+b-))表型187例(93.5%),Fy^((a+b+))表型12例(6.0%),Fy^((a-b+))表型1例(0.5%),未发现Fy^((a-b-))表型。基因频率为:Fy^a(0.965),Fy^b(0.035);汉族100份样本中,Duffy血型各种表型分布为:Fy^((a+b-))表型92例(92.0%),Fy^((a+b+))表型5例(5.0%),Fy^((a-b+))表型3例(3.0%),未发现Fy^((a-b-))表型。基因频率为:Fy^a(0.945),Fy^b(0.055)。傣族人群抗体筛选阳性率为1.5%,均为同种抗体,其中2例E抗体。结论云南傣族人群的Duffy血型系统抗原分布状况及抗原分布特征与当地汉族人群基本相符,但也有本民族的自身特点,傣族族人群的RhD阴性率和不规则抗体检出率比当地汉族人群的不规则抗体检出率高,差异有统计学意义(P<0.05)。

采用熔解曲线分析法检测红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因型

本研究建立用于红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因分型的熔解曲线分析方法。根据β-actin和Fy-a/bmRNA序列设计并合成引物,建立实时荧光多重PCR-熔解曲线分析法,并用该方法与常规PCR-SSP法同时检测中国成都地区198名献血者Duffy血型抗原Fy-a/b的基因型。结果表明,熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果完全一致。198名中国成都地区献血者中Fya(+)178例(89.9%),Fya(+)Fyb(+)杂合子19例(9.6%),Fyb(+)1例(0.5%),Fya基因频率0.947,Fyb基因频率0.053,符合中国人Duffy血型分布特点。结论:本研究成功建立了红细胞Duffy血型抗原Fy-a/b基因分型的熔解曲线分析方法,该方法适用于大规模Duffy血型基因分型。中国成都地区的献血者Duffy血型基因以Fya为主。

Duffy血型研究及临床应用新进展

Duffy血型是人类最重要的血型系统之一,Duffy血型不仅仅与输血安全及母婴血型不合引起的新生儿溶血病密切相关,Duffy抗原作为趋化因子还在人类疟疾疟原虫受体、炎症、肿瘤、移植排斥等方面发挥着重要作用。本文从Duffy抗原表达和基因结构、Duffy血型在人群中的分布、Duffy血型的检测方法、Duffy血型生物学功能及临床应用等方面,综述国内外关于Duffy血型研究与临床应用的现状及最新进展。

温州地区人群Duffy血型基因频率分布及供受者Duffy血型不相合情况调查

目的 了解本地人群Duffy血型基因频率的分布以及输血供受者Duffy血型不相合的情况。方法 2018年3月—2018年5月随机收集416(人)份温州献血者的血液标本(5 mL/份,EDTA-K2抗凝),采用间接抗球蛋白法测定其Duffy血型抗原;计算Duffy基因型及基因频率,根据基因频率计算本地供受(血)人群Duffy抗原不相合的机率。结果 本组温州地区献血人群的FYA和FYB基因频率分别为0.942 3和0.057 7,观察值与期望值符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律并与国内其他地区献血者人群相近(P>0.05),Duffy血型Fya和Fyb抗原供受者不相合机率分别为0.003 3和0.099 6,总不相合几率0.102 9。结论 温州地区献血人群Duffy血型基因频率符合中国汉族人群该基因频率的分布特征;供受者Fya和Fyb抗原不配合机率为建立本地献血者Duffy血型资料库、进一步保障临床用血安全提供依据。

中国人群Duffy血型基因启动子GATA-1序列研究

目的研究中国人群中Duffy血型基因启动子区域GATA-1盒子的遗传特点。方法在中国人群中选择182例无偿献血者,用血清学方法鉴定Duffy血型的表现型,提取基因组DNA,扩增测序Duffy血型基因启动子区域,其中包括GATA-1红细胞结合位点,同时使用PCR-SSP法检测Duffy基因型。结果 182例Duffy血型定型为Fy(ab-)0例,Fy(a-b+)3例,Fy(a+b-)153例,Fy(a+b+)26例。Duffy血型基因分型PCR-SSP结果显示与其表现型吻合。182例样本Duffy启动子区域的测序GATA-1的结合位点46位均为T/T纯合子。检出1例新的杂合子突变C-108T。结论本文首次针对中国人群进行Duffy启动子区域GATA-1序列进行研究,测序结果显示,182例样本GATA-1结合位点均为正常野生型,Duffy血型基因启动子区域C-108T突变为首例报导。

Rh联合Duffy血型系统的抗体鉴定及输血治疗1例

不规则抗体可引起溶血性输血反应及疑难配血,为确保患者输入相合的血液成分,进行红细胞不规则抗体筛选与特异性抗体检测具有十分重要的意义,特别是对体内产生多种或高频率抗体的患者,可避免急需输血时找不到相合血液而措手不及以至于延误临床治疗.

微流控毛细管电泳系统用于Duffy血型基因分型研究

目的:探索快捷筛选分析Duffy血型基因型的方法,建立稀有血型献血者信息档案。方法:2014年12月-2018年9月本中心采用微流控毛细管电泳系统和PCR-SSP法检测3936名无血缘关系O型献血者标本Duffy基因型,对Fy^a阴性标本进行血清学确认及其他血型系统表型分型,Fy(a-b-)标本做基因测序。结果:Fy^a阴性标本血清学表型与微流控毛细管电泳系统基因分型结果一致。3936例样本中Duffy表型结果为Fy(a+b-)3564例(90.54%),Fy(a+b+)353例(8.97%),Fy(a-b+)18例(0.46%),Fy(a-b-)1例(0.03%)。基因频率:FY*A为95.03%,FY*B为4.94%,FY*Null为0.03%。19个Fy^a阴性标本信息已登记在册。结论:微流控毛细管电泳系统适用于Duffy血型基因分型筛选,可用于建立稀有血型库,解决稀有血型患者紧急输血问题,提高输血安全。

TaqMan-MGB探针实时PCR用于Duffy血型基因分型的研究

目的应用Taq Man-MGB探针实时PCR技术,建立1个Duffy血型基因分型的新方法,了解大连地区汉族人群Duffy血型等位基因频率分布特征。方法设计并合成Taq Man-MGB探针实时PCR的引物和探针,应用TaqMan-MGB探针实时PCR对120例健康献血者的Duffy血型进行基因分型,对其重复性和最低检出限进行评价。并将该法和传统的等位基因特异性引物PCR(PCR-ASP)方法进行比较。结果 Taq Man-MGB探针实时PCR方法和PCR-ASP法对Duffy血型的基因分型结果是完全一致的。Taq Man-MGB探针实时PCR再次分型结果和初次基因分型的结果是完全一致的。Taq Man-MGB探针实时PCR的最低检测限是100 pg。大连汉族人群Duffy血型FY*A基因频率为93.3%,FY*B的基因频率为6.7%,其基因分布特点和国内其他地区汉族人群相似,无显著性差异(P>0.05),但与浙江畲族相比,有显著性差异(P<0.05)。Fya和Fyb抗原不配合几率为0.116 7。结论应用Taq ManMGB探针实时PCR技术建立的Duffy血型基因分型方法具有快速、简单、准确、灵敏、重复性好、通量高等特点,优于传统的PCR-ASP法。

Duffy血型的基因分型

目的建立 Duffy血型基因分型方法。方法根据 Duffy血型 c DNA结构 ,合成分型引物 ,建立聚合酶链反应 -序列特异性引物 (PCR- SSP)分型方法 ,对 10 2例浙江省汉族无血缘关系的献血者进行基因分型。结果 PCR-SSP分型方法与血清学分型方法结果完全一致 ,10 2例浙江省汉族人 ,Fya纯合子 91例 (89.2 2 % ) ,Fya Fyb 杂合子10例 (9.80 % ) ,Fyb 纯合子 1例 (0 .98% )。 Fya 基因频率 0 .9412 ,Fyb 基因频率 0 .0 5 88。结论 PCR- SSP对 Duffy血型基因分型 ,具有方法可靠、稳定 ,试剂来源广泛等优点 ,适合于临床常规应用。浙江省汉族

罕见的Duffy血型系统抗-Fy^a引起新生儿溶血病1例

Duffy血型系统有6个抗原，Fy^a和Fy^b是其中常见的2个抗原，由于Fy^a在中国人群中属高频抗原，因此产生的抗一Fy^a并不常见，而由此导致的新生儿溶血病更为罕见。报告1名稀有血型Fy（a—b＋）孕妇因输血产生抗-Fy^a并导致新生儿溶血病，本例报道在国内尚属首次。

罕见的Duffy血型系统抗-Fy^b抗体1例报告

患者女，59岁，孕3产2。1992年曾患脑胶质瘤手术，有输血史。2011年5月20日患者因双膝关节肿痛4年入我院行双膝关节置换术．术前备血时检查患者血型为ABO血型O型；Rh（D）血型阳性；

南京汉族人群Duffy血型等位基因FYES及FYX调查研究

目的研究南京地区汉族人群中Duffy血型等位基因FYES及FYX的表达情况。方法随机提取200例无偿献血者EDTA-K2抗凝外周血血样DNA,采用PCR-SSP方法进行Duffy血型FYA、FYB等位基因分型;采用Sanger双脱氧链末端终止测序法分析Duffy血型FYES及FYX等位基因序列特点。结果PCR基因分型结果与测序结果一致,200例标本中,检出FYA/FYA 180例,FYA/FYB 20例;测序结果表明,200例标本中未发现FYES及FYX等位基因表达。结论 FYES及FYX等位基因在中国南京地区汉族人群中表达频率极低,与其他人种相比具有显著性差异。