菠萝粉蚧和新菠萝灰粉蚧溴甲烷熏蒸处理研究

菠萝粉蚧Dysmicoccus brevipes(Cockerell)和新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes(Beardsley)是菠萝等热带水果上的重要害虫,均属我国进出境水果贸易中需要检疫处理的对象。为了建立两种粉蚧有效的除害处理方法,本文测定了溴甲烷熏蒸2h对两种粉蚧各虫龄的致死毒力。结果表明,两种粉蚧对溴甲烷具有相似的毒力反应,1龄若虫的耐药性明显低于其它各虫龄。菠萝粉蚧LC99最大值在19.4℃和28.8℃下均为3龄若虫,分别为30.32g/m3和18.17g/m3;新菠萝灰粉蚧LC99最大值在19.2℃和29.4℃下分别为3龄若虫和成虫,分别为29.19g/m3和18.41g/m3。确认实验表明,在25℃下,采用熏蒸剂量25g/m3,在19℃下采用40g/m3熏蒸2h可以使菠萝粉蚧和新菠萝灰粉蚧达到安全检疫处理要求。

菠萝洁粉蚧防治药剂筛选及安全间隔期分析

为了适应菠萝无公害食品生产的要求,达到安全合理地施用化学农药的目的,对几种常用的杀虫杀螨剂对菠萝洁粉蚧的防治效果及其在菠萝上的安全间隔期进行研究。结果表明,吡虫.噻嗪酮、吡虫啉、杀扑磷(速扑杀)等对菠萝洁粉蚧具有良好的防治效果,种苗浸泡对于菠萝洁粉蚧的防治效果尤为明显,吡虫.噻嗪酮、吡虫啉、杀扑磷等药剂浸泡处理的菠萝植株种植4个月后未发现菠萝洁粉蚧为害,对菠萝洁粉蚧的防治效果达100%;氧化乐果、噻嗪酮、炔螨特、吡虫啉等药剂在菠萝上的降解速度慢,安全间隔期长,杀扑磷、毒死蜱、哒螨灵等药剂在菠萝上降解速度快,安全间隔期短。菠萝种前进行种苗浸泡处理,收获时果实未检出农药残留。

菠萝粉蚧及菠萝凋萎病研究进展

菠萝粉蚧刺吸寄主汁液,分泌的蜜露容易引起煤烟病,是菠萝凋萎病病毒的主要传播媒介。对菠萝粉蚧、菠萝凋萎病及其防治,以及蚂蚁、粉蚧、菠萝凋萎病三者的关系进行了简要的综述,并就菠萝粉蚧的研究方向提出了一些建议。

菠萝粉蚧种类调查及发生规律研究

菠萝粉蚧是为害菠萝的粉蚧的统称,是菠萝凋萎病的主要传播媒介,本文对我国菠萝粉蚧的种类和发生规律进行了研究。结果表明:在我国,为害菠萝的粉蚧主要是菠萝洁粉蚧,仅在海南乐东菠萝园发现有新菠萝灰粉蚧危害;菠萝洁粉蚧目前仅限在菠萝上为害;新菠萝灰粉蚧主要为害剑麻,也为害菠萝和粉蕉;我国暂未发现2种粉蚧混合发生的现象。秋季是雷州半岛地区菠萝洁粉蚧自然种群快速增长期,12月下旬菠萝洁粉蚧自然种群数量进入高峰期;气温和降雨量是影响菠萝洁粉蚧自然种群增长的重要因子,高温、低温均不利于菠萝洁粉蚧生长和繁殖,降雨量对菠萝洁粉蚧的自然种群数量具有明显的抑制作用。

诱杀蚂蚁对菠萝洁粉蚧种群数量及菠萝凋萎病发生的影响

【目的】探索诱杀蚂蚁防治菠萝洁粉蚧的可行性,为菠萝洁粉蚧和菠萝凋萎病的防治提供新途径。【方法】对菠萝洁粉蚧共栖蚂蚁的种类进行调查,并采用田间小区试验法分别对施用蚂蚁毒饵及对照果园菠萝洁粉蚧种群消长动态和菠萝凋萎病发生情况进行调查。【结果】毒饵诱杀蚂蚁可以明显降低菠萝园菠萝洁粉蚧的种群数量,试验区菠萝凋萎病发病较轻,菠萝枯萎率为2.38%,而对照区菠萝凋萎病发病较重,菠萝枯萎率为15.73%。【结论】通过诱杀蚂蚁控制菠萝洁粉蚧种群数量,是防治菠萝凋萎病行之有效的新方法。

绿僵菌对菠萝粉蚧的室内致病力测定

[目的]筛选对菠萝粉蚧有高毒力的菌株，为菠萝粉蚧的田间防治提供科学依据。[方法]以菠萝粉蚧为目标昆虫，从自然感病虫体和土壤中分离获得3株绿僵菌菌株，在室内用喷雾法测定这3株绿僵菌对菠萝粉蚧的致病力。[结果]在室温下，用绿僵菌MA4、J813、J86C接种后，菠萝粉蚧的的死亡率随着绿僵菌孢子浓度的增加而逐步提高。在同一孢子浓度（108，107，106）中，绿僵菌3个菌株对菠萝粉蚧的致病力顺序均为J813（MA4（J86C。感病的粉蚧行动迟缓，死亡2-3 d后，形成僵虫。僵虫经保湿培养3-4 d后，虫体表面长出绿色的粉状孢子。[结论]绿僵菌J813菌株在室内对菠萝粉蚧有强致死力，拥有良好的田间应用前景。

菠萝粉蚧种群消长及空间分布型研究

菠萝粉蚧刺吸寄主汁液,分泌的蜜露容易引起霉烟病,是菠萝凋萎病病毒的主要传播媒介,是菠萝的一种重要害虫。采用隔行跳跃式及定点调查分别对雷州半岛菠萝粉蚧大田空间分布、自然种群消长动态进行调查。结果表明:菠萝粉蚧在菠萝中自然种群消长曲线呈单峰型,其空间格局是以个体群为基本成份呈聚集分布。

不同温度下的菠萝洁粉蚧实验种群生命表研究

组建了菠萝洁粉蚧在5个恒温、4个变温下的实验种群生命表。结果表明:在16~32℃,菠萝洁粉蚧的发育速率总体上随着温度的升高而加快,并符合二次回归模型;菠萝洁粉蚧若虫期、产雌前期及世代的发育起点温度分别为12.43、12.65、12.55℃,有效积温分别为602.71、169.43、770.98 DD。实验温度下,南瓜饲养菠萝洁粉蚧雌虫世代历期介于45.40~205.00 d,最适温度为27℃。菠萝洁粉蚧种群趋势指数介于0.68~39.86,24℃时达到最大值;变温下,26/21℃为最适梯度温度,种群趋势指数57.36。分析表明,梯度温度比恒温更有利于菠萝洁粉蚧的生长发育和种群的增长,菠萝洁粉蚧在华南地区一年中大多数月份里将呈种群增长态势。

菠萝粉蚧化学防治技术研究

菠萝粉蚧具有繁殖速度快、藏身隐蔽等特点,是较难防治的害虫之一。我国在菠萝粉蚧的防治上依然以传统高毒化学农药的防治为主。为了适应菠萝无公害食品生产的要求,通过种苗浸泡和大田喷雾两种方式就一批高效低毒农药对菠萝粉蚧的防治进行研究。结果表明,种苗浸泡对于菠萝粉蚧的防治具有事半功倍的效果,在生产过程中以吡虫·噻嗪酮、吡虫啉、杀扑磷(速扑杀)等低毒化学农药代替氧化乐果等传统高毒化学农药,对于建立菠萝无公害生产基地具有重要意义。

菠萝洁粉蚧响应杀扑磷基因差异表达分析

为了研究菠萝洁粉蚧对有机磷杀虫剂在分子水平上的应激反应,采用RNA-seq高通量测序的方法分别对清水处理和杀扑磷药液处理的菠萝洁粉蚧的转录组进行了测序,组装后获得52806个Unigenes,其中15890个Unigene在Nr、SwissProt、KOG和KO四个数据库中有注释。与清水处理的对照组相比,杀扑磷药液处理组中共发现8389个差异表达基因,其中表达量上调的有3068个,下调的有5321个。乙酰胆碱酯酶(AchE)、细胞色素P450酶系(P450s)、羧酸酯酶(CarEs)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)等相关抗逆、解毒基因表达量以下调为主,这可能与以致死中浓度(LC50)杀扑磷药液浸泡30 s的处理方式有关,即杀扑磷对菠萝洁粉蚧处理剂量相对较高。参与分子功能的基因大多体现在结合和催化活性方面,在脂肪酸代谢、淀粉与蔗糖的代谢、溶酶体、甘油酯代谢、神经活性配体受体相互作用和类固醇生物合成等代谢通路显著富集。

低温磷化氢熏蒸对进口山竹粉蚧杀灭效果及果实品质的影响研究

研究了磷化氢低温熏蒸对进口山竹品质的影响及对南洋臀纹粉蚧(Planococcus lilacius Cockerell)和新菠萝灰粉蚧(Dysmicoccus neobrevipes Beardsley)的杀灭效果.在5℃下,分别使用0.28,0.59,1.14和2.28 g/m 3磷化氢熏蒸南洋臀纹粉蚧、新菠萝灰粉蚧混合虫态和山竹4 h,统计2种粉蚧死亡率,同时测定山竹可溶性糖、酸度、抗坏血酸(Vc)、总抗氧化能力(T-AOC)和多酚氧化酶(PPO)等品质指标.结果表明,粉蚧雌成虫较若虫耐受力更强,磷化氢0.59 g/m 3即可杀死全部南洋臀纹粉蚧和新菠萝灰粉蚧雌成虫和若虫;熏蒸后贮藏期间山竹可溶性糖变化平稳,酸、Vc和T-AOC整体略微下降,只有PPO有上升的趋势;但各熏蒸组的果实品质指标与对照组相比差异并无统计学意义,说明磷化氢熏蒸对山竹品质无明显影响.上述研究表明,磷化氢熏蒸可用于进口山竹携带的南洋臀纹粉蚧和新菠萝灰粉蚧的检疫处理,5℃下使用磷化氢0.59 g/m 3熏蒸4 h可作为备选技术指标.

新菠萝灰粉蚧及其近似种的DNA条形码鉴定

DNA条形码是一段特殊的、可用来进行物种鉴定的DNA序列。线粒体COI基因的部分序列是研究动物DNA条形码最常用的分子标记。我国口岸每年从东南亚进口水果中截获新菠萝灰粉蚧等大量蚧虫,其中不少种类属检疫性有害生物,但由于蚧虫个体微小,形态学方法很难进行准确鉴定。本研究将DNA条形码技术运用到蚧虫分类鉴定之中,将测序得到的蚧虫COI部分序列与BOLD和Genbank中的DNA条形码数据库比对,实现了对相关蚧虫进行快速准确鉴定。

菠萝粉蚧和新菠萝灰粉蚧γ-射线辐照处理研究

菠萝粉蚧Dysmicoccus brevipes(Cockerell)和新菠萝灰粉蚧Dysmicoccus neobrevipes(Beardsley)是菠萝等热带水果上的重要害虫,是我国进出境水果贸易中均需要检疫处理的对象。为了建立适合菠萝等水果上这两种粉蚧的检疫处理技术,本研究采用80、130、180、230和280 Gyγ-射线辐照处理了两种粉蚧的若虫和成虫。结果表明,两种粉蚧对γ射线的剂量反应基本一致,表现为随虫龄增大对辐照的耐受性增强,以雌成虫为最强。采用230Gy辐照若虫,两种粉蚧各若虫均不产生F1代活虫体,并且菠萝粉蚧1龄若虫在该剂量下不能发育至雌成虫。以230 Gy辐照成虫,两种粉蚧均产生F1代雌成虫,但不产生F2代。以240 Gy剂量大规模辐照处理3龄若虫和雌成虫,表明该剂量足以阻止两种粉蚧繁殖,该剂量可作为这两种粉蚧辐照处理的参考指标。

基于RNA-Seq高通量测序技术的菠萝洁粉蚧转录组研究

为了探索调节昆虫世代历期的相关基因,研究了菠萝洁粉蚧在转录水平上对温度的响应。组装后获得49898个Unigenes,其平均长度为1007bp;其中有15015(30.10%)个Unigenes被成功注释到Nr、SwissProt、KOG和KO等功能数据库中。DEG分析表明,7960个Unigenes被诱导差异表达,其中MIX21相对于MIX27表达量上调的有5080个,下调的有2880个。差异基因代谢通路分析表明,差异表达基因中涉及长寿调节途径(Longevity regulating pathway)的有3个通路,其中21℃饲养下的菠萝洁粉蚧种群胰岛素/IFG-1信号通路关键因子DAF-2、雷帕霉素靶标TOR信号通路关键因子RSK-1和S6K显著下调,相关因子被抑制表达,很好地解释了其世代发育历期比27℃饲养下长的现象。21℃饲养下的菠萝洁粉蚧种群HSP60较27℃饲养下的显著上调,而HSPs有上调也有下调,显示热休克蛋白HSP对温度的反应呈现一定的多样性、复杂性。这些发现将有助于今后昆虫寿命分子调节机制的研究,DAF-2、S6K、RSK-1等相关基因未来或将应用于调节一些经济昆虫的生长周期。

基于分子标记COI、28S和18S对新菠萝灰粉蚧与菠萝灰粉蚧的识别鉴定

新菠萝灰粉蚧(Dysmicoccus neobrevipes Beardsley)是我国进境植物检疫性有害生物,与近似种菠萝灰粉蚧(Dysmicoccus brevipes(Cockerell))从形态上很难区分,给口岸快速准确鉴定带来了困难。本研究尝试采用快速、易于操作的DNA条形码技术对两种粉蚧识别鉴定。实验选择两种粉蚧的不同地理种群共65个样本,选用3个分子标记(COI、28S和18S)进行引物筛选、基因扩增、序列分析。结果表明:引物(18S_2880_F/18S_B_R;28S_S3660_F/28S_A335_R;Pco_F/C1-12342_R)能够成功扩增所有测试样品;3个分子标记都存在条形码间隔,COI最大,28S次之,18S最小;结合Gen Bank数据库中的同源序列进行系统发育分析,28S的NJ树图与COI相似,均以高支持率(97%和100%)将所有样本分成2个独立分支,分析结果与形态鉴定结果一致。与28S和COI相比,18S基因序列矩阵构建的聚类树含低支持率分支。本研究扩增的COI及28S基因区段均可作为快速准确鉴定新菠萝灰粉蚧与菠萝灰粉蚧的有效分子标记。