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基于CHD基因和EE0.6基因遗传多态鉴定白枕鹤、丹顶鹤性别研究报告 被引量:4
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作者 孙志明 徐琪 +2 位作者 徐禄 倪谷音 王金美 《野生动物学报》 北大核心 2018年第1期151-153,共3页
白枕鹤(Grus vipio)和丹顶鹤(Grus japonensis)是中国重点保护动物,为单态性鸟,很难通过外观和形态来进行性别鉴定,给人工繁殖造成很大困难。研究已发现CHD基因和EE0.6序列片段大小在非平胸鸟类W、Z染色体上均存在差异。基于此,本研究... 白枕鹤(Grus vipio)和丹顶鹤(Grus japonensis)是中国重点保护动物,为单态性鸟,很难通过外观和形态来进行性别鉴定,给人工繁殖造成很大困难。研究已发现CHD基因和EE0.6序列片段大小在非平胸鸟类W、Z染色体上均存在差异。基于此,本研究以无锡市动物园饲养的白枕鹤和丹顶鹤为研究对象,经PCR实验,对白枕鹤和丹顶鹤CHD基因和EE0.6序列的相关片段进行了特异性扩增。结果显示,这2种方法 PCR扩增结果一致,并根据这一结果进行白枕鹤、丹顶鹤配对,均成功孵化出后代,表明该PCR鉴定结果可靠,研究结果为提高鹤类人为配对指数和繁殖率奠定了基础。 展开更多
关键词 白枕鹤 丹顶鹤 CHD基因 ee0.6序列 性别鉴定
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合肥野生动物园东方白鹳的保护遗传学初步研究 被引量:7
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作者 昝树婷 周立志 +2 位作者 江浩 张保卫 吴治安 《生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第6期22-25,共4页
研究选用EE0.6基因和线粒体DNA控制区(D-loop)作为分子标记,用于合肥野生笼养东方白鹳的性别鉴定和遗传多样性检测。研究中成功地鉴定了东方白鹳成体和幼体的性别,并且双引物的引入克服了性别鉴定中假阴性。在合肥野生动物园28个笼养个... 研究选用EE0.6基因和线粒体DNA控制区(D-loop)作为分子标记,用于合肥野生笼养东方白鹳的性别鉴定和遗传多样性检测。研究中成功地鉴定了东方白鹳成体和幼体的性别,并且双引物的引入克服了性别鉴定中假阴性。在合肥野生动物园28个笼养个体中共检测出11种单倍型,其单倍型多样性(h)为0.8598±0.0419,核苷酸多样性(π)为0.01035±0.0058,但单倍型在繁殖个体间分布严重失衡,子一代个体的单倍型主要集中在H1,H2,H3。因此,建议在进行圈养东方白鹳的繁殖管理时,注重提升各单倍型的奠基者作用,以保护笼养群体的遗传多样性。 展开更多
关键词 东方白鹳 ee0.6基因 D-LOOP 遗传多样性
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The Experimental and Clinical Study on the Effect of Curcumin on Cell Cycle Proteins and Regulating Proteins of Apoptosis in Acute Myelogenous Leukemia 被引量:2
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作者 陈燕 吴裕丹 +1 位作者 何静 陈文娟 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2002年第4期295-298,共4页
To investigate whether the Bcl- 2 gene family is involved in m odulating mechanism of apoptosis and change of cell cycle protein induced by curcumin in acute myeloid leukemia HL - 6 0 cell line and primary acute m y... To investigate whether the Bcl- 2 gene family is involved in m odulating mechanism of apoptosis and change of cell cycle protein induced by curcumin in acute myeloid leukemia HL - 6 0 cell line and primary acute m yelogenous leukem ic cells,the Bcl- 2 family member Mcl- 1,Bax and Bak and cell cycle proteins including P2 7kipl,P2 1wafl,cyclin D3and p Rbp- were selected and their ex- pression detected by SABC imm uno- histochem ical stain m ethod.The attitude of sub- G1 peak in DNA histogram was determined by FCM.The TU NEL positive cell percentage was identified by term inal deoxynucleotidyl transferase (Td T ) - m ediated Biotin d U NP end labeling technique.It was found that when HL - 6 0 cells were treated with 2 5μm ol/ L curcumin for 2 4 h,the expression level of Mcl- 1was down- regulated,but that of Bax and Bak up- regulated time- dependently.There was significant difference in the expression level of Mcl- 1,Bax and Bak between the curcumin- treated groups and control group(P<0 .0 5 - 0 .0 1) .At the sam e time,curcumin had no effect on progress of cell cycle in prim aty acute m yelogenous leukemia at newly diagnosis,but could in- crease the peak of Sub- G1 (P<0 .0 5 ) ,and down- regulate the expression of Mcl- 1and up- regulate the expression of Bax and Bak with the difference being statistically significant.The expression of P2 7kipl,P2 1wafl and p Rbp- were elevated and thatof cyclin D3decreased in the presence of curcum in. These findings suggested thatthe Bcl- 2 gene fam ily indeed participated in the regulatory process of apoptosis induced by curcumin in HL - 6 0 cells and AML cells.Curcumin can induce apoptosis of primary acute myelogenous leukemic cells and disturb cell cycle progression of HL - 6 0 cells.The m echanism appeared to be m ediated by perturbing G0 / G1 phases checkpoints which associated with up- regulation of P2 7kipl,P2 1wafl and p Rbp- expression,and down- regulation of cyclin D3. 展开更多
关键词 curcum in Bcl- 2 gene family cell cycle protein HL - 6 0 cell prim ary leukemic cell
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鹈鹕性别鉴定的分子标记方法
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作者 李挺 李文斌 +2 位作者 秦立志 万小颖 吴信生 《畜牧与兽医》 北大核心 2013年第7期50-52,共3页
鹈鹕是一种雌雄同态鸟类,外观上难以区分。从鹈鹕血液中提取基因组DNA,参照近缘鸟类性染色体上的CHD基因和EE0.6序列,筛选了3对引物进行特异性扩增,其中2对引物组合成1个组(A/B)进行双重PCR扩增。结果表明,2组引物在雄性个体中均扩增出... 鹈鹕是一种雌雄同态鸟类,外观上难以区分。从鹈鹕血液中提取基因组DNA,参照近缘鸟类性染色体上的CHD基因和EE0.6序列,筛选了3对引物进行特异性扩增,其中2对引物组合成1个组(A/B)进行双重PCR扩增。结果表明,2组引物在雄性个体中均扩增出1条片段,在雌性中扩增出2条片段;待测群体中雄性个体2只,雌性个体8只。本试验首次确立了利用PCR技术对鹈鹕性别进行鉴定的分子标记方法。 展开更多
关键词 鹈鹕 性别鉴定 PCR CHD ee0 6
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灯盏乙素生物合成关键酶基因的克隆与表达分析 被引量:2
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作者 喻孟冬 张石先 +5 位作者 赵艳 宋婉玲 张高菊 刘冠泽 杨生超 张广辉 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1133-1139,共7页
灯盏乙素是灯盏花的主要药用成分,研究灯盏乙素合成的相关基因对培育高品质的灯盏花品种有重要意义。本研究通过转录组测序和RT-PCR获得灯盏花黄酮6-羟化酶(flavone 6-hydroxylase,F6H)和7-O-葡糖醛酸转移酶(flavonoid 7-O glucuronosyl... 灯盏乙素是灯盏花的主要药用成分,研究灯盏乙素合成的相关基因对培育高品质的灯盏花品种有重要意义。本研究通过转录组测序和RT-PCR获得灯盏花黄酮6-羟化酶(flavone 6-hydroxylase,F6H)和7-O-葡糖醛酸转移酶(flavonoid 7-O glucuronosyltransferases,F7GAT)基因c DNA全长,分别命名为EbF6H1、EbF6H2和EbF7GAT。生物信息学软件分析表明灯盏花F6H1 c DNA全长1 478 bp,编码492个氨基酸残基;F6H2 c DNA全长1 524 bp,编码507个氨基酸残基;F7GAT c DNA全长1 311 bp,编码436个氨基酸残基。荧光定量PCR表明F6H1主要在根中表达;F6H2在叶片中表达量最高,其次是根和茎;F7GAT在叶中的表达量显著高于其它器官。HPLC分析表明,叶片中灯盏乙素含量最高,其次是茎和花,在根中未检测到。根中总绿原酸的含量最高,其次是叶,显著高于茎和花。本研究有助于进一步探明基因功能和活性成分积累的关系。 展开更多
关键词 灯盏花 黄酮6-羟化酶(F6H) 类黄酮7-O-葡糖醛酸转移酶(F7GAT) 基因克隆 表达分析
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亚砷酸钠对HaCaT细胞MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2、DNA甲基转移酶1、组蛋白去乙酰化酶-1结合的影响 被引量:1
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作者 张博 潘雪莉 张爱华 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期16-20,共5页
目的观察亚砷酸钠(NaAsO:)对人肤角质形成细胞株(HaCaT细胞)MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2(MeCP2)、DNA甲基转移酶1(DNMTl)及组蛋白去乙酰化酶1(HDACl)结合情况的影响,为深化阐释砷毒作用机制提供依据。方法分别以0... 目的观察亚砷酸钠(NaAsO:)对人肤角质形成细胞株(HaCaT细胞)MGMT基因启动子区甲基化CpG结合蛋白-2(MeCP2)、DNA甲基转移酶1(DNMTl)及组蛋白去乙酰化酶1(HDACl)结合情况的影响,为深化阐释砷毒作用机制提供依据。方法分别以0.00(空白对照)、3.13、6,25、12.50、25.00μmol/LNaAs02重复间隔处理HaCaT细胞72h(NaAs02处理24h,隔天再次相同处理,重复3次),以人表皮鳞癌细胞株(A431)作为阳性对照。定量染色质免疫共沉淀技术(Q—CHIP)检测MGMT基因转录调控区CHIPl、CHIP2区域及MGMT基因编码区ChIP3区域MeCP2、DNMTl、HDACl结合情况。结果各组HaCaT细胞MGMT基因转录调控区CHIPl、CHIP2区域MeCP2、DNMTl、HDACl蛋白结合水平比较,差异有统计学意义(F值分别为7.387、84.634、78.442和19.263、69.649、26.546,P均〈0.05);其中各N以s02处理组CHIPl、CHIP2区域MeCI〉2、DNMTl、HDACl蛋白结合水平[3.13μmol/LNaAs02处理组:(136.00±16.97)%、(145.00±2.83)%、(88.50±19.09)%和(106.50±37.48)%、(112.34±8.73)%、(59.71±8.49)%;6.25μmol/LNaAs02处理组:(130.00±42.43)%、(154.50士4.95)%、(101.00±1.27)%和(88.50±3.54)%、(134.32±2.82)%、(102.75±19.91)%;12.50~mol/LNaAs02处理组:(141.50±23.33)%、(161.50±7.78)%、(125.00±U.31)%和(119.50±24.75)%、(171.59±3.54)%、(167.61±10.61)%;25,00μmol/LNaAs02处理组:(134.50±43.13)%、(472.50±50.20)%、(383.50±30.41)%和(180.09±12.73)%、(348.50±27.58)%、(158.45±12.02)%]均高于空白对照组[(51.50±9.19)%、(82.00±12.73)%、(25.03±2.91)%和(37.02±4.24)%、(91.56±26.16)%、(19.09±2.90)%,P均〈0.05]。各组HaCaT细胞MGMT基因编码区CHIP3区域MeCP2蛋白结合水平比较,差异无统计学意义(F=1.670,P〉0.05),而DNMTl、HDACl蛋白结合水平比较,差异有统计学意义(F值分别为4.404、9.863,P均〈0.05),其中25.00I,Lmol/LNaAs02处理组DNMTl、HDACl蛋白结合水平[(615.85±29.63)%、(306.09±59.40)%]与空白对照组[(99.70±12.02)%、(92.45,±48.79)%]比较,差异有统计学意义(P均〈0.05)。结论MeCP2可结合于砷所致高甲基化MGMT基因转录调控区。通过招募DNMTl及HDACl使组蛋白去乙酰化,同时DNMTl可结合于MGMT基因编码区,以非甲基化DNA结合蛋白(IVIBD)依赖的方式招募HDACl,通过染色质重塑方式导致MGMT基因沉默,可能是砷毒性表现的早期分子事件。 展开更多
关键词 砷中毒 基因 O(6)-甲基鸟嘌呤DNA转移酶 甲基-CpG-结合蛋白2 DNA(胞嘧啶-5-)-甲基转移酶 组蛋白脱乙酰基酶类
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