抗果蝇Dxl6蛋白抗体的制备及特异性分析

为了研究果蝇中SR蛋白家族新成员Dxl6的功能,通过RT PCR得到Dxl6的全长cDNA,并根据Dxl6基因产物的功能区,分别将Dxl6中间区域(Dxl6middlepart,Dxl6MP)、Dxl6C末端RS结构域(Dxl6RSdomain,Dxl6RSD)序列亚克隆至pGEX 4T 1(His)6C及pET32a表达载体中,表达和纯化获得融合蛋白。用纯化的融合蛋白GST Dxl6RSD His和GST Dxl6MP His免疫家兔,分别得到抗Dxl6RSD和抗Dxl6MP两种抗体。WESTERNBLOT结果显示两种抗体能特异地识别在原核表达系统内表达的抗原,抗Dxl6RSD的抗体对果蝇组织中的Dxl6具有较高的特异性。