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玻璃纤维桩树脂核联合E-max全瓷冠修复上前牙牙体缺损临床疗效分析
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作者 穆春晖 陈会然 王营 《中国美容医学》 CAS 2024年第6期136-140,共5页
目的:观察玻璃纤维桩树脂核联合E-max全瓷冠修复上前牙牙体缺损的临床效果,并将其与铸造金属桩核联合E-max全瓷冠的修复效果进行对比。方法:选取2017年1月-2022年1月笔者医院收治的60例上前牙牙体缺损患者,采用计算机随机数字生成器分为... 目的:观察玻璃纤维桩树脂核联合E-max全瓷冠修复上前牙牙体缺损的临床效果,并将其与铸造金属桩核联合E-max全瓷冠的修复效果进行对比。方法:选取2017年1月-2022年1月笔者医院收治的60例上前牙牙体缺损患者,采用计算机随机数字生成器分为A组和B组,每组30例。两组均采用E-max全瓷冠修复,A组采用铸造金属桩核,B组采用玻璃纤维桩树脂核。比较两组修复后1年的修复成功率、修复效果及不良事件发生率,比较修复前、后两组龈沟液基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)水平。结果:两组修复成功率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与A组比较,B组颜色匹配率、边缘适合率较高(P<0.05)。修复前两组龈沟液MMP-2、ALP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);修复后与A组比较,B组龈沟液MMP-2、ALP水平降低(P<0.05);与修复前比较,A组龈沟液MMP-2、ALP水平升高(P<0.05),B组水平变化不显著(P>0.05)。与A组比较,B组桩核断裂、牙龈着色及冠折或根折发生率较低(P<0.05)。结论:采用玻璃纤维桩树脂核联合E-max全瓷冠修复上前牙牙体缺损,可有效改善修复效果,减少对牙周组织的刺激及不良事件的发生。 展开更多
关键词 上前牙牙体缺损 玻璃纤维桩树脂核 e-max全瓷冠 基质金属蛋白酶-2 碱性磷酸酶
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大肠杆菌碱性磷酸酶在E.coli BL21(DE3)中的胞内可溶性表达 被引量:1
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作者 包剑铭 郭小帆 +3 位作者 赵雪飞 李雨丽 梁艺旋 唐金宝 《中国生化药物杂志》 CAS 北大核心 2014年第5期165-166,共2页
目的构建原核表达载体pEAP,在E.coil BL21(DE3)中实现大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase,EAP)的胞内可溶性表达,为进一步研究工程菌的大体积培养条件、提高其表达量提供理论基础。方法以质粒pDAP2为模板扩增不... 目的构建原核表达载体pEAP,在E.coil BL21(DE3)中实现大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase,EAP)的胞内可溶性表达,为进一步研究工程菌的大体积培养条件、提高其表达量提供理论基础。方法以质粒pDAP2为模板扩增不含信号肽的EAP基因,克隆至pGreen-S质粒构建表达载体pEAP,以E.coli BL21(ED3)菌株表达EAP,采用SDS-PAGE及EAP酶活性测定对表达产物的可溶性及胞内定位进行分析;Ni2+亲和层析方式纯化目的蛋白并测定其比活力。结果经PCR、双酶切及测序分析证实载体构建正确,所表达目的蛋白主要以可溶性形式存在于BL21(ED3)菌体细胞质,其相对分子量与理论值相符(47kD)且具有EAP催化活性;目的蛋白经His Trap亲和层析纯化后,其电泳纯度在90%以上,酶比活力可达358.6 U/mg。结论成功构建pEAP质粒表达载体,目的蛋白在BL21(ED3)菌株胞内主要以可溶性形式表达,为进一步更经济、高效制备EAP奠定了一定的实验基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 碱性磷酸酶 细胞质 可溶性表达
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Phosphatase Hydrolysis of Organic Phosphorus Compounds 被引量:4
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作者 Irenus A. Tazisong Zachary N. Senwo Zhongqi He 《Advances in Enzyme Research》 2015年第2期39-51,共13页
Phosphatases are diverse groups of enzymes that deserve special attention because of their significant roles in organic phosphorus (OP) mineralization to inorganic available forms (Pi). This work 1) compared the catal... Phosphatases are diverse groups of enzymes that deserve special attention because of their significant roles in organic phosphorus (OP) mineralization to inorganic available forms (Pi). This work 1) compared the catalytic potentials of commercially acid phosphatase from wheat germ, sweet potato, and potato, and alkaline phosphatase from E. coli;2) demonstrated that the rate of hydrolysis, catalytic efficiency, thermal stability, and optimal pH of these enzymes depended on enzyme sources and the stereochemical or stereoisomeric structures of the substrates;3) revealed that both acid and alkaline phosphatases exhibited broad range of substrate hydrolysis with high affinity for p-nitrophenyl phosphate bis (cyclohexylammonium) than the widely used p-nitrophenyl phosphate disodium hexahydrate for phosphatase assay. Sweet potato had relatively higher reaction kinetics (Vmax, Km, Kcat, Kcat/Km) values with most substrates tested. The order of catalytic activity was in the order: sweet potato > wheat germ > potato, while the order of substrate hydrolyzed was: PNPBC > PNP > PNP2A2E > DG6P2Na > DG6PNa > Bis-PNP > phytate. The optimum pH for the acid phosphatase was observed to be 5.0. Generally, the activity of alkaline phosphatase was similar to that of acid phosphatase with optimal pH between 10 and 13, depending on the substrates. Knowledge derived from this work would be helpful in enzyme catalysis in soils and water environments. 展开更多
关键词 enzymes phosphataseS Organic Phosphorus Mineralization Wheat GeRM SWeeT POTATO e. coli
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Effect of E. coli coli on Anti-disease Activities of Scailops: Argopecten irradians
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作者 胡晓珂 JiangXiaolu +1 位作者 LiuShiliang MaiKangsen 《High Technology Letters》 EI CAS 2003年第1期11-16,共6页
The effect of acute E.coli challenge on the anti-disease activity of scallops Argopecten irradians is examined.The treatments of scallop from which hemolymph samples were taken for study included(1)control scallops,(2... The effect of acute E.coli challenge on the anti-disease activity of scallops Argopecten irradians is examined.The treatments of scallop from which hemolymph samples were taken for study included(1)control scallops,(2)sham-injected scallops,(3)PSW-injected scallops and (4)E.coli-injected scallops.From the beginning,the anti-disease activites of scallops are determined at 12 hr and 24hr.The concentrations of circulating hemocytes,the total serum protein concentrations and the activities of alkaline phosphatase,acid phosphatase and superoxide dismutase in the scallops Argopecten irradians are determined.Injection with E.coli results in a significant elevation in the concentration of circulating hemocytes and in the alkaline phosphatase activity and a significant decline in the total serum protein concentration and in the superoxide dismutase activity at 24 hr postchallenge.It shows that metabolism of bay scallop is expedited to adopt the challenge. 展开更多
关键词 软体动物 扇贝 大肠杆菌 抗病性 血淋巴 碱性磷酸酶 酸性磷酸酶 超氧化物歧化酶
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V_E对河蟹血清和组织中超氧化物歧化酶及磷酸酶活性的影响 被引量:21
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作者 艾春香 陈立侨 +3 位作者 温小波 刘晓玲 高露姣 江洪波 《台湾海峡》 CAS CSCD 2003年第1期24-31,共8页
通过投喂添加VE 量分别为 0、0 .1× 1 0 - 3 、0 .2× 1 0 - 3 、0 .4× 1 0 - 3 、0 .6× 1 0 - 3(m m)的 5种实验饲料饲养河蟹 6 0d ,以探讨VE 对其体内SOD、ALP和ACP等酶活性的影响 .结果表明 ,饲料中未添加VE 时 ... 通过投喂添加VE 量分别为 0、0 .1× 1 0 - 3 、0 .2× 1 0 - 3 、0 .4× 1 0 - 3 、0 .6× 1 0 - 3(m m)的 5种实验饲料饲养河蟹 6 0d ,以探讨VE 对其体内SOD、ALP和ACP等酶活性的影响 .结果表明 ,饲料中未添加VE 时 ,河蟹血清、肝胰腺、卵巢和肌肉各组织中SOD、ALP和ACP活性各异 ,其中SOD的活性从高到低依次为肝胰腺 >卵巢 >血清 >肌肉 ,ALP活性的为肝胰腺 >血清 >卵巢 >肌肉 ,而ACP活性则是肝胰腺 >血清 >肌肉 >卵巢 .饲料中添加VE 时 ,与对照组相比 ,各组织中SOD活性随着VE添加量的升高而显著降低 ( p <0 .0 5或 p <0 .0 1 ) ;ALP和ACP活性则随着VE 添加量的增加而显著升高 ( p <0 .0 5或 p <0 .0 1 ) .这表明VE 作为天然抗氧化剂在河蟹体内发挥了很大的作用 ,并促进机体的新陈代谢 ,从而增强机体的非特异性免疫力 .VE 作为免疫刺激剂能有效地增强河蟹的非特异性免疫能力 ,能有效发挥其增强河蟹免疫功能的VE 适宜添加量为 ( 0 .2~ 0 .4)× 1 0 - 3(m m) . 展开更多
关键词 活性 中华绒螯蟹 维生素e 超氧化物歧化酶 磷酸酶 血清 卵巢 饲料
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牙周炎牙齿正畸加力前后龈沟液中PGE_2和ALP的变化 被引量:4
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作者 秦科 仇丽鸿 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期232-234,共3页
目的 :探讨牙周炎牙齿接受正畸治疗时牙周组织的反应。方法 :在牙周炎和牙周健康正畸组分别放置标准方丝弓矫治装置 ,一侧 (实验侧 )加力 ,另一侧 (对照侧 )未加力 ,分别于加力前和加力 2 4h后收集龈沟液 ,采用放射免疫法和生化分析法... 目的 :探讨牙周炎牙齿接受正畸治疗时牙周组织的反应。方法 :在牙周炎和牙周健康正畸组分别放置标准方丝弓矫治装置 ,一侧 (实验侧 )加力 ,另一侧 (对照侧 )未加力 ,分别于加力前和加力 2 4h后收集龈沟液 ,采用放射免疫法和生化分析法进行前列腺素E2 (PGE2 )和碱性磷酸酶 (ALP)检测。结果 :正畸加力 2 4h后实验侧 2组龈沟液中PGE2 总量均明显增加 (P <0 .0 1) ,2组PGE2 总量变化的差值无显著性差异 ,对照侧均无变化 (P >0 .0 5 ) ;2组龈沟液中ALP总量变化不明显。结论 :牙周炎牙齿在接受正畸治疗 2 4h时 ,龈沟液中PGE2 和ALP的改变与牙周健康牙齿的反应类似。 展开更多
关键词 牙周炎 牙齿正畸 龈沟液 PGe2 ALP 前列腺素e2 碱性磷酸酶
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大肠杆菌碱性磷酸酶的体外定向进化研究 被引量:13
7
作者 徐卉芳 张先恩 +2 位作者 张治平 张用梅 A.E.G.CASS 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期89-94,共6页
大肠杆菌碱性磷酸酶 (E .colialkalinephosphatase,EAP ,EC 3 1 3 1)是一个非特异性二聚体磷酸单酯酶 .采用易错聚合酶链反应 (errorpronePCR)的方法 ,在原有高活力突变株的基础上 ,对EAP远离活性中心催化三联体的区域进行定向进化 ,经... 大肠杆菌碱性磷酸酶 (E .colialkalinephosphatase,EAP ,EC 3 1 3 1)是一个非特异性二聚体磷酸单酯酶 .采用易错聚合酶链反应 (errorpronePCR)的方法 ,在原有高活力突变株的基础上 ,对EAP远离活性中心催化三联体的区域进行定向进化 ,经两轮errorpronePCR ,获得催化活力较亲本D10 1S突变株提高 3倍、较野生型酶提高 35倍的进化酶 4 186 ,并对该酶的催化动力学特征进行了分析 .进化酶基因的DNA测序表明 4 186含两个有义氨基酸置换 :K16 7R和S374C ,二者既不位于底物结合位点 ,也不位于酶的金属离子结合位点 . 展开更多
关键词 大肠杆菌 碱性磷酸酶 体外定向进化 催化活力
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免疫多糖对南美白对虾免疫相关酶的激活作用 被引量:27
8
作者 陈昌福 姚娟 +3 位作者 陈萱 李兆文 陈超然 梁运祥 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期551-554,共4页
将免疫多糖 (酵母细胞壁 )作为免疫激活剂注射到南美白对虾 (Penaeusvannawei)体内后 ,通过定时测定供试虾血清、肌肉和肝胰腺提取液中的酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (ALP)和过氧化物酶 (POD)的活性 ,探讨了免疫多糖 (酵母细胞壁 )对... 将免疫多糖 (酵母细胞壁 )作为免疫激活剂注射到南美白对虾 (Penaeusvannawei)体内后 ,通过定时测定供试虾血清、肌肉和肝胰腺提取液中的酸性磷酸酶 (ACP)、碱性磷酸酶 (ALP)和过氧化物酶 (POD)的活性 ,探讨了免疫多糖 (酵母细胞壁 )对南美白对虾免疫系统的免疫刺激效果。结果表明 ,南美白对虾经注射免疫多糖(酵母细胞壁 )刺激后 ,肝胰腺中的ACP和ALP活性明显增加 ,在注射后 72h ,ACP活性由对照组的 31.3U/L提高到 93.4U/L ,ALP活性由 38.3U/L提高到 12 8.0U/L ,而在血清和肌肉中ACP和ALP的活性没有明显变化。与对照组虾相比 ,试验组虾的血清、肌肉和肝胰腺提取液中POD活性均没有明显变化。 展开更多
关键词 免疫多糖 南美白对虾 免疫相关酶 激活作用
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黄芩苷对大肠杆菌细胞通透性的影响 被引量:23
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作者 刘昊 赵自冰 +1 位作者 吴丹丹 王新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第6期1890-1894,共5页
本试验旨在探索黄芩苷对大肠杆菌的抑菌机制。在测定黄芩苷对大肠杆菌的最小抑菌浓度和生长曲线的基础上,通过测定菌液电导率和碱性磷酸酶含量,研究黄芩苷对大肠杆菌细胞通透性的影响。试验结果表明,黄芩苷对大肠杆菌具有明显的抑菌效果... 本试验旨在探索黄芩苷对大肠杆菌的抑菌机制。在测定黄芩苷对大肠杆菌的最小抑菌浓度和生长曲线的基础上,通过测定菌液电导率和碱性磷酸酶含量,研究黄芩苷对大肠杆菌细胞通透性的影响。试验结果表明,黄芩苷对大肠杆菌具有明显的抑菌效果,其最小抑菌浓度为6.25mg/mL;黄芩苷可引起大肠杆菌菌液的电导率和碱性磷酸酶含量明显升高。证实了黄芩苷通过增加大肠杆菌细胞膜与细胞壁通透性,从而发挥抑菌作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 大肠杆菌 电导率 碱性磷酸酶
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大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的原核表达、纯化及其活性研究 被引量:5
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作者 高明春 李雪萌 +1 位作者 张润祥 王君伟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期48-53,共6页
使用常规PCR法以大肠杆菌菌株ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟肽基因,并将其构建到原核表达载体pET-30a(+)的Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体pET-30a-EAP。并且我们将pET-30a-EAP转化到大肠杆菌RosettaTM... 使用常规PCR法以大肠杆菌菌株ATCC 25922基因组为模板,克隆到该菌株的碱性磷酸酶成熟肽基因,并将其构建到原核表达载体pET-30a(+)的Bam HⅠ、XhoⅠ之间,获得重组表达载体pET-30a-EAP。并且我们将pET-30a-EAP转化到大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS中,经IPTG诱导表达后,获得大小为52ku的目的蛋白EAP。经试验证明该蛋白以可溶形式为主。进而,高效表达的重组碱性磷酸酶经亲和层析法纯化后被用于活性鉴定。pNPP的显色反应与去磷酸化试验证实来自ATCC 25922的重组碱性磷酸酶具有催化磷酸单酯水解活性,而且酶热稳定性高、有效工作温度范围大,与其他蛋白融合表达时仍保持酶活性。以上研究结果为大肠杆菌菌株ATCC 25922碱性磷酸酶的规模化生产及在免疫酶技术领域中的应用提供了重要的参考依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌碱性磷酸酶 ATCC25922 表达纯化 活性鉴定
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不同介质中大肠杆菌碱性磷酸酶构象变化的研究 被引量:2
11
作者 张海容 晋卫军 +1 位作者 董川 刘长松 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第1期57-60,共4页
利用色氨酸残基作为内源荧光探针在膜模拟剂(各种表面活性剂)和不同变性剂中对大肠杆菌碱性磷酸酶(AP)的构象变化进行了系统的研究。通过测定在不同变性时间下盐酸肌浓度对荧光强度的影响以及荧光强度随pH有规律的变化,进一步证实... 利用色氨酸残基作为内源荧光探针在膜模拟剂(各种表面活性剂)和不同变性剂中对大肠杆菌碱性磷酸酶(AP)的构象变化进行了系统的研究。通过测定在不同变性时间下盐酸肌浓度对荧光强度的影响以及荧光强度随pH有规律的变化,进一步证实了该蛋白质变性过程中形成较稳定中间态的结论。 展开更多
关键词 碱性磷酸酶 色氨酸残基 蛋白质构象 荧光探针 AP
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燐光探针法研究不同变性剂对大肠杆菌碱性磷酸酶构象的影响 被引量:2
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作者 张海容 晋卫军 刘长松 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第9期1067-1069,共3页
通过监测大肠杆菌碱性磷酸酶 (AP)的 10 9位色氨酸 (Trp 10 9)室温光 (RTP)的强度与寿命的变化 ,探讨了变性剂酸、盐酸胍及EDTA对AP构象变化的影响。结果表明 :光强度、光寿命与Trp 10 9所处的微环境刚性化程度有密切的关系。尤... 通过监测大肠杆菌碱性磷酸酶 (AP)的 10 9位色氨酸 (Trp 10 9)室温光 (RTP)的强度与寿命的变化 ,探讨了变性剂酸、盐酸胍及EDTA对AP构象变化的影响。结果表明 :光强度、光寿命与Trp 10 9所处的微环境刚性化程度有密切的关系。尤其是盐酸胍的加入 ,AP经历了典型的 3种变化状态 :从稳定折叠态到中间态 ,最后形成展开态。极少量的EDTA加入 ,导致蛋白质变性、光减弱和光寿命缩短。 展开更多
关键词 Lin光探针法 变性剂 大肠杆菌碱性磷酸酶 室温Lin光 蛋白质 构象 色氨酸
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重组大肠杆菌碱裂解方法的改进 被引量:2
13
作者 张泉 朱鸿飞 +2 位作者 于可响 薛方明 孙怀昌 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期76-79,共4页
为了降低质粒DNA的生产成本,对经典碱裂解法中的溶液III进行了改进,以表达溶菌酶基因的pcDNKLYZ重组质粒转化的大肠杆菌DH5α为指示菌,用标准碱裂解和改进碱裂解法提取质粒pcDNKLYZ,以提取的质粒产量和质量为指标,判断优化碱性裂解法的... 为了降低质粒DNA的生产成本,对经典碱裂解法中的溶液III进行了改进,以表达溶菌酶基因的pcDNKLYZ重组质粒转化的大肠杆菌DH5α为指示菌,用标准碱裂解和改进碱裂解法提取质粒pcDNKLYZ,以提取的质粒产量和质量为指标,判断优化碱性裂解法的性价比,结果显示,用改进后的碱裂解法裂解重组菌,提取的pcDNKLYZ质粒产量和质量等指标与标准方法接近,而成本仅为标准方法的1/4,可用于重组质粒的大规模制备。 展开更多
关键词 重组大肠杆菌 碱裂解法
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E.coli M15碱性磷酸酶的表达、纯化及活性分析 被引量:2
14
作者 杜庆辉 贺丽 +5 位作者 刘双喜 张莉君 冒艳丽 朱小平 焦红梅 李国才 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期35-38,共4页
目的:克隆、表达并纯化大肠杆菌M15碱性磷酸酶(EAP)成熟肽(phoA),分析其活性。方法:采用PCR技术从M15基因组DNA中扩增出phoA编码基因;构建其原核表达载体pCold-TF-EAP;转入E.coli BL21(DE3)进行表达;IMAC Ni-NTA柱层析法纯化重组蛋白;... 目的:克隆、表达并纯化大肠杆菌M15碱性磷酸酶(EAP)成熟肽(phoA),分析其活性。方法:采用PCR技术从M15基因组DNA中扩增出phoA编码基因;构建其原核表达载体pCold-TF-EAP;转入E.coli BL21(DE3)进行表达;IMAC Ni-NTA柱层析法纯化重组蛋白;重组蛋白与底物对硝基苯磷酸二钠显色反应分析其活性。结果:克隆得到了序列约1 400 bp phoA编码基因,原核表达了分子量约为100 kDa的融合重组EAP(rEAP),纯化获得的rEAP具有催化磷酸单酯的活性,有效反应温度范围大,在27℃~67℃都具有较高的催化活性,在pH 7.5~8.0间催化活性最高。结论:克隆了可正确表达EAP的phoA编码基因,为EAP的工业化生产及应用提供了生物材料。 展开更多
关键词 大肠杆菌 M15 碱性磷酸酶 表达与纯化 对硝基苯磷酸二钠 活性鉴定
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补体对大肠杆菌的致死过程 被引量:9
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作者 黄秀琴 王卫星 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第2期103-105,共3页
实验证明,在不依赖特异性机体的条件下,在E.coliB接触补体后的溶菌反应中,先释放碱性磷酸酶,后释放β-半乳糖昔酶,在一段时间内体外两种酶与溶菌率成正相关性,说明该情况下补体最初作用部位是细胞壁,但致死效应则涉及对... 实验证明,在不依赖特异性机体的条件下,在E.coliB接触补体后的溶菌反应中,先释放碱性磷酸酶,后释放β-半乳糖昔酶,在一段时间内体外两种酶与溶菌率成正相关性,说明该情况下补体最初作用部位是细胞壁,但致死效应则涉及对细胞膜的损伤。 展开更多
关键词 补体 大肠杆菌 致死效应 免疫
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大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对家蚕不同组织碱性磷酸酶活性的影响 被引量:1
16
作者 丁志伟 杨大平 +2 位作者 王永生 杨伟克 高建华 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第4期911-914,共4页
【目的】研究喂食不同细菌后,家蚕不同组织ALP酶活性变化规律,明确ALP在家蚕抵御细菌侵染过程中发挥的功能和作用,为揭示ALP在昆虫体内的生理功能及选育抗细菌病蚕品种提供借鉴和思考。【方法】分别经口喂食大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,... 【目的】研究喂食不同细菌后,家蚕不同组织ALP酶活性变化规律,明确ALP在家蚕抵御细菌侵染过程中发挥的功能和作用,为揭示ALP在昆虫体内的生理功能及选育抗细菌病蚕品种提供借鉴和思考。【方法】分别经口喂食大肠杆菌和金黄色葡萄球菌,采用微量酶标法检测家蚕血淋巴、中肠、马氏管和脂肪体ALP酶活性变化情况。【结果】中肠组织ALP酶活性在喂食不同细菌6 h就开始逐渐增加,在12 h达到最高值,随后急剧减弱,在24 h略低于对照组,而在48 h是极显著低于对照组水平。血淋巴ALP酶活性仅在喂食不同细菌24和48 h极显著高于对照组。喂食大肠杆菌和金黄色葡萄球菌3和6 h,马氏管ALP酶活性无显著变化,从12 h酶活性开始增强,24 h酶活性极显著高于对照组;而在48 h酶活性受到抑制,显著低于对照组。不论是大肠杆菌处理组还是金黄色葡萄球菌处理组,家蚕脂肪体ALP酶活性逐渐受到抑制,在12 h开始显著低于对照组,并随着处理时间的推移持续减弱,在24和48 h酶活性极显著低于对照组。【结论】大肠杆菌和金黄色葡萄球菌侵染家蚕,脂肪体ALP酶活性受到一定程度的抑制,而中肠、马氏管和血淋巴ALP酶活性呈现先显著升高,后急剧降低的变化趋势,暗示家蚕中肠、马氏管和血淋巴ALP可能参与了蚕体抵抗细菌侵染的免疫防御反应。 展开更多
关键词 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 家蚕 碱性磷酸酶 酶活性
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pH胁迫对脊尾白虾代谢酶活力的影响 被引量:11
17
作者 李玉全 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1098-1101,共4页
【目的】研究pH胁迫对脊尾白虾(Exopalacmon carinicauda Holthuis)代谢酶活力的影响,丰富脊尾白虾的逆境生物学和代谢生物学基础理论,同时为其养殖环境的调控提供科学指导。【方法】设置5.5、7.0、8.5和10.04个pH梯度,分别于... 【目的】研究pH胁迫对脊尾白虾(Exopalacmon carinicauda Holthuis)代谢酶活力的影响,丰富脊尾白虾的逆境生物学和代谢生物学基础理论,同时为其养殖环境的调控提供科学指导。【方法】设置5.5、7.0、8.5和10.04个pH梯度,分别于胁迫0、1、3、6、12、24和36h时从脊尾白虾心脏抽取血淋巴,分离血清,然后检测酸性磷酸酶(ACP)和碱性磷酸酶(AKP)活力变化。【结果】短期(3h)pH胁迫下,偏酸性环境可提高脊尾白虾血清ACP活力,而偏碱性环境会刺激脊尾自虾血清ACP活力下降。pH8.5和pH10.0胁迫组脊尾白虾血清ACP活力随胁迫时间的延长整体上呈降低-升高-降低的波浪式变化趋势,而pH5.5和pH7.0胁迫组恰好相反,整体上呈升高-降低-升高的变化趋势。在AKP活力方面,pH胁迫后脊尾白虾血清AKP活力迅速提高,整体上表现为:pH7.0和pH8.5胁迫组脊尾白虾血清ACP活力随胁迫时间的延长呈先升高后降低的变化趋势,pH5.5和pH10.0胁迫组则呈逐渐缓慢升高的变化趋势。【结论】在pH7.0~8.5范围内,脊尾白虾的磷酸酶可迅速作出反应,促使机体自我调整至相对稳定状态,但过酸或过碱的养殖水体会显著影响其非特异性免疫力。 展开更多
关键词 脊尾白虾 PH 酸性磷酸酶 碱性磷酸酶 活力
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不同质粒表达大肠杆菌碱性磷酸酶的研究 被引量:1
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作者 刘爱平 申文浩 +4 位作者 李俊柔 孙海芹 熊清 李文丽 李诚 《食品安全质量检测学报》 CAS 2016年第10期4125-4130,共6页
目的比较以pET-30a和pET-22b两个质粒表达碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)的活性差异。方法以质粒pET-30a-AP为模板,克隆大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)ATCC 25922的碱性磷酸酶成熟肽基因,并构建重组表达质粒pET-22b-AP。将这... 目的比较以pET-30a和pET-22b两个质粒表达碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)的活性差异。方法以质粒pET-30a-AP为模板,克隆大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)ATCC 25922的碱性磷酸酶成熟肽基因,并构建重组表达质粒pET-22b-AP。将这2种表达质粒转化到E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达AP。对温度和甲醇对AP活性的影响进行研究。结果 pET-30a-AP所产AP浓度约为pET-22b-AP 10倍时,才可达到类似催化效果;表达自pET-22b-AP质粒的AP对甲醇的耐受性略好于pET-30a-AP。结论本研究可为AP的生产及基因工程抗体-AP融合蛋白在类似ELISA等免疫检测方法的应用提供重要的参考依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 碱性磷酸酶 基因克隆 蛋白质表达 酶活性
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大肠杆菌K12碱性磷酸酶基因的克隆表达 被引量:1
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作者 南海波 《沈阳师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2006年第2期228-230,共3页
大肠杆菌碱性磷酸酶是同二聚体金属酶,被phoA基因编码.采用PCR方法从大肠杆菌K12中扩增到碱性磷酸酶基因(phoA).用限制性内切酶BamHI和HindⅢ将片段插入克隆载体pETBlue-2.该基因被重组、转化后在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,而后进行SDS-... 大肠杆菌碱性磷酸酶是同二聚体金属酶,被phoA基因编码.采用PCR方法从大肠杆菌K12中扩增到碱性磷酸酶基因(phoA).用限制性内切酶BamHI和HindⅢ将片段插入克隆载体pETBlue-2.该基因被重组、转化后在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,而后进行SDS-PAGE检测及紫外吸收分析测OD410.克隆得到了phoA基因并实现了蛋白表达,碱性磷酸酶的活性提高了18.3倍,为进行组织化学、免疫印迹、突变分析等工作打下了坚实的基础. 展开更多
关键词 碱性磷酸酶 大肠杆菌K12 克隆 表达
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重组人生长激素中宿主蛋白的点─免疫结合测定法
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作者 杨化新 张培培 徐康森 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期11-13,共3页
本文应用碱性磷酸酶免疫斑点法,检测重组人生长激素中E.coli蛋白质。该法的最低检出量为1.9ng;线性范围为2.5~0.039μg/ml;平均回收率为115.2%,RSD=6.99%(n=8)。并具有灵敏、特异、操... 本文应用碱性磷酸酶免疫斑点法,检测重组人生长激素中E.coli蛋白质。该法的最低检出量为1.9ng;线性范围为2.5~0.039μg/ml;平均回收率为115.2%,RSD=6.99%(n=8)。并具有灵敏、特异、操作简便等特点。 展开更多
关键词 免疫结合测定 宿主蛋白 重组 生长激素
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