原位定量检测磷酸化蛋白质的Duolink PQ技术

很多蛋白质功能的变化往往要借助于特定位置和一定数目的磷酸化变化,因此原位和定量检测将是磷酸化蛋白质分析发展的新方向。一种可原位定量检测磷酸化蛋白质的新技术——Duolink PQ在国内还被了解得很少。本文从原理、方法及应用三个方面对其进行了介绍,并进而对现有磷酸化蛋白质检测的主要技术进行了简要评价。

G蛋白偶联受体磷酸化研究进展

G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptors,GPCR)是具有重要生理病理功能的跨膜受体蛋白。GPCR磷酸化与G蛋白偶联受体激酶(G protein-coupled receptor kinases,GRKs)、蛋白激酶C(proteinkinase C,PKC)及β抑制蛋白(β-arrestin)密切相关。GPCR发生磷酸化可选择性的激活G蛋白依赖或G蛋白非依赖β-arresin信号转导通路,因而表现出偏向性受体/配体的特点。生物发光共振能量转移(bioluminescence resonance energy transfer,BRET)及Duolink等新技术的应用,推进了GPCR磷酸化的研究进程。本文简要综述了GRK、β-arrestin、PKC等对GPCR磷酸化的作用及GPCR发生磷酸化后对偏向性信号转导的影响,并探讨了目前研究GPCR磷酸化的最新技术,为进一步了解GPCR生理病理功能和药物研发提供理论基础。