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EBNA1-IgG抗体阳性患者免疫功能与肝功能损害的关系分析
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作者 马春红 王珂 李艳 《四川生理科学杂志》 2024年第5期1047-1049,共3页
目的:探究EBNA1-IgG抗体阳性患者免疫功能变化与肝功能损害的关系。方法:选取2020年4月至2023年4月于我院就诊的78例EBNA1-IgG抗体阳性患者为研究对象。根据肝功能是否受损分为肝功能正常患者为观察组(44例)和肝功能异常患者为对照组(34... 目的:探究EBNA1-IgG抗体阳性患者免疫功能变化与肝功能损害的关系。方法:选取2020年4月至2023年4月于我院就诊的78例EBNA1-IgG抗体阳性患者为研究对象。根据肝功能是否受损分为肝功能正常患者为观察组(44例)和肝功能异常患者为对照组(34例)。比较两组患者空腹血清免疫球蛋白(IgM、IgG和IgA)水平和白细胞计数(White Blood Cell Count,WBC)、淋巴细胞计数(Lymphocyte count,Lym)、中性粒细胞计数(Neutrophil count,NEUT)。采用Pearson相关性分析EBNA1-IgG抗体阳性患者免疫功能变化与肝功能损害的相关性。分析EBNA1-IgG抗体阳性患者肝功能损害的危险因素。结果:观察组IgM、IgG、IgA均低于对照组,其中IgG和IgA差异具有统计学意义(P<0.05),IgM差异无统计学意义(P>0.05)。观察组WBC、Lym和NEUT指标低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,EBNA1-IgG抗体阳性患者肝损伤与IgG、IgA、WBC、Lym和NEUT呈正相关。Logistic回归分析显示,Lym(OR=1.612,95%CI:1.056~2.459)为EBNA1-IgG抗体阳性患者合并肝功能损伤的独立危险因素。结论:EBNA1-IgG抗体阳性患者免疫功能变化与肝功能损害密切相关。 展开更多
关键词 ebna1-IgG抗体阳性 EB病毒 免疫功能 肝功能
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羧基水溶性量子点在鼻咽癌标志物EBNA1标记中的应用 被引量:1
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作者 何剑 吴平 +6 位作者 徐婧 米日喀米力.玉苏甫 廖玲凤 全华涛 张帅 田勇泉 唐瑶云 《检验医学与临床》 CAS 2016年第6期721-723,共3页
目的探讨605nm羧基水溶性量子点在鼻咽癌标志物EB病毒核抗原1(EBNA1)中的标记方法。方法将605nm羧基水溶性量子点和鼻咽癌EBNA1在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的作用下共价交联,生成量子点标记的抗原,对标记后的抗原采用紫... 目的探讨605nm羧基水溶性量子点在鼻咽癌标志物EB病毒核抗原1(EBNA1)中的标记方法。方法将605nm羧基水溶性量子点和鼻咽癌EBNA1在1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的作用下共价交联,生成量子点标记的抗原,对标记后的抗原采用紫外可见吸收谱、荧光光谱测定,琼脂糖凝胶电泳分析。结果羧基水溶性量子点与鼻咽癌EBNA1抗原通过表面氨基与羧基缩合形成的稳定共价键,羧基水溶性量子点与鼻咽癌EBNA1抗原之间实现了成功连接,标记后荧光发射光谱检测结果表明,标记后的量子点EBNA1溶液的发射峰位置在380nm附近,保持良好的荧光特性。结论 605nm羧基水溶性量子点采用共价交联法可稳定标记鼻咽癌标志物EBNA1,为后续研究提供可靠依据。 展开更多
关键词 羧基水溶性量子点 鼻咽癌 ebna1 共价交联法
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EBNA1BP2基因在肝癌形成过程中的表达及不同中医治法的调控作用 被引量:1
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作者 管冬元 方肇勤 +3 位作者 梁超 吴中华 胡卫 GAO BI-FENG 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2013年第1期33-35,I0003,共4页
目的:探讨EBNA1BP2基因在肝癌形成过程中不同阶段的表达情况及不同中医治法对其在肝癌中表达的影响。方法:①以DEN诱发大鼠肝癌模型,分别观察造模4、8、16、20周后其肝脏组织病理形态学的改变以及EB-NA1BP2基因表达的差异。②应用基因... 目的:探讨EBNA1BP2基因在肝癌形成过程中不同阶段的表达情况及不同中医治法对其在肝癌中表达的影响。方法:①以DEN诱发大鼠肝癌模型,分别观察造模4、8、16、20周后其肝脏组织病理形态学的改变以及EB-NA1BP2基因表达的差异。②应用基因芯片检测健脾益气、清热解毒、活血化瘀等常用中医治法对大鼠EBNA1BP2基因表达的影响。结果:①肝组织病理形态学观察结果表明,大鼠肝癌造模4、8周时肝组织主要表现为炎性病变,而到16周后呈现典型的增生病变,20周后已全部发展为肝细胞癌。②芯片结果显示,EBNA1BP2基因在DEN诱发大鼠肝癌形成过程中的表达量持续增加,至16周后形成表达高峰。③不同中医治法对EBNA1BP2基因在大鼠肝癌中具有不同程度的调控作用,其中健脾益气法下调作用较明显。结论:成功应用DEN诱发大鼠肝癌模型,EBNA1BP2基因在肝癌形成过程中表达持续增加,健脾益气法对其具有明显的下调作用。 展开更多
关键词 ebna1BP2 基因表达 治则治法 肝癌 健脾益气
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基于EBNA1和oriP的载体在基因治疗中的应用研究进展 被引量:3
4
作者 何婕 张智清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期507-510,共4页
非病毒载体用于基因治疗的主要问题是导入靶细胞的效率较低,目的基因表达水平低,疗效持续时间也较短。EBNA1和oriP元件使引入该元件的质粒在真核细胞内保持为游离体、转运入核、转录增强。质粒携带的目的基因能够获得较高的转染效率,高... 非病毒载体用于基因治疗的主要问题是导入靶细胞的效率较低,目的基因表达水平低,疗效持续时间也较短。EBNA1和oriP元件使引入该元件的质粒在真核细胞内保持为游离体、转运入核、转录增强。质粒携带的目的基因能够获得较高的转染效率,高水平、持续的表达。基于EBNA1 oriP的质粒在肿瘤、单基因缺陷先天性疾病、TNF相关的炎性疾病的基因治疗中显示了良好的应用前景。EBNA1 oriP元件用于构建人工染色体,携带目的基因的调控序列,可望实现可调控的基因治疗。 展开更多
关键词 基因治疗 ebna1/oriP 非病毒载体
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抑制EBNA1表达对NK/T细胞淋巴瘤细胞增殖的影响
5
作者 莫祥兰 苏祖兰 +1 位作者 张富程 陆慧琼 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1025-1027,共3页
目的研究抑制EBV阳性NK/T细胞淋巴瘤细胞系HANK1细胞EBV核抗原1的表达对细胞增殖和周期分布的影响,探讨抑制EBV感染治疗EBV相关性NK/T细胞淋巴瘤的潜在应用价值。方法用RNA干扰(RNA interference,RNAi)方法抑制HANK1细胞EBNA1表达,Weste... 目的研究抑制EBV阳性NK/T细胞淋巴瘤细胞系HANK1细胞EBV核抗原1的表达对细胞增殖和周期分布的影响,探讨抑制EBV感染治疗EBV相关性NK/T细胞淋巴瘤的潜在应用价值。方法用RNA干扰(RNA interference,RNAi)方法抑制HANK1细胞EBNA1表达,Western blot检测EBNA1蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡。结果 EBNA1-shRNA表达载体明显抑制EBNA1表达,细胞周期G1期停滞,凋亡细胞增多,细胞增殖受抑。结论根治EBV感染可能是治疗EBV相关性NK/T细胞淋巴瘤的好方法。 展开更多
关键词 HANK1细胞 ebna1 RNAI 细胞周期 增殖
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EB病毒EBNA1/IgA与鼻咽癌分期的关系 被引量:3
6
作者 成积儒 蔡永林 +3 位作者 郑裕明 李军 莫永坤 钟青燕 《华夏医学》 CAS 2009年第5期829-831,共3页
目的:探讨EB病毒EBNA1/IgA抗体与鼻咽癌临床分期的关系。方法:用酶联免疫吸附法(ELISA)检测211例未经治疗的鼻咽癌患者血清中EBNA1/IgA抗体,按"92分期法"进行分期,分别计算各T、N、M分期及临床分期的EBNA1/IgA抗体阳性率及抗... 目的:探讨EB病毒EBNA1/IgA抗体与鼻咽癌临床分期的关系。方法:用酶联免疫吸附法(ELISA)检测211例未经治疗的鼻咽癌患者血清中EBNA1/IgA抗体,按"92分期法"进行分期,分别计算各T、N、M分期及临床分期的EBNA1/IgA抗体阳性率及抗体水平并进行统计学分析。结果:鼻咽癌患者的EBNA1/IgA抗体表达与性别和各年龄组没有相关性。EBNA1/IgA抗体rA值与原发灶T分期及颈淋巴结转移N分期差异均有统计学意义(P<0.05);与远处转移M分期差异无统计学意义(P>0.05)。鼻咽癌早期(、期)患者的EBNA1/IgA抗体rA值显著低于晚期(、期)(P<0.05)。结论:EBNA1/IgA抗体在早期鼻咽癌表达水平相对较低。对于评估鼻咽癌临床分期有一定的参考价值。 展开更多
关键词 鼻咽癌 EB病毒 ebna1/IgA 临床分期
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EBNA1阳性肿瘤细胞株的建立
7
作者 张丽娅 廖志勇 +2 位作者 车小燕 温坤 潘玉先 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2004年第2期105-108,共4页
目的:建立表达Epstein-Barr(EB)病毒核抗原-1(EBNA1)的肿瘤细胞株,用于EB病毒相关肿瘤的研究。方法:将1 200 bp的EBNA1基因片段插入真核细胞表达载体pcDNA3中,使用脂质体介导pcDNA3/EBNA1质粒进入人鼻咽癌CNE2细胞和人宫颈癌Hela细胞,通... 目的:建立表达Epstein-Barr(EB)病毒核抗原-1(EBNA1)的肿瘤细胞株,用于EB病毒相关肿瘤的研究。方法:将1 200 bp的EBNA1基因片段插入真核细胞表达载体pcDNA3中,使用脂质体介导pcDNA3/EBNA1质粒进入人鼻咽癌CNE2细胞和人宫颈癌Hela细胞,通过G418进行阳性克隆的筛选,PCR、RT-PCR进行鉴定。结果:成功建立EBNA1基因阳性的鼻咽癌和宫颈癌肿瘤细胞株,经PCR、RT-PCR检测证明两种转基因细胞株稳定表达EBNA1。结论:EBNA1阳性肿瘤细胞株的建立,为体外进行EB病毒相关肿瘤的研究提供细胞模型。 展开更多
关键词 ebna1 肿瘤细胞株 EB病毒
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EBV阳性淋巴瘤组织中EBNA1基因多态性研究
8
作者 车奎 王笑峰 +2 位作者 王云 邢晓明 罗兵 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期476-480,共5页
EBV与多种人类肿瘤的发生有关,如伯基特淋巴瘤(Burkitt's lymphoma,BL)、霍奇金病(Hodgkin's disease, HD)、鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)以及胃癌等[1]。EBV潜伏感染和细胞转化能力被广泛认为是其致癌的基础,... EBV与多种人类肿瘤的发生有关,如伯基特淋巴瘤(Burkitt's lymphoma,BL)、霍奇金病(Hodgkin's disease, HD)、鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)以及胃癌等[1]。EBV潜伏感染和细胞转化能力被广泛认为是其致癌的基础,目前已知EBV多种潜伏期基因编码产物可引起细胞转化,其中核抗原家族基因(EBNAs)编码产物中的EBNA1是唯一在所有EBV相关肿瘤中均表达的蛋白,当病毒潜伏感染时,其在基因组的维持、复制和转录过程中发挥重要作用[2]。EBNA1重复序列可通过顺式作用方式抑制抗原递呈细胞对自身的加工处理,使CTL不能识别自身免疫表位从而逃避机体免疫应答[3]。EBNA1由N端(AA 1-89)、甘氨酸和丙氨酸重复序列(AA 90-327)以及C端(AA 328-641)组成,对EBNA1基因变异的分析多集中在C端。Bhatia等[4]和Gutiérrez等[5]根据突变热点AA487的变化及AA466-527之间的变异,将EBNA1基因分为P-ala、P-thr、V-val、V-leu和V-pro 5种亚型。本研究对EBV阳性淋巴瘤组织中EBNA1编码基因多态性进行了检测和分析,旨在探讨EBNA1多态性在EBV阳性淋巴瘤发生中的意义。 展开更多
关键词 EBV核抗原基因ebna1 基因多态性 疾病限制 地域限制 淋巴瘤
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Establishment of Diagnostic Criteria Using EBNA1 IgA Antibody Levels in a High-Risk Area for Nasopharyngeal Carcinoma 被引量:1
9
作者 WeiminCheng MingfangJi +5 位作者 YongshengZong YaoliangGu SPorkNg XiaolingLi JilanYang YuanqingGuo 《Chinese Journal of Clinical Oncology》 CSCD 2005年第3期637-640,共4页
OBJECTIVE The EBNA1 IgA antibody level of normal and NPC subjects in a high incidence area were analyzed for new diagnostic criteria to improve diagnosis. METHODS A total of 780 normal and 104 NPC sera were tested for... OBJECTIVE The EBNA1 IgA antibody level of normal and NPC subjects in a high incidence area were analyzed for new diagnostic criteria to improve diagnosis. METHODS A total of 780 normal and 104 NPC sera were tested for EBNA1 IgA antibody levels by ELISA. Two diagnostic criteria were obtained from sensitivity and specificity data: 1) lower equivocal limit (rOD =1.10) where sensitivity = 95%; and 2) upper equivocal limit (rOD=1.85) where specificity = 95%. RESULTS The range and distribution of EBNA1 IgA antibody levels are broad with those of normal subjects (0.093-4.726, mean = 0.850 ± 0.637) overlapping those from NPC subjects (0.235-3.721, mean = 2.241 ± 0.875). However, NPC subjects did exhibit significantly higher antibody levels (t = 18.5, P<0.001). Based on the diagnostic criteria, 3 diagnostic categories were established: ① Positive; ② Suspected Positive; and 3) Negative. The percentage of NPC subjects falling into these 3 diagnostic categories were 75.13%, 17.44% and 7.44%, respectively and of normal subjects, 4.81%, 17.31%, 77.88% respectively. CONCLUSION Due to the broad distribution and overlapping of antibody levels between normal and NPC subjects in a high incidence area, it is important to have diagnostic criteria that will categorize those with equivocal results to minimize misdiagnosis. The 3 diagnostic categories established in this study will enhance detection and help physicians in their clinical diagnosis. 展开更多
关键词 诊断标准 ebna1 IGA抗体 免疫球蛋白 鼻咽癌
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5-Aza-CdR联合EBNA1-DC疫苗诱导的淋巴细胞对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤作用
10
作者 谢云青 黄丽洁 +2 位作者 林晓为 陈莉 陈珊珊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期701-706,共6页
目的:探讨EB病毒核抗原1(EBNA1)mRNA修饰的DC(EBNA1-DC)诱导的淋巴细胞联合甲基化抑制剂5-Aza-CdR对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤作用。方法:以构建的EBNA1-pCDNA3.1质粒为模板,体外转录获得EBNA1 mRNA,通过脂质体转染至健康人外周血来源DC,... 目的:探讨EB病毒核抗原1(EBNA1)mRNA修饰的DC(EBNA1-DC)诱导的淋巴细胞联合甲基化抑制剂5-Aza-CdR对鼻咽癌C666-1细胞的杀伤作用。方法:以构建的EBNA1-pCDNA3.1质粒为模板,体外转录获得EBNA1 mRNA,通过脂质体转染至健康人外周血来源DC,构建EBNA1-DC疫苗。流式细胞术检测转染后DC表型及5-Aza-CdR处理后的C666-1细胞凋亡情况。实时无标记动态细胞分析技术检测EBNA1-DC疫苗诱导的淋巴细胞联合5-Aza-CdR的特异性抗肿瘤活性。结果:转染EBNA1 mRNA后EBNA1-DC表面EBNA1阳性率为(59.3±5.85)%,HLA-DR的表达与未转染DC相比显著升高[(84.9±5.5)%vs(68.0±5.8)%,P=0.026],CD80的表达也显著升高([88.2±3.9)%vs(61.1±4.4)%,P=0.015]。低剂量5-Aza-CdR处理后的C666-1细胞凋亡情况与未处理的细胞相比无显著差异。经低浓度5-Aza-CdR预处理的C666-1细胞中IRF7基因表达与未处理的细胞相比显著升高(P=0.0001)。与空载的DC相比,EBNA1-DC诱导的淋巴细胞对EBV阳性表达的C666-1细胞具有更强的特异性杀伤活性(P=0.049);经低浓度5-Aza-CdR预处理的C666-1细胞对EBNA1-DC诱导的特异性免疫杀伤更敏感(P=0.019)。结论:5-Aza-CdR与EBNA1-DC疫苗联合可显著增强对C666-1细胞的特异性免疫杀伤,本研究为开拓以mRNA为基础的DC疫苗及其在临床综合治疗中的应用转化提供前期研究基础。 展开更多
关键词 EB病毒核抗原1 甲基化抑制剂 5-AZA-CDR Epstein Barr病毒 DC疫苗 鼻咽癌
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Immunological Responses to the Combination of EBNA1 and LMP2 in Mice
11
作者 DU Hai Jun TONG Yan Yan +2 位作者 WANG Zhan ZHANG Li Xia ZENG Yi 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2019年第5期380-382,共3页
Epstein-Barr virus (EBV) infection is closely associated with nasopharyngeal carcinoma (NPC)and considered one of the major risk factors[1]. A limited number of viral proteins, such as latent membrane proteins (LMP1, ... Epstein-Barr virus (EBV) infection is closely associated with nasopharyngeal carcinoma (NPC)and considered one of the major risk factors[1]. A limited number of viral proteins, such as latent membrane proteins (LMP1, LMP2) and EB nuclear antigen1 (EBNA1), are expressed in NPC cells[2].Recognition epitopes for CD8+and CD4+T cells were included in the LMP2 antigen and EBNA1 C-terminal region (amino acid No. 380-641), respectively[3,4].Both CD4+and CD8+memory T-cell responses were efficiently reactivated by EBNA1 and LMP2[5;6]. 展开更多
关键词 IMMUNOLOGICAL RESPONSES ebna1 LMP2
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联合检测EBNA1-IgA和EA-IgG在鼻咽癌血清学诊断中的价值 被引量:10
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作者 张昌卿 宗永生 +5 位作者 孙韵 张玉 林素暇 叶永照 冯凯涛 梁英杰 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期482-484,共3页
目的 探讨联合检测EBNA1 IgA和EA IgG在鼻咽癌血清学诊断中的价值。方法 收集 5 6例未经治疗的鼻咽癌患者和 5 8例健康成年人血清 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测EBNA1 IgA和EA IgG ,比较其单独或联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测... 目的 探讨联合检测EBNA1 IgA和EA IgG在鼻咽癌血清学诊断中的价值。方法 收集 5 6例未经治疗的鼻咽癌患者和 5 8例健康成年人血清 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测EBNA1 IgA和EA IgG ,比较其单独或联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、正确率和优势比。结果 EBNA1 IgA的灵敏度 (91.0 7% )高于EA IgG(87.5 0 % ) ,EA IgG的特异度 (87.93% )高于EBNA1 IgA (84 .4 8% )。二者联合检测的特异度为 94 .83% ,阳性预测值为 0 .9375 ,阳性似然比为 15 .5 4 35 ,优势比为 75 .0 0 0 0。4 5例EBNA1 IgA阳性的鼻咽癌患者与EA IgG阳性结果相吻合 ;5例EBNA1 IgA阴性的鼻咽癌患者中 ,有 4例EA IgG阳性 ;7例EA IgG阴性的鼻咽癌患者中 ,有 6例EBNA1 IgA阳性。结论 EBNA1 IgA和EA IgG在血清学检测中有较高的灵敏度和特异度 ,二者联合检测有互补作用 ,可提高鼻咽癌血清学诊断的可靠性。大多数鼻咽癌患者为EBNA1 IgA和EA 展开更多
关键词 ebna1-IgA EA-IgG 鼻咽癌 血清学 鼻咽肿瘤 病毒感染
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EB病毒EBNA1基因原核表达载体构建及其对鼻咽癌筛选价值研究 被引量:8
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作者 胡波 陈忠城 +3 位作者 周文营 吴兴平 梁志超 李林 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2014年第16期1244-1247,共4页
目的:构建EB病毒(epstein-barr virus,EBV)EBNA1基因原核表达载体,并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用。方法:收集2003-02-01-2005-08-30中山大学附属肿瘤医院(216例)和江苏省肿瘤医院(84例)300例鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC... 目的:构建EB病毒(epstein-barr virus,EBV)EBNA1基因原核表达载体,并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用。方法:收集2003-02-01-2005-08-30中山大学附属肿瘤医院(216例)和江苏省肿瘤医院(84例)300例鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)患者的血清样本,同时收集2003-07-01-2005-07-30中山大学附属第三医院500名健康体检者标本作为对照组。以EBV DNA为模板,采用PCR法扩增目的基因EBNA1,定向克隆到原核表达载体pGEX-5X-1中,构建pGEX-5X-EBNA1重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达GST/EBNA1融合蛋白。经SDS-PAGE、蛋白质印迹法鉴定表达产物后,纯化目的蛋白作为包被抗原,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群EBNA1-IgA抗体。结果:在大肠埃希菌中成功表达了GST/EBNA1融合蛋白,相对分子质量为54×103,ELISA法检测结果显示,鼻咽癌患者EBNA1-IgA抗体阳性检出率为80.7%(242/300),对照组阴性检出率为91.0%(455/500);EBV-IgA检测鼻咽癌患者抗体阳性检出率为82.3%(247/300),对照组阴性检出率为93.0%(465/500),2种检测方法的阳性检出率(χ2=1.77,P=0.19)和阴性检出率(χ2=1.36,P=0.25)比较,差异均无统计学意义。结论:初步评估了EB病毒GST/EBNA1重组融合蛋白在鼻咽癌血清筛选中的诊断价值,获得了在鼻咽癌筛选中有一定应用价值的pGEX-5X-EBNA1大肠埃希菌工程菌株。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 EB病毒 ebna1 大肠埃希菌
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重组抗狂犬病病毒抗体在HEK293 EBNA1细胞中的瞬时表达优化 被引量:4
14
作者 陈继军 秦海艳 +3 位作者 安晨 乔玉玲 李晓进 毛晓燕 《现代生物医学进展》 CAS 2015年第33期6439-6443,6454,共6页
目的:优化重组抗体在悬浮无血清培养的HEK293 EBNA1瞬时表达,提高重组抗体表达量。方法:将HEK293 EBNA1细胞适应于无血清悬浮培养,筛选适宜的无血清培养基。使用PEI转染质粒进入细胞,瞬时表达重组抗体;使用Modde软件进行实验设计(DOE),... 目的:优化重组抗体在悬浮无血清培养的HEK293 EBNA1瞬时表达,提高重组抗体表达量。方法:将HEK293 EBNA1细胞适应于无血清悬浮培养,筛选适宜的无血清培养基。使用PEI转染质粒进入细胞,瞬时表达重组抗体;使用Modde软件进行实验设计(DOE),优化转染质粒量、轻重链比例、PEI量等影响瞬时表达的条件。培养上清经亲和纯化,获得目标抗体,用快速免疫荧光灶抑制试验(RFFIT)测定抗体活性,用BCA法测定纯化抗体浓度。结果:293SFMII为适宜的HEK293 EBNA1细胞无血清悬浮培养基。对抗体表达影响最大的因素是轻重链比例(P=0.00000),其次为质粒浓度(P=0.00086),最后为PEI(P=0.00257)。优化的转染条件为:质粒用量0.61μg/106细胞,轻重链比例2:1,PEI 2.67μg/106细胞,优化后抗体表达量有显著提高(P=0.007)。结论:通过DOE优化获得了重组抗狂犬病病毒抗体的高水平表达,抗体表达量提高了至少50倍。 展开更多
关键词 HEK293 ebna1 无血清悬浮培养 抗体瞬时表达 实验设计
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EBNA1基因在广东地区人群中的变异特征及与鼻咽癌的相关性 被引量:2
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作者 买世娟 张晓实 +6 位作者 李大疆 沈国平 姜桔红 张如华 余杏娟 陈诗萍 曾益新 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第22期2369-2372,共4页
关键词 鼻咽癌 EB病毒 ebna1 人群 基因 相关性 携带者 变异特征 广东地区 症状
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EBNA1/IgA血清学状态及动态变化相关的鼻咽癌发病风险研究 被引量:2
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作者 盛炜 吴标华 +5 位作者 吴文翰 黄守杰 吴婷 郑亚 夏宁邵 季明芳 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期338-344,共7页
分析EB病毒核抗原1-IgA抗体(EBNA1-IgA)的不同状态及变化趋势,并探讨人群的鼻咽癌发病风险。检测中山市小榄镇2009~2010年入组的16 695位30~59岁参加鼻咽癌筛查人群血清,按首次筛查和随访中EBNA1/IgA抗体状态将筛查人群进行分组,对照组... 分析EB病毒核抗原1-IgA抗体(EBNA1-IgA)的不同状态及变化趋势,并探讨人群的鼻咽癌发病风险。检测中山市小榄镇2009~2010年入组的16 695位30~59岁参加鼻咽癌筛查人群血清,按首次筛查和随访中EBNA1/IgA抗体状态将筛查人群进行分组,对照组为未参加筛查的两个镇区同年龄组人群,利用中山市肿瘤登记系统、死因登记系统随访至2014年12月31日,分析各组人群的鼻咽癌发病风险。与对照组相比,基线抗体阴性人群的发病风险比为0.46(95%CI 0.25~0.86),基线抗体阳性人群的发病风险比为31.1(95%CI 21.0~46.1);复查人群中上升组、持续阳性组的发病风险比分别为82.4(95%CI 36.1~188.2),26.4(95%CI 12.3~52.5),而下降组和波动组中未见病例。EBNA1/IgA基线阳性人群在5年中有很高的发病风险,复查人群中上升组和持续阳性组也有很高的发病风险,下降组和波动组发病风险较低。 展开更多
关键词 鼻咽癌 EB病毒 ebna1/IgA 筛查 发病率
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EBNA1在鼻咽癌发生中细胞免疫应答的研究 被引量:2
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作者 仝艳艳 杜海军 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期73-75,共3页
EB病毒核心抗原1(EB nuclear antigen1,EBNA1)是唯一一个在EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)潜伏感染和活化状态中均表达的抗原,也是在鼻咽癌(Nasopharyngealcarcinoma,NPC)组织中表达的几个EB病毒抗原之一.早期研究显示EBNA1为DN... EB病毒核心抗原1(EB nuclear antigen1,EBNA1)是唯一一个在EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)潜伏感染和活化状态中均表达的抗原,也是在鼻咽癌(Nasopharyngealcarcinoma,NPC)组织中表达的几个EB病毒抗原之一.早期研究显示EBNA1为DNA结合蛋白,在促进细胞转化、EBV基因组稳定、复制、基因的表达方面起着重要的作用,并可以诱导体液免疫应答.近来研究表明在EBNAI的C末端含有CD4+T细胞表位,在诱导细胞免疫应答方面起着重要作用,鉴此,本文对EBNA1在NPC发生中细胞免疫应答方面的研究做一综述. 展开更多
关键词 细胞免疫应答 ebna1 鼻咽癌 癌发生 EB病毒抗原 DNA结合蛋白 体液免疫应答 核心抗原
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EB病毒EBNA1基因酵母工程菌的构建、表达及临床应用 被引量:2
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作者 胡波 周文营 +2 位作者 李晓杰 刘梦琼 李林 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第17期2436-2439,共4页
目的建立能有效表达EB病毒核抗原1(EBNA1)基因的酵母工程菌株,并探讨EBNA1重组蛋白在鼻咽癌血清学诊断中的应用。方法以EBV DNA为模板,采用PCR法扩增目的基因片段EBNA1,与毕赤酵母表达载体pPICZaA连接,转化酵母菌GS115,甲醇诱导重组蛋... 目的建立能有效表达EB病毒核抗原1(EBNA1)基因的酵母工程菌株,并探讨EBNA1重组蛋白在鼻咽癌血清学诊断中的应用。方法以EBV DNA为模板,采用PCR法扩增目的基因片段EBNA1,与毕赤酵母表达载体pPICZaA连接,转化酵母菌GS115,甲醇诱导重组蛋白表达。表达产物经SDS-PAGE、免疫印迹法鉴定后,纯化目的蛋白作为包被抗原,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群EBNA1-IgA抗体。结果在毕赤酵母菌中成功高效地表达了分泌型的EBNA1重组蛋白,相对分子质量为28 000,免疫印迹证实目的带有免疫原性,目的蛋白经纯化后作为包被抗原检测鼻咽癌患者和健康对照的敏感度和特异度分别为81.4%和95.8%。结论采用毕赤酵母系统高效分泌表达了EBNA1重组蛋白并对其在鼻咽癌血清筛选中的诊断价值进行了初步评估,获得了在鼻咽癌筛选中有一定诊断价值的pPICZa-EBNA1生产酵母工程菌株。 展开更多
关键词 鼻咽癌 EB病毒核抗原1 毕赤酵母
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The character of EBNA1 gene variation in Cantonese and its association with nasopharyngeal carcinoma 被引量:1
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作者 MAIShijuan ZHANGXiaoshi LIDajiang SHENGuoping JIANGJuhong ZHANGRuhua YUXingjuan CHENShiping ZENGYixin 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第24期2640-2643,共4页
关键词 ebna1基因 鼻炎癌 病毒 预防方法 DNA
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EB病毒与结直肠癌的相关性(英文) 被引量:4
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作者 宋立兵 张星 +5 位作者 张昌卿 张颖 潘志忠 廖雯婷 李满枝 曾木圣 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1356-1360,共5页
背景与目的:研究表明,EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)除与鼻咽癌密切相关外,可能与其它癌症相关。本研究旨在探讨EBV与中国人结直肠癌的关系。方法:采用PCR方法从90例原发性结直肠癌标本及25例配对的癌旁标本检测EBVLMP1(latentmembrane... 背景与目的:研究表明,EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)除与鼻咽癌密切相关外,可能与其它癌症相关。本研究旨在探讨EBV与中国人结直肠癌的关系。方法:采用PCR方法从90例原发性结直肠癌标本及25例配对的癌旁标本检测EBVLMP1(latentmembraneprotein1)基因的第3外显子及BamHⅠW片段的部分序列;采用免疫组织化学方法检测EBNA1(EBVnuclearantigen1)和LMP1的表达,采用原位杂交检测EBERs(EBV-encodedRNAs)的表达。结果:在90例原发性结直肠癌标本中,EBV基因阳性率为27.7%(LMP1外显子3)和32.2%(W片段),而25例癌旁组织中只有1例(4.0%)EBV基因阳性,癌组织和癌旁组织EBV阳性率差异有显著性(P<0.001)。29例W片段阳性的大肠癌标本中,有23例(79.3%)EBNA1表达阳性,只有1例(3.4%)EBERs阳性,阳性细胞主要为癌细胞,阳性信号集中在核内;而在8例W片段阴性的标本中,未检测到EBNA1的表达,也未检测到EBERs;以上标本中均未检测到LMP1的表达。结论:EBV与部分中国人结直肠癌相关。 展开更多
关键词 EB病毒 结直肠肿瘤 中国人 ebna1 LMP1 EBERs
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