KAI1,Snail,Slug,E-cadherin在鼻咽癌组织中的表达及其与患者预后的关系

目的 探讨KAI1、Snail、Slug、上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)在鼻咽癌组织中的表达及其与患者预后的关系。方法 选取43例鼻咽癌患者,收集癌组织与癌旁正常组织,采用免疫组织化学法测定其KAI1、Snail、Slug、E-cadherin表达。分析四者与患者临床病理特征的关系;另随访3年,采用Kaplan-Meier法分析四者表达与鼻咽癌患者预后的关系。结果 癌组织中KAI1、E-cadherin阳性表达率低于癌旁组织,Snail、Slug阳性表达率高于癌旁组织,有统计学差异(P<0.05);KAI1、Snail、Slug、E-cadherin表达与鼻咽癌患者年龄、性别无关(P>0.05);KAI1、Snail、Slug、E-cadherin表达与肿瘤临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);癌组织KAI1、E-cadherin阴性表达与Snail、Slug阳性表达患者的3年生存率低于KAI1、E-cadherin阳性表达与Snail、Slug阴性表达患者,有统计学差异(P<0.05)。结论 KAI1、E-cadherin在鼻咽癌组织内呈低表达,Snail、Slug呈高表达,四项指标均参与疾病的发生、发展,与患者预后相关。

PLOD2、Snail和Slug在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的:研究食管鳞状细胞癌中PLOD2、Snail和Slug的表达情况。方法:采用免疫组织化学ElivisionTMplus法检测120例食管鳞状细胞癌、40例食管鳞状上皮非典型增生(中、重度)和40例正常食管鳞状上皮的PLOD2、Snail和Slug表达情况,分析三种标志物的表达与各临床病理因素和病人的生存预后之间的关系;以及PLOD2与EMT相关因子Snail和Slug的关系,探索PLOD2在EMT中的作用。结果:从正常食管鳞状上皮到非典型增生和食管鳞状细胞癌,PLOD2、Slug和Snail的表达逐渐明显上升(P<0.01);同时PLOD2、Snail和Slug的表达与肿瘤的浸润深度、分化程度、临床分期以及淋巴结转移有关(P<0.01)。另外,PLOD2与Snail、和Slug的表达均成正相关关系(r=0.812,r=0.759,P<0.01),Snail与Slug的表达成正相关关系(r=0.882,P<0.01)。同时,生存分析显示,PLOD2、Snail和Slug阳性表达组5年生存率明显低于阴性表达组(P<0.01)。结论:PLOD2、Snail和Slug的表达与食管鳞状细胞癌的发生发展和预后有关,联合检测其表达情况可能对食管鳞状细胞癌的进展及预后判断有重要意义。

HIF-1α、E-Cadherin、Snail+Slug在宫颈鳞癌中的表达及意义

目的研究宫颈鳞癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与上皮间充质转化(EMT)相关蛋白E-Cadherin、Snail+Slug的表达及其相关性。方法运用基因芯片免疫组织化学方法检测HIF-1α、E-Cadherin、Snail+Slug在20例正常宫颈组织(NC组)和80例宫颈鳞癌组织(ICC组)中的表达。结果HIF-1α、E-Cadherin、Snail+Slug在ICC组的阳性表达率分别为77.50%(62/80)、67.50%(54/80)、36.25%(29/80),在NC组的阳性表达率分别为5.00%(1/20)、95.00%(19/20)、0(0/20);HIF-1α、E-Cadherin及Snail+Slug在NC组及ICC组中的阳性表达率比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。80例宫颈鳞癌患者中,HIF-1α阳性62例(77.50%),E-Cadherin阳性54例(67.50%),Snail+Slug阳性29例(36.25%)。临床分期Ⅱ期患者的HIF-1α阳性率高于临床分期Ⅰ期患者(P<0.05);临床分期Ⅰ期、高+中分化程度、浸润深度<1/2宫颈间质、无淋巴结转移患者的E-Cadherin阳性率分别高于临床分期Ⅱ期、低分化程度、浸润深度≥1/2宫颈间质、有淋巴结转移患者(P<0.05);低分化程度、浸润深度≥1/2宫颈间质患者的HIF-1α、Snail+Slug阳性率分别高于高+中分化程度、浸润深度<1/2宫颈间质患者(P<0.05);有淋巴结转移患者的Snail+Slug阳性率高于无淋巴结转移患者(P<0.05)。相关性分析结果显示,HIF-1α与E-Cadherin的表达呈负相关,与Snail+Slug的表达呈正相关(P<0.05)。结论HIF-1α蛋白的表达水平与宫颈鳞癌的分化程度、浸润深度密切相关。HIF-1α的过表达可能通过EMT途径促进宫颈鳞癌的浸润与转移,联合检测HIF-1α蛋白表达可作为评价患者预后的生物学指标。

宫颈癌中Snail、Slug和KAI1的表达及临床意义

目的检测宫颈癌中上皮间充质转化(EMT)相关标记物Snail、Slug和转移抑制因子KAI1的表达,并分析它们的相互关系及其临床病理意义。方法利用免疫组化Elivision TM plus法检测154例宫颈鳞状细胞癌(CSCC)、50例宫颈上皮内瘤变(CIN)和40例正常宫颈上皮组织中Snail、Slug和KAI1蛋白的表达。结果 Snail、Slug和KAI1在CSCC组、CIN组和对照组的阳性表达率分别为66.2%、66.9%、43.5%;32.0%、34.0%、64.0%和0%、2.5%、95.0%,两组相互之间差异有统计学意义(P<0.05)。Snail、Slug和KAI1蛋白的表达均与CSCC肿瘤组织的分化程度、淋巴结转移与否、浸润深度、FIGO分期及术后生存期均有关(P<0.05);Snail蛋白的表达与Slug蛋白的表达呈正相关关系(r=0.752,P<0.001),Snail和Slug蛋白的表达均与KAI1蛋白的表达呈负相关关系(P<0.001)。Kaplan-Meier生存分析表明,Snail和Slug蛋白表达阳性的患者其生存率明显低于其阴性表达的患者(P<0.001);KAI1蛋白表达阳性的患者其生存率明显高于其阴性表达的患者(P<0.001)。Cox回归分析显示Snail和KAI1蛋白的阳性表达及FIGO分期是影响CSCC患者术后生存的独立预后因素。结论 Snail、Slug和KAI1蛋白的表达水平在CSCC组织中与肿瘤组织的分化程度、FIGO、浸润深度、淋巴结转移与否及预后等均有关;在CSCC组织中早期联合检测Snail、Slug和KAI1对判断预后有价值。

转录因子Snail、Slug在人宫颈癌上皮-间质转化中的作用

目的探讨调控因子Snail、Slug对E-钙黏蛋白的调控和参与人宫颈癌细胞转移侵袭的机制。方法对20例正常宫颈组织标本及85例宫颈鳞癌标本制成石蜡包埋切片,采用免疫组织化学染色方法检测Slug基因和间质标志物波形蛋白(Vimentin)的表达;采用免疫荧光化学染色检测转录因子Snail蛋白和上皮标志物E-cadherin的表达。结果在宫颈鳞癌组织中Slug蛋白和Vimentin的阳性表达率明显高于正常宫颈组织(P<0.05),随着临床分期增高,其阳性表达率有升高趋势,但未达到统计学差异(P>0.05)。随着组织分化级别下降和肿瘤淋巴结转移,其阳性表达率明显上升(P<0.05);Snail蛋白在鳞癌组织中荧光强度高于正常宫颈组织,浸润癌组织高于宫颈CIN组织(P<0.05),随着组织分化级别下降和肿瘤淋巴结转移,其荧光强度明显增强,但差异亦无统计学意义(P>0.05);E-cadherin在正常宫颈组织中荧光强度高于肿瘤组织,宫颈CIN组织高于浸润癌组织(P<0.05),随着组织分化级别下降和肿瘤淋巴结转移,其荧光强度明显减弱(P<0.05)。结论人宫颈组织上皮-间质转化在宫颈癌侵袭进展中可能发挥重要的作用,同时Snail、Slug信号通路可能参与了宫颈癌的侵袭转移过程。

Snail、Slug在喉鳞状细胞癌中表达与上皮-间质转化及侵袭转移之间的关系

目的研究Snail、Slug基因在喉鳞状细胞癌中的表达,探讨其与肿瘤上皮-间质转化及侵袭转移之间的关系及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测74例喉鳞状细胞癌组织及30例癌旁组织中Snail、Slug及Vimentin、E-cadherin的表达情况,统计分析其表达的相关性及与各临床病理指标之间的关系。结果 Snail、Slug蛋白在喉鳞状细胞癌组织中的阳性率为58.2%和55.4%,高于癌旁组织中阳性率(13.3%和16.7%,P<0.05)。Snail、Slug蛋白表达与E-cadherin呈负相关性(r=-0.567,P<0.001及r=-0.457,P<0.001),与Vimentin的表达呈正相关性(r=0.453,P<0.001及r=0.376,P<0.001)。Snai、Slug蛋白表达与分化程度、TNM分期及淋巴结转移密切相关(均P<0.05)。结论转录因子Snail、Slug可能通过参与与调控EMT过程,与喉鳞状细胞癌的发展和侵袭相关。

Snail E-cadherin与宫颈病变的相关性研究

目的:探索在宫颈癌变过程中E-cadherin、Snail的变化规律及二者之间的关系和临床意义。方法:选取宫颈组织标本共115例,用免疫组化SP法检测宫颈不同组织学阶段标本中E-cadherin、Snail蛋白的表达情况,分析其与临床肿瘤发生、发展的关系。结果:随着由慢性宫颈炎向宫颈上皮内瘤样病变乃至宫颈癌的逐步发展,E-cadherin蛋白的阳性表达逐渐减弱,Snail蛋白的阳性表达逐渐增强,各种组织间均存在差异,有统计学意义(P<0.05);E-cadherin蛋白表达Snail的蛋白表达呈负相关(P<0.01)。结论:Snail在慢性宫颈炎组织,宫颈上皮内瘤样病变(CIN),宫颈癌3个组织学阶段表达逐渐增强,E-cadherin在这3个阶段表达递减,其改变使癌细胞易于从癌组织上脱落,进而浸润、转移,Snail调节E-cadherin的表达。

肝癌细胞株中VEGFR-1活化前后对Snail,Slug,Twist蛋白改变及意义

最近研究表明,上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）在恶性肿瘤的侵袭转移中发挥重要的作用。做为EMT的共同特征,上皮标志物E-钙黏蛋白（E-CD）的表达往往下调,在对E-CD表达调控的研究中发现锌指转录因子Snail，Slug，Twist在转录水平对E—CD的调节是EMT的中心环节。

Twist、Snail、Slug在口腔鳞状细胞癌中的表达及其与各临床病理因素的关系

目的：探讨Twist、Snail、Slug在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）中的表达水平及其与各临床病理因素之间的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测术前未接受放化疗的有颈部淋巴结转移或无颈部淋巴结转移的60例原发OSCC患者肿瘤切除石蜡标本中Twist、Snail、Slug蛋白的表达情况,检测结果采用SPSS10.0软件包进行统计学分析。结果：60例OSCC组织标本中,Twist的表达率为70%;Twist在颈部淋巴结转移的OSCC标本中的表达率为64.3%,无颈部淋巴结转移OSCC中的表达率为35.7%;早期OSCC中的表达率为55.6%,晚期OSCC的表达率为81.8%。Twist表达水平在OSCC患者有无颈部淋巴结转移和不同肿瘤分期之间具有显著性差异（P=0.012,P=0.046）。60例OSCC患者随访时间37个月（6~59个月）,16例患者术后复发。Twist表达与肿瘤复发相关（P=0.025）;Cox回归模式分析表明Twist蛋白表达是OSCC患者预后的独立预测因素之一（P=0.042）。与患者年龄、性别、T分期、病理分级、吸烟、饮酒等无关（P〉0.05）。60例OSCC组织标本中,Snail和Slug表达率分别为63.3%,58.3%;表达水平在OSCC不同临床病理因素之间的差异无统计学意义,对预后无影响（P〉0.05）。结论：Twist、Snail、Slug蛋白在OSCC中高表达,Twist表达水平在OSCC患者有无颈部淋巴结转移和不同肿瘤分期之间具有显著性差异,Snail、Slug表达水平与OSCC临床病理因素无相关性。

Snail和E-cad在化生性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨化生性乳腺癌组织中Snail和上皮性钙黏附素(E-cad)的表达水平及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测58例化生性乳腺癌组织中Snail和E-cad的表达,并收集相应病例的临床病理资料,分析Snail、E-cad表达与化生性乳腺癌临床病理特征的关系及两蛋白的相关性,同时根据随访资料分析两者表达与复发转移的关系。结果在化生性乳腺癌中,Snail和E-cad的阳性表达率分别为77.6%(45/58)和48.3%(28/58)。Snail的表达与临床分期、淋巴结转移和ER表达有关(P<0.05),而E-cad表达与组织学分级、淋巴结转移有关(P<0.05),两者与年龄、HER-2表达、病理类型、肿瘤大小及月经状态均无关(P>0.05)。Snail与E-cad的表达呈负相关(r=-0.308,P=0.019),且均与化生性乳腺癌复发转移有关(P<0.05)。结论 Snail和E-cad联合检测可判断化生性乳腺癌的恶性程度和侵袭能力,且与复发转移有关,两者有望作为化生性乳腺癌治疗的分子靶点。

上皮-间充质转分化与转录因子Snail、Slug、Twist在口腔鳞状细胞癌发生、发展中的作用

上皮-间充质转分化(EMT)是上皮细胞在特定生理和病理情况下向间充质细胞转化的现象,它在上皮性肿瘤的演进中发挥了关键作用。肿瘤发生过程中,转录因子Snail、Slug、Twist等常可引发EMT,促使肿瘤的侵袭与转移。Snail、Slug和Twist在口腔鳞癌演变过程中,尤其在浸润和转移中发挥重要作用。该文介绍EMT的概念、特征以及Snail、Slug和Twist的基因结构特点、生物学特性等,特别对其在口腔鳞癌中的作用进行了综述。

Snail+Slug在宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Snail+Slug在宫颈癌组织中的表达及其临床意义。方法利用免疫组化检测Snail+Slug在60例宫颈癌组织和40例正常宫颈组织中的表达,分析Snail+Slug在宫颈癌组织中的表达状况以及与宫颈癌临床参数的关系。结果 Snail+Slug在宫颈癌组织和正常宫颈组织中阳性表达率分别为71.7%(43/60)、17.5%(7/40),两组间有统计学意义(χ2=29.917,P<0.05);Snail+Slug在宫颈癌组织中的表达明显高于正常宫颈组织,在正常组织中偶见核表达。Snail+Slug的过表达与患者年龄无关(χ2=0.002,P>0.05),与宫颈癌的组织学分化程度、临床分期、有无淋巴转移等有明显相关性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Snail+Slug在宫颈癌中高表达,提示其可能参与了肿瘤的发生和发展,并有望成为临床诊断及评价患者预后的新型标志物。

Biological activities of gastropods secretions:snail and slug slime

Gastropods,a mollusk class including slugs and snails,represent an extraordinarily diverse and ecologically significant group of organisms featuring the largest class of invertebrates.They can be classified as aquatic and terrestrial animals having coiled shells,although some species have reduced or absent shells.Their unique body structure includes a muscular foot for locomotion,a visceral mass containing essential organs,and a distinct head region with sensory organs such as tentacles and eyes.They are used to secrete a complex mixture of glycoproteins,enzymes,peptides,mucus and other bioactive compounds,namely slime,which represents a tool to allow locomotion,protection,and interaction within different habitats.The biological activities of the slime have attracted considerable interest due to their diverse and potentially valuable properties ranging from defense mechanisms to potential therapeutic applications in wound healing,antimicrobial therapy,management of inflammation,and neurological disorders.This review aims at exploring the beneficial effects of snail and slug slime focusing,in particular,on the improvement of the biological processes underlying them.Continued exploration of the intricate components of these slimy secretions promises to discover new bioactive molecules with diverse applications in various scientific and industrial fields.

苦瓜皂苷G通过调控Notch/Snail1信号通路改善糖尿病肾病大鼠肾功能减退及肾纤维化

【目的】观察苦瓜皂苷G对糖尿病肾病(DN)大鼠的治疗作用及机制。【方法】从55只大鼠中随机抽取45只采用一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法诱导DN模型。将造模成功的38只大鼠随机分为模型组9只、苦瓜皂苷G低剂量组9只、苦瓜皂苷G中剂量组10只、苦瓜皂苷G高剂量组10只。剩余10只大鼠设为正常组。对应灌胃给药4周后,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测大鼠24 h尿蛋白水平,血糖仪检测空腹血糖(FBG),全自动生化分析仪检测血肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)水平,苏木素-伊红染色(HE)法观察大鼠肾组织病理学变化,采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western Blot法分别检测E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Notch1、锌指蛋白转录因子1(Snail1)、Jagged1 m RNA及蛋白表达情况。【结果】与正常组比较,模型组24 h尿蛋白、FBG、血清SCr和BUN水平及肾组织α-SMA、Notch1、Snail1、Jagged1 mRNA及蛋白水平显著升高,肾组织E-cad m RNA及蛋白水平降低,肾组织可见肾小球萎缩、肾小管扩张及间质纤维化;与模型组比较,苦瓜皂苷G低、中、高剂量组24 h尿蛋白、FBG、血清SCr和BUN水平及肾组织α-SMA、Notch1、Snail1、Jagged1 mRNA及蛋白水平显著降低,肾组织E-cad m RNA及蛋白水平升高,肾组织病理损伤得到改善。【结论】苦瓜皂苷G可有效改善DN大鼠肾功能障碍、减轻肾脏纤维化,其机制可能与通过调控Notch/Snail1信号通路,抑制α-SMA和Jagged1 mRNA及蛋白表达,增强E-cad mRNA及蛋白表达有关。

探讨Snail调控上皮间质转化在结直肠癌侵袭、转移方面的作用及意义

目的:转录因子Snail能够抑制E-cadherin(E-cad)的表达促进上皮间质转化(Epithelial to mesenchymal transition,EMT),从而促进肿瘤侵袭与转移。本研究通过检测Snail及E-cad在结直肠癌组织、癌旁组织及结肠癌SW480细胞中的表达,探讨Snail调控EMT在结直肠癌侵袭、转移方面的作用及意义。方法:免疫组化检测40例结直肠癌组织及癌旁组织中Snail、E-cad的表达情况s;iRNA干扰Snail基因后将结肠癌SW480细胞分为对照组、空质粒组及siRNA-Snail转染组,RT-PCR分别检测各组结肠癌SW480细胞Snail、E-cad mRNA表达;Transwell小室基质侵袭实验和异质粘附实验分别检测各组结肠癌细胞侵袭与异质粘附能力。结果:结直肠癌组织细胞中Snail、E-cad阳性表达率分别为57.5%、27.5%,癌旁组织细胞10%、80%;2种蛋白在结直肠癌组织细胞和癌旁组织细胞中的表达差异具有统计学意义(P<0.05),均与结直肠癌组织的分化程度及淋巴结转移具有相关性(P<0.05),而与性别、年龄无相关性(P>0.05),且二者的表达呈负相关(P<0.05);RT-PCR结果显示,与对照组相比,Snail、E-cad mRNA表达在空质粒组差异无统计学意义(P>0.05),而转染组差异具有统计学意义(P<0.05);基质侵袭实验和异质粘附实验结果显示,与对照组相比,转染组结肠癌细胞侵袭力和异质粘附力降低,差异具有统计学意义(P<0.05),而空质粒组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Snail调控EMT与结直肠癌的侵袭和转移密切相关,Snail、E-cad可以作为判断结直肠癌侵袭和转移的指标。

Snail与E-钙粘素甲基化协同抑制E-钙粘素的表达

目的探讨去甲基化药物5-氮杂-2’-脱氧胞苷(简称5-Aza)对转录调节因子Snail的作用,转染反义Snail与5-Aza对上皮间质转化相关膜蛋白E-钙粘素的mRNA水平的影响及二者联合作用的可能机制。方法应用MTT、PCR、实时荧光定量PCR、检测低分化胃腺癌细胞株分别转染反义Snail、应用5-Aza单独或协同干预后对细胞的生长增殖及Snail、E-钙粘素mRNA表达的影响。结果与空白对照组比较5-Aza干预、转染反义Snail分别及二者共同干预均增加E-cadherin的mRNA的表达,空质粒组无显著差异。5-Aza上调Snail基因mRNA的表达。两种干预方式处理均能抑制胃癌细胞的生长。结论 5-Aza、转染反义Snail均使E-cadherin mRNA表达增强,且药物作用呈时间浓度依赖性。5-Aza能上调Snail基因的表达,提示甲基化作用在同时下调转录调节子Snail基因表达和抑制E-钙粘素表达。

KAI1、Snail、Slug、E-cadherin在鼻咽癌中的表达及其与患者预后的关系

目的研究KAI1和Snail、Slug、E-cadherin在鼻咽癌中的表达情况,分析其与患者预后的关系。方法收集2011年6月-2015年7月赣南医学院第一附属医院病理科存档石蜡包埋的212例鼻咽癌组织标本,50例鼻咽部黏膜炎组织标本,正常鼻咽上皮组织标本40例,采用免疫组化方法检测各标本中KAI1和Snail、Slug、E-cadherin的表达,通过Kaplan-Meier法评价KAI1和Snail、Slug、E-cadherin的表达与鼻咽癌患者预后的关系,采用Cox回归分析患者临床特征对其生存的影响。结果KAI1和Snail、Slug、E-cadherin在鼻咽癌标本中的表达阳性率分别为25.94%、65.09%、65.09%和31.60%;鼻咽癌组织中Snail、Slug表达阳性率高于鼻咽部黏膜炎组织和正常鼻咽上皮组织(P<0.05);鼻咽癌组织中KAI1、E-cadherin的表达阳性率低于鼻咽部黏膜炎组织和正常鼻咽上皮组织(P<0.05);KAI1与Snail(r=-0.435)、Slug(r=-0.473)呈负相关,与E-cadherin呈正相关(r=0.325);Kaplan-Meier分析显示,Snail(+)和Slug(+)患者的总生存时间短于Snail(-)和Slug(-)患者,KAI1(+)和E-cadherin(+)患者的总生存期长于KAI1(-)和E-cadherin(-)患者(P<0.05);Cox回归分析发现,KAI1、Snail、Slug、E-cadherin、淋巴结转移、远处转移、TNM分期是影响鼻咽癌患者预后的独立因素。结论KAI1和Snail、Slug、E-cadherin的表达及EB-DNA水平、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、TNM分期与鼻咽癌预后相关,联合检测可辅助判断鼻咽癌患者的预后。

EMT分子标志物在肝癌细胞系中的表达及其意义

目的探讨人肝癌细胞系EMT相关分子标志物的表达情况,为确定相关的肝癌细胞研究模型奠定基础。方法利用实时定量PCR方法检测5株人肝癌细胞系(SNU368、SNU739、HLF、Huh-1和MHCC97L)中E-cadherin、ZO-1、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug的mRNA表达,Westernblot和免疫荧光检测E-cadherin、ZO-1、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug的蛋白表达。结果E-cadherin、ZO-1、N-cadherin、Vimentin、Snail和Slug的mRNA在5种肝癌细胞中均有不同程度表达,E-cadherin、ZO-1、N-cadherin和Slug蛋白在5个细胞株中亦有表达,Vimentin蛋白主要在SNU368、SNU739、HLF和MHCC97L细胞中表达明显,Snail蛋白在SNU368,SNU739,Huh-1和MHCC97L细胞中表达较高。结论HLF细胞系表现出更明显的间质细胞表型特点,Huh-1和SNU368则表现为较典型的上皮细胞表型特点。

宫颈癌细胞系中EMT相关基因的表达及其意义

目的上皮-间质转化(EMT)是上皮来源的恶性肿瘤侵袭转移的重要机制之一,其特征为上皮细胞标志物表达下调(E-cadherin等)而间质细胞标志物(vimentin等)表达上调。本研究旨在探讨人宫颈癌细胞系EMT相关标志物的表达情况,以确定宫颈癌细胞是否发生EMT,并为确定相关的细胞研究模型奠定基础。方法采用逆转录PCR方法检测4株人宫颈癌细胞系(SiHa、HeLa、RJC-1、CS1213)中E-cadherin、vimentin、Snail和Slug mRNA的表达;Western blotting检测E-cadherin和vimentin的蛋白表达;免疫细胞化学方法检测Snail和Slug的蛋白表达。结果vimentin和Snail mRNA在4种细胞中均有表达,E-cadherin和Slug mRNA在SiHa、HeLa和RJC-1细胞表达。E-cadherin蛋白在SiHa和RJC-1细胞表达,vimentin蛋白在HeLa和CS1213细胞表达。Snail蛋白在4个细胞株都有表达,Slug蛋白在SiHa、HeLa和RJC-1细胞表达。结论 HeLa和CS1213表现出间质细胞表型,SiHa和RJC-1则表现为上皮细胞表型。

PM_(2.5)对人肺癌细胞A549迁移、侵袭能力的增强作用

为探讨PM_(2.5)(particulate matter 2.5)对人肺癌细胞A549迁移、侵袭能力的影响并探讨相关机制,采用含有不同浓度PM_(2.5)的无血清及抗生素培养液对A549细胞培养72 h,利用MTT法检测A549细胞的增殖抑制率。根据MTT实验结果,选择适当的PM_(2.5)暴露浓度用于后续实验,以细胞划痕实验检测细胞迁移能力,transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力,Western Blotting法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、转录因子snail和slug、基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及胞核内β-链蛋白(β-catenin)的蛋白表达水平。结果显示:细胞划痕实验结果显示10μg·m L-1PM_(2.5)组A549细胞划痕创面愈合率为(46.34%±5.19%),与对照组比较显著增高(P<0.05);transwell小室法迁移和侵袭实验结果显示10μg·m L-1PM_(2.5)组穿膜细胞数平均为(165.67±6.62)个和(47.83±2.04)个,与对照组比较显著增多(P<0.05);Western Blotting实验结果显示PM_(2.5)(10μg·m L-1)可显著上调A549细胞cyclin D1、snail、slug、MMP-2、MMP-9和胞核内β-catenin蛋白表达水平。因此,PM_(2.5)可通过提高Wnt/β-catenin通路活性及其下游cyclin D1、snail、slug、MMP-2和MMP-9的蛋白表达而增强A549细胞的迁移、侵袭能力。