都梁丸指纹图谱的建立及4种成分的含量测定研究

目的建立都梁丸的指纹图谱及4种成分含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃;检测波长300 nm。结果所建立的10批都梁丸指纹图谱,有16个共有峰;利用对照品指认出11个色谱峰,分别为阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、水合氧化前胡素、白当归素、佛手柑内酯、白当归脑、氧化前胡素、洋川芎内酯A、欧前胡素、藁本内酯、异欧前胡素,相似度均大于0.95;阿魏酸、欧前胡素、洋川芎内酯A、异欧前胡素4种成分含量测定的结果平均值分别为0.0620%、0.1401%、0.3064%、0.0752%。结论本方法简单可行,重复性良好,可用于都梁丸的质量控制。

都梁软胶囊的药效及毒性试验

目的观察都梁软胶囊和都梁丸的镇痛作用、对血瘀动物模型血流动力学的影响及毒性作用。方法在小鼠热板和扭体反应模型上,观察用药后舔足潜伏期和扭体数的改变;采用LG-R80全自动血液粘度测试仪测定血瘀大鼠模型全血、血浆的粘度变化;并行急性毒性及长期毒性观察。结果都梁丸5 g/kg·b.w.及都梁软胶囊10、5、3 g/kg·b.w.均能减少醋酸致小鼠扭体次数,并延长小鼠舔足潜伏期。服用都梁软胶囊0.5 h后即可出现止痛作用,而都梁丸则在服用1 h后才能观察到止痛作用。都梁软胶囊和都梁丸均能降低血瘀大鼠的全血粘度及红细胞压积;急性毒性及长期毒性实验未发现药物毒性反应。结论无论是胶囊还是丸剂均有明显的止痛、降低血瘀大鼠的全血粘度及红细胞压积作用,但都梁软胶囊在止痛方面起效快,且临床应用有效、安全。

都梁丸质量标准的研究

目的建立都梁丸的质量标准。方法采用TLC法对处方中川芎进行定性鉴别;用HPLC法测定方中君药白芷中欧前胡素的含量。结果在TLC色谱中,能检出川芎;欧前胡素浓度在2.464～61.6μg·ml-1范围内,与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999);样品中欧前胡素的平均加样回收率为99.60%,RSD为1.3%,(n=6)。结论此方法简便、准确性好,为都梁丸的质量控制提供了科学依据。

都梁丸提取液镇痛作用及对外周组织c-fos基因表达影响的实验研究

目的 :研究都梁丸提取液对炎性疼痛动物模型的镇痛作用及其对外周组织c fos基因表达的影响 ,为其镇痛作用机理提供依据。方法 :测定完全福氏佐剂 (FCA)所致大鼠疼痛模型的痛阈值 ,免疫组织化学法检测外周组织c fos的表达情况。结果 :都梁丸提取液能提高炎性疼痛模型痛阈值 ,抑制外周组织c fos的表达 ,与模型组相比具显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :都梁丸提取液具镇痛作用 ,其作用可能与抑制外周组织c fos基因的表达有关。

中药药对“都梁丸”化学成分的研究

目的:研究中药药对"都梁丸"的化学成分。方法:采用硅胶、高效液相等柱色谱方法进行分离纯化,通过质谱、核磁共振等谱学数据鉴定化合物结构。结果:从"都梁丸"环己烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取部位中共鉴定了41个化合物,分别为5-羟甲基糠醛(1),香草醛(2),阿魏酸(3),松柏醛(4),花椒毒素(5),佛手酚(6),镰叶芹二醇(7),洋川芎内酯H(8),洋川芎内酯I(9),洋川芎内酯D(10),4-羟基-3-丁基苯酞(11),洋川芎内酯A(12),Z-藁本内酯(13),3-丁烯基苯酞(14),新蛇床内酯(15),欧当归内酯A(16),β-谷甾醇(17),异茴芹内酯(18),邻苯二甲酸正丁酯(19),邻苯二甲酸异丁酯(20),川芎二内酯R1(21),白术内酰胺(22),香柑内酯(23),补骨脂素(24),异氧化前胡内酯(25),珊瑚菜内酯(26),独活属醇(27),牧草栓翅芹酮(28),异白当归脑(29),欧前胡素(30),异欧前胡素(31),别异欧前胡素(32),水合氧化前胡内酯(33),白当归素(34),印枳苷(35),(2'S,3'R)-3'-羟基印枳苷(36),仲-O-β-D-吡喃葡萄糖基白当归素(37),叔-O-β-D-吡喃葡萄糖基白当归素(38),(2'R,3'S)-3'-羟基紫花前胡苷(39),花椒毒酚-8-O-β-D-吡喃葡糖苷(40),腺苷(41)。结论:香豆素以及香豆素类成分应来源于复方中的白芷;藁本内酯类化合物应来源于复方中的川芎。

一测多评法测定中成药中洋川芎内酯A和藁本内酯

目的以丁苯酞为内标一测多评法测定都梁滴丸、白带丸、血府逐瘀胶囊中洋川芎内酯A和藁本内酯。方法待测药物以甲醇提取,HPLC分析采用的色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为甲醇-水(52∶48)。测定洋川芎内酯A和藁本内酯的相对校正因子,考察其校正因子的重现性,并与外标法进行比较。结果都梁滴丸和血府逐瘀胶囊能同时检测出洋川芎内酯A和藁本内酯,而白带丸仅检测出藁本内酯。在Agilent Eclipse XDB-C18、Phenomenex Luna C18和Agilent Zorbax SB-C18色谱柱上测定的相对校正因子重现性好,与外标法实测值无显著差异。结论本法可用于川芎、当归的质量控制,解决了洋川芎内酯A和藁本内酯对照品不稳定的难题。

都梁丸提取液的镇痛作用及其对小鼠脑组织中5-HT、5-HIAA、DA及NE含量的影响

目的观察都梁丸提取液的镇痛作用及其对脑组织中5-羟胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)含量的影响。方法实验设正常组、模型组、都梁丸提取液大、中、小剂量组;除生理盐水组外,其余各组足趾部注射完全福氏佐剂(FCA)复制炎性疼痛模型后,连续灌胃给药3天,正常组及模型组灌服生理盐水(简称 NS),都梁丸提取液大、中、小剂量组分别灌服都梁丸提取液13.36、6.68、3.34g/kg。热刺激法测定小鼠疼痛模型的痛阈值,高效液相色谱法测定脑组织中5-HT、5-HIAA、DA、NF 含量。结果都梁丸提取液明显提高动物模型痛阈,增加脑组织中5-HT、5-HIAA、DA 含量,降低 NE 的含量,与模型组比较有差异显著性(P<0.05)。结论都梁丸提取液具有镇痛作用,其机制可能与其影响痛觉调制的神经递质5-HT、5-HIAA、DA、NE 含量有关。

HPLC法测定都梁丸中阿魏酸的含量

目的：建立HPLC法测定都梁丸中阿魏酸的含量。方法：采用Diamonsil C18色谱柱,以甲醇-0.1%磷酸（65∶35）为流动相,柱温35℃,测定波长321nm。结果：阿魏酸进样量在0.0144～0.288μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均加样回收率为98.3%,RSD为1.02%。结论：该法准确、快速、重复性好,可用于都梁丸中阿魏酸的含量测定。

UPLC-MS/MS法测定都梁丸中37个成分在大鼠体内的药代动力学

都梁丸是中药经典方剂,由白芷和川芎组成。为了研究都梁丸的药效物质基础,我们采用Diamonsil C_(18)柱、乙腈和0.05%甲酸水溶液为流动相、电喷雾电离源和多重反应监测模式,建立了同时测定白芷、川芎中37种成分的UPLC-MS/MS法并进行了方法学验证。同时,我们采用该方法测定了口服都梁丸提取物后的大鼠体内药代动力学,发现这37种成分均能迅速吸收入血,大部分化合物在24小时内被完全清除,白芷香豆素的口服吸收效果优于川芎内酯类化合物,都梁丸中白芷香豆素的清除速度明显慢于白芷单一给药。该结果为都梁丸的药效物质基础和白芷-川芎配伍作用机制研究提供了依据。

基于网络药理学与分子对接分析都梁丸抗偏头痛的作用机制

目的运用网络药理学方法与分子对接技术探讨都梁丸抗偏头痛的分子作用机制。方法依据反向药效团匹配方法预测活性成分靶点信息,通过DrugBank、GeneCards、NCBI数据库对比筛选抗偏头痛靶点,通过Rv 3.5.1软件进行潜在靶点基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路注释分析,采用Cytoscape软件构建成分-靶点-通路网络图,通过String数据库获取蛋白相互作用,用Systems dock Web Site对其进行分子对接验证。结果网络药理学分析结果表明都梁丸中的活性成分可通过干预22个潜在靶点和调节肾素-血管紧张素系统、胰岛素抵抗、MAPK信号通路发挥抗偏头痛作用。分子对接结果中dockingscore>4.25占76%,说明活性成分与靶点之间有一定的结合活性。结论都梁丸可能通过“多成分-多靶点-多通路”调控MME、肾素-血管紧张素系统、激素受体等发挥抗偏头痛作用。

HPLC同时测定都梁滴丸中的阿魏酸、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡素、异欧前胡素

目的:建立一种同时测定都梁滴丸中的阿魏酸、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡素、异欧前胡素含量的方法。方法:都梁滴丸以75%甲醇超声提取30 min后取上清液,采用Agilent Zorbax SB C18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1;检测波长分别为254,320,330 nm。结果:4种成分的方法最低定量限为3～15 mg.kg-1,线性范围0.5～50 mg.L-1,相关系数(r2)≥0.999 5。高、中、低3个添加水平的平均加样回收率(n=5)为96.6%～102.5%,RSD 0.16%～2.07%。结论:该方法简便、快速适用于都梁滴丸中阿魏酸、5-甲氧基补骨脂素、欧前胡素和异欧前胡素的含量测定。

超高效液相串联质谱法同时测定中成药中5-甲氧基补骨脂素、8-甲氧基补骨脂素和欧前胡素

建立了同时测定中成药都梁滴丸中5-甲氧基补骨脂素、8-甲氧基补骨脂素和欧前胡素的超高效液相-串联质谱检测方法。都梁滴丸以甲醇超声提取45 min,提取液稀释后经Waters Oasis HLB固相萃取小柱净化,采用WatersACQUITY UPLC BEHC18（50 mm×2.1 mm,1.7μm）色谱柱,以乙腈（A）和水（B）为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾电离正离子模式,多反应监测模式检测,以保留时间和离子比定性,外标法定量。方法的定量限8-甲氧基补骨脂素和5-甲氧基补骨脂素均为0.3 mg/kg;欧前胡素为0.75 mg/kg。3种化合物在25~500μg/L范围内均呈线性,相关系数r〉0.99。在高,中,低三种添加水平的平均回收率为82.0%~107.4%日内精密度（RSD%）为1.1%~12%。

都梁滴丸提取物的含量测定

目的建立成品前都梁滴丸提取物的含量测定方法。方法外标法定量,Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),测定阿魏酸的流动相CH3CN与H2O(1 L水中含1mLH3PO4)的体积比为17∶83,检测波长316 nm;测定欧前胡素、异欧前胡素流动相CH3OH与H2O的体积比为70∶30,检测波长300 nm。结果阿魏酸进样量在0.023 4～0.140 6μg范围内,线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为100.4%,RSD为0.39%;欧前胡素进样量在0.016 1～0.322 0μg范围内,线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为102.9%,RSD为0.65%;异欧前胡素进样量在0.004 4～0.087 2μg范围内,线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为100.0%,RSD为0.24%。结论该方法简便、灵敏、准确,可作为都梁滴丸成品前提取物的质量控制方法。

都梁方制剂的现代药学、药理学及临床应用研究进展

都梁方源于《是斋百一选方》,由白芷单味药材组成,炼蜜为丸名"都梁丸",能祛风散寒,主诸风眩晕。现代都梁方制剂出自《北京市中药成方选集》,由白芷、川芎2味组成,能散风止痛,主治感冒风寒、头痛眩晕、鼻塞不通、身热倦怠。其制剂主要包括都梁丸、都梁滴丸和都梁软胶囊等,现代临床上广泛用于偏头痛、慢性紧张型头痛等头痛类疾病。本方主要化学成分包括香豆素类、有机酸类、挥发油类、苯酞类、多糖类等,药理研究表明,本品具有镇痛、抗炎、调节血管舒缩相关因子、内源性痛觉调制系统相关神经递质、改善血液粘度与血流动力学及抑菌解痉等其他药理学作用。本文概述了现代都梁方制剂的处方来源、组成、成方药材的道地产区、生产区划及资源概况,制备工艺剂型改革、化学成分、质量控制研究在内的都梁方制剂现代药学研究,其药理作用和安全性评价以及临床应用,以期为该复方的进一步研究与临床推广提供参考。