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广东省肉鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)抗药性调查 被引量:14
1
作者 李安兴 谢明权 +1 位作者 蔡建平 吴惠贤 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第S2期138-144,共7页
从广东省的中山、东莞、顺德、花都、广州江村镇、梅州、新兴县。新会和四川省泸县分离到9个柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)虫株,用接种雏鸡的方法测定了它们对常山酮、氯嗪苯乙氰、球痢灵、尼卡巴嗪、氯羟毗啶、马度拉霉素、拉沙... 从广东省的中山、东莞、顺德、花都、广州江村镇、梅州、新兴县。新会和四川省泸县分离到9个柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)虫株,用接种雏鸡的方法测定了它们对常山酮、氯嗪苯乙氰、球痢灵、尼卡巴嗪、氯羟毗啶、马度拉霉素、拉沙洛菌素、盐霉素、莫能霉素等9种药物的抗药性,结果表明:中山虫株对常山酮和尼卡巴嗪敏感,对克球粉轻度抗药,而对其余6种抗球虫药物则严重抗药;东莞虫株对尼卡巴嗪敏感,对常山酮、氯嗪苯乙氰、克球粉、马杜拉霉素轻度抗药,对拉沙洛菌素中度抗药,对盐霉素严重抗药;顺德虫株和江村虫株除对尼卡巴嗪轻度抗药外,对其余8种抗球虫药物均严重抗药;梅州虫株对尼卡巴嗪敏感,对常山酮和马杜拉霉素轻度抗药,对其余5种药物严重抗药;新会虫株对尼卡巴嗪敏感,对克球粉和拉沙洛菌素中度抗药。对其余5种药物均严重抗药;新兴虫株对尼卡巴嗪敏感,对常山酮、马杜拉霉素和球痢灵中度抗药,对其余4种药物严重抗药;花都虫株对尼卡巴嗪轻度抗药,对常山酮、氯嗪苯乙氰和克球粉中度抗药,对其余4种药物严重抗药.四川虫株对尼卡巴嗪、氯嗪苯乙氰敏感,对马杜拉霉素轻度抗药,对球痢灵、克球粉、盐霉素和拉沙洛菌素中度抗药,对莫能霉素和常山酮则严重抗药,由此可以看出? 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫(e.tenella) 抗药性
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E.tenella感染雏鸡特异性抗体的动态变化和母源免疫的研究 被引量:13
2
作者 郑明学 史喜菊 +1 位作者 高建光 韩春来 《激光生物学报》 CAS CSCD 2002年第2期104-108,共5页
本实验用斑点酶联免疫试验 (Dot ELISA)检测了E .tenella感染雏鸡特异性抗体、免疫母鸡卵黄和后代血清中特异性母源抗体的动态变化及不同日龄雏鸡的抗球虫水平。结果表明 :(1)雏鸡感染E .tenella后第 6d即可在循环血液中检测到特异性Ig... 本实验用斑点酶联免疫试验 (Dot ELISA)检测了E .tenella感染雏鸡特异性抗体、免疫母鸡卵黄和后代血清中特异性母源抗体的动态变化及不同日龄雏鸡的抗球虫水平。结果表明 :(1)雏鸡感染E .tenella后第 6d即可在循环血液中检测到特异性IgG ,于第 18天达到峰值 ,第 30天降至感染后第 7天时的水平。 (2 )母鸡二次免疫后第 5天卵黄中即有高水平的母源抗体 ,免疫母鸡后代 1日龄时母源抗体滴度高达 9.83,与未免疫对照组差异极显著 (P <0 .0 1) ,二者都随着日龄增长降低 ,但免疫组下降幅度很小 ,2 9日龄时仍和对照组 18日龄水平相当。 (3)免疫母鸡后代对再感染的抵抗力显著增强 ,卵囊减少率高达 93%,抗球虫指数和相对增重率都与对照组差异极显著 (P <0 .0 1) ,雏鸡的抗球虫水平随着日龄增长逐渐降低 ;母源抗体、抗球虫指数和相对增重率三者之间两两呈现明显的正相关 ,而这三者又都与卵囊产量呈明显的负相关。 展开更多
关键词 e.tenella 感染 雏鸡 特异性抗体 动态变化 母源免疫 抗球虫水平
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E.tenella吉林株单卵囊的分离及PCR鉴定 被引量:17
3
作者 杨桂连 李建华 +4 位作者 张西臣 赵权 宫鹏涛 蔡亚南 张国才 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第19期8893-8894,8900,共3页
[目的]为了获得E.tenella纯株,进行相关的分子生物学研究。[方法]对已经建立的球虫单卵囊分离技术进行改进,用分离的单卵囊胶囊接种雏鸡。同时应用PCR方法对收集的单卵囊分离株进行球虫种类鉴定。[结果]20只试验鸡中有15只粪便中分离到... [目的]为了获得E.tenella纯株,进行相关的分子生物学研究。[方法]对已经建立的球虫单卵囊分离技术进行改进,用分离的单卵囊胶囊接种雏鸡。同时应用PCR方法对收集的单卵囊分离株进行球虫种类鉴定。[结果]20只试验鸡中有15只粪便中分离到卵囊,感染成功率为75%。PCR扩增结果表明该单卵囊分离株为E.tenella。[结论]采用单卵囊胶囊进行接种,操作简便,既节省了接种时间,又降低了接种难度,且大大提高了接种成功率,为球虫的分子生物学研究提供了材料。 展开更多
关键词 e.tenella 单卵囊 PCR鉴定
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不同水平的蛋氨酸对感染球虫(E.tenella)肉仔鸡的影响 被引量:6
4
作者 王米 金岭梅 +2 位作者 孟新宇 赵枝新 戴志明 《饲料工业》 2005年第18期37-41,共5页
试验采用3×2试验设计。将7日龄360只AA肉仔鸡按称重均匀分成6组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ),每组60只鸡,每5只鸡一笼,饲养在不锈钢笼中。A处理为日粮蛋氨酸添加水平0%(A1)、0.2%(A2)、0.8%(A3),B处理为孢子化柔嫩艾美耳球虫(E.tenel... 试验采用3×2试验设计。将7日龄360只AA肉仔鸡按称重均匀分成6组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ),每组60只鸡,每5只鸡一笼,饲养在不锈钢笼中。A处理为日粮蛋氨酸添加水平0%(A1)、0.2%(A2)、0.8%(A3),B处理为孢子化柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)卵囊(B1——接种3×104个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊,B0——未接种)。其中Ⅰ、Ⅱ组饲喂试粮1(A1),Ⅲ、Ⅳ组饲喂试粮2(A2),Ⅴ、Ⅵ饲喂试粮3(A3)。14日龄时,Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ组鸡,每只分别接种3×104个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊,22日龄试验结束。结果表明:①日粮中添加蛋氨酸与未添加蛋氨酸比,可以显著提高日增重(P<0.05),且日粮中添加0.8%的蛋氨酸与0.2%的相比,对试验期间肉仔鸡的生产性能的影响差异不显著(P>0.05);②日粮蛋氨酸水平对肉仔鸡血糖影响不大;③日粮蛋氨酸水平可以显著影响感染球虫的肉仔鸡的病变记分(P<0.05),即日粮中添加0.8%的蛋氨酸,显著优于0.2%组、0%组(P<0.05)。因此,在球虫感染的情况下,高营养水平对其是有效的。 展开更多
关键词 蛋氨酸 水平 e.tenella 肉仔鸡
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AA鸡感染E.tenella后某些血清生化指标变化的研究 被引量:4
5
作者 韦进钟 吴玄光 林辉环 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2003年第3期1-3,共3页
2 3日龄AA鸡 36只均分为 3组 ,第 1组和第 2组分别经口感染E .tenella卵囊 35万 /只和 7万 /只 ,第 3组为对照组。在感染前 (0天 )及感染后第 5天和第 8天对病鸡 10项血清生化指标进行检测 ,结果如下 :(1)血清葡萄糖含量在感染前后无显... 2 3日龄AA鸡 36只均分为 3组 ,第 1组和第 2组分别经口感染E .tenella卵囊 35万 /只和 7万 /只 ,第 3组为对照组。在感染前 (0天 )及感染后第 5天和第 8天对病鸡 10项血清生化指标进行检测 ,结果如下 :(1)血清葡萄糖含量在感染前后无显著差异。 (2 )总蛋白、白蛋白和甘油三酯含量在第 5天显著降低 ;在第 8天 ,前二者回升 ,后者继续下降。球蛋白含量在第 5天和第 8天均显著升高。 (3)尿酸含量在第 1组的第 5天和第 2组的第 8天极显著升高。 (4 )天冬氨酸氨基转移酶和酸性磷酸酶活性在第 5天均极显著降低 ,前者在第 8天回升 ,后者在第 8天继续显著下降。碱性磷酸酶在第 5天升高后 ,在第 8天又回落。胆碱酯酶活性在第 1组的第 5天极显著降低 ,在第 8天又极显著升高 ;在第 2组无明显变化。 (5 )绝大多数指标在第 1组的变化幅度较第 2组大 ,其中总蛋白和甘油三酯含量在两组间的差异达到显著水平。这些结果表明病鸡能量代谢出现大的调整 ,病理损伤程度与感染剂量有关。 展开更多
关键词 AA鸡 e.tenella 血清生化指标 柔嫩艾美尔球虫
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日粮中不同蛋氨酸水平对感染E.tenella肉仔鸡的影响 被引量:3
6
作者 王米 金岭梅 +2 位作者 孟新宇 赵枝新 戴志明 《饲料研究》 CAS 2005年第1期4-9,共6页
试验采用 3× 2试验设计。将 7日龄 36 0只AA肉仔鸡按称重均匀分成 6组 (1、2、3、4、5、6 ) ,每组 6 0只鸡 ,每 5只鸡 1笼 ,饲养在不锈钢笼中。A处理为日粮蛋氨酸添加水平 0、0 .2 %、0 .8% ,B处理为孢子化柔嫩艾美耳球虫 (E .tene... 试验采用 3× 2试验设计。将 7日龄 36 0只AA肉仔鸡按称重均匀分成 6组 (1、2、3、4、5、6 ) ,每组 6 0只鸡 ,每 5只鸡 1笼 ,饲养在不锈钢笼中。A处理为日粮蛋氨酸添加水平 0、0 .2 %、0 .8% ,B处理为孢子化柔嫩艾美耳球虫 (E .tenella)卵囊 (接种 3× 10 4 个孢子化E .tenella卵囊 ,未接种 )。其中 1、2组饲喂试粮 1(添加 0蛋氨酸 ) ,3、4组饲喂试粮 2 (添加 0 .2 %蛋氨酸 ) ,5、6饲喂试粮 3(添加 0 .8%蛋氨酸 )。 14日龄时 ,1、3、5组的鸡 ,每只分别接种 3× 10 4 个孢子化柔嫩艾美耳球虫卵囊 ,2 2日龄试验结束。结果表明 ,日粮中添加蛋氨酸与未添加蛋氨酸比 ,可以显著提高日增重(P <0 .0 5 )。日粮中添加 0 .8%的蛋氨酸与 0 .2 %相比 ,对试验期间肉仔鸡的生产性能的影响差异不显著 (P >0 .0 5 )。日粮中蛋氨酸水平和柔嫩艾美耳球虫感染对肉仔鸡的免疫器官指数影响不显著 (P >0 .0 5 ) ,但感染组的脾脏指数却都比未感染组大。日粮中蛋氨酸水平可以显著影响感染球虫肉仔鸡抗体的产量 (P <0 .0 5 )。随着日粮蛋氨酸水平的增加 ,血清抗体也随着增加。日粮中蛋氨酸水平可以显著影响感染球虫的肉仔鸡病变记分 (P <0 .0 5 )。日粮中添加 0 .8%的蛋氨酸 ,病变记分显著优于 0 .2 %组、0组 (P <0 .0 5 )。在球? 展开更多
关键词 蛋氨酸水平 e.tenella 肉仔鸡
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柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)BJ株SO7基因的克隆和序列分析 被引量:1
7
作者 李安兴 蒋金书 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第S2期14-19,共6页
对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)BJ 株 SO7基因进行了克隆和测序分析。以纯化的 E.tenella BJ 株7h 孢子化卵囊的总 RNA 为模板,应用 RNA 反转录酶(M-MLV)合成 cDNA,再用 Taq DNA 聚合酶进行PCR 扩增出 BJ 株 SO7基因.用常规基因克隆方法把... 对柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)BJ 株 SO7基因进行了克隆和测序分析。以纯化的 E.tenella BJ 株7h 孢子化卵囊的总 RNA 为模板,应用 RNA 反转录酶(M-MLV)合成 cDNA,再用 Taq DNA 聚合酶进行PCR 扩增出 BJ 株 SO7基因.用常规基因克隆方法把 BJ 株 SO7基因插入 pGEM-T 克隆载体,选取正方向插入子的一个阳性克隆进行酶切分析及插入片段的全序列测序分析。结果表明:该序列全长862个核苷酸,有一个开放性读框(65~713nt),可编码216个氨基酸(22.4kD)。SO7-BJ 与国外株 SO7比较,同源性为99%,突变的8个核苷酸中,4个为有义突变.开放性读框中有仅2个核苷酸突变,其中1个为有义突变,使推测氨基酸 Cly 变为 Cys。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫(e.tenella) 逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR) 克隆 序列分析
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均匀设计抗球虫中药方球康剂量配伍对E.tenella感染雏鸡的疗效试验 被引量:8
8
作者 聂奎 黄庆洲 +2 位作者 林勇 秦国华 潘存西 《中兽医医药杂志》 2002年第6期5-8,共4页
运用均匀设计法 ,对抗球虫中药球康方中的凉血类与补益类、清热燥湿类与固涩类中药以 2因数 4水平进行 4个不同剂量的配伍设计。试验共设有凉血类与补益类组成的中药方 的 1组、 2 组、 3 组和 4组 ,清热燥湿类与固涩类组成的中药方 ... 运用均匀设计法 ,对抗球虫中药球康方中的凉血类与补益类、清热燥湿类与固涩类中药以 2因数 4水平进行 4个不同剂量的配伍设计。试验共设有凉血类与补益类组成的中药方 的 1组、 2 组、 3 组和 4组 ,清热燥湿类与固涩类组成的中药方 的 1组、 2 组、 3 组和 4组 ,并以鸡球素和球佳药物作对照组 ,进行抗人工感染柔嫩艾美尔球虫的疗效试验。结果中药 1~ 4组 ,中药 3 、 4组的平均增重显著地高于红组和鸡球素组 (P<0 .0 5 ) ,卵囊的排出量减少和肠道病变减轻 ,中药方球康全部试验组的抗球虫指数皆为 16 0以上 ,其中中药 1组达 175 .0 2 ,抗球虫疗效良好 ,但中药方球康的抗球虫疗效与高效抗球虫药球佳相比 ,效果略低。 展开更多
关键词 设计 抗球虫中药 方球康 剂量配伍 e.tenella感染 雏鸡 疗效试验
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柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2 SO7基因ORF的克隆与表达
9
作者 杨桂连 张西臣 +2 位作者 赵权 李建华 尹继刚 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期285-289,共5页
用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2[F1(JL×HB)×SD]的总RNA中扩增了651 bp的SO7基因ORF。通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pMD18-T中,转化至受体菌DH5α中,经PCR及酶切鉴定确定阳性克隆... 用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)杂交株F2[F1(JL×HB)×SD]的总RNA中扩增了651 bp的SO7基因ORF。通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pMD18-T中,转化至受体菌DH5α中,经PCR及酶切鉴定确定阳性克隆pMD18-T-SO7,然后进行序列测定及分析确定成功克隆SO7基因ORF。经DNAStar软件分析核苷酸和氨基酸序列,结果显示扩增出了完整的SO7开放阅读框架,含651个核苷酸,富含AGC重复序列,编码216个氨基酸。与国外株SO7比较,核苷酸序列的同源性为97.7%,有15个核苷酸发生突变,其中9个为有义突变,氨基酸序列的同源性为94.9%。将获得的重组阳性克隆质粒pMD18-T-SO7与融合型表达载体pGEX-6p-1均以BamH I和EcoR I双酶切后。进行连接转化与克隆鉴定。将阳性克隆pGEX-6p-SO7转化至感受态E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS-PAGE分析,可见约43.8 Ku融合蛋白带。Western blot分析发现,该蛋白具有E-tenella抗原性,从而为进一步研制E.tenella杂交株F2基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 e.tenella 杂交株F2 SO7 克隆 表达
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E.tenella吉林株单卵囊的分离及PCR鉴定(英文)
10
作者 杨桂连 李建华 +4 位作者 张西臣 赵权 宫鹏涛 蔡亚南 张国才 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第3期55-57,62,共4页
[Objective] In order to get a purified strain to carry out the relative molecular biology research about E.tenella. [Method] The single-oocyst isolation method was improved and the isolated single-oocyst which was put... [Objective] In order to get a purified strain to carry out the relative molecular biology research about E.tenella. [Method] The single-oocyst isolation method was improved and the isolated single-oocyst which was put into capsule was fed to chickens. At the same time, the collected oocysts were identified by PCR method. [Result] The oocysts were isolated from feces of 15 chickens among that of 20 chickens and the infection rate was 75%. The PCR results demonstrated that the single-oocyst strain was E.tenella. [Conclusion] The inoculation of single oocyst capsule was simple, besides, this method did not only save time but also declined inoculation difficulty, increased infection rate and provided good materials for biological research of coccidian. 展开更多
关键词 e.tenella 吉林 株单卵囊 分离 PCR 鉴定
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E.tenella端粒酶逆转录酶基因3′端序列的克隆及分析
11
作者 杨桂连 李建华 +5 位作者 张西臣 赵权 宫鹏涛 蔡亚南 任保彦 张国才 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第12期3-6,共4页
为了获得E.tenellaTERT全长cDNA序列,本试验根据已报道的其他,原虫TERT氨基酸序列,利用CODEHOP方法设计简并引物,同时利用Trizol法提取总RNA并反转录为cDNA,然后采用3-′RACE方法克隆获得E.tenellaTERT 3′cDNA序列,并采用生物信息学技... 为了获得E.tenellaTERT全长cDNA序列,本试验根据已报道的其他,原虫TERT氨基酸序列,利用CODEHOP方法设计简并引物,同时利用Trizol法提取总RNA并反转录为cDNA,然后采用3-′RACE方法克隆获得E.tenellaTERT 3′cDNA序列,并采用生物信息学技术进行序列分析。结果表明,该序列具有TERT蛋白家族特征性基序,证明成功克隆了E.tenellaTERT 3′cDNA序列。 展开更多
关键词 e.tenella 端粒酶逆转录酶基因 3′cDNA CODEHOP
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给药途径对虫草抗E.Tenella活性的影响
12
作者 秦新玲 张深固 +3 位作者 赵振升 宋文成 赵爱莲 盛宝恒 《河南科技大学学报(农学版)》 1991年第4期6-8,共3页
本研究以雏鸥E.Tenella病为模型,存活率、增重率、盲肠病变值、盲肠E.Tenella卵囊值为观察指标,美国默克公司提出的抗球虫指数为判定标准,探讨了给药途径对虫草(均为30mg/kg)抗E.Tenella活性的影响。结果观察到:滴鼻、皮下注射和灌服的... 本研究以雏鸥E.Tenella病为模型,存活率、增重率、盲肠病变值、盲肠E.Tenella卵囊值为观察指标,美国默克公司提出的抗球虫指数为判定标准,探讨了给药途径对虫草(均为30mg/kg)抗E.Tenella活性的影响。结果观察到:滴鼻、皮下注射和灌服的抗球虫指数分别为163、167和148,均有抗E.Tenella活性。皮下注射和滴鼻为中效,灌服为弱效。 展开更多
关键词 虫草 皮下注射 滴鼻 灌服 e.tenella抗球虫指数 e.tenella活性
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E.tenella初次感染雏鸡外周血T淋巴细胞亚群及增殖能力变化的动态研究 被引量:2
13
作者 黄海斌 张许科 +6 位作者 杨文涛 石少华 杨军 王倩 赵亮 王春凤 杨桂连 《中国兽药杂志》 2014年第10期6-10,共5页
应用流式细胞术( FCM)和MTS比色法检测雏鸡初次感染柔嫩艾美尔球虫( E. tenella)后外周血中CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞及其增殖能力的动态变化。数据显示,E. tenella初次感染雏鸡后7~20 d CD3+CD4+、CD3+CD8+T 淋巴... 应用流式细胞术( FCM)和MTS比色法检测雏鸡初次感染柔嫩艾美尔球虫( E. tenella)后外周血中CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞及其增殖能力的动态变化。数据显示,E. tenella初次感染雏鸡后7~20 d CD3+CD4+、CD3+CD8+T 淋巴细胞比例明显高于对照组雏鸡( P<0.05和P<0.01),并且均于12 d时达到峰值。初次感染后7~20 d雏鸡外周血中CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群的比值明显升高,于感染后16 d时达到1.78。 E. tenella初次感染雏鸡后12~20 d外周血淋巴细胞增殖能力明显高于对照组雏鸡( P<0.05),并于16 d达到峰值。试验表明E. tenella初次感染雏鸡能激活淋巴细胞产生增殖反应,CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞在抵抗E. tenella初次感染过程中有重要作用。 展开更多
关键词 柔嫩艾美尔球虫 外周血 CD3+CD4+ CD3+CD8+ 增殖
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人工感染E.tenella鸡嗜酸性细胞的动态变化 被引量:2
14
作者 商常发 顾有方 +1 位作者 刘德义 刘燕 《安徽技术师范学院学报》 2003年第1期17-19,共3页
8 0羽 2 1日龄罗曼蛋公鸡随机分成试验与对照两组 ,研究雏鸡在 2 1日龄人工感染E .tenella后第 1、2、3、4、5、6、7、8天鸡嗜酸性细胞的动态变化。结果表明 :感染E .tenella之后 ,试验组比对照组嗜酸性细胞明显增多 ,每日组间差异均极... 8 0羽 2 1日龄罗曼蛋公鸡随机分成试验与对照两组 ,研究雏鸡在 2 1日龄人工感染E .tenella后第 1、2、3、4、5、6、7、8天鸡嗜酸性细胞的动态变化。结果表明 :感染E .tenella之后 ,试验组比对照组嗜酸性细胞明显增多 ,每日组间差异均极显著 (P <0 .0 1 ) ;在感染后第 1~6天 ,试验组日间差异不显著 (P >0 .0 5 ) ,在感染后第 6~ 7天 ,试验组日间差异极显著 (P <0 .0 1 ) ,而在感染后第 7~ 8天日间差异显著 (P <0 .0 5 )。 展开更多
关键词 人工感染 嗜酸性细胞 动态变化 艾美尔球虫 球虫病
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培养基和换液时间对E.tenella子孢子在宿主细胞体外培养中发育的影响
15
作者 江珊 刘兴 +2 位作者 白瑞 郑明学 古少鹏 《畜牧兽医科技信息》 2013年第4期26-27,共2页
探索培养基和换液时间对E.tenella子孢子在宿主细胞体外培养的影响,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型。本实验研究了不同换液时间和不同培养基对E.tenella子孢子在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中发育情况的影响。结果表明:... 探索培养基和换液时间对E.tenella子孢子在宿主细胞体外培养的影响,为E.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型。本实验研究了不同换液时间和不同培养基对E.tenella子孢子在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中发育情况的影响。结果表明:(1)在相同培养基下(MEM199培养基或RPMR1640),与3h换液相比,4h换液更适于E.tenella子孢子的入侵;4h换液后培养至24h(或48h),E.tenella子孢子发育更好。(2)相同培养时间下,与RPMR1640培养基相比MEM199培养基更适于E.tenella子孢子的发育。 展开更多
关键词 e.tenella子孢子 MEM199培养基 RPMR1640培养基 换液时间
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次氯酸钠处理对E.tenella球虫卵囊的影响 被引量:2
16
作者 彭新宇 张健騑 +2 位作者 魏文康 吴惠贤 谢明权 《中国兽医寄生虫病》 1999年第2期6-7,共2页
14日龄爱维茵鸡接种E.tenela广东株7.5d后,扑杀,其盲肠粘膜刮取物及内容物以1:5次氯酸钠(含活性氯不低于7.5%)处理20min后,离心清洗,加2.5%的重铬酸钾,置敞开的大平皿中,28℃环境下孢子化。同... 14日龄爱维茵鸡接种E.tenela广东株7.5d后,扑杀,其盲肠粘膜刮取物及内容物以1:5次氯酸钠(含活性氯不低于7.5%)处理20min后,离心清洗,加2.5%的重铬酸钾,置敞开的大平皿中,28℃环境下孢子化。同时设未经次氯酸钠处理的对照组。48h与72h后分别取样检查其孢子化率。结果发现,次氯酸钠处理组孢子化率与未经次氯酸钠处理的对照组无显著差异。所得孢子化卵囊接种鸡的试验结果表明,低剂量下,未处理组显示出较强的致病力,不过平均卵囊数相差不大;较高剂量下,处理组病变略轻,而平均卵囊数明显高于未处理对照组。 展开更多
关键词 次氯酸钠 孢子化率 卵囊数 球虫
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E.tenella河北株pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2真核表达载体的免疫调节作用 被引量:2
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作者 张香斋 张召兴 +4 位作者 李佩国 李蕴玉 贾青辉 张艳英 丁咚 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期901-906,共6页
为了研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)河北株真核表达载体pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2的免疫调节作用,将240只14日龄雏鸡随机分成8组,第1,2组分别为阳性、阴性对照,在14,21 d,3、4组分别肌注100μg的pcDNA3.0-IL-2、pcDNA3.0-EtMIC-2;5、6、7... 为了研究柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)河北株真核表达载体pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2的免疫调节作用,将240只14日龄雏鸡随机分成8组,第1,2组分别为阳性、阴性对照,在14,21 d,3、4组分别肌注100μg的pcDNA3.0-IL-2、pcDNA3.0-EtMIC-2;5、6、7组分别肌注50,100,150μg的pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2;8组21 d时滴口免疫鸡球虫病四价活疫苗。28 d,阳性对照组和6个试验组每只鸡经口攻毒4×10~4个E.tenella卵囊,阴性对照组每只鸡灌服同体积的生理盐水。结果显示:当pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2真核表达载体的免疫剂量达100,150μg/只时,试验后7,21,28 d IgG的含量、7 d的IgA含量和21,28 d的IFN-γ含量均显著高于阴性对照组、阳性对照组、单独免疫pcDNA3.0-IL-2和pcDNA3.0-EtMIC-2组(P<0.05);试验后28 d,血清中IL-2的含量显著高于阴性和阳性对照组(P<0.05),与单独免疫pcDNA3.0-IL-2和pcDNA3.0-EtMIC-2组相比差异不显著(P>0.05);试验后7,14,21,28 d脾脏IL-2和IFN-γmRNA表达量均显著高于阳性对照组、单独免疫pcDNA3.0-IL-2和pcDNA3.0-EtMIC-2组(P<0.05)。综上所述,IL-2可增强EtMIC-2基因的免疫原性,适量的真核表达载体pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2可显著提高感染柔嫩艾美尔球虫雏鸡的免疫功能。 展开更多
关键词 e.tenella 真核表达载体 pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2 免疫调节
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E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养的影响因素 被引量:1
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作者 古少鹏 郑明学 +4 位作者 侯金环 陈赵英 李宝钧 唐芳 霍乃蕊 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期454-458,共5页
研究E.tenella子孢子的纯化方法、接种剂量以及细胞生长状态对E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中的影响,为E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养模型的建立提供依据。以子孢子回收率和细胞感染率为指标,对DE52纤维素层析法、蔗糖密... 研究E.tenella子孢子的纯化方法、接种剂量以及细胞生长状态对E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞体外培养中的影响,为E.tenella鸡胚盲肠上皮细胞体外培养模型的建立提供依据。以子孢子回收率和细胞感染率为指标,对DE52纤维素层析法、蔗糖密度梯度离心法和双层目筛过滤法纯化子孢子的效果进行比较;测定了子孢子接种剂量和细胞生长状态对虫体感染率的影响,并对各发育阶段的虫体进行观察。结果表明,采用双层目筛过滤法可得到纯净的子孢子,并且回收率和接种细胞后24、48h的虫体感染率均显著(P〈0.05)和极显著(P〈0.01)高于DE52纤维素层析法和蔗糖密度梯度离心法;在48孔细胞培养板中,子孢子的最佳感染剂量为每孔10万个;鸡胚盲肠上皮细胞覆盖率为85%~90%且贴壁细胞融合率在30%以上时接种子孢子,各时间段虫体的入侵率较高,且可以观察到E.tenella主要发育阶段的虫体。本研究获得了能使E.tenella在鸡胚盲肠上皮细胞完成整个内生发育的子孢子纯化方法、接种剂量和细胞生长状态。 展开更多
关键词 e.tenella 鸡胚 盲肠上皮细胞 体外培养 影响因素
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HB株E.tenella AMA-1基因的克隆及免疫调节型真核表达载体构建 被引量:1
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作者 闫艳娟 李蕴玉 +3 位作者 张东林 庞洪泽 张香斋 李佩国 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2173-2178,共6页
为研究HB株柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)AMA-1基因的免疫原性,根据GenBank收录的AMA-1基因序列设计了1对引物,对HB株E.tenella的AMA-1基因进行克隆,应用生物信息学分析软件预测AMA-1基因的核苷酸及编码的蛋白质的结构和功能。连接pPIC9载... 为研究HB株柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)AMA-1基因的免疫原性,根据GenBank收录的AMA-1基因序列设计了1对引物,对HB株E.tenella的AMA-1基因进行克隆,应用生物信息学分析软件预测AMA-1基因的核苷酸及编码的蛋白质的结构和功能。连接pPIC9载体,并与细胞因子IL-2串联,构建真核表达载体pPIC9-IL-2-AMA-1,转化毕赤酵母细胞GS115,进行蛋白表达及纯化验证。结果显示,HB株E.tenella AMA-1基因全长为1617bp,编码535个氨基酸,具有跨膜区及信号肽。经酶切和测序鉴定表明,真核表达载体pPIC9-IL-2-AMA-1构建成功。毕赤酵母转化结果表明,成功将重组载体转化到毕赤酵母中,PCR鉴定得到2200,2100bp 2条带。Western blot检测结果表明AMA-1在毕赤酵母中得到了很好的表达。本试验结果为AMA-1基因的功能和核酸疫苗的研制提供依据。 展开更多
关键词 e.tenella HB株 AMA-1基因 真核表达载体
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E.tenella河北株AMA-1重组酵母蛋白对雏鸡体液免疫及抗氧化能力的影响
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作者 闫艳娟 张东林 +4 位作者 张海龙 李佩国 李蕴玉 庞洪泽 张香斋 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期535-540,共6页
将150只雏鸡分成5个组,每组30只,1、2组分别为阴性对照组和阳性对照组,第3、4、5组在7,14,21日龄时分别肌肉注射重组AMA-1蛋白50,100,150μg。在28日龄时,除阴性对照组外,每只鸡经口灌服8×10^4个E.tenella卵囊,在试验的14,21,28,35... 将150只雏鸡分成5个组,每组30只,1、2组分别为阴性对照组和阳性对照组,第3、4、5组在7,14,21日龄时分别肌肉注射重组AMA-1蛋白50,100,150μg。在28日龄时,除阴性对照组外,每只鸡经口灌服8×10^4个E.tenella卵囊,在试验的14,21,28,35d时每组采集5只鸡的心脏血液收集血清。结果显示,第3、4、5组各期的血清AMA-1抗体水平均显著高于1、2组(P<0.05),尤以3、4组提高幅度最大,与5组比较达显著水平(P<0.05)。血清IgG、IgM、IgA含量也呈一定升高趋势,尤其在试验35d(即攻虫后7d)时,第3组血清IgG、IgM、IgA含量显著高于第1、4组(P<0.05),而血清IgG、IgA含量也显著高于第2组(P<0.05)。免疫各组血清T-SOD、T-AOC、GSH-Px活性较1、2组呈升高趋势,其中在试验35d时,第3组与第1、2组比较差异显著(P<0.05),而T-SOD、GSH-Px活性也显著高于第4组(P<0.05)。结果表明,适量的重组AMA-1蛋白能够刺激机体产生特异性抗体和免疫球蛋白,提高机体的体液免疫水平,增强清除机体氧自由基的能力,从而起到抗球虫的效果。 展开更多
关键词 e.tenella 毕赤酵母表达系统 重组AMA-1蛋白 体液免疫水平 抗氧化能力
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