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EDC/NHS交联重组胶原蛋白水凝胶修复关节软骨缺损 被引量:1
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作者 黄长瑾 雷桓 唐晓军 《中国材料进展》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期344-354,共11页
关节软骨损伤、缺损是一种常见且严峻的临床挑战,没有有效的治疗方法,基于胶原蛋白的水凝胶是软骨组织工程的研究热点之一,但在开发具有良好生物相容性且可安全交联的胶原蛋白产品,并提高软骨修复有效性方面仍然存在巨大挑战。将重组Ⅰ... 关节软骨损伤、缺损是一种常见且严峻的临床挑战,没有有效的治疗方法,基于胶原蛋白的水凝胶是软骨组织工程的研究热点之一,但在开发具有良好生物相容性且可安全交联的胶原蛋白产品,并提高软骨修复有效性方面仍然存在巨大挑战。将重组Ⅰ型胶原蛋白和重组Ⅲ型胶原蛋白通过EDC/NHS交联,制备了2种水凝胶,均表现出良好的三维孔隙结构以及优异的力学性能和可降解性。研究发现,重组Ⅰ型胶原蛋白水凝胶(Gel-Ⅰ)和重组Ⅲ型胶原蛋白水凝胶(Gel-Ⅲ)能促进人骨髓间充质干细胞(human bone-marrow mesenchymal stem cells,HBMSCs)糖胺聚糖的分泌,Gel-Ⅰ可以显著上调HBMSCs表达COLⅡ基因和SOX9基因,Gel-Ⅲ可以显著上调SOX9基因表达。在兔子膝关节软骨修复模型中,与对照组和Gel-Ⅲ组相比,Gel-Ⅰ组在骨体积大小方面表现出明显优势,软骨下骨已形成并有效恢复,小梁的数量和厚度最高,小梁分布更均匀,并且缺损处新软骨厚度与相邻软骨厚度相同。因此,Gel-Ⅰ在软骨修复有效性以及安全性方面具有极大的临床应用潜力。 展开更多
关键词 edc/nhs 交联 重组胶原蛋白 可注射水凝胶 关节软骨修复
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γ辐射和EDC/NHS改性对胶原壳聚糖支架性能的影响 被引量:1
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作者 杜歌 魏莉 +3 位作者 刘自双 武继民 陈子浩 田丰 《材料工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第5期106-111,共6页
以5%梯度制备11组壳聚糖质量分数为0%~50%的胶原壳聚糖支架。使用γ辐射和EDC/NHS分别改性处理各组胶原壳聚糖支架,采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)和扫描电镜(SEM)分析支架内部结构,利用吸水率、孔隙率、降解率和力学性能等指标对其性... 以5%梯度制备11组壳聚糖质量分数为0%~50%的胶原壳聚糖支架。使用γ辐射和EDC/NHS分别改性处理各组胶原壳聚糖支架,采用傅里叶变换红外光谱仪(FTIR)和扫描电镜(SEM)分析支架内部结构,利用吸水率、孔隙率、降解率和力学性能等指标对其性能进行检测,研究γ辐射和EDC/NHS改性对胶原壳聚糖支架性能的影响。结果表明:γ辐射和EDC/NHS改性均能使胶原与壳聚糖产生交联,壳聚糖的加入改善了γ辐射对支架分子结构的损伤;EDC/NHS改性支架的微结构好于γ辐射支架;两种改性支架壳聚糖较优,质量分数均为25%;γ辐射和EDC/NHS改性均能使支架产生取向结构。 展开更多
关键词 胶原壳聚糖支架 Γ辐射 edc/nhs 交联 改性
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Physiochemical and Biological Properties of Modified Collagen Sponge from Porcine Skin 被引量:7
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作者 许媛媛 武继民 《Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science)》 SCIE EI CAS 2009年第4期619-626,共8页
The aim of the present study was to compare one-step method to EDC/NHS crosslinking (EDC/NHS group) and one-step simultaneous method to EDC/NHS crosslinking and heparin immobilization (EDC/NHS- Heparin group) in i... The aim of the present study was to compare one-step method to EDC/NHS crosslinking (EDC/NHS group) and one-step simultaneous method to EDC/NHS crosslinking and heparin immobilization (EDC/NHS- Heparin group) in improving physiochemical and biological properties of native collagen sponge (Control group). Modified collagen sponge overcome the disadvantages of native collagen sponge. IR spectra suggest the change of the functional groups. DSC data indicate that the stability of caloric transformation in EDC/NHS group is slightly higher than that of EDC/NHS-Heparin group. The crosslinking degree, stability against enzymes, stability in morphologically and biomechanical properties of EDC/NHS-Heparin group are higher than those of EDC/NHS group, whereas, the water-binding capacity in EDC/NHS-Heparin group is lower than that of EDC/NHS group. HUVECs in EDC/NHS-Heparin group scaffold proliferate fast, migrate well and distribute uniformly. One-step simultaneous method gains the better effects in above aspects, heparinized collagen matrices increase in angiogenic potential and suit for defect repairing and tissue engineering. 展开更多
关键词 collagen sponge HEPARIN one-step method to edc/nhs crosslinking one-step simultaneous method to edc/nhs crosslinking and heparin immobilization
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多肽修饰载紫杉醇PLGA微球的制备技术 被引量:2
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作者 袁晓燕 刘为青 +3 位作者 董坚 高嫦娥 刘冬 袁明龙 《西部医学》 2015年第11期1626-1630,共5页
目的 以乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]为载体,研究经三阴性乳腺癌特异性多肽修饰的载紫杉醇PLGA微球(PI-PTX/PLGA微球)的构建方法,建立新型的经多肽修饰的载药方式。方法 以乳化-溶剂挥发法制备包载紫... 目的 以乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]为载体,研究经三阴性乳腺癌特异性多肽修饰的载紫杉醇PLGA微球(PI-PTX/PLGA微球)的构建方法,建立新型的经多肽修饰的载药方式。方法 以乳化-溶剂挥发法制备包载紫杉醇的PLGA微球(PTX/PLGA微球),采用EDC/NHS体系作为交联剂,将PI多肽连于PTX/PLGA微球表面,通过扫描电镜、激光粒度仪、高效液相色谱仪和倒置荧光显微镜分析微球的表面形态、粒径、载药量、包封率及多肽连接状态。结果 多肽修饰的载药微球呈圆球形,分散性好,形态规整,无聚集现象,球体表面未见明显空隙,激光粒度仪测得空白PLGA微球、PTX/PLGA微球和PI-PTX/PLGA微球的平均粒径分别为14.65μm、15.07μm和17.15μm。高效液相色谱法测得紫杉醇在1.0~50μg/ml浓度范围内,峰面积(Y)对紫杉醇浓度(X)有良好的线性关系,得到标准曲线方程为Y=33.783X+2.7098(R2=1),由此计算PTX/PLGA微球和PI-PTX/PLGA微球的载药量和包封率分别为2.8%和91%、2.5%和84%。多肽修饰的载药微球,表面呈绿色荧光,EDC/NHS交联体系对微球结构无明显影响。结论 EDC/NHS交联体系适用于多肽与PLGA微球的连接,稳定性好。同时,也为靶向生物分子与载药微球的结合提供了新的途径。 展开更多
关键词 紫杉醇 乳酸-羟基乙酸共聚物 PI多肽 微球 高效液相色谱法 edc/nhs交联剂
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明胶-胶原复合凝胶联合诱导因子调控大鼠骨髓间充质干细胞的肝向分化 被引量:2
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作者 袁伊航 徐梦浛 牛旭锋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第16期2510-2515,共6页
背景:体外人工肝系统已成为临床上非常有效且实用的肝衰竭治疗手段,但仍存在细胞来源有限和获得细胞的功能有限等问题。目的:优化和筛选符合细胞生长需要的明胶-胶原复合凝胶,以复合凝胶为细胞生长的基底材料,探究诱导骨髓间充质干细胞... 背景:体外人工肝系统已成为临床上非常有效且实用的肝衰竭治疗手段,但仍存在细胞来源有限和获得细胞的功能有限等问题。目的:优化和筛选符合细胞生长需要的明胶-胶原复合凝胶,以复合凝胶为细胞生长的基底材料,探究诱导骨髓间充质干细胞肝向分化的方案。方法:将明胶溶液与胶原溶液按照不同的体积比(1∶1、2∶1、4∶1)混合,分别制备明胶质量浓度为50,100,150,200 g/L的明胶-胶原复合凝胶,通过熔点、微观形貌、吸水率和孔隙率筛选溶液的体积比与明胶的质量浓度,进行后续实验。将大鼠骨髓间充质干细胞接种于复合水凝胶中(实验组),以单独培养的细胞为对照,采用CCK-8法检测细胞增殖;采用两阶段分步诱导方案来诱导两组大鼠骨髓间充质干细胞的肝向分化,于诱导培养的3,7,14,21 d检测上清中白蛋白与尿素的水平。结果与结论:(1)对比熔点、微观形貌、吸水率和孔隙率检测结果,当明胶溶液与胶原溶液按照4∶1体积比混合、明胶质量浓度为150 g/L时制备的复合凝胶最适宜用于细胞培养。(2)CCK-8检测显示,实验组培养1,3,5 d的细胞增殖活性低于对照组,此后两组间的差距逐渐减小,至10 d时已无差异。(3)肝向诱导分化实验显示,随着诱导时间的延长,两组白蛋白合成量逐渐增加,其中实验组14,21 d的白蛋白合成量高于对照组(P<0.05);两组诱导3-7 d内的尿素分泌量增幅较大,7 d后生成量趋于稳定,实验组14,21 d的尿素分泌量稍高于对照组,但差异无显著性意义(P>0.05)。(4)结果表明,以明胶-胶原复合凝胶为细胞生长的基底材料联合诱导因子可诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为肝样细胞。 展开更多
关键词 复合水凝胶 人工肝 骨髓间充质干细胞 肝细胞 诱导分化 明胶 胶原 edc/nhs
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PLGA-b-PEG纳米粒的合成与表征
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作者 焦方文 张盼盼 +2 位作者 徐有伟 王集会 刘玉红 《食品与药品》 CAS 2015年第6期390-393,共4页
目的以生物可降解材料聚乳酸羟基乙酸聚合物(PLGA)为载体,连接聚乙二醇(PEG)分子,制备PLGA-b-PEG纳米粒。方法采用EDC/NHS催化法和乳化溶媒蒸发法合成PLGA-b-PEG纳米粒,用1H NMR(CDCl3,400 MHz)表征,通过透射电子显微镜观察纳米粒的形... 目的以生物可降解材料聚乳酸羟基乙酸聚合物(PLGA)为载体,连接聚乙二醇(PEG)分子,制备PLGA-b-PEG纳米粒。方法采用EDC/NHS催化法和乳化溶媒蒸发法合成PLGA-b-PEG纳米粒,用1H NMR(CDCl3,400 MHz)表征,通过透射电子显微镜观察纳米粒的形态。结果 1H NMR(CDCl3,400 MHz)显示PLGA-b-PEG聚合物具有良好的的峰形和位移,透射电子显微镜下观察纳米粒大小均一,粒径为200 nm。结论此法成功制备了PLGA-b-PEG纳米粒。 展开更多
关键词 PLGA-b-PEG纳米粒 edc/nhs催化法 乳化溶媒蒸发法
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MiRNA-126硬脂胺阳离子脂质体递送系统的构建及细胞摄取考察
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作者 唐永瑜 邰诗蝶 +5 位作者 吴兴杰 陈英 冯发进 沈祥春 邹弢 陶玲 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第9期2006-2016,共11页
目的基于阳离子脂质体制备血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)单克隆抗体(VCAM-1 mAb)修饰的负载微小RNA-126(miR-126)的靶向递送系统,并初步评价其稳定性、细胞毒性及细胞摄取。方法采用薄膜分散-挤出法制备硬脂胺阳离子脂质体(SCL),以脂质体... 目的基于阳离子脂质体制备血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)单克隆抗体(VCAM-1 mAb)修饰的负载微小RNA-126(miR-126)的靶向递送系统,并初步评价其稳定性、细胞毒性及细胞摄取。方法采用薄膜分散-挤出法制备硬脂胺阳离子脂质体(SCL),以脂质体粒径、电位为指标,单因素法考察大豆磷脂与胆固醇质量比、硬脂胺用量、无水乙醇的用量、成膜温度、水合介质用量、水合制备温度、水合制备时间;并考察其稀释稳定性及储存稳定性。采用琼脂糖凝胶阻滞实验考察SCL对miR-126的负载能力及对酶解的保护效果。利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)交联法制备VCAM-1 mAb修饰的SCL(Va-SCL),并通过SDS-PAGE法考察VCAM-1 mAb与SCL的耦连效率。MTT法考察其对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的毒性,流式细胞术和荧光显微镜考察正常HUVECs及LPS(1μg·mL^(-1))刺激后HUVECs对miR-126、SCL/miR-126、Va-SCL/miR-126的摄取情况。结果精密称量大豆磷脂120mg、胆固醇40mg、硬脂胺10 mg于茄形瓶中,加入5 mL无水乙醇,50℃超声(功率300 W、频率40 kHz)使其充分溶解,肉眼观察无可见颗粒物或者不溶物,水浴减压蒸发除去有机溶剂,在瓶壁上形成均匀透明的脂质薄膜;加入12 mL DEPC水作为水合介质,水浴超声30 min,挤出器过孔径为200 nm聚碳酸酯膜7次,取续滤液,得SCL,稳定性良好。当氮磷比为10∶1时,SCL能够有效负载miR-126;miR-126通过静电吸附于SCL表面,SCL一定程度上保护miR-126不被酶解。SDS-PAGE结果显示,VCAM-1mAb与SCL成功偶联,接枝率为(53.2±7.6)%。MTT结果显示,Va-SCL、Va-SCL/miR-126对HUVECs的半数抑制浓度(IC_(50))值分别为17.38、71.61 nmol·L^(-1),SCL、SCL/miR-126的IC_(50)值分别为81.03、97.79 nmol·L^(-1)。荧光显微镜及流式结果均显示Va-SCL/miR-126的细胞摄取效果更为明显。结论成功制备了Va-SCL/miR-126,能明显增加miR-126的细胞摄取。 展开更多
关键词 阳离子脂质体 MIR-126 薄膜分散法 edc/nhs 血管细胞黏附分子-1单克隆抗体修饰
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Adjusting the physico-chemical properties of collagen scaffolds to accommodate primary osteoblasts and endothelial cells
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作者 Nima Meyer Daniel V.Bax +2 位作者 Jochen Beck Ruth E.Cameron Serena M.Best 《Regenerative Biomaterials》 SCIE EI CSCD 2023年第1期590-602,共13页
Collagen-based biomaterials are used widely as tissue engineering scaffolds because of their excellent bioactivity and their similarity to the natural ECM.The regeneration of healthy bone tissue requires simultaneous ... Collagen-based biomaterials are used widely as tissue engineering scaffolds because of their excellent bioactivity and their similarity to the natural ECM.The regeneration of healthy bone tissue requires simultaneous support for both osteoblasts and,where angiogenesis is intended,endothelial cells.Hence it is important to tailor carefully the biochemical and structural characteristics of the scaffold to suit the needs of each cell type.This work describes for the first time a systematic study to gain insight into the cell type-specific response of primary human osteoblast(hOBs)and human dermal microvascular endothelial cells(HDMECs)to insoluble collagen-based biomaterials.The behaviour was evaluated on both 2D films and 3D scaffolds,produced using freeze-drying.The collagen was cross-linked at various EDC/NHS concentrations and mono-cultured with hOBs and HDMECs to assess the effect of architectural features and scaffold stabilization on cell behaviour.It was observed that 3D scaffolds cross-linked at 30%of the standard conditions in literature offered an optimal combination of mechanical stiffness and cellular response for both cell types,although endothelial cells were more sensitive to the degree of cross-linking than hOBs.Architectural features have a time-dependent impact on the cell migration profile,with alignment being the most influential parameter overall. 展开更多
关键词 ANGIOGENESIS collagen scaffolds cell migration edc/nhs cross-linking
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丝胶蛋白/等离子体氧化PLA的制备及性能
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作者 丁展 王鑫 +2 位作者 王成红 杨梦菲 麻文效 《上海纺织科技》 北大核心 2023年第9期19-24,共6页
采用聚碳化二亚胺UN557和EDC/NHS体系低温胶脱剂,用氧气低温等离子体处理聚乳酸(PLA)无纺布,接枝丝胶蛋白,选用阳离子金黄X-8GL、阳离子红GRL、亚甲基蓝对处理后的PLA无纺布进行染色。结合上染率和纤维强力的变化,确定低温等离子体预处... 采用聚碳化二亚胺UN557和EDC/NHS体系低温胶脱剂,用氧气低温等离子体处理聚乳酸(PLA)无纺布,接枝丝胶蛋白,选用阳离子金黄X-8GL、阳离子红GRL、亚甲基蓝对处理后的PLA无纺布进行染色。结合上染率和纤维强力的变化,确定低温等离子体预处理最优工艺,最后对丝胶蛋白/PLA的接枝效果与抗菌、抗氧化功能进行综合性评价。结果表明:氧气等离子体在功率250 W、放电时间180 s、进气量300 mL/min的条件下处理效果最佳;EDC/NHS体系交联的接枝效果优于聚碳化二亚胺UN557;制备的丝胶蛋白/PLA无纺布具有良好的抗氧化和抗菌性能。 展开更多
关键词 聚乳酸 丝胶蛋白 等离子体 edc/nhs交联体系 染色 接枝
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