独活寄生汤含药血清对白细胞介素1β诱导的退变关节软骨细胞中基质金属蛋白酶和环氧化酶2表达的影响

目的:观察独活寄生汤含药血清对白细胞介素1β(interleukin-1 beta,IL-1β)诱导的退变关节软骨细胞中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)和环氧化酶2(cyclooxygenase 2,COX-2)表达的影响。方法:将36只2月龄SD大鼠随机分为独活寄生汤血清组、壮骨关节丸血清组和空白血清组,每组12只。分别以独活寄生汤、壮骨关节丸溶液和生理盐水灌胃,每次0.6 m L,每天2次,连续7 d。末次给药后采血,分离血清备用。将体外培养的SD大鼠第3代关节软骨细胞分为空白组、模型组、独活寄生汤组和壮骨关节丸组。模型组、独活寄生汤组和壮骨关节丸组软骨细胞加入IL-1β干预24 h后,分别采用含10%空白血清组血清、独活寄生汤血清组血清和壮骨关节丸血清组血清的DMEM培养基培养;空白组软骨细胞不加IL-1β,直接以含10%空白血清组血清的DMEM培养基培养。培养72 h后采用Western Blot法测定各组细胞中MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13和COX-2的含量。结果:4组软骨细胞的MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13和COX-2含量比较,组间差异均有统计学意义(0.135±0.007,0.324±0.006,0.174±0.007,0.234±0.007,F=266.333,P=0.000;0.150±0.028,0.346±0.027,0.250±0.028,0.293±0.028,F=26.855,P=0.000;0.131±0.014,0.283±0.009,0.148±0.014,0.158±0.015,F=50.442,P=0.000;0.173±0.035,0.691±0.051,0.318±0.038,0.286±0.039,F=91.860,P=0.000;0.201±0.033,0.796±0.031,0.370±0.033,0.327±0.034,F=125.270,P=0.000)。空白组的MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13和COX-2含量均低于模型组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000)。模型组的MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13和COX-2含量均高于独活寄生汤组和壮骨关节丸组(P=0.000,P=0.003,P=0.000,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.047,P=0.000,P=0.000,P=0.000)。独活寄生汤组的MMP-1含量低于壮骨关节丸组(P=0.000);2组的MMP-3、MMP-9、MMP-13和COX-2含量比较,组间差异均无统计学意义(P=0.094,P=0.497,P=0.380,P=0.220)。结论:独活寄生汤含药血清可抑制IL-1β诱导的退变关节软骨细胞中MMP-1、MMP-3、MMP-9、MMP-13和COX-2的表达,其抑制MMP-1表达的作用优于壮骨关节丸含药血清。

独活寄生汤对骨关节炎软骨退变的影响及其作用机制

目的:探讨独活寄生汤对骨关节炎软骨退变的影响及其作用机制。方法:将45只8周龄雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、独活寄生汤组,每组15只。模型组、独活寄生汤组采用改良Hulth法建立膝骨关节炎大鼠模型,空白组不做任何处理。独活寄生汤组给予9.3 g·kg-1的独活寄生汤水煎浓缩液进行灌胃,模型组和空白组给予等剂量生理盐水灌胃;每天灌胃1次,连续灌胃12周。末次灌胃后分别取各组大鼠双侧股骨髁,采用HE染色观察关节软骨组织形态,并采用Mankin's关节软骨组织学评分法评价软骨退变程度;采用Western blot法检测软骨中G蛋白偶联信号传导系统的关键调控因子的蛋白表达情况。分别从模型组和独活寄生汤组各取50 mg关节软骨组织,采用基因芯片检测软骨基质降解基因表达情况。结果:(1)软骨组织形态。空白组关节软骨结构层次清晰,潮线完整,软骨表面较为平滑;模型组关节软骨结构层次较为紊乱,未见潮线,表层软骨膜破损,膜样结构消失并呈丝绒样;独活寄生汤组关节软骨结构层次较为清晰,软骨破坏程度比模型组轻。(2)软骨退变程度。3组大鼠关节软骨的Mankin's组织学评分比较,差异有统计学意义[(3.46±2.04)分,(12.58±2.55)分,(7.75±1.91)分,F=13.114,P=0.006];空白组和独活寄生汤组低于模型组(t=-5.114,P=0.002;t=2.709,P=0.035);空白组与独活寄生汤组比较,差异无统计学意义(t=-2.406,P=0.053)。(3)药物干预后G蛋白偶联信号传导系统关键调控因子的蛋白表达。3组大鼠G蛋白偶联信号传导系统关键调控因子Gαs、Gαq、Gαo、Gαi蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义[(1.59±0.09)kDa,(1.01±0.04)kDa,(1.45±0.14)kDa,F=29.760,P=0.001;(1.03±0.06)kDa,(0.53±0.04)kDa,(0.75±0.09)kDa,F=14.969,P=0.027;(0.36±0.02)kDa,(0.11±0.01)kDa,(0.17±0.02)kDa,F=204.105,P=0.000;(0.20±0.02)kDa,(0.56±0.05)kDa,(0.33±0.07)kDa,F=28.357,P=0.001];空白组Gαs、Gαq、Gαo表达量均高于模型组(t=0.407,P=0.000;t=0.546,P=0.012;t=1.933,P=0.000),Gαi表达量低于模型组(t=-0.750,P=0.000);模型组Gαs、Gαq、Gαo表达量均低于独活寄生汤组(t=-5.584,P=0.001;t=-2.431,P=0.093;t=-4.584,P=0.004),Gαi表达量高于独活寄生汤组(t=4.377,P=0.005);独活寄生汤组Gαs、Gαq表达量与空白组比较,组间差异均无统计学意义(t=-1.816,P=0.119;t=-3.029,P=0.056);独活寄生汤组Gαo表达量低于空白组(t=-14.749,P=0.000),Gαi表达量高于空白组(t=3.119,P=0.021)。(4)药物干预后关节软骨基质降解基因的表达。药物干预后,表达上调2倍以上的软骨基质降解基因为基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)8、硒蛋白P(selenoprotein P,SELP),表达下调2倍以上的软骨基质降解基因为蛋白聚糖酶(a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs,ADAMTS)1、ADAMTS2、ADAMTS8、钙黏蛋白3(cadherin 3,CDH3)、胶原(collagen,COL)1A1、COL5A1、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、整合素(integrin,ITG)b1、ITGb4、MMP12、MMP14。模型组MMP8、SELP基因表达量均低于独活寄生汤组(1.00±0.00,2.81±0.60,t=-5.225,P=0.035;1.00±0.00,2.31±0.81,t=-2.808,P=0.107),ADAMTS1、ADAMTS2、ADAMTS8、CDH3、COL1A1、COL5A1、CTGF、ITGb1、ITGb4、MMP12、MMP14基因表达量均高于独活寄生汤组(1.00±0.00,0.21±0.05,t=27.366,P=0.001;1.00±0.00,0.31±0.16,t=7.458,P=0.018;1.00±0.00,0.11±0.04,t=38.538,P=0.001;1.00±0.00,0.30±0.23,t=5.271,P=0.034;1.00±0.00,0.12±0.09,t=17.380,P=0.003;1.00±0.00,0.09±0.16,t=10.168,P=0.010;1.00±0.00,0.21±0.30,t=4.605,P=0.044;1.00±0.00,0.37±0.20,t=5.456,P=0.032;1.00±0.00,0.13±0.22,t=6.960,P=0.020;1.00±0.00,0.05±0.08,t=19.388,P=0.003;1.00±0.00,0.05±0.10,t=15.671,P=0.004)。结论:独活寄生汤可以明显延缓骨关节炎软骨的退变,其作用机制可能是通过激活G蛋白偶联信号传导通路而抑制软骨基质降解,从而使受损的软骨组织修复,但其具体作用靶点有待进一步深入研究。

独活寄生汤含药血清抑制白细胞介素1β诱导的软骨细胞炎症反应的作用机制研究

目的:探讨独活寄生汤含药血清抑制白细胞介素1β(interleukin-1 beta,IL-1β)诱导的软骨细胞炎症反应的作用机制。方法:将10只2月龄雄性SD大鼠随机分为正常组和独活寄生汤组,独活寄生汤组以9.3 g·kg^(-1)剂量的独活寄生汤灌胃,正常组给予等量生理盐水灌胃;每日灌胃2次,连续1周;末次灌胃后,经腹主动脉取血,分别制备独活寄生汤含药血清及空白血清,低温保存备用。截取6只4周龄SD大鼠膝关节软骨,采用酶消化法分离并培养软骨细胞,光学显微镜下观察软骨细胞形态,并用Ⅱ型胶原酶免疫组化鉴定。取生长良好的第2代软骨细胞,采用MTT法检测含药血清培养24 h、36 h、48 h、72 h后的软骨细胞活性,采用酶联免疫吸附法测定不同浓度IL-1β干预后软骨细胞的基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-13含量。将培养好的第2代软骨细胞随机分为空白血清组、模型组、独活寄生汤含药血清组,其中空白血清组以含10%空白血清的培养基(dulbecco modified eagle medium,DMEM)培养;模型组加入浓度为15 ng·m L^(-1)的IL-1β干预24 h后,采用含10%空白血清的DMEM培养;独活寄生汤含药血清组加入浓度为15 ng·m L^(-1)的IL-1β干预24 h后,采用含10%独活寄生汤含药血清的DMEM培养;3组均连续培养48 h,采用Western blot法检测软骨细胞中G蛋白偶联信号传导系统关键调控因子的蛋白表达情况。结果:(1)软骨细胞形态及免疫组化鉴定结果。第2代软骨细胞胞浆丰富,细胞周围可见具有折光性的细胞外基质,细胞长势呈"铺路石"状,胞浆呈棕黄色阳性染色。(2)独活寄生汤含药血清培养不同时间后的软骨细胞活性。含药血清培养24 h、36 h、48 h、72 h后的软骨细胞活性比较,差异有统计学意义(1.01±0.01,1.03±0.02,1.07±0.01,1.02±0.02,F=8.300,P=0.008)。含药血清培养24 h时的软骨细胞活性低于培养48 h时的软骨细胞活性(t=-4.648,P=0.002);与培养36 h、72 h时的软骨细胞活性比较,差异无统计学意义(t=-1.549,P=0.160;t=-0.775,P=0.461)。(3)不同浓度IL-1β干预后的MMP-13含量。在含IL-1β浓度为0 ng·m L^(-1)、5 ng·m L^(-1)、10 ng·m L^(-1)、15 ng·m L^(-1)、20 ng·m L^(-1)、25 ng·m L^(-1)的DMEM中培养24 h后软骨细胞MMP-13含量比较,差异有统计学意义[(0.07±0.01)ng·m L^(-1),(0.08±0.01)ng·m L^(-1),(0.09±0.01)ng·m L^(-1),(0.10±0.01)ng·m L^(-1),(0.08±0.01)ng·m L^(-1),(0.06±0.01)ng·m L^(-1),F=6.823,P=0.001]。未经IL-1β干预时的软骨细胞MMP-13含量与浓度为5 ng·m L^(-1)、20 ng·m L^(-1)、25 ng·m L^(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量比较,差异均无统计学意义(LSD-t=-2.049,P=0.055;LSD-t=-2.083,P=0.052;LSD-t=0.496,P=0.626);浓度为10 ng·m L^(-1)、15 ng·m L^(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量高于未经IL-1β干预时的软骨细胞MMP-13含量(LSD-t=-3.412,P=0.003;LSD-t=-4.216,P=0.001);浓度为10 ng·m L^(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量与浓度为15 ng·m L^(-1)的IL-1β干预后软骨细胞MMP-13含量比较,差异无统计学意义(LSD-t=-0.804,P=0.432)。(4)软骨细胞中G蛋白偶联信号传导系统关键调控因子的蛋白表达。空白血清组、模型组和独活寄生汤含药血清组的Gαs、Gαq、Gαo和Gαi蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义[(0.81±0.09)k Da,(0.31±0.07)k Da,(0.78±0.13)k Da,F=23.669,P=0.001;(0.22±0.04)k Da,(0.14±0.02)k Da,(0.20±0.02)k Da,F=6.500,P=0.031;(0.25±0.02)k Da,(0.12±0.01)k Da,(0.18±0.03)k Da,F=27.214,P=0.001;(0.21±0.02)k Da,(0.26±0.02)k Da,(0.19±0.03)k Da,F=6.882,P=0.028];空白血清组Gαs、Gαq、Gαo蛋白表达量高于模型组(LSD-t=6.134,P=0.001;LSD-t=7.370,P=0.000;LSD-t=3.465,P=0.013),Gαi蛋白表达量低于模型组(LSD-t=2.572,P=0.042);模型组Gαs、Gαq、Gαo蛋白表达量低于独活寄生汤含药血清组(LSD-t=5.766,P=0.001;LSD-t=3.401,P=0.014;LSD-t=2.599,P=0.041),Gαi蛋白表达量高于独活寄生汤含药血清组(LSD-t=3.609,P=0.011)。结论:独活寄生汤含药血清可以抑制IL-1β诱导的软骨细胞炎症反应,其作用机制可能与G蛋白偶联信号传导系统的调控有关,但其具体作用靶点有待进一步深入研究。

口服独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症椎间孔镜术后感觉异常

目的:观察口服独活寄生汤治疗腰椎间盘突出症椎间孔镜术后感觉异常的临床疗效。方法:将60例腰椎间盘突出症椎间孔镜术后感觉异常的患者随机分为2组,分别采用口服独活寄生汤及甲钴胺胶囊治疗。治疗4周后,采用疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评定下肢疼痛情况,采用尼龙绳实验评定下肢麻木情况,采用Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)问卷表评定腰椎功能恢复情况,采用改良Mac Nab标准评定临床疗效。结果:治疗前2组患者的VAS评分、ODI评分及尼龙绳实验评分比较,组间差异均无统计学意义[(6.36±1.52)分,(6.03±1.48)分,t=0.080,P=0.936;(28.33±5.20)分,(28.03±5.42)分,t=0.219,P=0.828;(0.85±0.33)分,(0.88±0.23)分,t=0.395,P=0.694];治疗4周后独活寄生汤组的VAS评分和ODI评分均低于甲钴胺胶囊组[(2.74±1.63)分,(4.69±0.92)分,t=-3.299,P=0.002;(11.67±9.14)分,(18.80±4.87)分,t=-4.369,P=0.001],尼龙绳实验评分高于甲钴胺胶囊组[(1.65±0.33)分,(0.95±0.35)分,t=3.472,P=0.008]。独活寄生汤组优10例、良9例、可8例、差3例,甲钴胺胶囊组优5例、良14例、可7例、差4例,独活寄生汤组的临床疗效优于甲钴胺胶囊组(Z=-1.996,P=0.046)。结论:口服独活寄生汤可以有效治疗腰椎间盘突出症椎间孔镜术后感觉异常,提高患者生活质量,疗效优于口服甲钴胺胶囊,值得临床推广应用。

独活寄生汤治疗活动期类风湿性关节炎29例

目的:观察独活寄生汤治疗活动期类风湿性关节炎的临床疗效。方法:将58例患者随机分为观察组、对照组各29例。观察组采用独活寄生汤治疗,对照组采用甲氨喋呤(MTX)治疗,对比分析2组总疗效、临床症状及实验室相关指标的变化情况。结果:总有效率观察组为93.1%,对照组为69.0%,2组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。晨僵时间、关节相关症状评分、15 m步行时间、血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、IgG、IgA、IgM治疗后2组均明显改善(P<0.05),观察组改善更明显(P<0.05)。结论:独活寄生汤治疗活动期类风湿性关节炎临床疗效显著,可改善症状、体征及关节功能,提高患者机体免疫力。

独活寄生汤对肝肾不足寒湿痹阻型类风湿性关节炎Th17/Treg平衡的影响

目的:观察独活寄生汤对肝肾不足寒湿痹阻型类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)平衡的影响,探讨其控制炎症因子释放的作用机制。方法:将48例RA患者随机分为观察组和对照组,每组24例。对照组给予西医常规治疗,观察组在此基础上加用独活寄生汤口服,疗程24周。记录治疗前后患者关节压痛数(trajec-tory chart,TJC)、关节肿胀数(swollen joint counts,SJC)、晨僵时间、中医证候积分、视觉模拟评分(visual analogue score,VAS)、双手平均握力。酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)、转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)水平;散射比浊法测定外周血C反应蛋白(C-reactive protein,CRP);魏氏法测定外周血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)水平;流式细胞术检测外周血Th17、Treg细胞表达水平;免疫印迹试验检测叉头状转录因子P3(forkhead transcription facter 3,Foxp3)及其磷酸化叉头状转录因子P3(forkhead tran-scription facter 3,p-Foxp3)的表达。结果:1)治疗后两组TJC、SJC、晨僵时间、中医证候积分、VAS评分、双手平均握力明显改善,且观察组优于对照组(P<0.05)。2)治疗后两组IL-17、Th17、ESR及CRP水平都较治疗前降低,且观察组优于对照组(P<0.01)。3)治疗后两组IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3及p-Foxp3水平均升高,且观察组优于对照组(P<0.05)。结论:独活寄生汤联合西药可以有效改善肝肾不足寒湿痹阻型RA患者的临床症状,机制可能是与调节Th17/Treg的平衡,控制IL-17、IL-10、TGF-β等炎症因子的释放有关,达到改善RA自身免疫反应、减轻关节炎症的目的。

独活寄生汤对动物脑循环和血小板聚集性的实验研究

独活寄生汤十二指肠给药对麻醉狗有扩张脑血管、增加脑血流量、降低脑血管阻力等作用。对ADP诱导的家兔血小板聚集有剂量依赖性抑制作用。

基于分子对接的独活寄生汤治痿和治痹药效物质基础研究

目的:探索独活寄生汤治痿和治痹的药效物质基础。方法:构建独活寄生汤化学成分分子数据库,运用分子对接技术,探讨其与软骨退变靶点基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、炎症靶点环氧化酶-2(COX-2)受体的相互作用。结果:独活寄生汤的药效物质基础含有25个化合物,主要为苷类、黄酮类化合物,其中,16个化合物能与MMP-13有较好的作用,14个化合物能与COX-2有较好的作用,5个化合物对MMP-13和COX-2均有作用效应。结论:独活寄生汤可通过MMP-13和COX-2的有效成分群分别起到治痿、治痹或痿痹同治的作用,为其在骨关节炎中的临床运用提供新依据。

独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨形态的影响

目的:观察独活寄生汤对膝骨关节炎大鼠软骨形态的影响,探讨其治疗膝骨关节炎的作用机制。方法:2月龄雄性SD大鼠80只,适应性喂养1周,随机分为空白对照组(20只)和造模组(60只)。造模组在第1,4,7天双膝关节腔注射0.2 mL质量分数为4%的木瓜蛋白酶。术后2周,拍摄膝关节小动物核磁共振成像(MRI)进行鉴定。造模成功后,随机分为模型对照组、独活寄生汤组和盐酸氨基葡萄糖胶囊组(阳性对照组),每组20只。HE染色和番红-固绿染色后,采用Mankin软骨组织学评分法进行评分。结果:MRI显示,空白对照组关节间隙正常,关节面平整、光滑;与空白对照组比较,模型对照组关节软骨变薄、局部有充盈性缺损,关节腔内积液明显增加。HE染色和番红-固绿染色结果表明,盐酸氨基葡萄糖胶囊与独活寄生汤都可以有效促进膝骨关节炎软骨修复,抑制软骨细胞凋亡,降低Mankin评分,但2组间差异无统计学意义(P> 0.05),组内8周时优于4周(P <0.05)。结论:独活寄生汤能促进软骨生长与修复,保护膝骨关节炎模型大鼠膝关节的软骨形态,延缓软骨退变,从而起到治疗膝骨关节炎的作用。

络病理论指导下应用独活寄生汤加减治疗腰椎间盘突出症

目的:探讨络病理论指导下应用独活寄生汤加减治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法:将121例腰椎间盘突出症患者随机分为2组,在休息、外敷止痛散、特定电磁波照射的基础上,分别采用络病理论指导下的独活寄生汤加减口服治疗和洛索洛芬钠片口服治疗,共治疗14 d。分别采用疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)及Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index,ODI)对治疗前后患者腰腿疼痛及腰椎功能情况进行评价。结果:治疗前2组患者腰腿疼痛VAS评分和ODI评分比较,组间差异均无统计学意义[(6.82±1.21)分,(6.34±1.53)分;t=1.929,P=0.056;(50.67±14.73)分,(49.66±15.31)分;t=0.589,P=0.551]。治疗后2组患者腰腿疼痛VAS评分和ODI评分均较治疗前降低[t=17.290,P=0.000;t=7.181,P=0.000;t=18.630,P=0.000;t=9.084,P=0.000];且独活寄生汤组腰腿疼痛VAS评分和ODI评分均低于洛索洛芬钠组[(3.33±1.27)分,(4.18±1.94)分,t=2.980,P=0.004;(17.38±5.35)分,(28.31±5.34)分,t=10.340,P=0.000]。结论:以络病理论为指导采用独活寄生汤加减口服治疗腰椎间盘突出症,可有效缓解腰腿疼痛、改善腰椎功能,且疗效优于口服洛索洛芬钠片。

中药内服外用联合玻璃酸钠治疗中重度膝骨关节炎临床观察

目的:观察中药内服外用联合玻璃酸钠治疗中重度膝骨关节炎的临床疗效。方法:将60例中重度膝骨关节炎患者随机分为对照组和治疗组,每组30例。治疗组辨证给予口服独活寄生汤加减,外敷双黄散,关节腔内注射玻璃酸钠;对照组给予口服双醋瑞因胶囊,外用吡罗昔康贴片,关节腔内注射玻璃酸钠。3周为1个疗程。观察两组患者临床疗效,治疗前后膝关节视觉模拟评分法(VAS)评分及西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎调查表(WOMAC)评分。结果:治疗组临床治愈3例,显效8例,有效15例,无效4例,总有效率为86.67%;对照组临床治愈3例,显效7例,有效14例,无效6例,总有效率为80.00%。两组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组膝关节VAS评分、WOMAC评分较治疗前均有显著改善(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。结论:中药内服外用联合玻璃酸钠治疗中重度膝骨关节炎,在改善患者临床症状、减轻关节疼痛、改善关节功能方面疗效确切,值得临床推广。

独活寄生汤治疗膝骨关节炎随机对照临床文献的Meta分析

目的:系统评价独活寄生汤治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:检索2006年1月至2014年12月维普网、万方数据库、中国知网中采用独活寄生汤治疗膝骨关节炎的相关文献,并进行汇总,采用Reviews Manager 5.2软件进行Meta分析。结果:共检索出50篇相关文献,符合纳入标准的有14篇,14篇文献均未提及是否采用盲法,且均采用随机对照研究,共1815例患者,其中治疗组971例,对照组844例。Meta分析结果显示,独活寄生汤治疗膝骨关节炎有效率的比值比为5.01;95%可信区间[3.74,6.72],治疗组总有效率优于对照组,差异有统计学意义(P<0.000 01)。结论:独活寄生汤治疗膝骨关节炎较对照组有效,可改善患者的临床症状,减轻患者的痛苦和疼痛,临床治愈率仍有待提高。

独活寄生汤临床应用进展

独活寄生汤出自《备急千金要方》,有祛风湿,止痹痛,益肝肾,补气血之功,临床常用于治疗腰椎间盘突出症、坐骨神经痛、腰椎管狭窄、膝骨关节炎、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、肩关节周围炎、骨质疏松症、产后身痛等。

椎间盘镜下髓核摘除术配合独活寄生汤加减治疗肝肾亏虚型腰椎间盘突出症临床观察

目的：观察椎间盘镜下髓核摘除术配合独活寄生汤加减治疗肝肾亏虚型腰椎间盘突出症的临床疗效。方法：将60例肝肾亏虚型腰椎间盘突出症患者随机分为治疗组和对照组,每组30例。对照组采用椎间盘镜下髓核摘除术治疗,治疗组在对照组的基础上配合独活寄生汤加减治疗,两组均以4周为1个疗程。观察两组临床疗效及术前、术后6个月及术后12个月随访时JOA下腰痛评分。结果：所有患者均获得随访,随访时间6~12个月,平均（7.50±1.32）个月。治疗组显效25例,有效4例,无效1例,总有效率为96.67%;对照组显效20例,有效7例,无效3例,总有效率为90.00%。两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。两组术后6个月及末次随访时,JOA评分较治疗前均有改善（P〈0.05）,且治疗组优于对照组（P〈0.05）。两组治疗后腰腿痛症状均明显减轻,腰椎功能改善,但治疗组优于对照组（P〈0.05）。两组均无椎间隙感染、脑脊液漏、神经根损伤等并发症发生,结论：辨证分型口服独活寄生汤加减治疗肝肾亏虚型腰椎间盘突出症,能够减轻或消除神经水肿,改善微循环,促进炎性介质及致痛物的清除,促进神经功能恢复,有效提高临床疗效,较单纯椎间盘镜下髓核摘除术具有优势,值得推广运用。

独活寄生汤联合塞来昔布治疗膝骨关节炎临床观察

目的:观察独活寄生汤联合塞来昔布治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:将64例膝骨关节炎患者随机分为治疗组和对照组,每组32例。对照组给予塞来昔布每次200 mg,每日1次,口服;治疗组在对照组的基础上加用独活寄生汤加减治疗。30 d为1个疗程,共治疗2个疗程。观察2组临床疗效,采用WOMAC评估患者膝关节疼痛、僵硬及生活受限的程度。结果:治疗组显效1例,有效30例,无效1例,总有效率为96.88%;对照组显效0例,有效15例,无效17例,总有效率为46.88%。2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组WOMAC评分较治疗前均有改善(P<0.05),且治疗组优于对照组(P<0.05)。结论:独活寄生汤联合塞来昔布治疗膝骨关节炎可有效提高临床疗效。

独活寄生汤治疗大鼠膝骨关节炎的作用机制研究

目的:探讨独活寄生汤治疗大鼠膝骨关节炎(kneeosteoarthritis,KOA)的作用机制。方法:从66只大鼠中随机选取48只,采用改良Hulth法建立大鼠KOA模型,随机选择3只正常大鼠和3只建模大鼠进行鉴定。证实建模成功后,将剩余的15只正常大鼠纳入正常对照组,采用随机数字表将剩余的45只KOA模型大鼠分为KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组,每组15只。正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠均按每天10mL·kg^(-1)分别以0.9%生理盐水、0.9%生理盐水、独活寄生汤(浓度为0.93g·mL^(-1))、盐酸氨基葡萄糖溶液(浓度为0.015g·mL^(-1))灌胃,连续干预12周。12周后,切取大鼠双侧胫骨近端和股骨下端的软骨组织。采用实时定量PCR检测大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、长链非编码RNA(longnoncodingRNA,lncRNA)H19及聚集蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA、Ⅱ型胶原蛋白(CollagenⅡ)mRNA的表达量,采用蛋白印迹法检测大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan、CollagenⅡ的蛋白表达量。结果:①大鼠饲养结果。KOA模型组大鼠因肺栓塞死亡2只,独活寄生汤治疗组大鼠因腹泻死亡1只,盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠因肺栓塞死亡1只。②大鼠胫骨近端软骨组织中KOA相关基因的RNA表达结果。正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、lncRNAH19、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=83.050,P=0.000;F=436.003,P=0.000;F=129.212,P=0.000;F=135.844,P=0.000)。KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量均低于正常对照组(miR-675-3p:P=0.000;P=0.003;P=0.002;AggrecanmRNA:P=0.000;P=0.000;P=0.000;CollagenⅡmRNA:P=0.000;P=0.000;P=0.000);KOA模型组大鼠胫骨近端软骨组织中lncRNAH19的表达量低于正常对照组(P=0.002),独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中lncRNAH19的表达量与正常对照组比较,差异无统计学意义(P=0.058,P=0.069);独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量均高于KOA模型组(miR-675-3p:P=0.000;P=0.000;AggrecanmRNA:P=0.000;P=0.000;CollagenⅡmRNA:P=0.000;P=0.000);独活寄生汤治疗组大鼠胫骨近端软骨组织中miR-675-3p、lncRNAH19、AggrecanmRNA、CollagenⅡmRNA的表达量与盐酸氨基葡萄糖治疗组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.922;P=0.778;P=0.857;P=0.904)。③大鼠股骨远端软骨组织中软骨组成相关基因的蛋白表达结果。正常对照组、KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组的大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量比较,组间差异均有统计学意义(F=58.118,P=0.002;F=16.625,P=0.001)。KOA模型组、独活寄生汤治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan的蛋白表达量均低于正常对照组(P=0.003;P=0.004),盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan的蛋白表达量与正常对照组相比,差异无统计学意义(P=0.078),KOA模型组、独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中CollagenⅡ的蛋白表达量均低于正常对照组(P=0.000;P=0.028;P=0.018),独活寄生汤治疗组、盐酸氨基葡萄糖治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量均高于KOA模型组(Aggrecan:P=0.025;P=0.034;CollagenⅡ:P=0.003;P=0.004),独活寄生汤治疗组大鼠股骨远端软骨组织中Aggrecan和CollagenⅡ的蛋白表达量与盐酸氨基葡萄糖治疗组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.999;P=0.775)。结论:独活寄生汤治疗大鼠KOA的作用机制,可能与其能够上调miR-675-3p、lncRNAH19的表达进而促进Aggrecan、CollagenⅡ的表达有关。

独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞蛋白激酶R样内质网激酶/免疫球蛋白结合蛋白信号通路的影响

目的:观察独活寄生汤含药血清对大鼠退变软骨细胞蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)/免疫球蛋白结合蛋白(immunoglobulin-binding protein,Bi P)信号通路的影响。方法:将36只2月龄清洁级雄性SD大鼠随机分为含药血清组和空白血清组,每组18只。含药血清组按照9.3 g·kg-1以独活寄生汤灌胃、空白血清组按照10 m L·kg^(-1)以生理盐水灌胃,每天1次。连续灌胃7 d后,麻醉下行腹主动脉采血,获取独活寄生汤含药血清和空白血清。取4周龄SD大鼠膝关节,分离软骨进行软骨细胞培养,传代至第3代,以白细胞介素-1β干预24 h后获得退变软骨细胞。将获得的退变软骨细胞分为2组,分别以独活寄生汤含药血清(独活寄生汤组)和空白血清(空白组)进行干预。分别在干预24 h、48 h和72 h后,测定2组退变软骨细胞凋亡率、PERK mRNA含量、Bip mRNA含量、真核细胞翻译起始因子-2α(eukaryotic initiation factor2α,e IF-2α)mRNA含量、转录激活因子-4(activating transcription factor 4,ATF-4)mRNA含量、生长抑制DNA损伤基因153抗原(growth arrest and DNA damage-inducible 153,GADD153)mRNA含量、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cysteine containing aspartate specific protease,Caspase)-9活性及Caspase-3活性。结果:(1)退变软骨细胞凋亡率。时间因素与分组因素存在交互效应(F=9.022,P=0.038)。2组软骨细胞凋亡率总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=325.246,P=0.000);干预后不同时点之间软骨细胞凋亡率的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=389.768,P=0.000);2组软骨细胞凋亡率随时间变化均呈降低趋势;干预后各时点独活寄生汤组软骨细胞凋亡率均低于空白组(t=14.055,P=0.000;t=13.264,P=0.000;t=12.183,P=0.000)。(2)退变软骨细胞中PERK mRNA含量。时间因素与分组因素不存在交互效应(F=3.002,P=0.157);独活寄生汤组软骨细胞中PERK mRNA含量总体低于空白组,即存在分组效应(F=17.833,P=0.013);干预后不同时点之间软骨细胞中PERK mRNA含量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=43.060,P=0.003);2组软骨细胞中PERK mRNA含量随时间变化均呈降低趋势。(3)退变软骨细胞中Bip mRNA含量。时间因素与分组因素不存在交互效应(F=4.092,P=0.106);独活寄生汤组软骨细胞中Bip mRNA含量总体低于空白组,即存在分组效应(F=15.136,P=0.018);干预后不同时点之间软骨细胞中Bip mRNA含量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=62.968,P=0.001);2组软骨细胞中Bip mRNA含量随时间变化均呈降低趋势。(4)退变软骨细胞中e IF-2αmRNA含量。时间因素与分组因素不存在交互效应(F=2.138,P=0.201);独活寄生汤组软骨细胞中e IF-2αmRNA含量总体低于空白组,即存在分组效应(F=155.852,P=0.000);干预后不同时点之间软骨细胞中e IF-2αmRNA含量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=50.328,P=0.000);2组软骨细胞中e IF-2αmRNA含量随时间变化均呈降低趋势,且降低趋势基本一致。(5)退变软骨细胞中ATF-4 mRNA含量。时间因素与分组因素存在交互效应(F=14.612,P=0.017);2组软骨细胞中ATF-4 mRNA含量总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=33.703,P=0.004);干预后不同时点之间软骨细胞中ATF-4 mRNA含量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=187.700,P=0.000);2组软骨细胞中ATF-4 mRNA含量随时间变化均呈降低趋势;干预后各时点独活寄生汤组软骨细胞中ATF-4 mRNA含量均低于空白组(t=4.343,P=0.012;t=3.915,P=0.017;t=10.719,P=0.000)。(6)退变软骨细胞中GADD153 mRNA含量。时间因素与分组因素不存在交互效应(F=3.053,P=0.116);独活寄生汤组软骨细胞中GADD153 mRNA含量总体低于空白组,即存在分组效应(F=16.946,P=0.015);干预后不同时点之间软骨细胞中GADD153 mRNA含量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=88.206,P=0.000);2组软骨细胞中GADD153 mRNA含量随时间变化均呈降低趋势。(7)退变软骨细胞中Caspase-9活性。时间因素与分组因素不存在交互效应(F=1.266,P=0.327);独活寄生汤组软骨细胞中Caspase-9活性总体低于空白组,即存在分组效应(F=21.164,P=0.010);干预后不同时间点之间软骨细胞中Caspase-9活性的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=263. 384,P=0. 000); 2组软骨细胞中Caspase-9活性随时间变化均呈降低趋势,且降低趋势基本一致。(8)退变软骨细胞中Caspase-3活性。时间因素与分组因素不存在交互效应(F=1. 346,P=0. 314);独活寄生汤组软骨细胞中Caspase-3活性总体低于空白组,即存在分组效应(F=19. 422,P=0. 012);干预后不同时间点之间软骨细胞中Caspase-3活性的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=130. 649,P=0. 000); 2组软骨细胞中Caspase-3活性随时间变化均呈降低趋势,且降低趋势基本一致。结论:独活寄生汤含药血清可通过调控大鼠退变软骨细胞PERK/Bip信号通路,抑制因内质网应激反应引起的软骨细胞凋亡。

独活寄生汤联合运动疗法治疗膝骨关节炎临床观察

目的:观察独活寄生汤联合运动疗法治疗膝骨关节炎的临床疗效。方法:将99例膝骨关节炎患者随机分为药物组、运动组和联合组,每组33例。药物组单纯独活寄生汤治疗,运动组单纯运动疗法治疗,联合组采用独活寄生汤联合运动疗法治疗,3组均治疗8周。治疗4,8周后分别采用视觉模拟评分法(VAS)与西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数(WOMAC)评分量表对膝关节疼痛情况和功能进行疗效评价。结果:治疗4,8周后,3组VAS评分、WOMAC评分较治疗前均有改善(P<0.05);且联合组低于药物组和运动组(P<0.05);药物组与运动组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:独活寄生汤联合运动疗法效果优于单纯药物治疗和单纯运动疗法,对于膝骨关节炎患者疼痛缓解,关节功能恢复效果较好,值得临床推广。

独活寄生汤联合西药治疗类风湿关节炎随机平行对照研究

[目的]观察独活寄生汤联合西药治疗类风湿关节炎疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将80例分为两组,对照组40例美洛昔康、甲氨蝶呤、甲泼尼龙片口服。治疗组40例独活寄生汤加减,联合西药同对照组。3个月(90d)为1疗程,治疗1疗程(90d)判定疗效。[结果]治疗组临床缓解10例,显效21例,有效6例,无效3例,总有效率92.50%。对照组临床缓解5例,显效14例,有效11例,无效10例,总有效率75.00%。治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。[结论]中西医结合治疗类风湿关节炎,科学有效。

独活寄生汤含药血清对退变软骨细胞表达miRNA-140的影响

目的:观察独活寄生汤含药血清对体外培养的大鼠退变软骨细胞表达miRNA-140的影响,探讨独活寄生汤防治骨关节炎的作用机制。方法:4周龄SD大鼠膝关节软骨建立体外培养的软骨细胞,采用Ⅱ型胶原原位杂交法对第3代(F3)软骨细胞进行鉴定。用10 ng·mL^(-1)白细胞介素-1β诱导F3软骨细胞,复制退变软骨细胞模型。成功后随机分为模型组和独活寄生汤含药血清组,分别在培养24,48,72 h后采用Taq Man real-time PCR法检测各组miRNA-140表达。结果:独活寄生汤含药血清组miRNA-140相对表达量随着干预时间的延长逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:独活寄生汤治疗骨关节炎的部分作用机制是有效促进退变软骨细胞miRNA-140的表达。